Estudio Preliminar del Timo Humano en Diferentes Etapas del

Estudio Preliminar del Timo Humano
en Diferentes Etapas del Desarrollo
Piuzzi, María L. - Cerdera Noguera, Américo - Soto de Ferrini Susana
Viudes, Laura - Thompson, Carlos - Rossi, Luis
Cátedra l de Histología y Embriología . Facultad de Medicina . U.N.N.ESargento Cabral 2001 (3400) Corrientes - Argentina
Tel.: +54 (03783) 439624
ANTECEDENTES
El timo es una glándula clave en la constitución del sistema inmunológico por ser el órgano de maduración de
los linfocitos T; células imprescindibles por su actividad en la inmunidad celular .Se desarrolla a partir de la
5ª semana, de esbozos del intestino faríngeo en forma de rudimento epitelial de origen endodérmico . Células
oriundas del hígado y médula ósea colonizan el órgano. A partir de allí, el desarrollo es progresivo, llegando a
su máxima expresión aproximadamente a los 10 (diez) años; para luego comenzar a involucionar en la pubertad ,momento en que el órgano disminuye su volúmen y su parénquima es reemplazado parcialmente por
tejido adiposo .
Desde el punto de vista histológico es un órgano encapsulado , bilobulado . La cápsula presenta tejido conectivo denso, irregular que envía tabiques a los lóbulos y los subdivide en lobulillos incompletos. Cada lobulillo
presenta corteza y una médula común, estroma retículo epitelial y un parénquima predominantemente linfocitario .
En la zona cortical se agrupan densamente la mayoría de los timocitos inmunoincompetentes en fase de proliferación, mientras que en la médula se ubican los inmunocompetentes, lo que implica que existe un gradiente
de diferenciación de la corteza a la médula.
Contiene diferentes tipos celulares de acuerdo a su estructura , función y fenotipo:
-Células epiteliales corticales :
-Células epiteliales reticulares de tipo I: separan la corteza de la cápsula de tejido conectivo y a las trabéculas ,y rodean a los elementos vasculares de la corteza .Los núcleos polimorfos y nucleolos evidentes.
- Células epiteliales reticulares de tipo II :localizadas en la corteza media ,poseen largas proyecciones a
manera de vainas que dividen la corteza tímica en compartimientos pequeños llenos de linfocitos. Los núcleos
son grandes, pálidos y con poca heterocromatina. El citoplasma es pálido y con abundantes tono-filamentos.
- Células epiteliales reticulares de tipo III :localizadas en la parte profunda de la corteza y a nivel de la
unión cortico-medular, con amplias proyecciones a manera de vainas que forman compartimentos llenos de
linfocitos. Permiten aislar corteza y medula. Citoplasma y núcleos más densos .
La médula ,de color mucho más claro que la corteza, contiene una población de linfocitos no tan profuso y
gran número de células epitelio- reticulares (interdigitadas).
-Células epiteliales reticulares de tipo IV : se encuentran en la región cortico-medular. Los núcleos presentan cromatina burda .El citoplasma es oscuro y rico en tono-filamentos.
-Células epiteliales reticulares de tipo V: forman el citorretículo de la médula. Núcleos polimorfos, bien
definidos y cromatina perinuclear evidente.
-Células epiteliales reticulares de tipo VI : presentan núcleo eucromático con un nucleólo prominente,
citoplasma pálido. Estas células forman estructuras típicas y características del timo: los corpúsculos de
Hassall , son de aspecto redondeado, compuestos por células que se disponen conformando láminas concéntricas, las que pueden presentar necrosis o queratinización.
MATERIAL Y MÉTODOS
- Se obtuvieron timos humanos de individuos en distintas etapas del desarrollo, provenientes del laboratorio
privado de anatomía patológica del Dr. Cerdera Noguera y de la morgue judicial .
-Se los clasificaron en 3 grupos etarios diferentes :
Estrato A : Nacimiento hasta 5 años.
Estrato B : Niño de 5-10 años
Estrato C : Adulto
- Se los fijó en formol tamponado durante 48 hs
- Se procesaron siguiendo la técnica histológica de rutina.
