Introducción al Laboratorio Virtual sobre Diluciones seriadas

Introducción al Laboratorio Virtual sobre Diluciones seriadas
Tabla de Contenido
Objetivos, Estrategia para el logro de la meta, Video introductorio, Diluciones, Soluto y Solvente, Diluciones
Seriadas, Aplicaciones de Disoluciones,
Fecha de entrega: Incluida en el calendario del curso
Objetivos psicomotores generales:
1. Preparar soluciones expresadas en diferentes formas de concentración y realizar diluciones
de éstas.
2. Desarrollo de la capacidad de manipular físicamente una herramienta o instrumento del
laboratorio de biología o la sustitución de esta por herramientas que facilites resultados
similares.
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Estrategia para el logro de la meta [las herramientas de manejo de líquidos en sus hogares :
1. Facilitación del estudiante a adquirir la instrumentación requerida.
 Acompañamos la foto del instrumento junto a vinculación de sitios del internet
donde se pueden adquirir por costos sumamente económicos.
 Esta estrategia facilita la interacción de la herramienta o instrumento a través
su estadía en el programa.
 A diferencia de aquellos que solo se pondrán en contacto con ellos durante la
experiencia presencial podrás practicar tantas veces como te sea necesario.
2. Desarrollar a nivel de maestría las destrezas de medidas de líquidos, el transporte de
porciones del mismo a otras unidades y la mediada precisa.
3. Promover la mediante la practica ilimitada en sus hogares y su relación con actividades de la
vida cotidiana y otras disciplinas.
4. Envío de herramientas instrumentos de laboratorio con carácter de préstamo a sus hogares
dentro del territorio de americano.
 El estudiante cubrirá los costó de manejo y envió además de comprometerse
a el pago de las herramientas y/o equipo en caso de no devolverse o
producirles daños.
b. Viaje a nuestras facilidades para completar la experiencia asistido por el profesor.
5. Componente perceptuales
a. Estimulación perceptual mediante videos, tutoriales, diagramas, presentaciones
grabaciones de sonido con instrucciones o cometarios sobre el manejo de la
herramienta o equipo
b. Video informe de laboratorio
i. , verificación de la aplicación e implementación del protocolo psicomotor,
discriminación e identificación de errores en la aplicación del protocolo al
evaluar un video reporte de laboratorio de sus colegas estudiantes
 Se requiere del estudiante la producción de un video que documente el proceso completo
de cada uno de los pasos de esta experiencia utilizando como referencia APA. Súbelo a la
pizarra de discusiones del tema correspondiente a Diluciones Seriadas para permitir la
crítica de tus compañeros. Selecciona uno de los videos de tus colegas y produce una
crítica lógica, respetuosa, que incluya tus razones y las fuentes de referencias en que la
basas.
a. Cómo escribir un Informe de Laboratorio de Ciencia
b. Formato Informe De Laboratorio
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Introducción Protocolo de Diluciones Seriadas paso a paso Créditos a :
https://www.youtube.com/watch?v=MCrNjHcfcpY
1. DILUCIONES
 La dilución es el procedimiento que se sigue para preparar una disolución menos concentrada a
partir de una más concentrada.
 Definición general de disolución: Una dilución es una mezcla homogénea, uniforme y estable,
formada por dos o más sustancias denominadas componentes. La sustancia presente en mayor
cantidad suele recibir el nombre de solvente, y a la de menor cantidad se le llama soluto y es la
sustancia disuelta. El soluto puede ser un gas, un líquido o un sólido, y el disolvente puede ser
también un gas, un líquido o un sólido.

Observadas a través del microscopio, las diluciones aparecen homogéneas y el soluto no puede
separarse por filtración.

Es una mezcla ya que las cantidades de los componentes no son fijas y también se denomina
mezcla porque no hay reacción química en la unión de componentes.
Se denomina Homogénea porque es uniforme ante la observación visual directa o con
microscopio, y no apreciamos la existencia de varias partes o fases. Las partículas de los
componentes son de tamaño molecular y están distribuidas sin ningún orden.
Se denomina Uniforme puesto que en todas sus partes tiene una misma composición con las
mismas propiedades, cojamos la porción de mezcla que cojamos en cada una de ellas siempre
encontraremos el mismo contenido en cuanto a sus componentes. Además las partículas se
hallan distribuidas de forma ordenada, y no al azar.
Se denomina estable por mantenerse en su composición inicial sin cambiar en cuanto a los
componentes químicos que la forman, [soluto y disolvente]




