BD DCLS Agar

INSTRUCCIONES DE USO –
MEDIO EN PLACAS LISTO
PARA SU USO
PA-254012.06
Rev.: April 2013
BD DCLS Agar
USO PREVISTO
BD DCLS Agar (agar sacarosa desoxicolato citrato lactosa) es un medio de diferenciación
moderadamente selectivo para el aislamiento de Salmonella, Shigella y vibriones de cólera a
partir de torundas fecales y rectales de pacientes con diarrea.
PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO
Método microbiológico
DCLS Agar es una modificación del Agar salmonella-shigella y del Agar citrato desoxicolato
descritos por Leifson1. Generalmente se inhiben los microorganismos coliformes capaces de
fermentar la lactosa o la sacarosa. Las bacterias gram-positivas se suprimen. Algunos
coliformes fermentan la sacarosa con mayor facilidad que la lactosa2,3. La adición de sacarosa
permite la diferenciación entre patógenos entéricos tales como la Salmonella y los
microorganismos no patógenos fermentantes de sacarosa.
En el BD DCLS Agar, el extracto de carne bovina y las peptonas proporcionan nitrógeno,
vitaminas y aminoácidos. La lactosa y la sacarosa proveen los carbohidratos fermentables. El
citrato, el tiosulfato y el desoxicolato de sodio son agentes selectivos. El rojo neutro es el
indicador del pH y ocasiona un cambio de color de rosa claro a rosa intenso o rojizo al
fermentarse la lactosa o la sacarosa (p. ej. por E. coli).
REACTIVOS
BD DCLS Agar
Fórmula* por litro de agua destilada
Digerido pancreático de caseína
Digerido péptico de tejido animal
Extracto de carne bovina
Lactosa
Sacarosa
3,5 g
3,5
3,0
5,0
5,0
Desoxicolato de sodio
Citrato sódico
Tiosulfato sódico
Rojo neutro
Agar
2,5 g
10,5
5,0
0,03
12,0
pH 7,2 +/- 0,2
*Ajustada o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.
PRECAUCIONES
Para uso exclusivo por parte de profesionales.
No usar placas que presenten señales de contaminación microbiana, decoloración, desecación,
roturas u otras señales de deterioro.
Consultar en las INSTRUCCIONES GENERALES DE USO los procedimientos de
manipulación aséptica, peligros biológicos y eliminación del producto después de su uso.
ALMACENAMIENTO Y VIDA UTIL
Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro a una temperatura entre 2 y 8 °C,
envueltas en su envase original, hasta justo antes de usarlas. Evitar la congelación y el
calentamiento excesivo. Las placas pueden inocularse hasta su fecha de caducidad (ver la
etiqueta en el paquete) e incubarse durante los períodos de incubación recomendados.
Las placas de grupos de 10 placas ya abiertos pueden usarse durante una semana siempre que
se almacenen en un lugar limpio a una temperatura entre 2 y 8 °C.
CONTROL DE CALIDAD DEL USUARIO
Inocular muestras representativas con las siguientes cepas (consultar las INSTRUCCIONES
GENERALES DE USO para obtener instrucciones detalladas). Incubar las placas en
condiciones aerobias a una temperatura entre 35 y 37 °C, por un período de 18 a 48 horas. Leer
al cabo de 18 a 24 horas e incubar nuevamente en caso necesario.
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Cepas
Escherichia coli ATCC 25922
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Proteus mirabilis ATCC 12453
Salmonella Abony DSM 4224
Salmonella Typhimurium ATCC 14028
Shigella flexneri ATCC 12022
Shigella sonnei ATCC 25931
Sin inocular
Resultados del crecimiento
Crecimiento ausente o aceptable; colonias rosa rojizo,
precipitación biliar alrededor de las mismas
Inhibición total
Colonias incoloras; crecimiento aceptable o bueno
Colonias desde incoloras hasta de color naranja pálido;
crecimiento bueno o excelente
Colonias desde incoloras hasta de color naranja pálido;
crecimiento bueno o excelente
Colonias desde incoloras hasta de color naranja pálido;
crecimiento entre aceptable y excelente
Colonias rosa pálido; crecimiento entre aceptable y excelente
Colonias de color anaranjado rojizo, ligeramente
opalescentes
PROCEDIMIENTO
Materiales suministrados
BD DCLS Agar (placas Stacker de 90 mm). Controladas microbiológicamente.
Materiales no suministrados
Medios de cultivo auxiliares, reactivos y equipo de laboratorio que se requiera.
