PROTOCOLO PARA MEDICION DE LA CONCENTRACION DE

PROTOCOLO PARA MEDICION DEL COEFICIENTE DE ABSORCION DE
LA MATERIA ORGANICA DISUELTA (CDOM)
LABORATORIO DE PRODUCTIVIDAD ORGANICA PRIMARIA
FCM-UABC
Segun: Mitchell et al, 2000. Determination of spectral absorption coefficients of
particles, dissolved material and phytoplankton for discrete water samples. En
Ocean Optics Protocols for satellite ocean Color Sensor Validation, Revision 2.
NASA/TM-2000-209966. Editores G. S. Fargion & J.L. Mueller.
MATERIAL NECESARIO:
1. Filtros de membrana de 0.2 M de poro (Nuclepore).
2. Botellas de Vidrio ámbar LIMPIAS
3. Pinzas
4. Vaso de precipitado con HCl 10%
5. Vaso de precipitado con agua destilada filtrada (MilliQ)
PROCEDIMIENTO 1. PREPARACION DEL MATERIAL
1. Este procedimiento es esencialmente de limpieza del material para
que este se encuentre libre de cualquier contaminación por materia
orgánica.
2. Lavarse bien las manos antes de iniciar el trabajo.
3. Lavar botellas usadas para colectar la muestra usando detergente y
agua filtrada varias veces (tres es razonable). Enjuagar bien con agua
filtrada y hacer un enjuague con HCl al 10% luego del cual volver a
lavar con agua destilada filtrada. “Quemar” las botellas cubiertas con
papel aluminio a 450oC durante 4-6 hs. Luego de frías rellenarlas con
agua ultrapura (MilliQ/destilada), taparlas y guardarlas en oscuridad
hasta su uso.
4. Lavar también las tapas usando HCl 10% y enjuagando con agua
filtrada. Secar a 70oC por 4-6 hs.
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5. El mismo procedimiento de limpieza se debe tener para el aparato de
filtración que será usado en el filtrado de la muestra y vasos de
precipitado.
PROCEDIMIENTO 2. TOMA DE LA MUESTRA.
1. Los filtros que serán usados para filtrar la muestra deben ser dejados
de remojo en HCl 10% durante mínimo 15 minutos.
2. Enjuagar el filtro con agua filtrada.
3. Colocar el filtro en el aparato de filtración y lavar tres veces con agua
filtrada. Tapar el aparato de filtración con papel aluminio hasta su uso
para evitar polvo/contaminación.
4. Tomar la muestra.
5. Filtrar ~ 50 mL de esta cuidando de no dejar secar el filtro.
6. Enjuagar bien el matraz y repetir el procedimiento de lavado.
7. El tercer filtrado es la muestra a ser llevada al espectrofotometro.
8. Seguir el mismo procedimiento anterior filtrando agua filtrada (MilliQ) y
este será el blanco (Realizar este paso primero).
PROCEDIMIENTO 3. LECTURAS EN EL ESPECTROFOTOMETRO.
1. Conectar el espectrofotometro al menos 1 hora antes de los análisis.
2. Verificar que las ventanas ópticas del espectrofotómetro estén muy
limpias y si necesario limpiar con agua, luego etanol y a seguir secar
bien con Kimwipes.
3. Usar cubeta de 10 cm de longitud la cual debe ser enjuagada dos
veces con HCl al 10%, luego dos veces con etanol, y luego
enjuagadas abundantemente con agua destilada filtrada.
4. iniciar programa y escoger Método CDOM, el cual debe determinar
lecturas entre 250 a 800 nm.
5. Hacer el autozero (Baseline).
6. Pedir Start y cuando pida el blanco no colocar nada. Esto será el
baseline aire/aire del aparato el cual debe ser registrado.
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7. Cuando pida la primera muestra insertar la cubeta con el blanco. Esto
se realiza para tener un registro del blanco (DOb()) y verificar su
variación espectral (que debería ser aproximadamente neutra).
8. A seguir se leerán las densidades ópticas de las muestras (DOs()).
PROCEDIMIENTO 4. CALCULOS.
La ecuación que permite calcular el coeficiente de absorción de la materia
orgánica disuelta (ag(), m-1) es:
a g ( ) 
2.303
DOs ( )  DOb ( )]  DOscorr (600 )
l
En la cual l es la longitud de la cubeta (m) y DOscorr es la densidad óptica de la
muestra ya descontado el valor del blanco y a ~ 600 nm (null point). En
ocasiones se utiliza 550 si este ya es cero.
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