FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA RE RED NACIONAL UNIVERSITARIA UNIDAD ACADÉMICA DE SANTA CRUZ FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD BIOQUÍMICA Y FARMACIA CUARTO SEMESTRE SYLLABUS DE LA ASIGNATURA DE BACTERIOLOGÍA GENERAL Elaborado por: Dra. Carmela Tapia Rios Gestión Académica I/2013 U N I V E R S I D A D D E 1 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA UDABOL UNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA Acreditada como PLENA mediante R. M. 288/01 VISIÓN DE LA UNIVERSIDAD Ser la Universidad líder en calidad educativa. MISIÓN DE LA UNIVERSIDAD Desarrollar la Educación Superior Universitaria con calidad y Competitividad al servicio de la sociedad. Estimado(a) estudiante: El Syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus docentes, quienes han puesto sus mejores empeños en la planificación de los procesos de enseñanza para brindarte una educación de la más alta calidad. Este documento te servirá de guía para que organices mejor tus procesos de aprendizaje y los hagas mucho más productivos. Esperamos que sepas apreciarlo y cuidarlo. Aprobado por: Fecha: Marzo de 2013 SELLO Y FIRMA JEFATURA DE CARRERA U N I V E R S I D A D D E 2 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA SYLLABUS BACTERIOLOGÍA GENERAL Código: BCL-421 Requisito: BCL-321 Carga Horaria: 100 horas / Semestre Horas Teóricas 60 horas Horas Prácticas 40 horas Créditos 10 OBJETIVOS GENERALES DE LA ASIGNATURA. Asignatura: I. Adquirir conocimientos de bacteriología, especialmente sobre bacterias del medio en el que vivimos. Aplicar los conocimientos básicos en el empleo de métodos de diagnóstico de laboratorio. Determinar los métodos de diagnóstico y la metodología en cada una de los casos a estudiar. Determinar el cuadro clínico, tratamiento y profilaxis epidemiológica en cada enfermedad bacteriana. Prácticar los métodos de control y bioseguridad en laboratorio bacteriológico. II. PROGRAMA ANALITICO DE LA ASIGNATURA. UNIDAD I: HISTORIA E INTRODUCCIÓN AL ESTUDIO DE LA MICROBIOLOGÍA. TEMA 1. ESTRUCTURA BACTERIANA 1.1. 1.2. 1.3. 1.4. 1.5. 1.6. 1.7. Pared celular, membrana citoplasmática: Flagelo, Cápsula, Pilli. Ribosomas, lisosomas, nucleoide. Crecimiento y control de microorganismos. Nutrición y reproducción microbiana. Cultivo. Medios de cultivo.Crecimiento Bacteriano Patogenicidad bacteriana.Relación huésped-bacteria. Factores importantes. TEMA 2. CLASIFICACIÓN Y DIVISIÓN DE LA BACTERIOLOGÍA, PRINCIPALES NUTRIENTES 2.1. Bacteriología. 2.2. Virología 2.3. Micología 2.4. Criterios para su clasificación 2.5. Morfología, Tinción, reacciones bioquímicas 2.6. Principales nutrientes, y medios de cultivo 2.7. Lípidos, Proteinas e Hidratos de Carbono. 2.8. Genética bacteriana U N I V E R S I D A D D E 3 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA TEMA 3. ESTERILIZACIÓN Y DESINFECCIÓN 3.1. Métodos 3.2. Utilización del calor seco. 3.3. Utilización del calor húmedo 3.4. Otros métodos, Radiación ,trituración, sonido 3.5. Bactericida y Bacteriostático. 3.6. Uso de desinfectantes más comunes 3.7 Antibiograma.Antimicrobianos. Betalactámicos , quinolonas, macrólidos, tetraciclinas. UNIDAD II: RESISTENCIA E INMUNIDAD TEMA 4. INTRODUCCIÓN A LA INMUNOLOGÍA 4.1. Relación antígeno anticuerpo 4.2. Parasitismo, comensalismo, simbiosis 4.3. Toxinas., alergia 4.4 Factores importantes. 4.5 Defensas específicas e inespecíficas contra la infección. UNIDAD III. BACTERIAS PATÓGENAS TEMA 5. GÉNERO STHAPYLOCOCCUS Y STREPTOCOCCUS 5.1. Morfología, cultivo, tipo de infección 5.2. Staphylococcus aureus, epidermidis. S, saprophyticus ,Streptococcus pyogenes 5.3. Streptococcus pneumoniae 5.4. Enterococcus faecalis 5.5. Examen de secreciones y líquidos corporales TEMA 6.1. 6.2. 6.3. 6.4. 6.5. 6. GÉNEROS HAEMOPHYLUS Y BORDETELLA H . influenzae, Bordetella pertusis H. parainfluenzae. Morfología, cultivo, transmisión patogenia, tratamiento prevención. Género neisseria: Neisseria gonorrhoeae y meningitis Examen de LCR. Secreciones faringeas, secreciones vaginales. TEMA 7. ENTEROBACTERIACEAE 7.1. Morfología, cultivo, patogenia, tratamiento prevención de infecciones causadas por Enterobacteriaceae 7.2. Escherichia coli y otras afines 7.3. Salmonella, Shigella. 7.4 Género Vibrio, género Brucella 7.5 Examen bacteriológico de orina 7.6 Examen bacteriológico de materia fecal. U N I V E R S I D A D D E 4 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA TEMA 8. BACTERIAS NO FERMENTADORAS Y MICOBACTERIAS 8.1 Morfología, transmisión. Cultivo. Patogenia, tratamiento, prevención 8.2 Género Pseudomonas 8.3 Género Aeromonas 8.4 Género Acinetobacter 8.5 Género Cromobacter 9.6 Género Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae 9.7 Examen de esputo, toma de muestras de secreción bronquial, baciloscopía UNIDAD IV : BACTERIAS PATÓGENAS TEMA 9 9.1 9.2 9.3 9.4 9.5 BACILOS ANAEROBIOS Clostridium tetani. Clostridium perfringens Clostridium botulinum Otros Clostridium Morfología, transmisión, tratamiento, prevención TEMA 10 BACILOS ANAEROBIOS 10.1 Chlamydia trachomatis 10.2 Treponema. Treponema pallidum 10.3 Ricketsias 10.4 Morfología. Diagnóstico. Transmisión, tratamiento, prevención 10.5 Examen bacteriológico de secreción uretral 10.6 Pruebas indirectas en sangre, 10.7 Aplicación de técnicas en el diagnóstico microbiológico TEMA 11 BACILLUS. 11.1. Bacillus anthracis 11.2 Bacillus cereus 11.3 Otros Bacillus 11.4 Morfología, transmisión, tratamiento, prevención. TEMA 12 IDENTIFICACIÓN MICROBIANA Y BACTERIANA 12.1. Identificación microbiana y bacteriana. Crecimiento en los cultivos. 12.2. Antibiograma. 12.3. Quimioterapia. 12.4. Examen bacteriológico de materia fecal. Cultivos. Pruebas de laboratorio. 12.5. Técnicas más utilizadas. Medios de cultivo. 12.6. Examen bacteriológico en orina. Cultivos. Pruebas de laboratorio. 12.7. Técnicas y medios de cultivo. 12.8. Examen de secreciones y líquidos corporales: LCR. Secreciones faríngeas. Secreciones vaginales. Cultivos. Medios de cultivo. Crecimiento bacteriano. 12.9. Pruebas bacteriológicas en sangre total. En plasma y en suero. Cultivos. Medios de cultivo. Resultados obtenidos. Informes de laboratorio. 12.10. Examen de esputo. Toma de muestras en secreciones bronquiales. Examen de laboratorio. Tinción para BAAR. U N I V E R S I D A D D E 5 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 12.11. Características del bacilo en la Tuberculosis. 12.12. Técnicas en el diagnóstico microbiológico molecular. Aplicación de las mismas. III. ACTIVIDADES A REALIZAR DIRECTAMENTE EN LA COMUNIDAD. i Tipo de asignatura Asignatura de Apoyo. ii Resumen de los resultados del diagnóstico realizado para la detección de los problemas a resolver en la comunidad. Según los datos obtenidos de los diagnósticos realizados por las instituciones de salud (SEDES y el Centro de Salud Sagrada Familia) y de acuerdo a la demanda social la problemática sobre salud pública ocupa los primeros lugares en cuanto a la preocupación de la población se trata. Inmerso dentro de esta problemática tenemos la falta de concientizaciòn y conocimiento de enfermedades trasmitidas por alimentos ocasionando diarrea en pacientes menores a 5 años, es importante el diagnostico, el tratamiento y la prevención de este tipo de enfermedades iii Nombre del proyecto al que tributa la asignatura. “Estudio de Diarreas en niños menores de 5 años en el Centro de Salud Sagrada Familia de la Red Metropolitana Sur “ iv Contribución de la asignatura al proyecto. De acuerdo al contenido programático de la asignatura y su vinculación con el proyecto la contribución consistirá en coadyuvar a otras asignaturas inmersas en el proyecto en el diagnóstico prevención de las diarreas en niños, Actividades a realizar durante el semestre para la implementación del proyecto. Trabajo a realizar por los estudiantes Organización de actividades del proyecto Búsqueda de bibliografía Localidad, aula o laboratorio Aula Incidencia social A los alumnos que participan Mayor información sobre la etiología de las diarreas Elaboración de fichas para los pacientes Aula y Centro de salud Concienciación sobre Sagrada familia Red la necesidad de Sur realizar el análisis en niños menores a 5 años Capacitación en talleres sobre Laboratorio de Pericia en el manejo bioseguridad, toma y transporte Microbiología de muestras biológicas de nuestra, en los alumnos que participan de la Brigada U N I V E R S I D A D D E 6 A Q U I N O B O L I V I A Fecha. 