laboratorio # 5: microorganismos, infecciones nosocomiales

LABORATORIO # 5:
MICROORGANISMOS,
INFECCIONES NOSOCOMIALES
Y EL AMBIENTE
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magenes/entfaec.jpg
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REPASO…
¿Cuántos tipos de tinciones discutimos en el
laboratorio?
La tinción Gram, ¿de que tipo es?
¿Utilizando la tinción Gram, que color espera
observar en una bacteria Gram +, y en una
Gram -?
¿Cuál es la función del yodo como agente
mordante?
Según la practica del laboratorio ¿Cuáles fueron
las diferencias entre Serratia marcescens y
Staphylococcus aureus al observar la laminilla?
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com/d/11428-1/BiologyBacteria.jpg
Repaso:
Tinciones
Resumen resultados de tinciones
Tinción Gram (estructura de pared celular)
Tinción de esporas
Tinción de cápsula
Objetivos
Definir
y discutir sobre las enfermedades
nosocomiales
Conocer qué son las enterobacterias y la
importancia de éstas
Utilizar indicador de fluorescencia para
identificar la presencia de microorganismos
especificos
Enfermedades nosocomiales
Se adquieren durante la estadia del paciente en el
hospital (intrahospitalarias), es decir, no son la
causa del ingreso.
Se asocian a instrumentación, procedimientos
invasivos, pacientes graves e inmunosuprimidos.
Pseudomonas aeruginosa
Enterococcus faecium
Enterococcus faecalis
MIEMBROS DE LA
FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE
Citrobacter sp.
Enterobacter sp.
Escherichia sp.
Klebsiella sp.
Morganella sp.
Proteus sp.
Providencia sp.
Salmonella sp.
Serratia sp.
Shigella sp.
Yersinia sp.
Salmonella typhimurium
Salmonella enteritidis
Yersinia pestis
Shigella dysenteriae
Serratia
marcescens
Klebsiella pneumoniae
Familia Enterobacteriaceae
Miembros de la microbiota intestinal de la mayoría de
animales y humanos.
Son bacterias que abundan en el agua, suelo y
vegetación en descomposición.
Son los patógenos humanos más comunes
Entre sus características:
Cocobacilos o bacilos
Anaerobios facultativos (crece con o sin oxigeno)
Gram negativos
No esporulados
Algunos son mótiles (flagelos perítricos)
Algunos son capsulados
Poseen pilis
Enterobacterias: Estructura antigénica
•El conocimiento detallado de la estructura
antigénica resulta de utilidad para estudios
epidemiológicos y en la formulación de vacunas
Se distinguen tres tipos de
antígenos:
•AgO ó antígeno somático
constituido por el
lipopolisacárido (LPS) de
la membrana externa.
•H ó antígeno flagelar.
•K ó antígeno capsular.
Enterobacterias: Factores de virulencia
•Virulencia
Virulencia: Grado de patogenicidad de un
microorganismo.
•Estructuras le brindan capacidad de sobrevivencia
al microorganismo.
Enterobacterias: Factores de virulencia
Endotoxinas- (LPS)
Su actividad depende del componente lípido A
del lipopolisacárido. Las endotoxinas son liberadas por
lisis o en forma de burbujas de la membrana externa,
impregnadas con LPS.
Cápsula
Los protege de la fagocitosis. repelen la superficie
hidrofóbica de la célula fagocítica.
Sistema de secreción de tipo III
Aproximadamente 20 proteínas que facilitan la secreción
de factores de virulencia en bacterias hacia sus
huéspedes.
Métodos de clasificación
Enterobacteriaceae
patógenos se clasifican en 3
grupos:
Coliformes
•Fermentan lactosa, microbiota normal y
podrían ser patógenos oportunistas.
Oportunistas* (no coliformes)
•Provoca una enfermedad cuando el
sistema inmunológico está débil.
•No fermentan lactosa
Patógenos verdaderos
Coliformes Oportunistas
Algunas características:
Aeróbicos o anaeróbicos facultativos
Bacilos Gram Fermentadores de lactosa
• Producción de gas a altas temperaturas en medio
con lactosa
Colonizan el tracto intestinal de animales y humanos.
La presencia de coliformes en el agua es indicativo de
impureza y pobre tratamiento de desagües.
Ejemplos:
Escherichia coli
Klebsiella spp.
Klebsiella pneumoniae
Serratia spp.
Enterobacter spp spp, Hafnia y Citrobacter spp
Escherichia coli
El coliforme más común y más estudiado.
Cepas virulentas tienen genes localizados en un
plásmido virulento que le permite a la bacteria
colonizar el tejido humano.
Provoca gastroenteritis por exotoxinas
Causa más común de infecciones
nosocomiales en el tracto
urinario.
