PRACTICA 2 ENSAYOS DE RUTINA EN LECHES FLUIDAS 1. DETERMINACION DEL PESO ESPECIFICO - Método: Densimétrico - Fundamento: La leche tiene mayor densidad que el agua por los elementos disueltos en ella. 1,028 – 1,033 gr./ml. - Material: Lactodensímetros Quevenne u otro lactodensímetro, Probeta de 250 ml. 2.- DETERMINACION DE LA ACIDEZ La leche fresca carece de ácido láctico en el momento de ser ordeñada, y su contenido va en aumento conforme el tiempo transcurre hasta su llegada a la planta de proceso - Método :Titulación con soda. - Fundamento :La acidez titulable de la leche se valora con una solución de sosa N/9 ó N/4 ó N/10 - Material :Matraz erlenmeyer pipeta de 10 ml. bureta - Reactivo: Fenolftaleína al 1% Hidróxido de sodio 1º Dornic = 0,01 % ácido láctico 3.- DETERMINACION DE MATERIA GRASA - Método : Volumétrico (Gerber) - Fundamento : El ácido sulfúrico al 90% disuelve todos los componentes de la leche, excepto la grasa, en presencia de alcohol amílico puro. Con el calor y la fuerza centrífuga la grasa se separa en una capa refringente y transparente. - Material : butirómetros gerber empujadores pipetas de 11, 10 y 1 ml. baño maría centrífuga de gerber - Reactivo :ácido sulfúrico (p.e. 1,825 a 20ºC) alcohol amílico (p.e. 0,815 a 20ºC) 4. DETERMINACION DEL EXTRACTO SECO - Método :directo. - Fundamento :está constituido por componentes que no se volatilizan calentando la leche a 100ºC., como materias nitrogenadas, lípidos, glúcidos y sales. Si al extracto seco se le resta el contenido de materia grasa se obtiene el extracto seco magro. -Material :cápsula de porcelana estufas de 102 ± 2ºC desecador pipetas de 10 ml. balanza analítica 5. DETERMINACION DE CENIZAS - Fundamento : El producto resultante de la incineración del extracto seco expresado en porcentaje en peso, obtenido según el procedimiento anteriormente descrito se le conoce como cenizas. - Material : balanza de sensibilidad 0,1 mg. desecador previsto de un buen deshidratante estufa de desecación regulado a 102ºC. horno eléctrico con circulación de aire cápsula de platino o porcelana Ver gráfica anterior. 6. DETECCION DE AGUA OXIGENADA - Método - Reactivo : Con ioduro potásico : solución de ioduro de potasio al 25% (p/v) 7. DETECCION DE ALMIDON Y FECULAS La adición de almidón se realiza con fines fraudulentos con la finalidad de aumentar la cantidad de materia seca en la leche y/o disminuir un posible aguado. - Material: tubos de ensayos pipetas de 5 y 10 ml. - Reactivo: solución de yodo: 1 gr yodo 2 gr. Ioduro de K en 100 ml de agua destilada. 8. PRUEBAS DE ESTABILIDAD AL CALOR - Fundamento: Al añadir una cantidad de alcohol etílico a la leche se produce una deshidratación de algunos coloides hidrófilos, con lo que se puede llegar a producir una desnaturalización y pérdida de equilibrio seguido de floculación. - Material: tubos de ensayo pipetas de 2 ml. - Reactivo: alcohol de 68º y 72-74% 9. RECUENTO BACTERIANO Entre los diversos métodos utilizados para el control bacteriológico de la leche existen una serie de pruebas que de una manera indirecta aportan una idea aproximada del grado de calidad de la misma. Estos ensayos consisten en correlacionar un parámetro físico químico con el número de bacterias y entre ellos uno de los más empleados es la prueba de azul de metileno. Por otra parte hay que conocer de una forma cuantitativa el número de bacterias y el método de referencia es la siembra en un medio de cultivo apropiado de diferentes diluciones de leche y el recuento de las u.f.c./ml. ó de aerobios mesófilos. 9.1. REDUCCION DEL AZUL DE METILENO - Método : de reducción del azul de metileno - Fundamento : El método mide en términos de intervalos de tiempo requerido, la decoloración de una mezcla - Material - Reactivo colorante leche azul característico hasta el blanco, desde el comienzo de la incubación : tubos de prueba estériles con tapa rosca gradilla de acero inoxidable pipetas de 0.1 y 10 ml. baño maría temporizador :solución de azul de metileno 2.5% 9.2 RECUENTO DE AEROBIOS Y MESOFILOS - Fundamento : La técnica se basa en el crecimiento de microorganismos que se encuentran en la leche utilizando un medio de cultivo adecuado - Material - Reactivo : Autoclave tubos de ensayo pipetas de 1 ml. baño maría placas petri : solución diluyente medio de cultivo agar-agar. 9.3. RECUENTO DE CELULAS SOMATICAS Los equipos más utilizados en el recuento de células somáticas son: el contador electrónico, el sistema óptico electrónico y el aparato fossomátic. 10. DETERMINACIÒN RÁPIDA DE PROTEÌNA: Una de las pruebas que permiten tener un alcance del contenido proteico en leches frescas es el método de la titulación con formol. Fundamento: El método se basa en la acidificación de la leche neutralizada, por acción de formaldehido que produce ácido libre en la proporción a la cantidad de proteínas presente, el mismo que se calcula por un factor empìrico: 1.7 (a-b) % (cuando se usa oxalato) y 1.95(a-b)% cuando se omite el oxalato, a y b son los gastos de soda en la muestra y blanco. HOJA DE REPORTE DEL CONTROL DE RUTINA EN LECHES MUESTRA: leche fresca CODIFICACION: FECHA: HORA: ANALISTA: PRUEBA COLOR OLOR DENSIDAD ACIDEZ EXTRACTO SECO DETECCION DE AGUA OXIGENADA DETECCION ALMIDON ESTABILIDAD AL CALOR ESTABILIDAD AL CALOR REDUCCION AZUL METILENO OBSERVACIONES MUESTRA __________________________ ANALISTA __________________________ SUPERVISOR ______________________ JEFE CONTROL CALIDAD