Laboratorio de Fisiología - Fisiología Animal Ambiental Consumo de oxígeno en animales aéreos Objetivos Los objetivos de esta parte de la práctica son: 1. Medir el consumo de oxígeno en homeotermos. 2. Medir el efecto de la temperatura sobre el consumo de oxígeno en un homeotermo. Introducción Prácticamente en todos los animales la tasa de consumo de oxígeno depende del peso corporal. En esta experiencia se puede comprobar que el consumo de oxígeno total es mayor en animales grandes que en pequeños, mientras que la tasa de consumo por unidad de peso corporal es mayor, generalmente, en animales pequeños que en los grandes. Asimismo, el consumo de oxígeno es mucho mayor en homeotermos que en los poiquilotermos de tamaño similar. También sirve indirectamente para medir la producción de calor metabólico, considerando que es principalmente aeróbico. Para determinar la cantidad de un gas presente en una mezcla gaseosa (ej. atmósfera) se utilizan detecto¬res sensibles a alguna propiedad física del gas. Algunos aparatos están orienta¬dos a la medida de una propiedad específica de un gas concreto, son analizadores de gases específicos. Algunos gases, como el oxígeno y el óxido nítrico, son atraídos por los campos magnéticos. Esta propiedad se denomina paramagnetismo. También pueden emplearse sondas de oxígeno para medio aéreo (VTT). El analizador mide la concentración de oxígeno en la muestra del gas que le llega. Material Consola VTT: 1 de 3 Laboratorio de Fisiología - Fisiología Animal Ambiental Cámaras respiratorias: Se pueden utilizar (igual que en el medio acuático) sistemas cerrados o abiertos: Sistema cerrado: consta de un recipiente con un volumen de aire determinado, que contiene también cal sodada (para absorber el anhídrido carbónico y la humedad de la respiración); la disminución de la presión parcial de oxígeno - en función del tiempo - se puede medir con la consola VTT y permite calcular el consumo de oxígeno. En un sistema abierto se pueden realizar medidas continuas y durante mucho tiempo. Se requiere una bomba que proporcione un flujo de aire que se regulará con una válvula y se medirá con un flujímetro; una cámara en la que se coloca el animal (que debe mantener una atmósfera uniforme, sin espacios muertos) y un analizador de oxígeno (sonda galvanométrica conectada a una consola VTT)). Puede completarse el conjunto con un termó¬metro o termopar en la cámara, para medir la tempera¬tura. Balanza (para pesar al animal, con precisión de décimas de gramo). Protocolo experimental Montaje del sistema: - Encender la consola; conectar las sondas de oxígeno y de temperatura a la consola. - Calibrar la sonda de oxígeno ajustando con el botón del adaptador del oxímetro hasta 20,9 %. Es preciso asegurarse que el conmutador del adaptador está en posición de medida en aire (% = mL por cada 100 mL). - Entrar al menú de aplicación (F1) y seleccionar con la tecla (↓) el programa "Respi". - Escoger el tipo de animal que se utilizará (en el presente caso, un pequeño mamífero) como indica la figura (VTT-pantalla.gif). - Escoger Conten. O2) para medir el contenido de oxígeno y después pulsar OK. - Introducir la sonda de oxígeno y la sonda de temperatura por los orificios correspondientes del recinto; colocar el animal de experimentación (pesado previamente o al final de la experiencia) dentro del recipiente y cerrar la cámara tapando todos los agujeros que quedan con los tapones de goma. Obtención de datos Dejar unos 30 segundos antes de iniciar la captación de datos, con la finalidad de que la sonda de oxígeno se estabilice. Comenzar la experiencia pulsando "Mem." Se recomienda una duración de la experiencia de 10 minutos. La visualización del contenido de oxígeno puede realizarse de diferentes maneras (gráfico, tabla) pulsando la tecla azul. Finalizar la obtención de datos pulsando "Mem". Podrán grabarse los resultados, ser transferidos a un PC, visualizarse y manipularse según se explica en el Anexo. Propuesta de experiencias Estudiar los efectos de la temperatura: calor y frío en la tasa metabólica de los 2 de 3 Laboratorio de Fisiología - Fisiología Animal Ambiental animales: - Se pueden conseguir temperaturas de 8°C-10°C colocando dentro de un recipiente con hielo picado. Deberá esperarse que la temperatura del interior del recipiente (registrada con la sonda de temperatura) se estabilice a la temperatura deseada. - Se pueden conseguir temperaturas cercanas a los 30°C-35°C colocando el respirómetro sobre una placa calefactora y con una lámpara cerca del recipiente. Anótense los cambios que se observen a las diferentes temperaturas: acti¬vidad y postura, piloerección, etc. El consumo de oxígeno depende en gran manera de la activi¬dad; por ello se ha de procurar que las medidas correspondan a periodos en que el animal está en reposo, para que sean compara¬bles. Para facilitar la experimentación, unos días antes se han introducido los animales en las cámaras durante cortos periodos de tiempo para conseguir su adaptación a las condiciones experimen¬tales. Resultados 3 de 3