UNIVERSIDAD DE CONCEPCION Facultad de Ciencias Veterinarias Comité de Bioética CB-01-2015 27 de enero de 2015 Protocolo para Certificado de Bioética de Proyectos de Investigación ● Título del proyecto Prevalencia de Campylobacter en aves de la región del Bio-Bío ● Nombre de investigadores principales y otras personas autorizadas Daniel González Acuña, Håkan Johansson, PatrikHellström, Jorge Hernandez, , Daniel Bengtsson, JonasBonnedhal, BjörnOlsen y JonasWaldenström. ● Fecha propuesta de inicio y de término del estudio. 12 de enero de 2015 al 15 de marzo de 2015. ● Objetivos del proyecto y su metodología con base a su relevancia para la salud humana y animal, el avance del conocimiento y el bien de la sociedad. Estudios de agentes infecciosos en animales silvestres y la ecología de las enfermedades es importante para evaluar a largo plazo la viabilidad de las poblaciones animales. Las bacterias del género Campylobacter son responsables de gran parte de las gastroenteritis de origen alimentario y representan un alto impacto en la salud humana (García et al., 2009). Al parecer las aves silvestres jugarían un rol importante en la epidemiología de Campylobacter, debido a que ellas serían las diseminadoras de ésta bacteria a otras especies de aves como aves de corral o incluso directamente a los seres humanos. Sin embargo, también se ha logrado aislar esta bacteria en muestras de tierra, agua, arena, leche, verduras, mariscos y heces de un gran número de especies domésticas y silvestres, incluidas aves silvestres (Wesley et al., 2000). Desafortunadamente son pocos los estudios que han estimado la prevalencia de Campylobacter en aves silvestres y casi nulos en Chile. Debido a esto, los objetivos de la presente investigación serán identificar diferentes especies y genotipos de Campylobacter presentes en aves de la región del Biobío, estableciendo la prevalencia de infección según localidad de muestreo y especie de ave evaluada. Además, se evaluará el grado de patogenicidad de Campylobacter detectados y se creará un banco de bacterias para futuros estudios. Las muestras se UNIVERSIDAD DE CONCEPCION Facultad de Ciencias Veterinarias Comité de Bioética identificarán y se evaluará su grado de patogenicidad en el laboratorio de Microbiología de la Universidad de Concepción, campus Chillán. ● Descripción detallada de los procedimientos utilizados en los animales y su clasificación según nivel de invasividad. Las aves serán capturadas mediante redes niebla, las cuales serán extraídas de ésta con delicadeza para evitar lesiones. Una vez extraídas de la red niebla se tomarán cuidadosamente con el cuello extendido y asegurado con dos dedos (índice y medio) con la otra mano se extienden las extremidades inferiores. Mediante esta técnica se asegura el flujo continuo de aire y se evitan lesiones en las alas. Otra persona procede a realizar la medición morfométrica (largo de pico, de cabeza, tarso, ala) y la toma de muestras fecales con tórulas estériles de algodón, la que será introducida dentro de la cloaca del ave. Todo el proceso de manipulación y toma de muestras será realizado por Médicos Veterinarios experimentados en manejo de aves. En primera instancia será Daniel González Acuña, los otros investigadores son destacados científicos con un amplio currículum en manejo de aves. Según las categorías de invasividad en animales de experimentación, el grado de invasividad de la toma de muestras es B, es decir, experimentos que causan poco o ningún estrés en los individuos muestreados. ● Justificación ética en el uso animal (Reemplazar) Debido a que Campylobacter puede ser aislada incluso de la tierra, es necesario obtener las muestra fecal directamente desde la cloaca de las aves, descartando contaminación cruzada de las muestras. ● Las especies y número de animales a ser utilizados (Reducir). Para dar cumplimiento con dichos objetivos se recolectarán muestras fecales de aves Passeriformes en espacios urbanos y periurbanos del centro-sur de Chile. El tamaño de muestra se determinó mediante la siguiente fórmula: n (95%) = 4*p*q/ L2 = 4*50*50/ 10 = 1000 aves Dónde: n = Tamaño de muestra p = proporción estimada a priori de aves positivas a Campylobacter q = 1-p UNIVERSIDAD DE CONCEPCION Facultad de Ciencias Veterinarias Comité de Bioética L2 = error admisible ● Técnicas de Refinamiento a considerar: sedación, anestesia y analgesia, incluyendo las dosis y los métodos de uso; técnicas de enriquecimiento ambiental, etc. (Refinar). El tiempo de manipulación por aves no supera los 2 minutos, por lo que se garantiza su pronta liberación y poco tiempo de exposición frente a los factores estresantes. Tampoco este corto periodo de tiempo de manipulación justifica el uso de anestésicos, que incluso pueden ser más riesgosos para el ave por una sobredosis del fármaco. ● Adopción de normas de bioseguridad según especificaciones de CONICYT Si bien Campylobacter no está dentro de las clasificaciones de riesgo entregadas por CONICYT, durante todo el proceso de manipulación de las aves se contará con el uso de guantes, trajes aislantes y mascarillas, para evitar transmisión de enfermedades. Además se contará con alcohol gel para limpiar las manos y toallas con cloro para desinfectar contantemente entre una toma de muestra y otra. ● Normas de eliminación de muestras y residuos biológicos y químicos. El material de desecho resultante será eliminado mediante incineración en las dependencias de la Universidad de Concepción, Campus Chillán, evitando de esta forma la dispersión de agentes patógenos. ● Protocolo de supervisión y criterio de punto final. No aplica ● Método de eutanasia, acorde a la especie. No aplica debido a que una vez procesadas las aves y obtenido el material de estudio, serán liberadas en el mismo lugar de captura. ● Referencias bibliográficas. García, P; Valenzuela, N; Rodríguez, M; León, E; Fernández, H. 2009. Susceptibilidad antimicrobiana de Campylobacterjejuni aislado de coprocultivos en Santiago de Chile. Rev. Chil. Infect. 26,(6): 511-514. UNIVERSIDAD DE CONCEPCION Facultad de Ciencias Veterinarias Comité de Bioética Wesly, IV; Wells, SJ; Harmon, KM; Green, A; Schroeder-Tucker, L; Glover, M; Siddique, I. 2000.Fecal Shedding of Campylobacter and Arcobacter spp. in dairy cattle.ApplEnviron. Microbiol. 66, (5): 19942000. Categories of Invasiveness in Animal Experiments. Canadian Council on Animal Care Conseil canadien de protection des animal. 1991. En línea: http://www.ccac.ca/en_/standards/policies/policycategories_of_invasiveness Revisado el 26-01-2015. Mario Briones Luengo Presidente CC Decano de la Facultad Archivo