6 al 9 de mayo Entre el 13 al 18 de mayo Entre 18 al 25 de mayo FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Recolección de muestras Centro Indicaciones sobre como Red.Sur prevenir infecciones gastrointestinales a los padres de familia Tabulación de datos y entrega de resultados de salud Capacitación de los Entre 3 al 8 de actores involucrados. junio. Padres de familia Aula Actores involucrados en el proceso. Pacientes del Centro de Salud Jefatura de carrera Entre el 24 al 29 de junio. IV. EVALUACIÓN DE LA ASIGNATURA. ● PROCESUAL O FORMATIVA. ACTIVIDAD EVALUATIVA Preguntas orales Resolución de casos Prácticas de laboratorio PARÁMETROS PONDERACIÓN Conocimiento del tema. Respuestas oportunas TOTAL Conocimiento del tema. Capacidad de deducción, criterio TOTAL Presentación Conocimiento de la práctica Iniciativa, creatividad y participación Destreza en la práctica TOTAL 25 puntos FECHA En todas las clases teóricas y prácticas. 25 puntos 50 puntos 25 puntos Una semana antes de las evaluaciones 25 puntos 50 puntos 10.Puntos En todas las clases prácticas. 10 Puntos 10Puntos 20 Puntos 50 Puntos A lo largo del semestre se realizarán estos tres tipos de actividades formativas: Las primeras serán de aula, que consistirán en clases teóricas, exposiciones, repasos cortos, resolución de casos como análisis de muestras y estudio de láminas de bacteriología en el laboratorio de microbiología El trabajo, la participación y el seguimiento realizado a estas tres tipos de actividades se tomarán como evaluación procesual calificándola entre 0 y 50 puntos independientemente de la cantidad de actividades realizadas por cada alumno. La nota procesual o formativa equivale al 50% de la nota de la asignatura. U N I V E R S I D A D D E 7 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA ● DE RESULTADOS DE LOS PROCESOS DE APRENDIZAJE O SUMATIVA (examen parcial o Final) Se realizarán 2 evaluaciones parciales con contenido teórico y práctico (resolución de casos y prácticos) sobre 50 puntos cada una. El examen final consistirá en un examen escrito con un valor del 75% de la nota y la presentación de los informes y documentos del proyecto con el restante 25%. V. BIBLIOGRAFÍA BIBLIOGRAFÍA BASICA - JAWEST y MELICK. Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2006(Signatura topográfica 616.01 B79). - ATLAS, RM y R. BARTHA. Ecologia Microbiana y Microbiología Ambiental. 4º Edicion. Edit. Addison-Wesley. Madrid.2002. - JAWEST. Microbiologia. Editorial Progreso. Moscú. 2008 - PEREA, EJ. Enfermedades infecciosas. Editorial Limusa. México.2002. BIBLIOGRAFÌA COMPLEMENTARIA - MIMS, PLAYFAIR, ROITT,WAKELIN,WILLIANS. Microbiologia Médica. PLAYFAIR, (eds) Mosby Doyma libros 1º Edicion,1995. MURRAY PR, ROSENTHAL KS, KOBAYASHI GS, PFALLER MA. Microbiologia Médica. 5º Edicion. Edit. Mosby. Madrid.2006. - PEREZ ALVA, Simon. Control Microbiologico. Ed. Acacia S.A. Peru.1989. - Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Washintong C. Diagnóstico Microbiológico. Quinta Edición. Editorial Médica Panamericana. 2000. - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 8 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA VII. PLAN CALENDARIO. SEMANA ACTIVIDADES ACADÉMICAS OBSERVACIONES 1ra. Avance de materia Unidad I, Tema I 2da. Avance de materia Unidad I, Tema I-II Preguntas orales GIPS 3ra. Avance de materia Unidad I,Tema II Preguntas orales GIPS 4ta. Avance de materia Unidad I, Tema III Preguntas orales GIPS 5ta. Avance de materia Unidad I, Tema III 6ta. Avance de materia Unidad I, Tema III 7ma. Avance de materia Unidad II, Tema IV 8va. Avance de materia Unidad III, Tema V Avance de materia Unidad III, Tema VI Preguntas orales GIPS Preguntas orales GIPS,Resolucion de casos Preguntas oralesGIPS Primera Evaluación Preguntas oralesGIPS Primera Evaluación Preguntas orales GIPS 1ra. Incursión Preguntas orales GIPS 2da. Incursión 3ra. Incursión Preguntas orales GIPS Preguntas orales GIPS Preguntas orales,GIPS Resolución de casos 4ta. incursion Preguntas orales GIPS Segunda Evaluación Preguntas oralesGIPS Segunda Evaluación 9na. Unidad III, Tema VII 10ma. Avance de materia 11ra. Avance de materia Unidad III, Tema VII 12da. Avance de materia Unidad III, Tema VIII 13ra. Avance de materia Unidad IV, Tema IX Actividad de Brigadas 14ta. Avance de materia Unidad IV, Tema X 15ta. Avance de materia Unidad IV, Tema XI 16ma Avance de materia 17va Avance de materia 18na Avance de materia Unidad IV, Tema XI Unidad IV, Tema XII Unidad IV, Tema XII Preguntas orales GIPS Preguntas orales,GIPS Preguntas orales,GIPS Resolución de casos Examen final 19va. Examen final 20va. Examen segunda instancia U N I V E R S I D A D D E 9 Presentación de notas A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA VII. WORK PAPER PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 1 UNIDAD I : Tema 1 TÌTULO: Estructura bacteriana FECHA DE ENTREGA: 2 semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN : Tercera semana de clases INTRODUCCIÓN Bacteria: La bacteria es un ser unicelular que se divide por simple división se nutre de compuestos como ser los hidratos de carbono, lípidos, proteínas y agua, también son necesarios elementos como las vitaminas minerales anhídrido carbónico, requerimientos físicos como ser la temperatura, presión y PH. Las bacterias forman parte del ecosistema en el que vivimos, algunas son saprófitas, comensales y patógenas causan infección, la estructura nos permite comprender el comportamiento de las bacterias frente a nuestro organismo. COMPOSICIÓN DE LA BACTERIA COMPONENTES DE LA PARED CELULAR. 1.- Pared celular: Responsable de la morfología de las bacterias y de protección natural de la misma. 2.- Membrana citoplasmática: Permite el ingreso y la salida de nutrientes a la bacteria. 3.- Péptidoglucano. Compuesto por N- acetil glucosamina, N- acetil murámico ligado a un tetrapéptido. Se encuentra entre la membrana y la pared celular. 4.- Cápsula: Organela facultativa destinada a la protección de la bacteria, esta compuesta por hidratos de carbono. 5.- Flagelo. : Organela facultativa responsable de la motilidad de la bacteria, esta compuesta por una proteína llamada quitina. 6.- Pilli ó fimbrias: Organela facultativa, cuya función es la adherencia a través de substancias conocidas como andesinas, Las fimbrias están compuestas por quitina. COMPONENTES DEL CITOPLASMA 1.- Ribosomas: Estructura destinada a la síntesis de proteínas, se encuentran agrupados llamados polisomas 2.- Lisosomas. Estructura destinada a la catabolización de los nutrientes. 3.- Nucleoide: La bacteria no tiene núcleo sin embargo contiene restos de DNA que le permite replicarse a través de la información genética. U N I V E R S I D A D D E 10 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA COMPONENTES NUTRICIONALES La composición de los nutrientes nos permite saber sus necesidades nutricionales y de esta manera poder desarrollarlos en el laboratorio Hidratos de carbono Lípidos Proteínas Agua : 15 a 25 % : Hasta el 40 % : 50% en peso seco : 85 % Factores de crecimiento: Vitaminas: VIT. B1. Vit. B6, Vit, B12 Ac, pantoténico, Acido nicotínico Aminoácidos: Glicina, Serina, Triptofano fenil alanita cisteina asparagina Minerales : Sodio, potasio ,Cobre, Fósforo, azufre, Fosfatos, carbonatos Anhídrido carbónico Requerimientos inorgánicos Temperatura : 35 a 37 ºC. Presión : 1 At. PH . La óptima MÉTODOS DE OBSERVACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE LAS BACTERIAS Para la observación de la estructura de las bacterias se emplea métodos de tinción que permite observar: La morfología Tinción de Gram.: Método universal de tinción, que permite observar la forma de la bacteria que puede ser coco, bacilo, espirilo, grampositivos o gramnegativos empleando dos colorantes que son la violeta de genciana y la safranina Tinción de Ziehl Neelsen: Método de tinción que nos permite la observación de bacterias ácidoalcohol resistentes como son los del género Mycobacterium, utilizando colorantes como la fucsina fenicada, el alcohol ácido y el azul de metileno. Tinción de cápsulas: permite observar a las bacterias que tienen cápsula Tinción de flagelos: Permite observar a los flagelos y pilli con mayor nitidéz Medios de cultivo: Conociendo la estructura y los requerimientos se pueden utilizar medios de cultivo que nos permitan identificar la bacteria. Medios de cultivo selectivos Medios de cultivo diferenciales Medios de cultivo enriquecidos Medios de cultivo de transporte Medios de cultivo de enriquecimiento Medios de cultivo especiales IMPORTANCIA DE LA ESTRUCTURA BACTERIANA Y SU COMPOSICIÓN.Conocer la estructura bacteriana es de vital importancia en el reconocimiento de la bacteria en la identificación preliminar de las bacterias para poder utilizar los medios de cultivo para su correspondiente identificación . U N I V E R S I D A D D E 11 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Las bacterias en su estructura tienen elementos que nos permitirán en el laboratorio el desarrollo y la correspondiente identificación de la especie que causa infección En la enfermedad de la Tuberculosis se emplea la tinción de Ziehl Neelsen ya que su composición lipídica hace a la bacteria que sea ácido alcohol resistente y para la misma bacteria se emplea un medio especial Lowentein jensen, ya que esta bacteria es de desarrollo lento y los medios de cultivo aumenta su sensibilidad en el diagnóstico CUESTIONARIO DEL WORK PAPER 1. ¿Las bacterias son células procariotes ó eucariotes? 