Escherichia coli O157:H7
Es
la cepa más patogénica
Causa diarrea, colitis hemorrágica, y síndrome
hemolítico urémico (un desorden severo en
riñones).
Las epidemias están mayormente asociadas a
carne de res no cocida o a leche no
pasteurizada.
Klebsiella spp.
Algunas características:
Encontrado en el sistema digestivo y respiratorio de
humanos y animales
Causa infección oportunista
Produce cápsula
Klebsiella pneumoniae especie más patógena.
Neumonía
Involucrada en bacteremia, meningitis, infección de heridas
Klebsiella pneumoniae
Serratia spp.
Pigmento rojo (temperatura ambiente).
Prodigiosina
Puede crecer en catéteres, solución salina y otros
utensilios de hospitales.
Puede causar infecciones en el tracto urinario y
respiratorio a pacientes inmunocomprometidos.
Difícil de tratar por resistir varios antibióticos.
Serratia marcescens
TSA
Enterobacter, Hafnia y Citrobacter
Encontrados en suelo, agua, vegetación y
desagües.
Reside en sistema digestivo de humanos y
animales.
Patógenos oportunistas.
Infecciones nosocomiales en pacientes
inmunocomprometidos.
Resistentes a antibióticos.
Enterobacter spp.
Oportunistas (No coliformes)
Enterobacteriaceae
Incluyen varios patógenos oportunistas
Ej. Proteus spp.
Gram -, anaerobio facultativo
Proteus mirabilis es la especie más común asociada a
enfermedades
Infección urinaria en pacientes que tiene un catéter por
mucho tiempo
Su infección puede inducir la piedra en riñón
Resistente a muchas drogas con poder antimicrobiano.
Proteus en EMB Agar
Patógenos verdaderos
Enterobacteriaceae
Miembros importantes de este grupo son
patógenos debido a numerosos factores de virulencia.
Sistema de secreción Tipo III
Permite la entrada de proteínas que inhiben fagocitosis
Rearregla el citoesqueleto de células eucariotas
Induce apoptosis (muerte).
Algunos ejemplos:
Salmonella spp.
Salmonella spp.
Gram-, mótil, bacilo
Intestino de heces fecales de aves, reptiles y mamíferos.
Se adquiere por consumo de alimentos contaminados.
Dos patógenos importantes:
S. typhimurium-causa salmonelosis
S. typhi-causa fiebre tifoidea
Yersinia spp.
Patógeno de animales.
Generalmente relacionado a
cerdos.
Tres especies importantes:
Y. enterocolitica
Consumo de alimentos
Inflamación de intestino
Infecciones gastrointestinales
Y. pseudotuberculosis
Similar a Y. enterocolitica pero la inflamación
intestinal es menos severa.
Coliformes totales vs. fecales
Coliformes Totales- el grupo de coliformes en
general (de origen fecal y no fecal). Se utilizan en
aguas tratadas para observar si ocurrió
contaminación.
Coliformes Fecales- son un subgrupo de los
coliformes totales, son de origen intestinal. Se
denominan termotolerantes por su capacidad de
soportar temperaturas más elevadas.
“Todos los coliformes fecales son totales
pero no todos los coliformes totales son
fecales”
Método rápido para identificar coliformes: Colilert
Detecta la presencia de coliformes totales y fecales
simultáneamente.
Consiste en añadir a un frasco con 100 ml de muestra
el medio en polvo “Pouch” e incubar a 37°C/24hrs
.
Resultados:
Si la muestra se torna amarillo intenso contiene
coliformes totales.
Si emite fluorescencia al exponerla en luz UV hay
presencia de E. coli (coliforme fecal).
Familia Enterococcaceae
Género Enterococcus:
Cocos Gram +
Aerobio facultativo
Prefiere oxigeno pero esta bien sin él
Toleran altas temperaturas y altas concentraciones de
sal
Se encuentran de manera natural en muchos
organismos como parte de su flora intestinal
E. faecalis y E. faecium en humanos
Agencia estatal y federal de Protección Ambiental
lo utilizan para monitorear la calidad de agua en
playas recreativas.
Método rápido para identificar enterococos: Enterolert
Similar al método de Colilert con algunas diferencias:
Identifica microorganismos del género Enterococcus
Temperatura de incubación es a 41°C/24hrs
Al exponer las muestras en luz UV:
Fluorescencia=Positivo (Presencia de enterococos)
No Fluorescencia=Negativo
Observar
fluorescencia en
UV
24hrs.
EJERCICIO PRÁCTICO
Paso #1: Lavado de Manos
RECAPITULACIÓN…
¿Qué es una enfermedad nosocomial?
Algunos factores de virulencia de las bacterias
son…
¿Qué son los coliformes, coliformes oportunistas y
patógenos verdaderos?
Un método rápido para identificar coliformes lo
es...
¿¿Preguntas??...