Soluto: Es el componente que cambia de fase cuando se produce la disolución; también
denominado cuerpo disperso.
 Solvente: Es el componente que disuelve, teniendo la propiedad de disolver ciertas sustancias.
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1.1 NORMAS PARA LA ELECCIÓN DE SOLUTO Y SOLVENTE:
La sustancia presente en mayor cantidad suele recibir el nombre de disolvente, y a la de menor cantidad
se le llama soluto y es la sustancia disuelta.
 El soluto puede ser un gas, un líquido o un sólido, y el disolvente puede ser también un gas, un
líquido o un sólido.
 El agua con gas es un ejemplo de un gas (dióxido de carbono) disuelto en un líquido (agua). Las
mezclas de gases, como ocurre en la atmósfera, son disoluciones.
 En las disoluciones entre un sólido y un líquido es fácil identificar el soluto y el disolvente; pero
si se trata de dos o más líquidos o gases, la distinción entre soluto y disolvente es arbitraria.
1.2 SOLUBILIDAD
 La solubilidad de un compuesto en un solvente concreto y a una temperatura y presión dadas se
define como la cantidad máxima de ese compuesto que puede ser disuelta en la dilución. En la
mayoría de las sustancias, la solubilidad aumenta al aumentar la temperatura del disolvente. En
general, la mayor solubilidad se da en disoluciones cuyas moléculas tienen una estructura
similar a las del solvente.
1.3 PROPIEDADES FÍSICAS DE LAS DILUCIONES
 Cuando se añade un soluto a un disolvente, se alteran algunas propiedades físicas del
disolvente. Al aumentar la cantidad del soluto, sube el punto de ebullición y desciende el punto
de solidificación.
 Otra propiedad destacable de una disolución es su capacidad para ejercer una presión osmótica.
Si separamos dos diluciones de concentraciones diferentes por una membrana semipermeable
(una membrana que permite el paso de las moléculas del disolvente, pero impide el paso de las
del soluto), las moléculas del disolvente pasarán de la disolución menos concentrada a la
disolución de mayor concentración, haciendo a esta última más diluida.
1.4 CONCENTRACIÓN DE UNA DISOLUCIÓN
Existen distintas formas de expresar la concentración de una dilución, pero las dos más utilizadas son:
 gramos por litro (g/l) y molaridad (M). Los gramos por litro indican la masa de soluto, expresada
en gramos, contenida en un determinado volumen de disolución, expresado en litros. Así, una
disolución de cloruro de sodio con una concentración de 40 g/l contiene 40 g de cloruro de
sodio en un litro de disolución.
 La molaridad se define como la cantidad de sustancia de soluto, expresada en moles, contenida
en un cierto volumen de disolución, expresado en litros, es decir: M = n/V. El número de moles
de soluto equivale al cociente entre la masa de soluto y la masa de un mol (masa molar) de
soluto
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2. DILUCIONES SERIADAS