2. ¿Qué función tiene la cápsula? 3. ¿Qué utilidad tienen los flagelos y las fimbrias? 4. ¿Cuál es la composición del péptido glucano? 5. ¿Qué función cumplen los ribosomas y los lisosomas? 6. ¿Para qué sirve la tinción de Gram? 7. ¿De qué esta compuesto la cápsula? 8. ¿Qué observa en la Tinción de Ziehl Neelsen? 9. ¿Cuántas clases de medios de cultivo conoce? 10. ¿Qué composición aproximada porcentual tienen los hidratos de carbono? 11. ¿Qué porcentaje de lípidos tienen las bacterias? 12 ¿Cuáles son los factores de crecimiento de las bacterias? 13 ¿Qué función cumplen los oligoelementos o minerales? 14. ¿Cuáles son los requerimientos inorgánicos para el desarrollo de las bacterias? 15. ¿Cuál es la composición porcentual de proteínas en la bacteria? 16. ¿Cuáles son los componentes celulares bacterianos? U N I V E R S I D A D D E 12 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 2 UNIDAD III : Tema 6 TÌTULO: Neisseria gonorrhoeae FECHA DE ENTREGA: 9na Semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN : Décima semana GONORREA Es una de las enfermedades de transmisión sexual mas común, y es también considerada como una de las enfermedades infecciosas bacteriana más frecuente, puede contraerse juntos con otras E.T.S. ya sea Clamidia, Sífilis, Herpes AGENTE CAUSAL La bacteria que la produce es la Neisseria gonorrhoeae, llamado comúnmente gonococo MORFOLOGIA: Contiene diplococos Gramnegativos no esporulados intra o extracelular, con un diámetro aproximado de 0.6 a 0.8 um estos cocos tiene forma de riñón o de grano de café. El gonococo es un gérmen muy frágil al calor, a temperaturas de refrigeración y a diversos antisépticos. ULTRAESTRUCTURA: De la Neisseria gonorrhoeae carece de cápsula, la estructura más extensa esta compuesta por fimbrias compuesta por sub.- unidades de péptidos (pilli) En la membrana trilaminar están presentes las proteínas I, II y III y polisacáridos. La proteína TRANSMISIÒN:La gonorrea se transmite: -Por relaciones sexuales sin protección -Se puede transmitir de una mujer embarazada a su bebé recién nacido durante el -Por relaciones sexuales con múltiples compañeros sexuales parto PATOGENIA: las bacterias que causan gonorrea se encuentran en las áreas de la mucosa del cuerpo (vagina, uretra, garganta y el recto) en el semen y líquidos vaginales. El gonococo expresa su primer grado de patogenicidad al adherirse a la superficie de los epitelios uretral , endocervical vaginal e incluso a los espermatozoides humanos y a las células no ciliadas que cubren las trompas de Falopio ,la bacteria con pili se adhiere con mayor facilidad que la que no tiene pili. La bacteria evade a la fagocitosis por que puede expresar antígenos de superficie antifagocitarios como los pilli bacterianos y ciertas proteínas presentes en la bacteria que pueden protegerla de la fagocitosis. PERÍODO DE INCUBACIÒN: Aproximadamente de 2 a 5 días después del contacto sexual con una persona infectada, aunque los síntomas pueden aparecer dos semanas después SINTOMATOLOGIA: Sobre un 50% de las muyeres infectadas y de 5 a l0 % de los hombres infectados con gonorrea no tienen síntomas .Estos son los principales síntomas más comunes: U N I V E R S I D A D D E 13 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Hombres: Un flujo del pene que suele ser medio amarillo dolor y ardor al orinar. Mujeres: Usualmente flujo y dolor al orinar, sangrado entre menstruaciones o después del sexo y dolor en el bajo vientre Infección Rectal: Flujo del ano, picazón anal, defecaciones dolorosas y materia fecal sangrante. TRATAMIENTO; Se suele tratar con una sola dosis de antibióticos, el tratamiento puede ser por vía oral Ciprofloxacina) o por vía IM la Penicilina o Espectinomicina debido a que la gonorrea y la Clamidia suelen existir juntos se suele tratar a la gonorrea con antibiótico contra la Clamidia los antibióticos usados son: Ceftriaxona, Doxiciclina, Levofloxacina, Tetraciclina y otros, Sin tratamiento existe un buen porcentaje de desarrollar complicaciones. La complicación más frecuente en las mujeres es la enfermedad pélvica inflamatoria (EPI) que puede causar incapacidad de embarazo o aumentar el riesgo de embarazo ectópico. Los hombres pueden sufrir hinchazón de los testículos y pene, ocasionar prostatitis, epididimitis y ocasionar esterilidad. Ambos sexos pueden sufrir Artritis, Endocarditis. PREVENCIÓN. : La abstinencia de la actividad sexual es la manera más segura de evitar infectarse con la gonorrea. Limitar el sexo a una sola pareja no infectada, monogamia mutua, la base es la educación sexual. PROFILAXIS: Similar a las demás E.T.S. no hay una vacuna disponible y se limita al uso preservativo o condón de látex. del DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO: Se realiza una tinción de Gram. En muestras obtenidas ya sea se secreción uretral o flujo vaginal, donde se pueden observar a los diplococos gramnegativos, también se realiza cultivo en agar Thayer Martín o agar chocolate CUESTIONARIO DEL WORK PAPER: 1. ¿Qué es la Gonorrea o blenorragia? 2. ¿Cuál es el agente causal? 3. ¿Qué organelas posee la bacteria en la pared celular? 4. ¿Qué morfología presenta la Neisseria gonorrhoeae? 5. ¿Son resistentes los gonococos al medio ambiente y a medios físicos? 6. ¿Cuál es su principal signo de patogenicidad de la bacteria? 7. ¿La transmisión se realiza por contacto directo, indirecto o por ambos mecanismos? 8. ¿Cuál es el período de incubación? 9. ¿Cuáles son los síntomas más comunes en la gonorrea? 10. ¿Existen personas que son contagiadas y que no presenten síntomas? 11. ¿Cuál es la complicación mas frecuente de la gonorrea en las mujeres que no realizan tratamiento? 12. ¿Qué antimicrobianos se utilizan en el tratamiento de la gonorrea? U N I V E R S I D A D D E 14 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 3 UNIDAD III: Tema 8 TÌTULO: Mycobacterium tuberculosis FECHA DE ENTREGA: Décima semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÒN: Décima primera semana de clases INTRODUCCION. La tuberculosis es una enfermedad crónica, ocasionada por el Mycobacterium tuberculosis generalmente la infección se localiza en los pulmones, puede ocurrir la diseminación y afectar a otros órganos Robert Koch lo descubre en el año 1882, AGENTE CAUSAL: Mycobacterium tuberculosis CARACTERISTICAS DEL BACILO: El Mycobacterium tuberculosis es un bacilo aerobio es ácido alcohol resistente Es aerobio estricto Muy resistente al frío y a la congelación Sensible al calor, a la luz solar y la luz ultravioleta Se multiplica lentamente TRANSMISION: La tuberculosis se transmite por contacto directo: Se transmite de persona a persona por vía respiratoria a través de las gotitas de líquidos expulsados al hablar, toser estornudar las gotitas se evaporan a poca distancia de la boca y seguidamente los bacilos desecados persisten en el aire por largo tiempo. La infección se produce por la inhalación de estos bacilos., Normalmente se necesitan muchos meses de convivencia con un enfermo para que se produzca la transmisión La tuberculosis se contagia a través del aire las personas no pueden contagiarse mediante el saludo de manos, o compartiendo alimentos. PERÍODO DE INCUBACIÒN A diferencia de otras enfermedades infecciosas laTuberculosis no tiene un período de incubación específico aunque se considera alrededor de 21 días. El bacilo puede permanecer latente en el organismo durante un largo período, hasta que una disminución de las defensas le da la oportunidad de multiplicarse y producir los síntomas de la enfermedad, aunque una tercera parte de la población mundial es portadora de los bacilos la enfermedad se desarrolla en un porcentaje pequeño de personas. U N I V E R S I D A D D E 15 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PATOGENIA: La tuberculosis constituye un paradigma de la interacción de un agente exógeno y la respuesta inmunitaria del huésped. La primoinfección tuberculosa definida por el conjunto de fenómenos biológicos que tienen lugar cuando un organismo entra en contacto con el bacilo tuberculoso. Cuando un bacilo ingresa al organismo son atacados por las