Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas

Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas,
Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholderia
Elizabeth Torrico Helguero.
Resumen:
Con el término de bacilos Gram negativos no fermentadores (BNNF), se designa
a un heterogéneo grupo de microorganismos bacterianos que comparten algunas
características muy generales. Están ampliamente distribuidos en la naturaleza, se
los encuentra en el suelo, agua y plantas. Si bien este grupo incluye muchos géneros
presentamos en este acápite los que con mayor frecuencia se aislan en infecciones
asociadas a servicios de salud y que pueden ser identificados por los laboratorios
de tercer nivel.
Palabras claves: bacilos Gram Negativos No Fermentadores
Correspondencia
Elizabeth Torrico
[email protected]
INTRODUCCIÓN
Son bacilos o cocobacilos Gram negativos, aerobios estrictos, que no fermentan
los hidratos de carbono, y lo utilizan por vía oxidativa, sin formación de gas.
Generalmente son oxidasa positiva, pueden ser inmóviles o móviles, presentar
319
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
flagelos polares, bipolares, lofotricos o peritricos.
Más de 120 especies de Bacilos no fermentadores han sido reconocidos en
especímenes humanos, solo una especie perteneciente al género Burkholderia ,
es un patógeno obligado para el hombre (Burkholderia pseudomallei), el resto se
caracterizan por comportarse como agentes patógenos oportunistas. Actualmente
han cobrado importancia por su incidencia en infecciones hospitalarias en
pacientes inmunosuprimidos, neutropénicos, con enfermedades de base,
sometidos a tratamiento con antibióticos, con intervenciones quirúrgicas, tratados
con procedimientos de instrumentación invasivas (catéteres intravasculares,
catéteres o sondas urinarias, respiradores mecánicos, etc).
Existen varios factores que propagan estas bacterias en el medio
intrahospitalario:
• Falta de hábito en lavarse las manos antes y después de atender a los
pacientes.
• Inadecuada asepsia al realizar maniobras invasivas.
• Utilización de antisépticos contaminados (yodo povidona)
• Inadecuada esterilización de respiradores mecánicos.
Taxonomía
Desde el punto de vista taxonómico la clasificación de estos microorganismos es
muy compleja pertenecen al:
Dominio:
Bacteria (Eubacteria)
Philium:
Proteobacteria
Flavobacteria
Clase: Proteobacteria
• α Proteobacteria
• ß Proteobacteria
• γ Proteobacteria
• δ Proteobacteria
• ε Proteobacteria
Clase: Flavobacteria
320
• Flavobacteria
Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
• Sphingobacteria
Géneros:
• Pseudomonas
• Acinetobacter
• Stenotrophomonas
• Burkholderia
• Achromobacter
• Alcaligenes
• Flavobacterium
• Chryseobacterium
• Brevudimonas
• Sphingomonas
• Elizabethkingia
• Shewanella
• Acidovorans
Alrededor del 15% de los bacilos Gram negativos aislados de muestras clínicas
corresponde a bacilos no fermentadores y de este porcentaje, Pseudomonas
aeruginosa, Pseudomonas stutzeri, el complejo Acinetobacter baumanniicalcoaceticus, Acinetobacter lwoffii,
Stenotrophomonas maltophilia y
Burkholderia cepacia son las de mayor incidencia.El aislamiento de los otros
géneros son menos frecuentes por lo cual presentaremos sólo a los géneros de
mayor aislamiento.
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA
Estos microorganismos pueden ser aislados de:
• Orina
• Sangre
• L.C.R (Líquido cefaloraquideo)
• Secreciones de heridas, quemaduras, abscesos
• Liquido pleural
321
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
• Lavado bronquial
• Catéteres intravenosos y urinarios
• Soluciones desinfectantes: jabones, agua destilada
• Instrumental de uso médico
• Ambientes y equipos hospitalarios
• Suelo, plantas, etc.
DIAGNÓSTICO BACTERIOLOGICO
La identificación de bacilos Gram negativos no fermentadores (BNNF) representa
un desafío para los laboratorios, considerando que la mayoría de las pruebas
bioquímicas corrientemente usadas para el diagnóstico bacteriológico resultan,
con frecuencia, poco útiles para estos gérmenes.
