Paper Title - Centro de Investigaciones en Optica, A.C.

TITULO: Efecto de una dosis de Valerato de Estradiol en el consumo de Alcohol y en
la población de neuronas secretoras de beta-endorfinas en el núcleo arcuato
hipotalámico.
G. Camargo-Hernández, G.1y2, Gómez-Pinedo U.A1 y 3, Juárez, J.2
Centro de Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del estado de Jalisco.
Departamento de Patología. Laboratorio de Microscopía Óptica de Alta resolución e
Inmunohistoquímica. Av. Normalistas 800, Colinas de la Normal C.P. 44270, Guadalajara,
Jalisco.
2
Instituto de Neurociencias de la Universidad de Guadalajara.
3
OPD Antiguo Hospital Civil de Guadalajara.
e-mail: [email protected]
1
RESUMEN
El síndrome de adicción al alcohol se encuentra relacionado con niveles bajos de β-endorfinas (β-end). La
administración de Valerato de Estradiol (VE) se encuentra asociada con cambios patológicos en el núcleo
arcuato del hipotálamo, observándose reducción en concentraciones de β-end 60 días después de su
administración. Considerando lo anterior, estudiamos a nivel de Sistema Nervioso Central el efecto del VE
sobre el consumo de alcohol. Se cuantifico el número de neuronas inmunoreactivas a β-end y concentraciones
de β-end. Se observó incremento en el consumo de alcohol, este efecto pudiera deberse a una reducción del
número de neuronas β-end, inducida por VE.
1. INTRODUCCIÓN
En las dos últimas décadas parte del interés respecto a la adicción al alcohol, se ha centrado en entender los
problemas biomédicos, psicológicos y socioculturales asociados con el consumo excesivo de alcohol en el ser
humano; así como en conocer los mecanismos neuroquímicos que median el reforzamiento de esta conducta.
La etiología de la adicción al alcohol hasta este momento es desconocida. Se atribuye su origen a factores
causales múltiples, como son factores metabólicos, bioquímicos, genéticos y socioculturales. Lo más probable
es que el origen etiológico, corresponda a la suma de todos estos factores. (Gianoulakis, 2004; Marinelli y
col., 2003; Xing y col., 2002; Chen y col., 1989; O’Brien y Volpicelli 1996; Gianoulakis, 1996). Entre los
sistemas de neurotransmisión propuestos como importantes en el control de la conducta de búsqueda en la
ingesta de alcohol, se encuentra el sistema opioide (Reid y col., 2002). Investigaciones experimentales, tanto
en humanos como en animales, sugieren que el sistema opioide endógeno posee un papel importante en el
control del consumo de alcohol, así como una posible contribución en la predisposición genética de la
dependencia al mismo. (Reid y col., 2003; Xing y col., 2002; Gianoulakis 2001; Gianoulakis 1993). El
alcohol es capaz de estimular la liberación de ciertos péptidos opioides, que interactúan con centros cerebrales
asociados con recompensa y reforzamiento positivo (Koob 1996). El Incremento en la actividad cerebral de
endorfinas (encefalinas y β-end) en el sistema opioide, en condiciones básales o en respuesta a la exposición
de etanol poseen una participación importante en lo que se refiere a iniciar y mantener consumos altos de
etanol (Gianoulakis 2001).
DISEÑO EXPERIMENTAL
22 Ratas Wistar Hembras con ovarios intactos de 200 a 220 gr de Peso
Corporal . (Mantenidas en condiciones controladas de bioterio).
Administración “ad libitum” de etanol USP al 10% a las 22 ratas: 70 días
de edad.
(1 semana de inducción y 2 semanas de línea base)
División de los animales en 2 grupos
experimentales
Valerato de Estradiol
(dosis única I.M. 2 mg)
n=11
Control
(dosis única de aceite)
n=11
Administración “ad libitum” de etanol USP al 10% a las 22
ratas
por 9 semanas (a partir de los 90 días de edad)
División de los sujetos en 4 grupos experimentales
VE +Alcohol
continuo
VE – 5 días privados
de Alcohol
CTRL+ Alcohol
continuo
CTRL – 5 días
privados de Alcohol
Sacrificio mediante perfusion intravascular (Cloruro de sodio
fisiológico, heparina 1000 U/I por litro y 0.1% de Procaína).