defensa del organismo. Se propaga y alcanzan el torrente sanguíneo y pueden llegar a todo el organismo dando una enfermedad diseminada SINTOMATOLOGÍA: Fatiga Fiebre Pérdida de peso Sudoración nocturna Tos persistente Dolor toráxico Esputos sanguinolentos TRATAMIENTO; Realizar un correcto aislamiento domiciliario durante los primeros 15 días de tratamiento El reposo es necesario y el paciente puede reincorporase a su actividad laboral después de 2 meses. Lo antibióticos más utilizados en un esquema de tratamiento son.: Isoniacida, Estreptomicina, pirazinamida, Etambutol, Rifampicina la duración del tratamiento oscila entre 6 a 9 meses. PREVENCIÓN. : Una ventilación suficiente es la medida más aconsejada para reducir la infecciosidad. Evitar el hacinamiento La quimiprofilaxis pretende detener la cadena epidemiológica de la tuberculosis mediante el tratamiento de sujetos expuestos a contagio o ya infectados. La vacunación sistemática con el bacilo de Calmette Guerin (BCG), es la norma en nuestro pais. DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO: Se realiza una tinción de Ziehl Neelsen que nos permite visualizar el bacilo ácido alcohol resistente. El cultivo presenta una mayor sensibilidad y especificidad requiriéndose ocho semanas de incubación para obtener un resultado definitivo El diagnóstico de la Tuberculosis se restablece cuando el bacilo tuberculoso es identificado en los líquidos corporales tejidos y esputo. La prueba de tuberculina mediante la intradermoreacción de Mantoux es el único método aceptado para el diagnóstico de la infección se aplica en forma intradérmica el antígeno proteico purificado PPD después de 72 hrs. se considera positivo cuando hay una induración igual o mayor a l4 mm de diámetro en pacientes vacunados La radiografía de tórax puede dar mucha información. Todo caso de tuberculosis debe ser considerado como de probabilidad mientras no se observe al bacilo o se obtenga a través del cultivo en el medio de Lowenstein Jensen. En la práctica,por la demora de los cultivos es suficiente con disponer de una baciloscopía si se acompaña de clínica y radiografía indicativa. CUESTIONARIO DEL WOK PAPER 1. ¿Que es la Tuberculosis? 2. ¿La tuberculosis es una enfermedad asociada a la mal nutrición y a depresiones en el sistema inmunológico fundamentalmente? 3. ¿El Mycobacterium tuberculosis es un bacteria resistente o lábil? 4. ¿Qué morfología presenta el M, tuberculosis? U N I V E R S I D A D D E 16 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 5. ¿Cómo se transmite la tuberculosis? 6.- ¿La bacteria desarrolla en medios de cultivo comunes? 7. ¿La transmisión se realiza por contacto indirecto? 8. ¿Cuál es el período de incubación? 9. ¿Cuáles son los síntomas mas frecuentes?? 10. ¿Cómo se define la primoinfección? 11. ¿Para que sirve la quimioprofilaxis? 12. ¿Cómo se realiza el diagnostico en el laboratorio de bacteriología? 13. ¿Cuáles son las bases de diagnóstico de la tuberculosis? U N I V E R S I D A D D E 17 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 4 UNIDAD IV: Tema 9 TÌTULO: Clostridium tetani FECHA DE ENTREGA: Décimo tercera semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN : Décimo cuarta semana de clases El tétanos es un desorden neurológico caracterizado por un aumento del tono muscular, espasmos provocados por la tetanospasmina, una toxina producida por una bacteria denominada Clostridium tetani. Con frecuencia la enfermedad es mortal sobre todo en niños y ancianos. El tétanos actúa esporádicamente y casi siempre afecta a personas no inmunizadas o personas inmunizadas que no han renovado su vacuna. Se trata de un microorganismo de distribución mundial encontrado en el suelo, en medio inorgánico, metales en oxidación. Sus esporas pueden vivir años en algunos medios y son resistentes a varios desinfectantes. Suele ser mas frecuente en pequeñas heridas de menor importancia que en grandes heridas. MORFOLOGÍA: El Clostridium tetani es un bacilo grampositivo no esporulado de forma bastonada móvil y formador de esporas que se sitúan en un extremo dándole un aspecto de raqueta o palito de tambor. El microorganismo se encuentra en el suelo en las heces de los animales y ocasionalmente del hombre, Las esporas pueden sobrevivir varios años en un ambiente hostil y son resistentes al agua hirviendo durante 20 minutos y a varios desinfectantes químicos. Las células vegetativas son por el contrario bastante fáciles de inactivar y son sensibles a varios antibióticos. Es un anaerobio estricto. TRANSMISIÒN Y CAUSAS: La contaminación del tétanos se produce a través de heridas abiertas que entran en contacto con agentes infectados, Una vez en el interior del organismo se multiplican y liberan dos substancias tóxicas la tétano lisina y la tetanoespasmina, esta última neurotóxica y responsable del cuadro causado por el Clostridium tetani PERÍODO DE INCUBACIÓN : El período de incubación es de 5 días a 15 semanas siendo frecuentemente de 7 a 10 días cuanto màs corto mayor gravedad suele tener el cuadro,. Existen tres formas clínicas, tétanos generalizado, localizado y neonatal PATOGENIA: Probablemente la contaminación de las heridas con las esporas es un hecho frecuente, sin embargo, la germinación y la producción de toxina solo ocurre en las heridas con bajo potencial de oxido reducción, como las que contienen los tejidos desvitalizados, cuerpos extraños o infección activa, El Clostridium tetani por si mismo no produce inflamación y la puerta de entrada tiene aspecto benigno U N I V E R S I D A D D E 18 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA si no hay infección con otros gérmenes. La toxina liberada en la herida se fija en las terminaciones de la neurona motora periférica, penetran en el axón y es trasladada a la zona neural del sistema nervioso central por un transporte intro-neuronal retrogrado. La toxina migra a través de la sinapsis a las terminales PRE - sinápticas en los que la bloquea, La liberación de los neurotransmisores inhibidores de glicina y GABA., disminuir la inhibición la frecuencia de descarga de reposo de la neurona motora aumenta produciendo rigidez. Con la disminución de la actividad de reflejo, que limita la diseminación polisinaptica de los impulsos, en ves de inhibirse recluta los antagonistas produciendo espasmos En el tétano localizado solo se afectan los nervios que inervan a los músculos afectados. El tétano generalizado se produce cuando la toxina liberada en la herida penetra en el torrente sanguíneo y se extiende a otros terminales nerviosos, la barra hemato-encefálica bloque la penetración directa al sistema nervioso central SINTOMATOLOGIA: Lo primero que el paciente nota es el cierre de la mandíbula como consecuencia del la afectación de los músculos maseteros. También aparece disfagia (dificultad acompañada de dolor al tragar), rigidez de los músculos el cuello y la espalda. Seguidamente aparece rigidez en el abdomen Así mismo la contracción mantenida en los músculos de la cara produce un signo característico denominado risa sardónica MANIFESTACIONES CLÌNICAS TETANOS GENERALIZADO: Es la forma más generalizada de la enfermedad y se caracteriza por un aumento en el tono y por espasmos generalizados. Las primeras manifestaciones tienen lugar a los 7 días de la infección aunque pueden verse después de 14 días. Los primeros síntomas consiste en inquietud, dolor y rigidez de la espalda por espasmo muscular así como el cuello los músculos el abdomen, también es muy común la dificultad Para la masticación y la deglución. Un signo precoz es el trismo o dificultad para abrir la boca por aumento del tono de los músculos maceteros TETANOS NEONATAL Usualmente tiene lugar como forma generalizada y si no se trata suele ser fatal. Se desarrolla en niños de madres inadecuadamente inmunizadas, después de un tratamiento del cordón umbilical en condiciones no estériles, suele producirse en las dos primeras semanas después del nacimiento. Los síntomas màs característicos es la rigidez, espasmos y dificultad en la deglución. TETANOS LOCAL Es una forma poco frecuente que tiene lugar cuando solo quedan afectados los músculos cerca de la herida, el pronóstico es bueno. TETANOS CEFALICO: Es un forma rara de tétanos, después de una herida en la cabeza o en la oreja, Frecuentemente se observa trismos y disfunción del séptimo par craneal, El período de incubación es corto y la mortalidad elevada TRATAMIENTO; Los objetivos del tratamiento son: - Eliminar el foco de origen y la toxina - Neutralizar la toxina no fijada - Impedir los espasmos musculares U N I V E R S I D A D D E 19 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA La penicilina sigue siendo el antibiótico de elección debido a su eficaz acción contra el Clostridium y su capacidad de difusión. La antitoxina se administra para neutralizar a la toxina circulante,que aun no se a fijado a la herida, esto contribuye a disminuir la mortalidad. PREVENCIÓN Y PROFILAXIS: Todos los sujetos inmunizados parcialmente o no inmunizados deben ser vacunados entre los 2 meses y dos años de vida con tres dosis de la vacuna triple DTP o la pentavalente. La herida debe someterse a una limpieza y desbridamiento quirúrgico inmediato para eliminar cuerpos extraños y cualquier tejido necrótico en el que se puedan desarrollar condiciones anaeróbias. DIAGNÒSTICO DE LABORATORIO: El Clostridium tetani no siempre es visible en la tinción de Gram., de una muestra tomada de la herida. El cultivo de las muestras se realiza en atmòsfera de anaerobiosis , utilizando medios de cultivo como el Skirow Agar, o el agar sangre con telurito. CUESTIONARIO DEL WORK PAPER 1. ¿Qué es el Tétanos? 