Tipos de muestras
Muestras fecales o torundas rectales de pacientes en quienes hay sospecha de una infección
por especies de Salmonella o Shigella (véase también CARACTERÍSTICAS DE
RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO). También se puede utilizar para el
aislamiento de Vibrio cholerae a partir de muestras fecales.
Procedimiento de análisis
Una vez recibida la muestra en el laboratorio, extenderla tan pronto como sea posible. La
placa de extendido se emplea sobre todo para aislar cultivos puros en muestras que
contengan flora microbiana mixta. Si por el contrario el material se cultiva directamente
empleando una torunda, hacerla girar en una sección pequeña cercana al borde, extendiendo
luego para hacer el aislamiento a partir de esta área inoculada.
Además, es preciso inocular un medio menos selectivo como el BD MacConkey II Agar y
medios líquidos de enriquecimiento selectivo, p. ej. Selenite F Broth, a fin de incrementar la
posibilidad de recuperación cuando la población de microorganismos gram-negativos sea
escasa y de proporcionar una indicación sobre otros microorganismos presentes en la
muestra. Si se sospecha la presencia de Vibrio cholerae, debe incluirse igualmente una placa
de BD TCBS Agar. Una explicación detallada sobre el aislamiento y la identificación de los
patógenos entéricos en las muestras clínicas puede obtenerse consultando los procedimientos
descritos en las referencias correspondientes4-6.
Incubar las placas, protegidas de la luz, a una temperatura de 35 ± 2 °C durante un período de
18 a 24 h o durante más tiempo si es necesario.
Resultados
En la tabla siguiente se indica el aspecto característico de las colonias en el BD DCLS Agar:
Microorganismos
E. coli
Resultados del crecimiento
Colonias grandes, planas, de color rosa o rojo con una zona de precipitación
biliar
Enterobacter/Klebsiella Colonias grandes, mucoides, de color rosa
Colonias incoloras o rojas dependiendo de la especie
Proteus
Colonias incoloras o de color anaranjado pálido
Salmonella/Shigella
Colonias desde incoloras hasta marrón o verde
Pseudomonas
Colonias de incoloras a rojas
Vibrio cholerae
Bacterias gram-positivas Crecimiento nulo o escaso
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CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
BD DCLS Agar se utiliza principalmente para el aislamiento de Salmonella y Shigella en
muestras de materia fecal humana3,6.
Sólo en raras ocasiones es posible recuperar en un único medio todos los patógenos
contenidos en una muestra. Por tanto, para el aislamiento de Salmonella, Shigella o Vibrio
cholerae y posiblemente otros patógenos entéricos es preciso inocular otros medios con la
muestra.
En este medio, las colonias de Proteus mirabilis pueden asemejarse a colonias de Salmonella.
Algunas cepas de Shigella pueden necesitar de 42 a 48 h de incubación.
Ciertas pruebas de diagnóstico pueden efectuarse directamente en este medio; no obstante,
para lograr la identificación total se necesitan pruebas bioquímicas, y (si así se indica)
pruebas inmunológicas usando cultivos puros. Consultar las referencias correspondientes4-6.
REFERENCIAS
1. Leifson, E. 1935. New culture media based on sodium desoxycholate for the isolation of
intestinal pathogens and for the enumeration of colon bacilli in milk and water. J. Pathol.
Bacteriol. 40:581-599.
2. Holt-Harris, J. E., and O. Teague. 1916. A new culture medium for the isolation of Bacillus
typhosus from stools. J. Infect. Dis. 18:596-601.
3. MacFaddin, J.F. 1985. Media for the isolation – cultivation – maintenance of medical
bacteria. Volume 1. Williams and Wilkins, Baltimore, London
4. Bopp, C.A., Brenner, F.W., Fields, P.I., Wells, J.G., and N.A. Strockbine. 2003. Escherichia,
Shigella, and Salmonella. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and
R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for
Microbiology, Washington, D.C.
5. Isenberg, H. D. (ed.). 1992. Clinical microbiology procedures handbook, vol.1. American
Society for Microbiology, Washington, D.C.
6. Kist, M., et al. 2000. Infektionen des Darmes. In: Mauch, H., Lüttiken, R., and S. Gatermann
(eds.): MiQ - Qualitätsstandards in der mikrobiologisch-infektiologischen Diagnostik, vol. 9.
Urban & Fischer, Munich, Germany.
ENVASE Y DISPONIBILIDAD
BD DCLS Agar
Nº de cat. 254012
Medio en placas listo para su uso, 20 placas
INFORMACIÓN ADICIONAL
Para obtener más información, diríjase a su representante local de BD.
Becton Dickinson GmbH
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