Diagnóstico tumores

Diagnóstico tumores
Definición
Tipos de muestras


Biopsias, citologías
Biopsias peroperatorias
Criterios diagnósticos



Patológicos. Gradación y estadío tumoral
Inmunohistoquímicos
Moleculares
Dianas terapeúticas
Diagnóstico patológico patológico
Diagnóstico
Diagnóstico patológico
 Es un informe médico basado en los datos
histopatológicos, fenotípicos, moleculares y
clínicos. No es un análisis.
 Correlación clinico-patologica. Edad,
antecedentes y datos clinico-radiológicos,
localización, tipo de resección.
 El estudio de marcadores y dianas
terapeúticas es la clave de los nuevos
tratamientos antitumorales
Diagnóstico tuBiopsia:
mores


Simples-diagnósticas (trucut, punch,
endoscópicas, RTU, piel)
quirúrgicas: tipo incisional o excisional
-piezas pequeñas (ganglios, vesículas,
apéndices..)
-piezas grandes (mama, colon,
estómago,..) con/sin ganglios
Skin samples
3 Ømmpunch biopsy
Tumor samples
18G20mmcore biopsy
Citologia: mètodes d’obtenció



Citologia exfoliativa: col·lecció de cèl·lules
descamades d’un epiteli de forma espontània o
induïda: esput, raspallat bronquial,
broncoaspirat
Citologia de líquids serosos: Ex. líquid pleural.
Punció i extracció de líquid. Normalment cal
centrifugar la mostra
Citologia per punció aspiració (PAAF)
Citologia

Extensió de cèl·lules en un portaobjectes

Tinció de rutina Papanicolaou o Giemsa

Molt bona relació cost-benefici
Citologia: Diagnóstic

Citologia cèrvico-vaginal:

Lesió escamosa intraepitelial d’alt grau
(Neoplàsia escamosa intraepitelial de
grau 3, Carcinoma in situ)
Citologia: Diagnóstic

Tumor mamari (citologia)

Carcinoma
Biòpsies peroperatòries

Durant la intervenció quirúrgica amb el
pacient anestesiat

Justificació: el diagnòstic anatomo-patològic
suposa una modificació en l’actitud quirúrgica

Tumoració (B vs M)

Marges de ressecció

Ganglis
Biopsias intra (per)operatorias
Ganglio centinela
-no siempre se hace un diagnóstico
concluyente
.se puede diferir a parafina
.se puede solicitar más
muestra
Criterios diagnóstico tumores
1. Criterios histopatológicos. Estadio de los
tumores.
2. Criterios inmunohistoquímicos
3. Datos moleculares.Marcadores tumorales
4.
Otros : a) Citometría de flujo:
procesos linfoproliferativos
b) microscopia electrónica (t. Neuroendocrinos,
musculares,…)
Grànuls de neurosecreció
Carcinoma neuroendocrí
Datos Histoquímicos
Tècnicas clásicas basadas en substancias
colorantes que tiñen de forma más o menos
específica diversas estructuras

PAS: glucogeno, substáncias mucoides, hongos

Gram: bacterias

Ziehl-Nielsen: micobacterias (tuberculosis)

etc…
Inmunohistoquímica
 Permite estudiar fenotipo tumores.
-antígenos tumorales específicos