2. ¿Cuál es su hábitat de la bacteria? 3. ¿Qué morfología tiene el Clostridium? 4. ¿Las esporas y las formas vegetativas son iguales? ¿Cual la diferencia? 5. ¿El Clostrdium tetani es una bacteria aerobia o anaerobia? 6. ¿El Clostridium tetani ocasiona Septicemia? 7. ¿El Tétanos es Transmisible? 8. ¿Cuál es el período de incubación? 9. ¿Cuántas clases de tétano existen? 10. ¿Cuales son los principales síntomas del tétanos? 11. ¿Cuál es el objetivo del tratamiento del Tétanos? 12. ¿Qué antibióticos se utiliza en el tratamiento del Tétanos. 13. ¿Cómo se neutraliza la acción de la Toxina? 14. ¿Cuál es la prevención para el tétanos? 15. ¿Existe vacuna para evitar el tétanos? U N I V E R S I D A D D E 20 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA VIII. GIP´S PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 1 UNIDAD I :Tema 4 Esterilización TÌTULO: Preparación de material de laboratorio FECHA DE ENTREGA: Primera semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN : Segunda semana FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA: La esterilización es el proceso de eliminación de toda forma de vida, incluidas las esporas. Es un término absoluto que implica pérdida de la viabilidad o eliminación de todos los microorganismos contenidos en un objeto o sustancia, acondicionado de tal modo que impida su posterior contaminación. En esta práctica se podrá utilizar esterilización al calor seco, al calor húmedo, calor más presión y otros. - Métodos Químicos Estos métodos provocan la pérdidá de viabilidad de los microorganismos. Con oxido de etileno: Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrógenos lábiles. Es utilizado en la esterilización gaseosa, generalmente en la industria farmacéutica. Destruye todos los microorganismos incluso virus. Sirve para esterilizar material termosensibles como el descartable (goma, plástico, papel, etc.). Con aldehídos: Son agentes alquilantes que actúan sobre las proteínas, provocando una modificación irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimática. Estos compuestos destruyen las esporas. Glutaraldehído: Consiste en preparar una solución alcalina al 2% y sumergir el material a esterilizar de 20 a 30 minutos, y luego un enjuague de 10 minutos. Este método tiene la ventaja de ser rápido y ser el único esterilizante efectivo frío. Puede esterilizar plástico, goma, vidrio, metal, etc. - Métodos físicos Calor: La utilización de este método y su eficacia depende de dos factores: el tiempo de exposición y la temperatura. Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la acción del calor. Calor Húmedo: El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. Autoclave: Se realiza la esterilización por el vapor de agua a presión. El modelo más usado es el de Chamberland .Esteriliza a 121ºC a una atmósfera de presión (estas condiciones pueden variar) y se dejan los medios de cultivo durante 15 minutos. Calor seco: U N I V E R S I D A D D E 21 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA El calor seco produce desecación de la célula, es esto tóxicos por niveles elevados de electrolitos, fusión de membranas. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con éstos. Estufas: Doble cámara, el aire caliente generado por una resistencia, circula por la cavidad principal y por el espacio entre ambas cámaras, a temperatura de 180º C para el instrumental metálico y a 140º C para el contenido de los tambores. PRÁCTICA OBJETIVOS: Conocer los diferentes proceso de esterilización de material utilizando equipos utilizados en Bacteriología MATERIAL: Autoclave Pupinel Baño maría Cajas petri Tubos de ensayo Mechero y aza MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS 1. – Esterilizar cajas petri, tubos de ensayo, material metálico en el pupinel a 180 ºC 1 hora 2. - Esterilizar los medios de cultivo en el autoclave a 121 ºC drante 15 minutos . 3.- Esterilizar por el método de combustión utilizado mechero, manejo de aza bacteriológica, Esterilizar la boca de los tubos, y frascos. RESULTADOS: Observación del material esterilizado guardar para su uso posterior CONCLUSIONES EVALUACIÒN 1,- ¿Qué tipos de material se esterilizan en el pupinel y en el autoclave? 2.- ¿Qué tipos de cuidados se deben tener al utilizar el pupinel y el autoclave? 3.- ¿Cuáles son las ventajas y las desventajas de los métodos de esterilización fisicos y quimicos? 4.- ¿A que se refiere el tipo de esterilización mecánico? U N I V E R S I D A D D E 22 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 5.- ¿Qué tipos de materiales se esterilizan a fuejo directo? 6.- ¿Cómo se realiza actualmente el control del material esterilizado? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008 (Signatura topográfica 616.01 B79 - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 23 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP’s # 2 UNIDAD I :Tema 2 Nutrición y medios de cultivo TITULO: Preparación de medios de cultivo FECHA DE ENTREGA: Segunda semana de clases PERÍODO DE EVALUACION: Tercera semana de clases FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA La utilización de medios de cultivo artificialmente preparados in vitro para el desarrollo de las bacterias es una metodología básica en la práctica de la Bacteriología, donde se utilizan medios deshidratados y hay que volver a hidratarlos para vaciar a las cajas petri y tubos de ensayo, para conservarlos en la heladera y utilizarlos cuando sean requeridos, para ello se debe hacer cálculos y pesar los medios para la cantidad necesaria de medio de cultivo. Tipos de medios de cultivo Según su estado: A.- Medios líquidos: No llevan agentes solidificantes. B.- Medios sólidos: Llevan un agente solidificante (agar) que es un polisacárido acídico producido por ciertas algas rojas que gelifica por debajo de 45°C. Se usa a una concentración del 1,5%. C.- Medios semisólidos: Agar a una concentración del 0,7%. Según su composición: A.- Medios sintéticos o químicamente definidos. Llevan fuente de carbono, fuente de nitrógeno, sales que suplan iones, otros elementos como son estimuladores del crecimiento pero siempre a concentraciones conocidas. B.- Medios complejos o de composición indefinida. Estos medios llevan ingredientes como extracto de levadura, peptona, infusión de cerebro, extracto de carne, etc. que contienen nutrientes en abundancia pero sin saber con exactitud la composición cualitativa ni cuantitativa de estos nutrientes. C.- Medios de enriquecimiento. Son medios complejos (normalmente) con aditivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados microorganismos (particularmente heterótrofos exigentes). Ejemplo: adicción de sangre, suero o extractos de tejidos de animales y plantas. U N I V E R S I D A D D E 24 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA D.- Medios selectivos. Son aquellos que favorecen por su diseño el crecimiento específico de un microorganismo particular (o grupo de microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de una población microbiana mixta. Ejemplo: CO2 como fuente de carbono es selectivo para autótrofos; adiccionando cristal violeta se inhibe el crecimiento de los Gram (+); utilizando maltosa como única fuente de carbono sólo crecerán los que usen maltosa. E.- Medios diferenciales. Son aquellos destinados a facilitar la discriminación de microorganismos de una mezcla por sus propiedades diferenciales de crecimiento en dichos medios. Ejemplo: agar sangre diferencia hemolíticos de no hemolíticos; Mac Conkey diferencia lactosa (+) de lactosa (-). F.