En las últimas décadas se han descrito varios procedimientos para
identificar estos microorganismos mediante métodos convencionales, con nuevas
pruebas bioquímicas, por ensayos de bacteriología analítica, mediante procesos
que involucran al genoma bacteriano o con el empleo de sistemas diagnósticos
comerciales como: Oxi-FERM, API 20E, API 20 NE, NF-System, MINITEX,
Micro ID y R/B Enteria, entre otros.
Entre los métodos convencionales revisados, se destacan el de Hugh
y Gilardi y el aportado por Silva, quienes seleccionaron un grupo de pruebas
bioquímicas claves que permiten la identificación y clasificación de estos
microorganismos.
AISLAMIENTO PRIMARIO
El aislamiento primario depende del tipo de muestra, pero los BNNF se
desarrollan bien en agar nutritivo, agar sangre y agar Mac Conkey (con algunas
excepciones)
• Una vez obtenida la muestra se siembra en los medios anteriormente
mencionados, se incuba en estufa durante 18-24 horas a 35ºC, si no
se observa desarrollo, dejarlas por 18 horas adicionales a 30ºC o a
temperatura ambiente.
• Hacer tinción de Gram de las colonias aisladas en medios primarios,
realizar prueba de catalasa y de oxidasa a partir de agar nutritivo o agar
322
Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
sangre.
• A partir de una sola colonia realizar siembra en medios diferenciales (TSI,
BHI caldo , UREA, CITRATO). Incubar durante 18-24 horas a 35ºC; si
no se observa viraje del indicador en el TSI (K/K), estaríamos frente a
un microorganismo no fermentador por lo cual sembrar en batería de
azucares O/F de Hugs y Leifson O/F glucosa, lactosa, maltosa, xilosa,
manitol, sacarosa.
• Interpretar las pruebas y utilizar flujograma de orientación para
identificación de BNNF.
• Hacer pruebas adicionales reducción de nitratos, cecimiento a 42ºC, bilis
esculina, prueba de colistin . ADH, ODC. LDC., etc para la identificar
especie en algunos géneros.
Para el diagnóstico de los dos géneros de BNNF de mayor aislamiento en
nuestro medio, es necesario tener presente lo siguiente:
• Si se observa al microscopio cocobacilos Gram negativos, oxidasa negativa
y son inmóviles, debe sospecharse del género Acinetobacter.
• Si se observa bacilos Gram negativos, oxidasa positiva, móviles, el
cultivo presenta pigmentación amarillo verdosa, brillo nacarado y olor
característico a uvas o mote se debe pensar en Pseudomonas aeruginosa.
GENERO Pseudomonas
INTRODUCCION
Características generales del grupo de Pseudomonas
Este género está constituido por bacilos Gram-negativos, rectos o ligeramente
curvos, no formadores de esporas, no encapsulados, siempre móviles con
flagelación polar monotrica o lofotrica, oxidadan glucosa, son oxidasa positivas.
Se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza, se pueden aislar
normalmente del suelo, aguas contaminadas, así como de plantas y animales,
comportándose como patógenos oportunistas.
En el hombre pueden causar infección de quemaduras, colonizar tracto
respiratorio, producir neumonías, se aísla de pacientes con fibrosis quística, puede
323
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
producir infección destructiva del ojo: queratitis y endoftalmitis; las personas
que utilizan lentes de contacto constituyen un grupo de mayor riesgo; ocasiona
infección de tracto urinario sobre todo en pacientes tratados con sondas urinarias
de larga data y tratados con múltiples antibióticos; produce infección del oído:
otitis externa, oído de nadador; otitis externa maligna, otitis media crónica; en
diabéticos y ancianos invade tejidos subyacentes como: pares craneales, huesos,
bacteriemia, etc.
Existen numerosas especies, (76) sin embargo, las que con mayor frecuencia
se aíslan de muestras clínicas son: Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas
fluorescens, Pseudomonas putida, Pseudomonas stutzeri. Las tres primeras
especies se caracterizan por producir pigmento fluorescente verde limón.
Pseudomonas stutzeri generalmente presenta cultivos de aspecto seco y rugoso.
Estas bacterias son capaces de utilizar una enorme variedad de compuestos
orgánicos como sustrato para crecer, capacidad que le permite colonizar nichos
en los que son escasos los nutrimentos, que otros organismos pueden asimilar.
