IX Conferencia Española de Biometría La Coruña, 28-30 de mayo de 2003 Aplicación de técnicas biométricas al estudio taxonómico de Anthoxanthum amarum Brot Pimentel Pereira, M. Departamento de Bioloxía Bioloxía Vexetal e Ecoloxía Universidade da Coruña Sahuquillo Balbuena, E. Departamento de Bioloxía Bioloxía Vexetal e Ecoloxía Universidade da Coruña Animal, Animal, Abstract The genus Anthoxanthum L. includes 15 species, one of which (Anthoxanthum amarum Brot.) is an endemism of the North of the Iberian Peninsula. The aim of this study is to establish the morphological relationships among 6 populations of A. amarum in order to determine if any infraspecific category should be defined in this taxon. 1. Introducción El género Anthoxanthum (Poaceae: Pooideae) está representado en la Península Ibérica por cuatro especies, siendo una de ellas, A. amarum, endémica del cuadrante septentrional. A pesar del gran número de estudios realizados en este género, A. amarum continúa siendo una especie poco conocida que presenta una cierta diversidad morfológica. El objetivo de este estudio es determinar, mediante métodos biométricos usados en Taxonomía Numérica (Sneath & Sokal, 1973; Rohlf, 1993), si la variabilidad interpoblacional observada apoyaría la descripción de nuevos taxa. 2. Material y métodos Para el presente estudio se seleccionaron 6 poblaciones de A. amarum en Galicia. En cada población se recogieron al azar 40 individuos, de los que 35 se utilizaron para obtener datos macroscópicos y 5 para microanatómicos de la epidermis foliar. Se analizaron 19 caracteres de interés (9 cualitativos y 10 cuantitativos). La toma de 1 2 Aplicación de técnicas biométricas al estudio taxonómico de Anthoxanthum amarum Brot medidas se estandarizó según los criterios de Devesa (1992). Los datos fueron almacenados en distintas bases elaboradas en Excel 97, y los análisis estadísticos se realizaron con el programa SPSS 11.0. El tratamiento estadístico de los datos cuantitativos se inició con el análisis exploratorio, que consistió en el cálculo del coeficiente de variación, del grado de asimetría y en la obtención de los gráficos de dispersión. Además se realizaron un Análisis de la Varianza (ANOVA) y un Análisis de Componentes Principales (ACP). Por último, se llevó a cabo un análisis de asociación utilizando la distancia de Manhattan y el método UPGMA (Unweighted Pair-Group Method, Arithmetic Average) para realizar el fenograma (Visauta, 1998). Para los caracteres macroscópicos cualitativos, dada su naturaleza binaria, se utilizaron tablas χ-2 de contingencia y para la elaboración del dendrograma se utilizó como medida de distancias el coeficiente “phi de 4 puntos” y como método de agrupamiento el UPGMA. El tratamiento aplicado a los caracteres microanatómicos fue idéntico, si bien previamente debieron ser convertidos a binarios. En total se tuvieron en cuenta 12 variables de la epidermis abaxial de la hoja. 3. Resultados y discusión 1.- Datos macroscópicos cuantitativos. Los coeficientes de variación observados fueron altos dentro de cada población, siendo los caracteres vegetativos los más variables. El mismo patrón se observó en el coeficiente de asimetría. El resultado del ANOVA permitió constatar que existen diferencias significativas entre las poblaciones para todos los caracteres, a pesar del alto grado de solapamiento. Por el contrario, los resultados del test de Tukey no muestran ningún patrón de agrupamiento entre las poblaciones que permita extraer conclusiones taxonómicas. Al interpretar los resultados del ANOVA es preciso tener en cuenta que los requisitos de normalidad y homogeneidad de las varianzas no se cumplían en todos los casos. Como resultados del ACP se obtuvieron tres nuevas componentes. La primera componente explica el 33,1% de la varianza, la segunda el 16,5% y la tercera el 10,7%. El porcentaje acumulado ascendió al 60,3%. El test KMO y la prueba de esfericidad de Bartlett confirman la adecuación muestral de nuestros datos para el ACP. En la componente número 1 aparecen todos los caracteres florales, mientras en las componentes 2 y 3 figuran caracteres bien vegetativos o bien ligados a las estructuras florales, pero no de forma directa (longitud de la inflorescencia). Dado el mayor peso de la primera componente (33,09%), se deduce que los caracteres florales son más importantes al explicar la variabilidad existente entre las poblaciones. El fenograma resultado del análisis de asociación es reflejo del solapamiento que presentan los caracteres cuantitativos analizados, ya que los individuos de las distintas poblaciones aparecen entremezclados. IX Conferencia Española de Biometría Pimentel Pereira, M. y Sahuquillo Balbuena, E. 3 2.- Datos macroscópicos cualitativos. El test χ2 mostró que todos los caracteres tomaban valores significativamente diferentes en función de la población de la que se tratase con la excepción de la pilosidad de las glumas y la presencia de bulbillos y estolones, que parecen ser las únicas variables que apuntan a una diferenciación entre las poblaciones del Norte y del Sur. El dendrograma realizado con los datos cualitativos agrupa las poblaciones en base a la presencia de estolones o bulbillos en la base de la planta y a la existencia o no de escotadura en la lema estéril superior. Las poblaciones ecológicamente más diferenciadas (San Andrés de Teixido y Montederramo) no se agrupan de una forma clara, lo que parece señalar la influencia del medio sobre los caracteres, aunque existe una cierta separación entre las poblaciones del Norte y las del Sur. 3.- Datos microanatómicos. Como resultado de los tests χ2 de contingencia se observa que numerosos caracteres de la epidermis abaxial de las hojas se comportan de forma independiente al factor “población”, por ejemplo la tipología de los estomas, la longitud de las células largas de las áreas nervales y la tipología de los elementos exodérmicos, para los que la variabilidad observada se explica en base a otros factores subyacentes. En el fenograma (Figura 1) se aprecia una perfecta diferenciación entre las poblaciones del Norte y las del Sur (si bien la población de Aríns-Tomiño ocupa una posición intermedia). Caracteres de importancia en esta separación son la tipología y longitud de las células largas en áreas nervales e internervales y la tipología de los elementos exodérmicos. Figura 1: Fenograma realizado a partir de los caracteres anatómicos. CI.- Tipología de las células largas en áreas internervales; CLI.- Longitud de las células largas en las áreas internervales; EE.Tipología de los elementos exodérmicos; CCN.- Longitud de las células cortas en las áreas nervales; CCI.- Longitud de las células cortas en las áreas internervales. IX Conferencia Española de Biometría 4 Aplicación de técnicas biométricas al estudio taxonómico de Anthoxanthum amarum Brot 4. Conclusiones 1.- Los métodos biométricos comúnmente empleados en Taxonomía Numérica han resultado muy útiles para analizar los patrones morfológicos de variabilidad que se pueden encontrar en las poblaciones naturales de A. amarum. 2.- Los caracteres macroscópicos cuantitativos resultaron menos concluyentes que los cualitativos y los microanatómicos, a pesar de que se trata de variables más subjetivas y de difícil caracterización que responden a efectos ambientales de forma más directa, especialmente los caracteres microanatómicos. 3.- A pesar de que existe una clara diferenciación entre las poblaciones del Norte y del Sur de Galicia, la existencia de una cierta continuidad y el efecto climático (ambiental) que condiciona las variables estudiadas aconsejan otorgarles categoría de ecotipos. Referencias Devesa, J.A. (1992). Anatomía foliar y palinología de las gramíneas extremeñas. Monografías Botánicas. Universidad de Extremadura. Badajoz. Rohlf, F.J. (1993). NTSYS-pc. Numerical Taxonomy and Multivariate Analysis System. Exeter Software. Nueva York. Sneath, H.A. & Sokal, R.R. (1973). Numerical Taxonomy. The Principles and Practice of Numerical Classification. W.H. Freeman & co. San Francisco. Visauta, B. (1998). Análisis estadístico con SPSS de Windows. Mc Graw Hill. Madrid. IX Conferencia Española de Biometría