- Medios de mantenimiento. Suelen ser distintos a los de crecimiento óptimo ya que el crecimiento rápido y prolífico suele ocasionar la muerte rápida de las células. Ejemplo: al añadir glucosa y utilizarla los microorganismos producen ácidos, acidificándose el medio por lo que es preferible no utilizar glucosa en los medios de mantenimiento. PRÁCTICA OBJETIVOS: Preparar medios de cultivo para el uso en el laboratorio de Bacteriología. MATERIAL Balanza Espátula Matraz o balón de vidrio Pipetas Cajas petri Tubos de ensayo Agar sangre Agar Mac Conkey Agar SS Agar Chocolate Agar CLED Caldo BHI Médios selectivos : TSI, Citrato , LIA, Urea, SIM, Malonato MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS 1.-Realizar cálculos para pesar la cantidad de medio requerido 2.-Usar balanza analítica para pesar el medio de cultivo 3.-Rehidratar con agua destilada deionizada, al volumen necesario 4.- Medir el PH 5.-Esterilizar en el autoclave 15 Min. A 121 ºC 6.-Esperar 15 minutos para sacar del autoclave, distribuir en los tubos de ensayo, cajas petri dejar enfriar y gelificar. 7.-Guardar en heladera para su posterior utilización CONCLUSIONES U N I V E R S I D A D D E 25 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA EVALUACIÓN: 1.- ¿Nombrar los tipos de medios diferenciales, selectivos y de mantenimiento? 2.- ¿Qué tipo de medio de cultivo es el medio Agar chocolate? 3.- ¿Cuáles son los cuidados que se deben tener al preparar los diferentes medios de cultivos? 4.- ¿Cómo se realiza el control de calidad de los medios de cultivo preparados? 5.- ¿Cuáles son los cuidados que se deben de tener con la utilización de la balanza analítica? 6.- ¿Como se realiza el control de crecimiento de los medios de cultivo? 7.- ¿Mencionar los medios de cultivo que no se autoclavan? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008(Signatura topográfica 616.01 B79) - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 26 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 3 UNIDAD I :Tema 1 Genética bacteriana TITULO: Técnicas de sembrado FECHA DE ENTREGA: Tercera semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÒN. Cuarta semana de clases FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA Existen varias técnicas de siembra en los medios preparados, estas técnicas o formas de siembra que se realizan a partir de muestras biológicas que presumiblemente existe infección deben ser realizadas con destreza para poder aislar las colonias que se desarrollan en lo medios de cultivo, esto nos permitirá poder observar después de un tiempo de incubación a una temperatura determinada , generalmente la temperatura corporal 37 ºC la multiplicación de las bacterias por división binaria se transforman en clones o colonias que cada bacteria tiene una característica determinada como ser, color ,tamaño, aspecto, dureza adhesión.PRÁCTICA OBJETIVOS Realizar diferentes formas de siembra para el aislamiento de bacterias en los medios de cultivo. MATERIAL 1.- Medios Líquidos 2.- Medios de cultivo sólidos en tubos 3.- Medios de cultivo sólidos en cajas petri 4.- Mechero y aza bacteriológica 5.- Estufa de cultivo a 35-37 ºC. MÈTODO Y PROCEDIMIENTO 1.-Esterilizar el aza en el mechero 2.-Recolectar muestra biológica del frasco 3.-Sembrar por agotamiento en media caja petri 4.-Sembrar por agotamiento en tres direcciones en una caja petri 5.- Sembrar en medio líquido 6.-Sembrar en tubo inclinado por agotamiento 7.-Incubar a 35 -37 ºC en la estufa de cultivo durante 24 Hrs. 8.-Sacar de la estufa y observar el desarrollo de las colonias U N I V E R S I D A D D E 27 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA RESULTADOS Observar el desarrollo bacteriano CONCLUSIONES EVALUACIÓN 1.- ¿A qué se llama siembra por agotamiento? 2.- ¿Qué es una siembra por inoculación? 3.- ¿Para qué se realiza un estriado en la caja petri? 4.- ¿A qué temperatura crecen favorablemente las bacterias? 5.- ¿Qué tiempo necesitan las bacterias para su desarrollo? 6.- ¿Todas las bacterias desarrollan a la misma temperatura? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008 (Signatura topográfica 616.01 B79). - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 28 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA GIP 4 UNIDAD I :Tema 1 Estructura bacteriana TITULO: Tinción de Gram FECHA DE ENTREGA: Cuarta semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN : Quinta semana de clases FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA. La tinción de Gram es un tipo de tinción diferencial empleada en Bacteriología para la visualización de bacterias, sobre todo en nuestras clínicas. Su nombre se debe al bacteriólogo danés Christian Gram, que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose a las bacterias Grampositivas que se visualizan de color violeta y bacterias gramnegativas a las que se visualizan de color rosado. Las bacterias grampositivas y gramnegativas se tiñen de forma distinta debido a las diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes celulares. La pared de la célula bacteriana sirve para dar su tamaño y forma al organismo así como para prevenir la lisis osmótica. El material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el peptidoglicano. La pared de la célula grampositiva es gruesa y consiste en varias capas interconectandas de peptidoglicano así como algo de ácido teicoico. Generalmente, 80%-90% de la pared de la célula Grampositiva es peptidoglicano. La pared de la célula gramnegativa, por otro lado, contiene una capa mucho más delgada, únicamente de peptidoglicano y está rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolípidos, lipopolisacáridos, y lipoproteínas. Sólo 10% - 20% de la pared de la célula gramnegativa es peptidoglicano. U N I V E R S I D A D D E 29 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PRÁCTICA: OBJETIVOS: Realizar la metodología de la tinción de Gram. Material Violeta de genciana Lugol Alcohol acetona Safranina Mechero Aza Portaobjetos Microscopio PROCEDIMIENTO - Realizar el frotis en el portaobjetos - Colocar violeta de genciana 1 min. - Lavar con agua - Agregar lugol dejar 1min. - Lavar con agua - Decolorar con alcohol acetona segundos - Lavar con agua - Agregar safranina ó fucsina diluida - Lavar con agua, secar y observar al microscopio con 100X RESULTADOS CONCLUSIONES EVALUACIÓN 1.- ¿Qué colorantes se utiliza en la tinción de Gram? 2.- ¿A qué caracteristicas se debe la coloracion de las bacterias? 3.- ¿Porqué es esencial que el proceso de decoloración sea en el tiempo preciso? 4.- ¿Cuáles son los tipos de morfología bacteriana que se observan con la tinción de Gram? U N I V E R S I D A D D E 30 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 5.- ¿En la tinción de Gram se utiliza safranina ó fucsina diluida? 6.- ¿Cuál es el fundamento de la tinción de Gram? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008 (Signatura topográfica 616.01 B79) - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 31 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA GIP # 5 UNIDAD III :Tema 8 Tuberculosis TITULO : Tinción De Ziehl Neelsen FECHA DE ENTREGA: Quinta semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÒN: Sexta semana de clases FUNTAMENTACIÓN TEÓRICA: La tinción de Ziehl-Neelsen (BAAR) es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, aplicada a la observación de bacterias ácido alcohol resistentes como ser el Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium leprae. Se basa en que las paredes celulares de las bacterias contienen ácidos grasos que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan bacilos ácido-alcohol resistentes o BAAR. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana. Consiste en la utilización de dos colorantes uno la fucsina fenicada que se colorea de rojo al calentarla y luego el otro colorante el azul de metileno como contraste en fondo azul. Al observar la preparación al microscopio óptico con objetivo de inmersión los microorganismos ácido alcohol resistentes (Micobacterias) aparecen teñidas de rojo mientras que el resto de bacterias presentes en la muestra aparecen teñidas de azul. U N I V E R S I D A D D E 32 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PRÁCTICA. Objetivo: Realizar la técnica con la finalidad de observar bacilos ácidos alcohol resistentes Material Muestra (esputo) Fucsina fenicada concentrada Alcohol ácido Azul de metileno Microscopio Mechero Aza Porta objetos Baja lengua de madera Aceite de inmersión MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS 1.- Realizar el frotis de la muestra con ayuda de un palito sobre el portaobjetos. 2.- Colocar la fucsina fenicada. 3.- Calentar hasta emitir vapores durante 5 minutos 4.- Lavar con agua corriente a baja presión 5.- Decolorar con alcohol ácido durante 1 a 3 min. 6.- Lavar con agua corriente a baja presión. 7.