Se ha reportado el aislamiento de Pseudomonas. aeruginosa de ambientes tan
inhóspitos como son el combustible de avión, soluciones de clorhexidina, el
jabón, etc.
Su metabolismo es siempre aerobio (la mayoría usa como aceptor de electrones
al O2) o anaerobio (algunos usan NO3). Presentan una versatilidad metabólica
muy grande que se traduce en su capacidad de utilizar como fuente de carbono
substratos muy variados.
El metabolismo central de azúcares en este grupo se desarrolla por la vía
de Etner-Doudoroff, y disponen de un ciclo de ácidos tricarboxílicos normal.
Algunas bacterias de este grupo producen pigmentos fluorescentes de colores
amarillo-verdosos fácilmente solubles en agua. Estos pigmentos actúan como
sideróforos: moléculas cuya función es capturar el hierro del medio necesario
para el metabolismo del microorganismo.
Taxonomía
Por estudios recientes realizado por Gilardi, se ha clasificado a este género en
base a la homología del rRNA/DNA en varios grupos con 76 especies. Los
grupos más frecuentemente aislados son:
1.- Grupo fluorescente
324
Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
Todas las especies de este grupo producen pigmentos solubles en agua que
fluorescen bajo luz ultravioleta (400nm)
• Pseudomonas aeruginosa (más frecuente)
• Pseudomonas fluorescens
• Pseudomonas putida
2.- Grupo Sturzeri
• Pseudomonas stutzeri (más frecuente)
• Pseudomonas mendocina
• CDC Vb - 3
3.- Grupo alcalígenes
• Pseudomonas alcaligenes
• Pseudomonas pseudoalcalígenes
• Pseudomonas grupo 1
4.- Grupo Pseudomonas pigmentadas en amarillo
• Pseudomonas luteola
• Pseudomonas oryzihabtans
• Sphingomonas paucimóbilis
• Balneatrix alpica
• Massilia timonae
• CDC grupos 0 -1, 0 -2
Pseudomonas aeruginosa
Representa un problema importante de salud en centros hospitalarios,
especialmente cuando se trata de pacientes con cáncer o quemados. Una vez que
se establece la infección, el microorganismo produce una serie de compuestos
tóxicos que causan no sólo daño tisular extenso, sino adicionalmente interfieren
con el funcionamiento del sistema inmune. Entre las proteínas que intervienen
en la infección de Pseudomonas aeruginosa encontramos toxinas, como las
exotoxinas A y S, así como enzimas hidrolíticas que degradan las membranas
y el tejido conjuntivo de diversos órganos. Esta situación se ve agravada por
la dificultad para tratar las infecciones por P. aeruginosa, ya que esta bacteria
presenta una alta resistencia natural a distintos antibióticos y a desinfectantes.
325
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
Existe un grupo poblacional especialmente vulnerable a las infecciones
con P. aeruginosa: los enfermos con fibrosis quística; a medida que progresa
la infección se seleccionan derivados mucoides de la bacteria que producen
grandes cantidades del exopolisacárido alginato, la presencia de estas cepas
mucoides en los pulmones de estos pacientes es indicativo de etapa terminal
de la enfermedad. Esto se debe a que estas cepas no pueden ser eliminadas por
el sistema inmune y hasta el momento, no existe un tratamiento efectivo contra
estas cepas mucoides.
Por otra parte, en ambientes acuosos esta bacteria se adhiere a superficies,
produciendo una especie de agregado llamado biopelícula, la formación de estos
cúmulos de bacterias y material extracelular representa un problema de salud pues
contamina dispositivos que se implantan dentro del cuerpo, como por ejemplo:
dispositivos intrauterinos, catéteres o válvulas cardiacas, las biopelículas también
representan un problema en el proceso de producción de diversas industrias pues
provocan taponamiento y corrosión de conexiones y filtros.