Se obtuvieron seis (6) cortes en forma aleatoria de cada taco. El espesor de cada uno de ellos fue de 5 a 7
micras.
- Se realizó la tinción de los cortes utilizando la técnica hematoxilina - eosina, observando con microscopio
óptico las preparaciones.
-Se seleccionó el más representativo de cada estrato y con ellos se realizaron técnicas de inmunoperoxidasa
utilizando como sistema de detección: avidina-biotina y como revelador diaminobencidina. Los anticuerpos
monoclonales utilizados para la determinación de los distintos tipos celulares fueron:
UCHL-1 (CD45RO): marcador de timocitos.
CD68 : marcador de histiocitos.
AE1-AE3 (CK): marcador de citoqueratinas en células epiteliales.
S-100: marcador de células retículo-epiteliales e histiocitos.
ACL: antígeno leucocitario común.
RESULTADOS
Los resultados obtenidos por medio de la observación microscópica fueron:
-Estrato A : niño de 10 (diez) meses, sano (muerte accidental). Con la técnica de hematoxilina- eosina se
observa una muy delgada cápsula de tejido conectivo que emite gran cantidad de trabéculas .La población
linfocitaria es abundante y se notan los distintos estadíos de proliferación de éstas células.
Hay una notoria definición entre la zona cortical y medular . Se evidencian las células retículo-epiteliales, con
las características nucleares y ubicación, descriptas en el órgano . Se visualizan corpúsculos de Hassall en su
mayor parte con la estructura conservada y sobresalen algunos con aspectos pseudoquísticos.
Con la técnica de inmunoperoxidasa se observó: positividad en el componente retículo-epitelial y en corpúsculos de Hassall con AE1 - AE3, en linfocitos presentes con ACL y UCHL-1 (CD45RO), en histiocitos con
CD 68 y S-100 y en células reticulo-epiteliales interdigitadas también con S-100
-Estrato B : niño de 10 (diez) años , sano (muerte accidental). Con la técnica de hematoxilina - eosina se
observa que el timo presenta una estructura conservada , donde se destaca predominio de la cortical sobre la
medular, con células linfocitarias
proliferantes. En la corteza, se visualizan células reticulares tipo I y de tipo II. Ambas conservan las características histológicas descriptas anteriormente.
Se observan numerosas formaciones pseudoquísticas bien delimitadas, de hasta 300 (trescientos) micrómetros conteniendo material amorfo ; en muchos de ellos aparecen focos de calcificación distrófica y escasos
corpúsculos de Hassall típicos ( células reticulares de tipo VI).
Con la técnica de inmunoperoxidasa se observó: positividad en el componente retículo-epitelial y en corpúsculos de Hassall con AE1 - AE3, en linfocitos presentes con ACL y UCHL-1 (CD45RO), en histiocitos con
CD 68 y S-100 y en células reticulo-epiteliales interdigitadas también con S-100
-Estrato C: hombre de 64 (sesenta y cuatro) años de edad, que presentó una pericarditis crónica. Se distinguen islotes de tejido tímico con corteza y medula diferenciadas. Con la técnica de hematoxilina - eosina, se
puede distinguir el órgano con un marcado reemplazo adiposo; zonas de tejido conectivo denso y otras de
tejido conectivo laxo, (trabéculas), éstas, en relación directa con los adipocitos y delimitando la zona cortical
En. las trabéculas se pueden observar células retículo-epiteliales , lo mismo que en la zona medular. La población linfocitaria está conservada en relación con la escasa cantidad de parénquima tímico. La población macrofágica es abundante.
Escasos corpúsculos de Hassall pequeños y compactos ; que conservan su estructura laminar concéntrica .