- Agregar el colorante de contraste azul de metileno durante 1 a 5 min.. 8.- Lavar con agua. Secar… observar con inmersión 100x 9.- Buscar los bacilos alcohol ácido resistentes de color rojo en fondo azul. RESULTADO El resultado se informa de la siguiente manera: Negativo: no se observan BAAR en 100 campos observados. Positivo +: se observan menos de un bacilo por campo en promedio en 100 campos observados. Positivo ++: se observan de 1 a 10 bacilos por campo en promedio en 50 campos observados. Positivo +++: Se observan más de 10 bacilos por campo en promedio en 20 campos observados. CONCLUSIONES Baciloscopía positiva………………………………………………… Baciloscopía negativa……………………………………………….. EVALUACIÓN 1.- ¿Cuál es el fundamento de la tinción de Ziehl Neelsen? 2.- ¿Cuál es la muestra adecuada para realizar la tincion de Ziehl Neelsen ? 3.- ¿Qué importancia tiene el calentamiento de la Fucsina? U N I V E R S I D A D D E 33 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 4.- ¿Cuáles son los dos métodos para realizar la tècnica de Ziehl Neelsen? 5.- ¿Cómo se informa una Baciloscopía? 6.- ¿Que colorantes se utilizan en la tinción de Ziehl -Neelsen? BIBLIOGRAFÍA BÁSICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008 (Signatura topográfica 616.01 B79) - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 34 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA – GIP’ #6 UNIDAD III :Tema 5 TITULO: Identificación del género Staphylococcus FECHA DE ENTREGA: Sexta semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN : Séptima semana de clases FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA Los Staphylococcus aureus son bacterias que se encuentran en la piel y fosas nasales de las personas sanas, causan una gran variedad de infecciones, desde infecciones menores de la piel (forúnculos, ampollas, y abscesos cutáneos hasta enfermedades que pueden poner en peligro la vida como Neumonía, Meningitis, Endocarditis, Síndrome del shok tóxico (SST) y Sepsis. Es un coco que crece agrupado en racimos (de ahí su raíz "Staphylo"), que responde positivamente a la tinción de Gram, es aerobio y anaerobio facultativo por lo que puede crecer tanto en una atmósfera con oxígeno y también sin el mismo, no presenta movilidad ni forma cápsula. Es capaz de crecer hasta con un 10 % de sal común. Por esto puede crecer en el agua del mar. Produce la fermentación láctica. Es catalasa positivo y coagulasa positivo. PRÁCTICA OBJETIVOS Realizar pruebas de identificación para Staphylococcus MATERIAL Medios de cultivo con desarrollo de bacterias (Agar sangre) Colorantes para tincion de Gram Portaobjetos Mechero y aza bacteriologica Microscopio Manitol Sal agar Plasma humano Tubos de hemólisis Novobiocina H2O2 MÉTODO Y PROCEDIMIENTO U N I V E R S I D A D D E 35 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 1.- Observación de hemólisis en el agar sangre 2.- Observación de colonias blanquecinas, grandes cremosas 3.- Observación en el microscopio de cocos grampositivos agrupados por la tinción de Gram. 4.- Prueba de la catalasa positiva (unión del H2O2+ la enzima coagula del estafilococo) 5.- Prueba de la Coagulasa En un tubo de hemólisis con 0,5 ml de plasma colocar una colonia de estafilococo Incubar a 35 ºC durante 4 - 24 Hrs. observar la formación del coagulo. 6.- Prueba del Manitol Sal agar. Sembrar una colonia en el MSA incubar a 35 ºC 24 Hrs.Observar el desarrollo y desdoblamiento del manitol (viraje de rojo a amarillo) 7.-Prueba de la Novobiocina Realizar una suspensión de bacterias sospechosas de estafilococo sembrar en el medio de Müeller Hinton agar colocar el disco de novobiocina incubar a 35 ºC 24 Hrs. Observar si existe halo de inhibición alrededor de la novobiocina CONCLUSIONES Interpretar los resultados de las pruebas S. aureus: Catalasa positiva, MSA positivo coagulasa positiva S. epidermidis: Catalasa positiva MSA con desarrollo sin desdoblar el manitol Coagulasa negativa, novobiocina sensible S. saprophyticus : Catalasa (+) MSA(-) coagulasa(-) novobiocina (R) EVALUACIÒN 1.-¿Qué aspecto tienen las colonias de los Staphylococcus? 2.-¿Qué pruebas son positivas en el S. aureus? 3.- ¿Qué pruebas son positivas para el S. epidermidis? 4.- ¿Para qué sirve la prueba de la novobiocina? 5.- ¿En qué medios de cultivo desarrolla el género Staphylococcus? 6 ¿Que pruebas utiliza para diferenciar al género Staphylococcus del género Streptococcus? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008(Signatura topográfica 616.01 B79) - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 36 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 7 UNIDAD III :Tema 5 TITULO: Identificación del género Streptococcus FECHA DE ENTREGA: Séptima semana de clases PERÍODO DE EVALUACION: Octava semana de clases FUNDAMENTACION TEÓRICA El género Streptococcus es un grupo muy grande de bacterias la mayoría de ellos son saprófitos. Sin embargo es importante la identificación de los estreptococos patógenos como ser el S. pyógenes del grupo A, S. pneumoniae y el S. agalactiae del grupo B,Enterococcus faecalis para ello se toma en cuenta las sensibilidades a la bacitracina.y la optoquina , y la bilis esculina, también se debe tomar en cuenta la característica de las colonias y la producción de hemólisis PRÁCTICA OBJETIVOS Reconocer a los diferentes Streptococcus a través de sus reacciones MATERIAL Cajas petri con cultivo de Streptococcus Colorantes de Gram. Discos de bacitracina Discos de optoquina Medio con bilis esculina Portaobjetos Cajas petri con agar sangre Microscopio Mechero y aza bacteriológica Pinza Estufa de cultivo MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS 1.-Tinción de Gram. Realizar un frotis de las colonias sospechosas, teñir con los colorantes de Gram. Observar la morfología característica de cocos grampositivos 2.- Observación de tipo de hemólisis al rededor de las colonias U N I V E R S I D A D D E 37 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 3.- Prueba de la bacitracina y optoquina Realizar una suspensión de bacterias. Sembrar en una caja petri con agar sangre en forma masiva, colocar los discos de bacitracina y optoquina, incubar a 35 ºC 24 Hrs. Observar al día siguiente un halo de inhibición alrededor de los discos. 4.-Inocular en el medio de bilis esculina colonias de Enterococcus faecalis incubar por 24 Hrs. a 35ºC .al día siguiente observar el cambio de color del medio RESULTADOS Bacitracina: (S) sensible: Streptococcus del grupo A Optoquina: (S) sensible: Streptococcus pneumoniae Bacitracina y Optoquina (R): Streptococcus Spp. Bilis esculina (+) Enterococcus faecalis CONCLUSIONES Informar la especie de Streptococcus………………………………. EVALUACIÓN 1.- ¿Qué aspecto presentan las colonias de los Streptococcus? 2.- ¿Qué tipo de hemólisis se pueden observar en el agar sangre? 3.- ¿Qué tipo de hemólisis presenta el Streptococcus pyógenes? 4.- ¿Qué morfología tiene el Streptococcus pneumoniae? 5.- ¿Para qué utiliza la bacitracina y la optoquina? 6 ¿Que medios de cultivo diferenciales se utilizan para identificación del género Enterococcus? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008(Signatura topográfica 616.01 B79) - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 38 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 8 UNIDAD III :Tema 6 TITULO: Identificación de Haemophilus influenzae FECHA DE ENTREGA: Octava semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN : Novena semana de clases FUNDAMENTACION TEORÍA Los Haemophilus son bacterias pequeñas morfológicamente son Cocobacilos gramnegativos existen varias especies, la más importante por su patogenicidad es el Haemophilus influenzae causante de la influenza. Esta bacteria es considerada de crecimiento lento y exigente, crece en agar chocolate con la adición de factores de crecimiento como son la Hemina y la coenzima A llamados también Factor X y V. PRÁCTICA OBJETIVOS Reconocer a los Haemophilus e identificar utilizando los factores X y V. MATERIAL Medio de cultivo (agar chocolate) con desarrollo de Haemophilus Discos de papel con factores X y V Mechero Tubos de ensayo Pinza Medio de Müller Hinton ó HTM MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS 1.- Reconocer macroscópicamente las colonias de haemóphilus 2.- Realizar una siembra masiva en agar Mueller Hinton 3.- Colocar los discos con los factores X y V 4.- Incubar a 35 ºC en la estufa de cultivo durante 24 hrs. 5.- Observar el desarrollo de las bacterias alrededor de los discos con los factores CONCLUSIONES Haemophilus influenzae Desarrollo en presencia de factores X y V Otros Haemophilus: Desarrollo al rededor del factor X EVALUACIÓN U N I V E R S I D A D D E 39 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 1.