Hay muchas situaciones en que las cantidades de sustancia necesarias para ver un efecto son
extremadamente pequeñas (por ejemplo un fármaco para tratar una enfermedad, una hormona
para estudiar su efecto en un animal de experimentación, etc) y difícilmente se pueden pesar o
medir en esas proporciones tan pequeñas. En esas situaciones es necesario recurrir a la
preparación de una solución de alta concentración (o solución de stock o solución madre) y
hacer diluciones seriadas a partir de ésta.
2.1 ¿CÓMO SE PREPARAN LAS DILUCIONES SERIADAS?
 En general se parte de una solución concentrada y se preparan series de diluciones al décimo
(1:10) o al medio (1:2). De esta manera se obtiene una serie de soluciones relacionadas por
ejemplo por un factor de dilución 10 es decir 1/10; 1/100; 1/1000 y así sucesivamente. O la otra
serie es 1/2; 1/4; 1/8; 1/16; 1/32 etc.
 Ejemplo: si partimos de una solución de 50mg/ml de una sustancia (Solución A)
a. Dilución 1/10: 1ml de la solución A + 9 ml de agua= una solución de 5 mg/ml (dilución
1:10)
b. Dilución 1/2: 5 ml de la solución A + 5 ml de agua= una solución de 25 mg /ml
(dilución 1:2)
Veremos dos ejemplos:
1) Diluciones seriadas de una proteína. El primer ejemplo que veremos es una proteína. La
albúmina sérica bovina es la proteína que más usualmente se emplea como patrón para calcular
la cantidad de proteínas totales en una muestra incógnita. Las unidades que habitualmente se
usan para la solución de stock son mg/ml, y en general una solución de 1 mg/ml puede resultar
adecuada para realizar diluciones seriadas y medir luego la concentración de proteínas en una
muestra. Las diluciones se harán al medio en una serie de tubos rotulados 1; 0,5; 0,25; 0,12;
0,06; 0,03; 0,015, a todos se les agrega 2 ml de agua destilada y luego la solución
correspondiente:
2) Diluciones seriadas de un neurotransmisor. El otro ejemplo es un neurotransmisor, como por
ejemplo la noradrenalina, ya que las concentraciones que se emplean para producir un efecto
biológico suelen ser tan pequeñas que es necesario hacer diluciones muy grandes de la
sustancia. Por ejemplo, se parte de una solución madre 0,1 M y se hacen diluciones 1/10 hasta
10-9 M.
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3. APLICACIÓN DE DILUCIONES
3.1 EN HOMEOPATIA
 La homeopatía forma parte de los métodos biológicos, puesto que trabaja en el sentido del
curso de la enfermedad y la aviva por medio de una enfermedad medicamentosa que se
desarrolla en una dirección similar. Por lo tanto, la homeopatía conoce también el
empeoramiento inicial, es decir, una intensificación de los síntomas patológicos y de las
molestias después de comenzar el tratamiento que luego se convierte en una fase curativa.
 La dilución se elabora con una proporción siempre ascendente, con las llamadas "potencias".
Por lo general se diluye con potencias decimales, o sea:
o 1:10 = D 1
o 1:100 = D 2
o 1:1.000 = D 3
o 1:10.000 = D 4
o etc.
3.1.1 PROCEDIMIENTO DE KORSAKOV
 Forma de preparación continua que se realiza en un solo frasco, el principio se basa en que el
frasco, una vez vacío, mantiene sobre sus paredes la cantidad de líquido suficiente como para
preparar la dilución centesimal siguiente.
En la práctica se opera a partir de la tercera dilución centesimal hahnemaniana.
Se vacía el frasco, se rellena de disolvente, se perfecciona la mezcla mediante una serie de
agitaciones y se obtiene la cuarta dilución centesimal.
Se continúa así, 27 veces si se requiere una treintava, 997 veces si se requiere una 1.000, etc.
3.1.2 PROCEDIMIENTO DE HAHNEMANN
 Forma de preparación discontinua que se realiza con frascos separados.
 Un primer frasco recibe una parte del remedio a diluir, al cual se le añaden 99 partes de
disolvente; se perfecciona la mezcla mediante agitaciones y se obtiene la primera dilución
centesimal.
 Una parte de esta mezcla se coloca en un segundo frasco, en el cual se vierten 99 partes de
disolvente, se agita y se obtiene la segunda la segunda dilución centesimal.
 Se continúa con el procedimiento tantas veces como diluciones se deseen obtener, sin
sobrepasar, en la práctica corriente, la novena dilución centesimal.
(Respecto a las diluciones decimales, se opera de la misma forma, pero con una parte de
remedio por cada nueve de disolvente).
Ambos procedimientos tienen sus defensores, pero no es posible en
3.2 EN LABORATORIO.
 Dilución en Siembra de las muestras:
Cuando se tienen las muestras al laboratorio, se colocan en un vortex durante 15 segundos con
la finalidad de homogeneizarlas e inmediatamente se procede a realizar las diluciones de las
mismas en forma seriada, previo a la siembra y a la observación microscópica. Las diluciones se
hacen de la siguiente forma:
o Se toma 0,9 ml de Caldo Tripticasa de Soya estéril y se mezcla con 0,1 ml del inóculo
contenido en el medio de transporte, obteniéndose una dilución de 10-1.
o De la dilución obtenida10-1, se toma 0,1 ml y se mezcla con 0,9 ml de Caldo Tripticasa
de Soya estéril, obteniéndose la de 10-2.
o Luego de realizadas las diluciones, se toma 0,1 ml de ambas diluciones y se inocularon
en placas de Petri.
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