Con la técnica de inmunoperoxidasa se observó: positividad en el componente retículo-epitelial y en corpúsculos de Hassall con AE1 - AE3, en linfocitos presentes con ACL y UCHL-1 (CD45RO), en histiocitos con
CD 68 y S-100 y en células reticulo-epiteliales interdigitadas también con S-100
CONCLUSIONES
- La celularidad disminuye y es reemplazada por tejido adiposo en relación con la involución del órgano,
quedando corpúsculos de Hassall rudimentarios pero con respuesta positiva al inmunomarcado (AE1AE3).Disminuyen también las células reticulares interdigitadas .
-La presencia de los pseudoquistes encontrados , con marcada necrosis central , constituyen un aspecto morfológico de la involución de los corpúsculos de Hassall en las distintas edades..
-Si suponemos que los corpúsculos de Hassall, son derivados de las células interdigitadas, que algunos autores las consideran nueroectodérrmicas ( derivadas de la cresta neural) y que se han marcado como tales en
nuestro laboratorio ¿porque no se marcaron con S-100 los corpúsculos de Hassall , cuando lo lógico es que
sean S100 positivos; interrogante que nos abren expectativas para nuevas líneas de investigación .
Si bien histológicamente hemos encontrado marcadas diferencias en los timos de distintas edades, coincidentes con otros trabajos realizados , no encontramos con las técnicas de inmunomarcación diferencias significativas; por lo que deducimos que el timo aún en etapa involutiva, conserva potencialmente su importancia
funcional.
BIBLIOGRAFÍA
-Tratado de Histología D.W. Fawcett - William Bloom 12ª Edición .1995
-Histología Texto y Atlas Leslie P. Gartner - James L. Hiatt . 1997
-Histología Texto y Atlas Color Ross - Romrell - Kaye 3ª Edición .1998
-Chromogranin A immunoreactivity in epithelial cells of the thymus. Ginda WJ, Gratzl M, Mayerhofer A,
Warchol JE. Folia Histochem Cytobiol 1996;34(2):91-3
-The role of zinc in pre- and postnatal mammalian thymic immunohistogenesis. Bodey B, Bodey B Jr, Siegel
SE, Kaiser HE .In Vivo 1998 Nov-Dec;12(6):695-722
-Identification of neural crest derived cells within the cellular microenvironment of the human thymus employing a library of monoclonal antibodies raised against neuronal tissues. Bodey B, Bodey B Jr, Siegel SE,
Kemshead JT, Kaiser HE. In Vivo 1996 Jan-Feb;10(1):39-47
-On the size of Hassall's corpuscles in human fetuses. Liberti EA, Fagundes TP, Perito MA, Matson E, Konig
Junior B. Bull Assoc Anat (Nancy) 1994 Sep;78(242):15-8
Properties of human thymic B cells.Spencer J, Choy M, Hussell T, Papadaki L, Kington JP, Isaacson PG.
Immunology 1992 Apr;75(4):596-600
-Histological changes of the thymus in the aged.Zhao XY, Wang TL. Chung-hua Ping Li Hsueh Tsa Chih
1990 Jun;19(2):141-3.
-Immunoglobulins in Hassall's corpuscles of the human thymus. Henry L, Anderson G. J Anat 1990
Feb;168:185-97
-The cytoarchitecture of the human thymus detected by monoclonal antibodies.
Izon DJ, Boyd RL. Hum Immunol 1990 Jan;27(1):16-32
-Immunohistochemical and histometrical studies of the human thymus with special emphasis on age-related
changes in medullary epithelial and dendritic cells.Nakahama M, Mohri N, Mori S, Shindo G, Yokoi Y, Machinami R. Virchows Arch B Cell Pathol Incl Mol Pathol 1990;58(3):245-51
-K21-antigen: a molecule shared by the microenvironments of the human thymus and germinal centers.Imami
N, Ladyman HM, Vincents B, al-Tubuly A, Freysdottir J, Sedibane ML, Taylor-Fishwick DA, Foxwell BM,
Ritter MA. Dev Immunol 1998;6(1-2):41-52
-Immuno-electron microscopy of the thymic epithelial microenvironment.Von Gaudecker B, Kendall MD,
Ritter MA. Microsc Res Tech 1997 Aug 1;38(3):237-49
-Phenotypic and immunohistological analyses of the human adult thymus: