Laboratorio de Mecánica, Práctica 0, Equipo 5 (2015) formato ok Desnaturalización de proteínas J. Tamayo Nuñez1 1Universidad de Guanajuato, DCNyE Enviado el 29 de Enero del 2015 bien uso de figura y tabla pie de tabla y figura ok coherencia en el documento RESUMEN Se realiza una serie de pruebas agregando diversos compuestos a varias muestras de clara de huevo, para así poder observar el grado de desnaturalización de proteínas que provoca cada una de las sustancias utilizadas. 1 INTRODUCCIÓN Las proteínas son los materiales que desempeñan un mayor número de funciones en las células de todos los seres vivos. Por un lado, forman parte de la estructura básica de los tejidos. Y, por otro, desempeñan funciones metabólicas y reguladoras. También son la base de la estructura del código genético (ADN) y de los sistemas de reconocimiento de organismos extraños en el sistema inmunitario. Son macromoléculas orgánicas, constituidas básicamente por carbono (C), hidrógeno (H), oxígeno (O) y nitrógeno (N); aunque pueden contener también azufre (S) y fósforo (P) y, en menor proporción, hierro (Fe), cobre (Cu), magnesio (Mg), yodo (I), etc. Estos elementos químicos se agrupan para formar unidades estructurales llamados aminoácidos. La organización de una proteína viene definida por cuatro niveles estructurales denominados: Estructura primaria. La estructura primaria es la secuencia de aminoácidos de la proteína. La función de una proteína depende de su secuencia y de la forma que ésta adopte. esta Estructura Secundaria. La estructura secundaria es la disposición de la secuencia de aminoácidos en el espacio. Estructura terciaria. La estructura terciaria informa sobre la disposición de la estructura secundaria de un polipéptido al plegarse sobre sí misma originando una conformación globular. Esta conformación globular facilita la solubilidad en agua y así realizar funciones de transporte, enzimática, hormonales, etc. Esta conformación se mantiene estable gracias a la existencia de enlaces (puentes de disulfuro, puentes de hidrógeno, 1 puentes eléctricos, interacciones hidrófobas) entre los radicales R de los aminoácidos. Estructura Cuaternaria. Esta estructura informa de la unión, mediante enlaces débiles (no covalentes) de varias cadenas polipeptídicas con estructura terciaria, para formar un complejo proteico. Cada una de estas cadenas polipeptídicas recibe el nombre de protómero. 2 OBJETIVOS Determinar el comportamiento de una proteína globular hidrosoluble bajo condiciones de desnaturalización. 3 MATERIALES Se utilizaron los siguientes materiales para el experimento: Clara de huevo Etanol Jugo de limón Ácido clorhídrico 1N Hidróxido de sodio 1N Sal de mesa Tubos de ensaye Tapones para tubo de ensaye Varilla de vidrio Gradilla Gotero Laboratorio de Mecánica, Práctica 0, Equipo 5 (2015) 4 DESARROLLO EXPERIMENTAL Colocamos un poco de clara de huevo en siete tubos de ensaye. Al primero le agregamos un poco de etanol, al segundo un poco de jugo de limón, al tercero un poco de ácido clorhídrico (HCl) 1N, al cuarto un poco de hidróxido de sodio (NaOH) 1N, al quinto sal y al sexto lo batimos con una varilla o vortex, al séptimo sólo agregamos clara de huevo para usarlo como referencia. Tapamos los tubos y esperamos 10 minutos. A medida que pasó el tiempo, observamos lo que sucedió en cada tubo. y su consistencia. Al agitar la clara de huevo, cambió su color y consistencia en un principio, se formó espuma. Pero con el tiempo regresaba poco a poco a su estado original. Tubo Condición Grado de desnaturalización 1 Etanol 7 2 Jugo de limón 5 3 HCl 1 N 6 4 NaOH 1 N 4 5 Sal de mesa 2 6 Agitación 2 minutos 3 7 Nativa 1 Tabla 1. El grado de desnaturalización fue dado en una escala del 1 al 7, en base a las comparaciones realizadas entre los resultados obtenidos en los diversos tubos. Figura 1. Cada uno de los tubos contiene una muestra de clara de huevo (proteínas) y a ellos se adicionó una de las sustancias. Puede observarse que en cada uno de los tubos el grado de desnaturalización de las proteínas es diferente. 5 RESULTADOS Inmediatamente que la clara de huevo tuvo contacto con el etanol se hizo un tapón de color blanco en la superficie muy consistente por lo que el alcohol no pudo pasar hasta la parte inferior del tubo. Al añadir jugo de limón a la clara de huevo, cambió su color y su consistencia, se volvió de color blanco y se formó una especie de espuma. Cuando se agregó el ácido clorhídrico 1N, se formó una especie de tapón de gel color blanco muy consistente. Con el paso del tiempo, después de agregar hidróxido de sodio 1N, se formó un gel de color trasparente. transparente Al colocar la sal de mesa en contacto con la clara de huevo, solamente se modificó un poco su color 2 6 CONCLUSIONES El agente mayoritariamente desnaturalizante de proteínas (de las sustancias utilizadas en este experimento) es el etanol; ya que la clara de huevo presentó una mayor alteración y en menor tiempo, que los demás compuestos. Las condiciones ácidas generan un mayor grado de desnaturalización de proteínas que las condiciones básicas. La agitación puede provocar la desnaturalización de proteínas. 7 BIBLIOGRAFÍA Cooper, G.M. The Cell. A Molecular Approach. ASM Press, Sinauer. Karp, G. Biología Celular y Molecular. 2008. McGraw-Hill Interamericana.