RESUMEN Bacterias patógenas como Salmonella

Caracterización Fenotípica y Genotípica de Estirpes de
Salmonella Choleraesuis
Aisladas de Ambientes Marinos.
Flores Aguilar, Lidia Escolástica.
RESUMEN
Bacterias patógenas como Salmonella, habitantes naturales del tracto intestinal de diversos
animales incluido el hombre, están comúnmente presentes en efluentes de desagües
principalmente domésticos que desembocan al mar en forma directa o indirecta a través de
ríos y acequias, llegando a constituir parte de la flora contaminante del litoral limeño y de los
alimentos provenientes del mismo. La presencia de Salmonella está determinada por las
condiciones biológicas y fisicoquímicas del ambiente acuático, que permiten su
supervivencia, desarrollando mecanismos de adaptación como entrar a un estado de “viable
no cultivable”, cambios metabólicos o alteraciones genómicas en respuesta a condiciones
ambientales adversas. Debido a la importancia que tiene Salmonella en la incidencia de
enfermedades gastrointestinales, se hace necesaria su vigilancia en el medio ambiente
acuático para lo cual es preciso desarrollar estudios que faciliten el aislamiento, identificación
y diferenciación de estirpes patogénicas en ambientes naturales.
Muestras de agua de mar tomadas a lo largo del litoral limeño, durante los meses de
marzo, abril y mayo del 2000, fueron procesadas para el aislamiento de Salmonella usando el
método de filtración en membrana, pre-enriquecimiento en Agua Bufferada Peptonada;
enriquecimiento selectivo en caldo Tetrationato, Selenito Cistina y Rappaport-Vassiliadis y
posterior aislamiento selectivo en Agar XLD, Sufito de Bismuto, BPLS, SS, Hektoen y XLD.
La identificación bioquímica se realizó mediante las pruebas de Oxidasa, Catalasa, Indol,
Urea, TSI, LIA, Citrato y RM-VP. Para la identificación serológica se utilizaron sueros
polivalentes agrupadores (A, B, C1 , C2 , D, E1 y E4 ), suero capsular Vi y flagelares de
Salmonella choleraesuis.
Se seleccionaron 203 estirpes oxidasa negativos, catalasa positivos, de las que 18 fueron
identificadas como Salmonella choleraesuis, de las cuales 10 cepas fueron del serogrupo C1 y
serotipo Salmonella Djugu y 8 del serogrupo D y serotipo Salmonella Enteritidis, una con
bioquímica típica y 2 cepas atípicas incluidas en el serogrupo B de Salmonella choleraesuis, 3
cepas rugosas y 24 cepas con bioquímica típica que no aglutinaron con el suero polivalente
empleado.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca
Central UNMSM
Caracterización Fenotípica y Genotípica de Estirpes de
Salmonella Choleraesuis
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Flores Aguilar, Lidia Escolástica.
Los perfiles de proteínas totales obtenidos mediante PAGE-SDS señalan diferencias de las
cepas entre e intra serovar luego del análisis estadístico.
El ADN cromosómico de los serotipos identificados fueron cortados con endonucleasas
de restricción e hibridados con una sonda específica para el gen rDNA16S marcada por
quimioluminiscencia. Se encontraron 4 ribotipos (RB, RC 1 , RC 2 y RD), que correspondieron
a cada serovar de Salmonella choleraesuis.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca
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Caracterización Fenotípica y Genotípica de Estirpes de
Salmonella Choleraesuis
Aisladas de Ambientes Marinos.
Flores Aguilar, Lidia Escolástica.
SUMMARY
Pathogenic bacteria like Salmonella, natural inhabitants of the intestinal tract of diverse
animals included the man, they are commonly present in effluents of mainly domestic
drainages that discharge into the sea in direct form or through rivers and canals, ending up
constituting part of the contaminate flora of the Lima´s coast and of the foods coming from
the same one. Their presence is determined by the biological and physico chemical conditions
of the aquatic environment that allow its survival, developing mechanisms of adaptation like
to enter to state of “viable but no culturable”, metabolic and genomic changes in answer to
adverse environmental conditions. Due to the importance that Salmonella has in the incidence
of gastrointestinal illnesses, it becomes necessary their surveillance in the aquatic
environment for that which is necessary to develop studies that facilitate the isolation,
identification and differentiation of parthogenic strains in natural ecosystems.
Seawater samples were taked along the Lima´s coast, during the months of march, april
and may of 2000. For the isolation the membrane filtration method was used, pre-enrichment
in Buffered Peptoned Water; selective enrichment in Tetrathionate, Selenite Cystine and
Rappaport-Vassiliadis broths and selective isolation in XLD, Bismuth Sulfite, BPLS, SS,
Hektoen, XLD agars. In the biochemical identification Oxidasa, Catalasa, Indole tests were
used and it was cultivated in Urea, TSI, LIA, Citrato, RM-VP media. For the serologic
identification grouping polyvalents (A, B, C1 , C2 , D, E1 and E4 ) and flagellars sera of
Salmonella choleraesuis were used.
203 strains negative oxidase and positive catalase were selected, of which 18 were
identified as Salmonella choleraesuis, inside those that 10 strains belonged to C1 serogroup
and Salmonella Djugu serotype, and 8 to D serogroup and Salmonella Enteritidis serotype,
one with typical biochemistry and 2 atypical strains typing inside the B serogroup of
Salmonella choleraesuis, 3 rough strains and 24 with typical biochemistry that they didn't
agglutinate with the polyvalent serum used.
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Caracterización Fenotípica y Genotípica de Estirpes de
Salmonella Choleraesuis
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Flores Aguilar, Lidia Escolástica.
The profiles of total proteins obtained by means of SDS-PAGE point out differences of
the strains inter and intra serovar after statistical analyses.
The chromosomal DNA of the identified serotypes was cut with restriction endonucleases
and hibridized with a specific probe for the gene rDNA16S marked by chemioluminiscens.
They were 4 ribotypes (RB, RC 1 , RC 2 y RD), that corresponded to each serovar of Salmonella
choleraesuis.
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y Biblioteca
Central UNMSM