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EFECTOS NEUROPROTECTORES DE LA ADMINISTRACION SISTEMICA DE LKINURENINA Y PROBENECID EN UN MODELO DE DAÑO HIPOCAMPAL POR
AMILOIDE BETA
Carrillo-Mora Paula, Colín-Barénque Laurab, Méndez Cuesta Luis A.a, Santamaría
Abela.
a
Laboratorio de Aminoácidos Excitadores. Instituto Nacional de Neurología y
Neurocirugía. Secretaria de Salud.
b
Laboratorio de Neuromorfología FES Iztacala UNAM
RESUMEN:
INTRODUCCION: Uno de los procesos fisiopatológicos implicados en el origen de la
enfermedad de Alzheimer es la producción excesiva y acumulación del péptido
amiloide beta (Aβ) en el tejido cerebral. El Aβ es un péptido de 39-42 aminoácidos que
experimentalmente ha demostrado poseer diversas propiedades tóxicas, una de las
más importantes es la excitotoxicidad ya que el Aβ es capaz de incrementar la
actividad de los receptores NMDA (NMDAr). El acido kinurénico (KYNA) es un
metabolito endógeno del triptofano (vía de la kinurenina= VK) que ha demostrado ser
un antagonista eficaz del sitio co-agonista de glicina del NMDAr. La fuente celular más
importante de KYNA en el Sistema Nervioso son las celulas gliales, que lo sintetizan a
partir de precursores como la L-kinurenina o el triptofano. Existen varios estudios que
han demostrado que la administración sistémica de Probenecid (PROB), que inhibe la
eliminación del KYNA del tejido nervioso; y de L-kinurenina (L-KYN), precursor
metabólico que atraviesa con facilidad la BHE, aumentan de forma significativa los
niveles cerebrales de KYNA, lo cual se ha relacionado con efectos neuroprotectores
en distintos modelos de toxicidad estriatal. El objetivo del presente trabajo fue
demostrar si la manipulación farmacológica de la VK es neuroprotectora en un modelo
in vivo de toxicidad por Aβ hipocampal en rata. METODOLOGIA: Se utilizaron ratas
Wistar macho de entre 250-280g de peso y se formaron 9 grupos experimentales con
7-8 animales cada uno: 1) Control: Solución salina intra-hipocampal bilateral (IHB) e
intraperitoneal (IP); 2) Aβ IHB + Solución salina IP; 3) Aβ IHB + PROB IP; 4) Aβ IHB +
L-KYN IP; 5) Aβ IHB + PROB + L-KYN IP; 6) Aβ IHB + MK-801 IP; 7) MK-801 IP; 8)
PROB IP; y 9) L-KYN IP. Las dosis utilizadas de los fármacos fueron las siguientes:
PROB 50mg/Kg/día, L-KYN 75mg/Kg/día, MK-801 0.8mg/Kg/día, todos administrados
durante 7 días. El Aβ 25-35 soluble (1μL 100μM) se administró por vía estereotáxica
en el sector CA1 de ambos hipocampos. La evaluación histológica del sector CA1 de
ambos hipocampos (Kluver-Barrera e inmunohistoquímica vs. GFAP) se realizó 28
días después de la lesión estereotáxica. RESULTADOS: En el grupo de Aβ se
observó una disminución significativa del número de neuronas viables contenida en el
estrato piramidal (p<0.001); reducción que también se observó en el grupo de Aβ + LKYN (p<0.01). En el resto de los grupos se observó una preservación del número de
neuronas viables respecto al control. Al contabilizar las neuronas degeneradas se
observó un incremento significativo en el grupo de Aβ y en el grupo de Aβ + MK-801
(p<0.001 y p<0.05 respectivamente); en el resto de grupos no existió diferencia
respecto del control. Al obtener el índice de neuronas degeneradas/totales, se observó
que todos los grupos en los que se administró Aβ presentan un incremento del
porcentaje de células degeneradas respecto de las totales contenidas en el área
estudiada (300μm): El análisis cuantitativo de células reactivas el GFAP, demostró un
incremento significativo de los astrocitos en el sector CA1 del hipocampo en el grupo
de Aβ (p<0.001), y una reducción significativa de la glia reactiva en el grupo del Aβ +
MK-801 (p<0.05). CONCLUSIONES: La administración sistémica de L-KYN y PROB
tiene efectos neuroprotectores significativos en las neuronas del estrato piramidal de
CA1 del hipocampo en el modelo de toxicidad por Aβ.