INSTITUTO DE SALUD PUBLICA DE CHILE SUBDEPARTAMENTO LABORATORIOS DEL AMBIENTE SECCION QUÍMICA DE ALIMENTOS PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR MATERIA GRASA Método Hidrólisis Ácida-Soxhlet PRT-701-02-033 Rev N° 1 Pag: 1 of 2 1.- OBJETIVO Determinar la concentración total de materia grasa. 2.- CAMPO DE APLICACIÓN El método es aplicable a alimentos que han sido sometidos a tratamientos térmicos y para los cuales se desea extraer la totalidad de la grasa. 3.- PRINCIPIO Una cantidad previamente homogeneizada, medida o pesada del alimento se somete a una hidrólisis ácida con HCL concentrado para separar la materia grasa de los hidratos de carbono o proteínas, la que luego es absorbida por la celite. Posteriormente, se realiza la extracción total de la materia grasa por soxhlet. 4.- REFERENCIAS 4.1.-Official Methods of Analysis A.O.A.C. 15th Edition, U.S.A.(1990) 5.- MATERIAL Y EQUIPO 5.1.- Matraz erlenmeyer de 250 mL 5.2.- Perlas de vidrio 5.3.- Sistema refrigerante 5.4.- Baño termoregulado 5.5.- Sistema de filtración con vacío 5.6.- Papel filtro o dedal de celulosa, pipeta 5.7.- Sistema extractor Soxhlet 5.8.- Manto calefactor o rotavapor 5.9.- Estufa de aire a 103 ± 2°C 5.10.- Balanza analítica 5.11.- Material usual de laboratorio 6.- REACTIVOS 6.1.- Acido clorhídrico conc 37 % p.a 6.2.- Celite 6.3.- Eter de petróleo P.E. 40-60 °C p.a 7.- PROCEDIMIENTO 7.1.- Preparación de la muestra: 7.1.1 Pesar en un matraz erlenmeyer de 250 mL entre 2 a 5 gramos de muestra, previamente homogeneizada, adicionar 10 mL de agua y 10 mL de ácido clorhídrico más algunas perlas de ebullición . INSTITUTO DE SALUD PUBLICA DE CHILE SUBDEPARTAMENTO LABORATORIOS DEL AMBIENTE SECCION QUÍMICA DE ALIMENTOS PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR MATERIA GRASA Método Hidrólisis Ácida-Soxhlet PRT-701-02-033 Rev N° 1 Pag: 2 of 2 7.1.2. Conectar al sistema refrigerante, calentar por 45 minutos, agitando a intervalos de 10 minutos. 7.1.3. Preparar una suspensión que contenga 3 gramos de celite en 20 mL de agua 7.1.4. Una vez terminado el calentamiento, adicionar 1 gramo de celite y agitar. 7.1.5. Proceder a filtrar al vacío por medio de un embudo Buchner con papel filtro, adicionados de la suspensión de celite preparada previamente. 7.1.6. Secar el papel filtro con la celite y la grasa adsorbida en estufa a 103 ± 2°C por 1 hora y extraer la grasa por Soxhlet. 7.2.- Determinación por Soxhlet 7.2.1.-Incorporar la muestra hidrolizada y seca a un dedal de celulosa o envolver en papel filtro. 7.2.2.- Colocar el dedal en el tubo de extracción y adicionar el solvente al matraz previamente tarado. 7.2.3.- Extraer la muestra con solvente por 6 a 8 horas a una velocidad de condensación de 3-6 gotas/seg. 7.2.4.- Cuando se completa la extracción eliminar el solvente en rotavapor o evaporando con precaución bajo campana, hasta que se evapore todo el éter. 7.2.5.- Secar el matraz en estufa a 103 ± 2°C por 30 min, enfriar en desecador y pesar. 8.- CALCULO Y EXPRESION DE RESULTADOS m2 -m1 % grasa cruda = ----------------x100 m Donde : m peso de la muestra m1 tara del matraz solo m2 peso matraz con grasa. Los resultados se informan en % de materia grasa. Promediar los valores obtenidos y expresar el resultado con 2 decimales. Repetibilidad : La diferencia de los 2 resultados no debe ser superior al 2 % del promedio.