Estudio inmunoenzimático (EIA) para
cuantificar niveles de -endorfina en
núcleo arcuato hipotalámico
(bregma –1.80 mm a –4.16, interaural
7.20 mm a 4.84 mm )
Inmunohistoquímica para:
-endorfina, LHRH y TH en
núcleo arcuato hipotalámico
Análisis estadístico
ANDEVA
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PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA: El conocimiento de que una sola inyección de VE (2 mg) a
ratas hembras con ovarios intactos produce citotoxicidad en el núcleo arcuato del hipotálamo, se traduce en un
decremento en niveles de β-end, (Brawer y col., 1978), esto nos proporcionará un modelo para el estudio de la
participación de las β-end en el síndrome de adicción al alcohol.
HIPÓTESIS: Una sola dosis de VE afectará el consumo de alcohol en hembras con ovarios intactos y
niveles de β-end en el núcleo arcuato del hipotálamo.
OBJETIVO: Analizar las variaciones en los valores del consumo de alcohol y en los niveles de β-end, tras
una dosis única de valerato de estradiol en ratas con ovarios intactos.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN:
El número de neuronas inmunoreactivas β-endorfinérgicas en sujetos VE fue significativamente menor vs
gpo-Control. En concentraciones de β-end no se observó diferencias significativas, sin embargo encontramos
tendencia al decremento en el grupo tratado con VE. En la evaluación conductual de ingesta de etanol en ratas
tratadas con VE se observaron cambios en el consumo de alcohol asociados, con el contenido de β-end a nivel
del núcleo arcuato del hipotálamo. Los sujetos tratados con VE, mostraron un incremento del consumo del
alcohol en la cuarta y quinta semana postratamiento comparado con los sujetos tratados con vehículo. En
estudios recientes se han analizado los efectos neurofisiológicos del VE sobre el consumo voluntario de
alcohol en ratas hembras, en estos estudios se identifican cambios en el consumo del alcohol y se observan
modificaciones en el contenido de β-end a nivel de hipotálamo (Marinelli y col., 2003; Reid y col., 2003; Reid
y col., 2002). Conclusiones: El VE incrementa el consumo de alcohol a partir del mes subsecuente a su
administración en ratas con ovarios intactos, este efecto pudiera deberse a una reducción del número de
neuronas β-end inducida por VE.
Gráfico 1
Consumo de etanol en gr/kg de peso corporal
alcohol consumido (gr/kg)
7
VE
*
6
*
CTRL
5
4
3
2
1
0
LB
1
2
3
4
5
VE
6
7
8
9
10
Fig. 1. En el eje de las abscisas se observa los días postratamiento con VE y en el eje de las ordenadas alcohol
consumido en gr/kg de peso corporal. El gráfico muestra el consumo de alcohol en gr/kg de peso. Grupos
valerato de estradiol (VE) vs Control (Ctrl). En los periodos de línea base (LB) y tratamiento con VE. Los datos
están agrupados en 3 días por semana. Cada barra representa una semana. Semana 4 * P=0.05 y semana 5 *
P=0.05. Se muestra la media + el error estándar. ANOVA seguido de una prueba post-hoc de Tukey.
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Gráfico 2
Análisis inmunohistoquímico
de β-end
No de Neuronas β-end, n arc
40
30
*
20
*
10
0
TxEthoCtrl
TxP5/dCtrl TxP5/d VE
TxEthoVE
TRATAMIENTO
La gráfica muestra el número de neuronas β-end del n. Arc
(Bregma -1.80 mm a –4.16, Interaural 7.20 mm a 4.84 mm) en los
diferentes tratamientos. Tratamiento con VE * P= 0.05, la gráfica
muestra la media + la desviación estandar.
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BIBLIOGRAFÍA (Times New Roman, bold, 10 pt. justificado a la izquierda)
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