Antígenos oncofetales(CEA, alfafetoproteina), hormonas,
enzimas (fosfatasa ácida prostática), glucoproteinas
(Ca125, Ca 19.9,...), queratinas,..
-agentes etiológicos: virus,..
-tumores indiferenciados: perfilar tipo tumor
-metástasis: perfilar tumor de origen
 Permite estudiar factores pronósticos
 Permite estudiar dianas terapeúticas
Diagnóstico definitivo y confirmatorio en biopias-citologías
LCA: LYMPHOMA
PS100
HMB45
CK: CARCINOMA
A103
VIM: SARCOMA
MELANOMA
MIB-1 (proliferació)
Carcinoma de creixement
ràpid
MIB-1 (proliferació)
Carcinoma de creixement
lent
APLICACIONES DE LA HIBRIDACION IN
SITU
 1.Estudio de alteraciones oncogénicas.
Amplificación y translocaciones de
oncogenes: n-myc en neuroblastomas, neu
en cáncer de mama, Bcl-2 en linfomas
foliculares, abl-bcr en leucemias mieloides
crónicas,...
 2.Neoplasias endocrinas. Detectan el mARN
de
diversas hormonas.
 3.Detectan
virus
o
genomas
citomegalovirus, virus de Epstein Barr, herpes,
papilpomavirus, JC virus y otros.
virales:
HTLV-I,
JCV(M.E.)
JCV(Hibridacióninsitu)
Specificity
NEG
Desmoplastic small
round cell tumor
Alveolar rhabdom.
Ewing tumor
de Alava et al. Am J Pathol 1995
EWS/
WT1
PAX3/ EWS/
FKHR FLI-1Actin
M
Diagnósticos moleculares
 Tejido congelado (mejor)
 Extracción DNA, RNA
 PCR, rtPCR (real time PCR)
 PCR-SSCP,..
 Secuenciación
 Southern-blot, Northern-blot
 Extracción de proteinas
 western-blot
 Arrays cDNA, proteinas
Gradación y estadiaje de los tumores
Carcinomas
1.
Histopatológica
Grado 1: bien diferenciado. Bajo grado
Grado 2:moderadamente diferenciado. Bajo grado
Grado 3: poco diferenciado. Alto grado
Grado 4:indiferenciado. Alto grado
2.
TNM
T: tamaño del tumor. T1, T2, T3, T4
N: ganglios linfáticos. N0, N1,..
M: metástasis. M0, M1,..
Gradación y estadiaje de los tumores
Linfomas
I: un grupo ganglionar a un lado
diafragma
II: 2 ó mas grupos a un lado diafr.
III: grupos afectos a ambos lados diafr.
IV: infiltración órganos sólidos (m.o....)
Alteraciones moleculares y Diagnóstico
 Adca
mama (cERBB2: 25% )
 Linfomas
y leucemias: reordenamientos,
translocaciones..
 rabdomisarcomas,
sarcomas sinovial,
liposarcomas, T. Ewing,….translocaciones
 Tumores
y ckit)
del estroma gastrointestinal (GISTs
Alteraciones moleculares y Diagnóstico
 Adca
ductal páncreas (K-ras)
 Adca
colon (APC,B-catenina, KRAS,
BRAF,IM,..)
 Tumores
endocrinos ( tiroides: ret, trk,...)
 Tumores
renales (VHL, met,TFE3,..)
 Virus:
HPV, EBV, Herpes 8, hepatitis,..
Alteraciones moleculares y tumores
Pronóstico y tratamiento
 Actividad proliferativa: mitosis, Ki67
 Receptores hormonales
 P53
 Neu (c-erbB2)
 Marcadores representativos de resistencia
apoptosis, señalización celular, aneuploidía,
capacidad infiltrativa..
RE
Ki 67
P-53
HE
E-cadh
C erb B2
Dianas terapeúticas: realidades
A) Receptores hormonales: estrógenos y
progesterona en mama
B) CD20: procesos linfoproliferativos B
C) Quinasas celulares
Neu/c-erbB2: mama (20%)
C-kit: tumores GIST
EGF-r: pulmón (5%), colon
Bcr-abl: leucemia mieloide crónica
BRAF y melanoma
ALK y pulmon
The Biology of Cancer (© Garland Science 2007)
K-Ras: mutated
inactive
GDP
EGFR
RAS
RAF
PI3K
Akt
MEK
MAPK
Cell
Cell
Survival Proliferation
active
*
GTP
K-Ras: mutated
inactive
GDP
EGFR
RAS
RAF
PI3K
Akt
MEK
MAPK
Cell
Cell
Survival Proliferation
active
*
GTP
Colorectal cancer patients with K-ras mutations did
not benefit from cetuximab
Karapetis et al. NEJM 2008
3. Integrate AP diagnosis and molecular data including both
diagnostic and therapeutic targets and predictive factors
»To FOLLOW ONCOGUIDES
● Biomarkers
● algorithms and applications
.
● Techniques: IHC, PCR, FISH…
● Quality control
Menos de 100
cigarrillos en su vida
CPNM
Estadio IV
No fumador
EGFR Mutado
EGFR Wild-Type
Considerar test
EML4-ALK
Fumador o ex-fumador
No evaluable
Carcinoma
No epidermoide
Considerar repetir
biopsia
Carcinoma
epidermoide
No test
molecular
EGFR mutado
EGFR Wild-Type
Considerar test
EML4-ALK
Dianas terapéuticas
Perspectivas
 Más de 350 nuevos inhibidores
 Más de 24 ensayos clínicos fase III







EGFr: Ab, inhibidores
Ras
mTOR
Factores angiogénicos: VEGFr, bFGF
Metaloproteinasas: MMP2, MMP9
CDKs, ALK, TRK,...
Inhibidores ciclooxigenasa 2.
Diagnóstico patológico patológico
Diagnóstico
Diagnóstico patológico
 Es un informe médico basado en los datos
histopatológicos, fenotípicos, moleculares y
clínicos. No es un análisis.
 Correlación clinico-patologica. Edad,
antecedentes y datos clinico-radiológicos,
localización, tipo de resección.
 El estudio de marcadores y dianas
terapeúticas es la clave de los nuevos
tratamientos antitumorales