Cultivo
Las muestras se cultivan en agar sangre, Mac Conkey o cualquier otro medio
diferencial, no fermenta la lactosa siendo fácil su diferenciación de las bacterias
que si la fermentan. Pseudomonas aeruginosa produce un olor dulzón semejante
a jugo de uvas o de maíz, algunas cepas producen hemólisis, forma colonias
redondas, lisas con frecuencia produce un pigmento azulado no fluorescente:
piocianina que difunde en el agar, también produce pioverdina pigmento que
confiere un color verdoso al agar, algunas producen pigmento rojo oscuro
piorrubina o negro piomelanina; las otras especies de pseudomonas no producen
piocianina
Ps. aeruginosa en
Agar nutritivo
326
Ps. aeruginosa en
Agar Mac Conkey
Ps. aeruginosa en
Agar Sangre
Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS
TABLA 1 Características bioquímicas Genero Pseudomonas
Ps.
aeruginosa
Ps.
fluorescens
Ps.
putida
Ps.
stutzeri
+
+
Ox
K
K
A
A
+
+
+
+
+
+
+
+
+/-
-
-
1 polar
+
+
Ox
K
K
A
A
-
+
+
-
+
+
-
+
-
-
-
>1 polar
+
+
Ox
K
K
A
K
-
+
+
-
+
+
-
-
-
-
-
> 1 polar
+
+
Ox
K
A
A
A
+
+
+
+
+
+
1 polar
-
V
Catalasa
Oxidasa
O/F Glucosa
OF/ Lactosa
O/F Maltosa
O/F Xilosa
O/F Manitol
Piocianina
Pioverdina
Movilidad
Nitrato
ADH
Fluorescencia
Denitrificación
Gelatina
NaCl 6,5%
Almidón
Colonias rugosas
Nº flagelos
Desarrollo a 42ºC
+
-
Prueba de Fermentación de azucares (O/F)
K
K
A
K
K
A
A
Pseudomonas aeruginosa
327
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
K
K
A
K
A
A
A
Pseudomonas stutzeri
K= Alcalino
A= Acido
GENERO Stenotrophomonas
INTRODUCCION
Anteriormente pertenecía al género Pseudomonas, posteriormente al género
Xanthomonas. Actualmente esta dentro del genero Stenotrophomonas.
Este género se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza, se
aísla de humanos, alimentos y muchas fuentes ambientales; es un patógeno
oportunista en pacientes inmunocomprometidos y aquellos con tratamiento
antibiotecoterapico prolongado, es considerado como un patógeno nosocomial
emergente por su incremento desde los años 70 a 90. Se aisla de muchos sitios
anatómicos como ser: secreciones respiratorias, orina, heridas de la piel, sangre, etc.
Taxonomía
Se describen dos especies:
• Stenotrophomonas africana
• Stenotrophomonas malthophilia
Stenotrophomonas maltophilia es un bacilo Gram negativo, no formador
de esporas, no encapsulado, oxidasa negativo, lisina decarboxilasa positivo,
móvil por flagelación polar lofotríca, Indol negativo, no reduce nitratos, DNAsa
positivo, oxida glucosa y maltosa.
328
Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
Las colonias en agar sangre son de color café-grisáceo o color lavanda (por
producción de pigmentos solubles) además de olor amoniacal.
En agar Mac Conkey las colonias son transparentes lactosa negativa.
Es genéticamente resistente a muchos antibióticos, desarrolla mutaciones
rápidamente contra varios antibióticos.
Crecimiento en Mac Conkey
Crecimiento en Agar Sangre
CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS
TABLA 2 Características bioquímicas Stenotrophomonas maltophilia
Pruebas Bioquímicas
Oxidasa
O/F glucosa
O/F maltosa
O/F lactosa
O/F xilosa
O/F manitol
Movilidad
Nº flagelos
Denitrificación
Gelatina
DNAsa
Fluorescencia
Lactosa
Ureasa
Indol
Producción de SH2
Orinitina decarboxilasa
Lisina decarboxilasa
Arginina dehidrolasa
Stenotrophomonas maltophilia
A (retardada)
A
K
V
K
+
> 2 polar
V+
+
+
-
329
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
K
K
A
K
A
K
K
Stenotropomonas maltophilia
GENERO Acinetobacter
INTRODUCCIÓN
Los miembros del género Acinetobacter han sufrido grandes cambios taxonómicos
a lo largo de la historia, lo cual ha impedido un estudio adecuado, es así que
hasta el año 1986 sólo se reconocía la especie Acinetobacter calcoaceticus
con las variedades anitratus y lwoffi. Posteriormente, los avances logrados en
los estudios genéticos han permitido establecer la existencia de al menos 30
genoespecies de Acinetobacter, de los cuales solo 18 son nombradas el resto aún
no tienen nombre.