- ¿Qué morfología y tinción presentan los Haemophilus? 2.- ¿Qué es el factor X? 3.- ¿Qué representa el factor V? 4.- ¿En qué medio de cultivo desarrolla el Haemophilus? 5.- ¿Qué aspecto tienen las colonias del género Haemophilus? 6 ¿En que tiempo desarrolla el género Haemophilus? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008 (Signatura topográfica 616.01 B79) - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 40 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA GIP # 9 UNIDAD III :Tema 6 TITULO: Identificación del género Neisseria FECHA DE ENTREGA: Novena semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN : Décima semana de clases FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA: La Neisseria gonorrhoeae llamada también gonococo se la reconoce por su típica morfología de ser diplococo gramnegativo. intr. o extra celular se la puede encontrar en las secreciones uretrales y endocervicales o conjuntivitis purulenta del recién nacido en pacientes con diagnóstico presuntivo de gonorrea. Para la identificación se realiza la tinción de Gram. Y el desarrollo en chocolate o Thayer Martín. PRÁCTICA Objetivos .Observar la morfología del diplococo gramnegativo. Neisseria gonorrhoeae en diferentes muestras Material Microscopio Portaobjetos Colorantes para la tinción de Gram Mechero Aza Muestra de secreción uretral o endocervical Agar Chocolate Oxidasa Estufa de cultivo PROCEDIMIENTO. 1.- Recolectar la secreción uretral o endocervical 2.- Realizar un frotis en el portaobjetos 3.- Teñir con técnica de Gram 4.- Observar al microscopio 5.- Reconocer a los diplococos gramnegativos 6.- Cultivo en agar chocolate o Thayer Martín CONCLUSIONES EVALUACIÓN U N I V E R S I D A D D E 41 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 1.-¿Qué aspecto tienen las colonias del género Neisseria? 2.- ¿Qué morfología tiene el gonococo? 3.- ¿Cuáles son las pruebas presuntivas del gonococo? 4.- ¿Cuáles son las pruebas confirmativas de la Neisseria gonorrhoeae? 5.- ¿Cuál es el medio utilizado para el desarrollo de Neisseria? 6 ¿Cual es el tratamiento actual para el gonococo? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008(Signatura topográfica 616.01 B79) - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 42 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA GIP 10 UNIDAD IV :Tema 9 Tétanos TITULO: Identificación del género Clostridium FECHA DE ENTREGA: Décima semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN : Décima primera semana de clases FUNDAMENTO TEÓRICO: La identificación del género Clostridium bacilo anaerobio estricto se lo puede realizar a partir de heridas que no cicatrizan en úlceras de pié diabético, o en heridas por objetos corto punzantes, se realiza a partir de un examen directo con la tinción de Gram. Donde se observan los bacilos gram. positivos grandes y desarrollan en medio de anaerobiosis cultivados en agar sangre con telurito. El diagnóstico precoz del Clostridium es de vital importancia para el paciente y el médico. PRÁCTICA Objetivo. Realizar la tinción de Gram. Cultivo en agar sangre con telurito para la identificación del Clostrium. MATERIAL Microscopio Estufa de cultivo Portaobjetos Mechero Aza Cajas petri Medio de cultivo de agar sangre con telurito Colorantes de Gram Aceite de inmersión Muestra, secreción purulenta de heridas MÉTODO Y PROCEDIMIENTO 1.- Obtener la muestra 2.- Realizar el frotis en portaobjetos 3.- Teñir con la técnica de Gram 4.- Realizar la siembre en agar sangre con telurito 5.- Colocar el medio de cultivo en atmósfera para anaerobiosis 6.- Dejar 48 hrs. A 35 ºC 7.- Observar al microcopio la tinción de Gram. 8.- Observar el cultivo el desarrollo de colonias grandes hemolíticas U N I V E R S I D A D D E 43 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 9.- Realizar un Gram a las colonias para observar los bacilos grampositivos . CONCLUSIONES EVALUACIÓN 1.- ¿Qué morfología presentan en el Gram. Los Clostridium? 2.- ¿Cómo diferencia los diferentes Clostridium? 3.- ¿Qué aspecto tiene la colonia del Clostridium? 4.- ¿Cuáles son los requerimientos para el desarrollo de los Clostridium? 5.- ¿Presentan hemólisis los Clostridium? 6 ¿En que tiempo desarrollan los Clostridium? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008 (Signatura topográfica 616.01 B79) - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 44 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA – GIP # 11 UNIDAD IV :Tema 11 TITULO: Identificación del género Bacillus FECHA DE ENTREGA: Décima primera semana de clases PERÍODO DE EVALUACIÓN : décima segunda semana de clases FUNDAMENTACION TEÓRICA El género Bacillus comprende varias especies algunas son patógenas como el Bacillus anthracis y Bacillus cereus y otras especies saprófita, morfológicamente son bacilos grampositivos,forman esporas y son formadoras de toxinas son aeróbis facultativos y crecen en agar sangre .En la práctica del laboratorio se podrán reconocer a través de la tinción de Gram. , el desarrollo de las colonias en el agar sangre característica llamada cabeza de medusa como también la sensibilidad a la Penicilina. PRÁCTICA OBJETIVOS Identificar el género Bacillus a través de su morfología y desarrollo en agar sangre. MATERIAL Muestra con bacillus Agar sangre Disco de Penicilina Coloración de Gram. Mechero y aza bacteriológica Estufa bacteriológica Pinza MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS 1–Tinción de Gram. . Realizar un frotis y realizar la técnica de Gram. 2.-Realizar siembra en agar sangre, incubar a 35ºC 24 Hrs. Observar las colonias con subcrecimiento de la colonia (cabeza de medusa). Observar ausencia de hemólisis. 3.-Sensibilidad a la Penicilina. Realizar un inóculo de bacterias comparable con el tubo O.5 de la escala de Mac Farland sembrar en forma masiva, colocar el disco de Penicilina, incubar a 35ºC 37º 24 Hrs. 4.-Observar al día siguiente la sensibilidad o resistencia a la Penicilina RESULTADOS U N I V E R S I D A D D E 45 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Tenciona de gram : Observar bacilos grampositivos . Desarrollo en agar sangre: Colonias grandes mucoides no hemolíticas de apariencia de cabeza de medusa Sensibilidad a la Penicilina: Bacillus anthracis (S) Sensible, Bacillus cereus (R) Resistente CONCLUSIONES EVALUACIÓN 1.- ¿Qué tipo de hemólisis presenta el género bacillus? 2.- ¿Qué aspecto tiene las colonias del género Bacillus? 3.- ¿En qué medios de cultivo desarrolla el Bacillus Anthracis? 4.- ¿Cuáles son los requerimientos de oxigeno para el desarrollo del género Bacillus? 5.- ¿Que morfología presentan en la tinción de Gram? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008 (Signatura topográfica 616.01 B79) - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 46 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP’s # 12 UNIDAD III :Tema 7 TITULO: Identificación de Enterobacteriaceae FECHA DE ENTREGA: Décima segunda semana de clases PERÍODO DE EVALUACION: Décima cuarta semana de clases FUNDAMENTACION TEÓRICA Las Enterobacteriaceae son bacterias muy parecidas en los medios de cultivo morfológicamente son bacilos gramnegativos. y solo se puede diferenciar una de otra especie a través de los medios diferenciales, o pruebas bioquímicas, con ayuda de una tabla de interpretación de las reacciones químicas PRÁCTICA OBJETIVOS Diferenciar géneros y especies a través de sus propiedades bioquímicas MATERIAL Caja petri con desarrollo de bacterias en Mac Conkey Tubos de ensayo con medios de cultivo diferenciales. TSI, SIM CITRATO. LIA, UREA Estufa de cultivo Aza Mechero ,reactivo de Kovacs ó Erlich Tabla de interpretación de Enterobacteriaceae MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS Elegir una colonia del medio de cultivo Esterilizar el hilo de platino Inocular en los medios de cultivo diferenciales Incubar en la estufa de cultivo a 35ºC durante 24 Hrs.. Hacer la lectura de las reacciones con ayuda de la tabla de identificación CONCLUSIONES Informar el género y especie identificada en la práctica U N I V E R S I D A D D E 47 A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA EVALUACIÓN 1.- ¿Qué fundamento tiene el medio del citrato? 2.- ¿Cuál es el fundamento de la reacción del indol? 3.- ¿Cuál es el fundamento de la reacción de la lisina? 4.- ¿Cuál es el fundamento de la Urea? 5.- ¿Cuál es el fundamento del medio TSI? 6 ¿Cual es el fundamento del medio SIM? BIBLIOGRAFÍA BASICA - Jawest y Melick Microbiología médica ED. El manual Moderno México 2008(Signatura topográfica 616.01 B79) - Bailey Scott: Diagnòstico Microbiógico ED. Panamericana 2010 Bs. As. Argentina. U N I V E R S I D A D D E 48 A Q U I N O B O L I V I A