Los miembros de este género están ampliamente dispersos en la naturaleza
habitan en el agua y el suelo, también forman parte de la flora normal de la
piel humana (especialmente manos), orofaringe e intestino, en una pequeña
proporción de sujetos adultos; estos sitios suelen ser el reservorio de la bacteria
en hospitales y causar brotes en los que el germen se comporta como oportunista,
razón por la cual su aislamiento no debe ser menospreciada ya que es capaz de
causar infecciones de importancia clínica a nivel de tracto respiratorio inferior
(neumonías), producir infecciones del tracto urinario, infección de heridas en los
servicios de traumatología, cirugía, causa bacteriemias, meningitis y septicemia.
La puerta de entrada del organismo son en general tubos endotraqueales, sondas,
catéteres y otros cuerpos extraños.
Como se dijo anteriormente, es frecuente que las infecciones producidas
por estos microorganismos, aparezcan en forma de brotes, las unidades más
330
Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
afectadas son las de cuidados intensivos y quemados, donde el uso masivo
de antibióticos puede seleccionar cepas multirresistentes, las de aislamiento
más frecuente en muestras clínicas asociadas tanto en casos esporádicos como
brotes epidémicos son: Complejo A. baumannii-calcoaceticus, A. lwoffi, A.
haemolyticus.
CARACTERISTICAS GENERALES
El género Acinetobacter está compuesto por bacterias cocoides o cocobacilos
Gram negativos, a menudo se ven como diplococos. Después de 24 horas de
crecimiento en agar sangre, las colonias miden entre 0,5 a 2mm de diámetro,
translúcidas a opacas, blancas o grisáceas, a veces hemolíticas (nunca
pigmentadas) convexas y enteras, no son exigentes, crecen bien en agar Mac
Conkey. La mayoría crece a 35ºC, algunas crecen a 44ºC. Son oxidasa negativa,
inmóviles, nitrato movilidad negativa y resistentes a la penicilina.
Acinetobacter bumannii-calcoaceticus es sacarolítico es decir acidifica
muchos hidratos de carbono, la identificación definitiva se efectúa demostrando
la rápida produccion de ácidos a partir de medios como el O/F. Mientras que
Acinetobacter lwoffi es asacarolítico y el tamaño de sus colonias en agar sangre
son más diminutas.
Las genoespecies 1,2,3,13 poseen características similares, por lo cual
Genner, Smith y colaboradores sugirieron que estas especies conformen el
Complejo Acinetobacter baumannii-calcoaceticus.
Dentro de la especie Acinetobacter .baumannii se han definido además
19 biotipos siendo el 1,2,6 y 9 los más frecuentes, se diferencian a través de su
capacidad de utilizar seis compuestos como única fuente de carbono. (levulinato,
citraconato, L-fenilacetato, L-fenilalanina, 4-hidroxibenzoato y L-tartrato).
Taxonomía:
Actualmente el género Acinetobacter se ubica en la:
Familia: Moracellaceae
Génoespecies:
- Acinetobacter calcoaceticus
- Acinetobacter baumanii
-3
- 13TV
- Acinetobacter haemolyticus
331
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
- Acinetobacter junii
-6
- Acientobacter johnsonii
- Acinetobacter lwoffii
-9
- 10
- 11
- Acinetobacter radioresistens
- 13BJ/14TV
- 14BJ
- 15BJ
- 16
- 17
- 15TU
- Acinetobacter venetianus
- Acinetobacter ursingii
- Acinetobacter shindlen
- Acinetobacter bouwetii
- Acinetobacter towneri
- Acinetobacter tandoii
- Acinetobacter grimontii
- Acinetobacter tjernbergiae
- Acinetobacter generi
- Acinetobacter parvus
332
Acinetobacter en Agar Mac Conkey Acinetobacter en
Agar Sangre Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS
TABLA 3. Características bioquímicas Genero Acinetobacter
Complejo
Acinetobacter
Acinetobacter
Prueba
A. baumannii
lwoffi
haemolyticus
calcoaceticus
Catalasa
+
+
+
Oxidasa
-
-
-
O/F glucosa
Ox
NR
Ox (v)
O/F lactosa
A
K
O/F maltosa
K
K
O/F manitol
K
K
O/F xilosa
A
K
Movilidad
-
-
-
Fluorescencia
-
-
-
Desnitrificación
-
-
-
Hemólisis
-
-
+
Gelatina
-
-
+
K
K
A
A
K
A
K
Acinetobacter complejo baummanii-calcoaceticus
333
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
K
K
K
K
K
K
K
Acinetobacter lwoffi
K= Alcalino
A= Acido
GENERO Burkholderia
INTRODUCCION
En 1992 fue definido como un nuevo género, separandose del género
Pseudomonas por estar estrechamente relacionado genéticamente.
Este género se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza: agua,
suelo, plantas, frutas, verduras, la excepción es Burkholderia cepacia que no se
cultiva a partir de muestras ambientales.
Causa infecciones nosocomiales, sobre todo en pacientes
inmunocomprometidos con infecciones urinarias, sondados, con endocarditis,
infecciones de heridas, infecciones respiratorias, especialmente en pacientes con
fibrosis quística, con catéteres intravenosos, con septicemia, etc.
Esta compuesto por bacilos Gram negativos, rectos o ligeramente curvos,
no formadores de esporas, no capsulados, aerobios, catalasa positiva, móviles
por uno o mas flagelos polares, excepto B. mallei, son oxidasa variables, por lo
general positivos, O/F glucosa oxidativo
334
Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
TAXONOMÍA
Este género está compuesto por las siguientes especies:
• Complejo Burkholderia cepacia con 9 genovares
• Burkholderia pseudomallei
• Burkholderia mallei
• Burkholderia gladioli
• Burkholderia picketti
Burkholderia cepacia, está formado por 9 especies genómicas
estrechamente relacionadas (genovars), razón por la que se los denomina como
complejo Burkholderia cepacia.
Burkholderia cepacia tipo pertenece a la genovariedad I, es un bacilo
Gram negativo, oxidasa positivo, crece en la mayoría de los medios de cultivo
selectivos, sin embargo lo hace muy lentamente, puede tomar hasta tres días antes
de que las colonias sean visibles. Algunas cepas pueden producir un pigmento
amarillo en medios de cultivo que contienen fierro. Se aísla frecuentemente en
pacientes con fibrosis quistica de páncreas con fase terminal
Burkholderia pseudomallei es un bacilo gram negativo aerobio, pequeño,
dotado de movilidad, crece en la mayoria de los cultivos estándar, forma colonias
que varían desde mucoides y lisas, hasta gruesas y arrugadas de color crema a
naranja en la placa de cultivo. Es el agente etiológico de “mieloidosis” adquirido
por inhalación o por contacto de una lesión de piel, tierra o agua contaminada,
esta enfermedad puede ser asintomática o producir sepsis fulminante, puede
causar también otros procesos como abscesos en pulmón, hígado, bazo, ganglios,
piel, articulaciones y huesos.
Burkholderia mallei causa el muermo, infección pulmonar en caballos
Burkholderia gladioli aislado de pacientes con fibrosis quistica
Burkholderia picketii aislada de una gama de muestras clínicas
335
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS
TABLA 4 Características bioquímicas Genero Burkholderia
Pruebas
B. cepacia genov.I
B. pseudomallei
B. mallei
Catalasa
+
+
+
Oxidasa
+ (debil y lenta)
+
V
O/F glucosa
Ox
Ox
Ox
O/F maltosa
A
A
K
O/F lactosa
A
A
V (k)
O/F manitol
A
A
V
O/F xilosa
A
K
V(k)
Movilidad
+
+
-
Nº flagelos
>1 polar
>1 polar
Reducción de NO3
V
+
Reducción de NO3 a gas
-
+
Lisina decarboxilasa
+
-
-
Arginina dihidrolasa
-
+
+
Ornitina decarboxilasa
V
-
-
Desarrollo a 42ºC
V
+
-
Amarillo
Crema/tostado
Urea
+
-
Colonias rugosas
-
+
Polimixina B
R
R
Pigmento
K
K
A
A
A
Complejo Burkholderia cepacia
336
A
+
V-
A
Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
K
K
A
A
A
K
A
Burkholderia pseudomallei
K: Alcalino
A: Acido
337
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
FLUJOGRAMA DE IDENTIFICACIÓN DE BACILOS NEGATIVOS
NO FERMENTADORES
Bacilos Gram (-)
Medio selectivo
TSI
LIA
MIO
UREA
CITRATO
K/K
K/A
A/A
Fermentador
Enterobacterias
No Fermentador
Oxidasa (-)
MOTILIDAD (-)
Acinetobacter spp
338
MOTALIDAD (+)
Stenotrophomonas spp
Oxidasa (+)
Pseudomonas spp
Burkolderia spp
Alcal“genes spp
Acromobacter spp
KIA
Bacilos Gram negativos no fermentadores: Pseudomonas, Stenotrophomonas, Acinetobacter, Burkholdería.
REFERENCIAS
1. KONEMAN,E. y col.; Diagnóstico Microbiológico; Edit. Panamericana; 5a Ed.; 1999; Buenos Aires.
2. SAKASAKI, T.; Explicación Gráfica de la Investigación Bacteriológica; Edit.. Departamento de
Medicina de Tokai; 1 Ed.; 1987; Tokai.
3. GRANADOS,R.; VILLAVERDE,M.C.; Microbiología: Medios de cultivo y pruebas bioquímicas; Edit.
Paraninfo; 1998; Barcelona.
4. HERRERA G.,A.; Manual de Medios de Cultivo; Edit. Científico Técnica; 1 Ed.; 1985; La Habana.
5. KING,M.; Técnicas de Laboratorio para el Médico; Edit. PAX; 1 Ed.; 1985; México D.F.
6. FINEGOLD S., BARONE E.; Bailey - Scott Diagnóstico Microbiológico; Edit Panamericana; 11 Ed.;
2004; Buenos Aires.
7. MERCK; Manual de Microbiología; Edit. Merck; 1 Ed.; 1982; R.F. de Alemania.
8. TRIGOSO, Ch. y col.; Manual Técnico de Laboratorio de Nivel II Bacteriología Clínica; INLASA Ministerio de Salud y Previsión Social; 1 Ed.; 1999; La Paz.
9. ESTEVEZ, R.; Bacteriología General - Sistemática Y Diagnóstica; Edit.Mikrobia; 1ª Ed.; 2004; La Paz,
Bolivia..
10. JAWETZ Y COL; Microbiología Médica; Editorial El Manual Moderno; 16ª edición; 1999; México.
11.C. TRIGOSO Y COL.; Bacteriología básica; UMSA; 1ra edición; La Paz - Bolivia
12.R. ESTÉVEZ Y COL; Fascículo Nº15: Pruebas bioquímicas; 2000; La Paz - Bolivia.
13 PRESCOTT, L; Microbiología; Edit. McGraw - Hill. Interamericana; 4ª Ed.; 1999; Madrid, España.
14.SHERRIS; Microbiología Médica, Edit. McGraw - Hill. Interamericana; 4ª Ed.; 2004; Mexico.
15.MAC FADDIN, Jean , Pruebas Bioquímicas para la Identificación de Bacterias
16.de Importancia Clínica, Edit, Panamericana; 3ra. Edición,
17.BROCK , Biología de los Microorganismos, 8va. Edición, 2000.
18.PATRICK R. Murray, Microbiología Médica, 4ta. Edición, 2002.
19.FINEGOLD S: BARONE E: Bailey Scott, Diagnóstico Microbiológico, 11va Ed., 2004; Buenos
Aires.
20 SARA C, Rev. Cuba, 1997. pp.Website.
21.BALLOWS A; SHADOMY H.J. Manual of Clinical Microbiology.5th ED. Washington D.S. ASM,
1991
22. Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. 1984
23.Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology, 1994
24.Identificaction of Unusual Pathogenic Gramnegative Aerobic and Facultatively
25.Anaerobic Bacteria. CDC-1984
26.MURRAY, BARON, PFALLERER, TENOVER, YOLKEN, Manual of Clinical Microbiology; 6th ed.
Washington D.C. ASM, 1995
27.BRISOU and PREVOT (1954). En Kreig NR, Holt JG. Bergey’s Manual of Systematic WILLIAMS &
WILKINS, Bacteriology, volume 1, Baltimore, 1984; pp: 303-7
339
Vigilancia, prevención y control de infecciones asociadas a servicios de salud
340