Informe Final VIUSID 2.4 k CERDOS 30 Abril 2011 26

Anuncio
EVALUACION DE LA EFICACIA DE Viusid Vet Polvo* SOBRE LOS PARAMETROS PRODUCTIVOS E
INMUNOLOGICOS EN CERDOS EN ENGORDA
Antecedentes.
La producción porcina en países industrializados y del tercer mundo, ha cambiado en los últimos años, lo cual ha
generado que grandes grupos de animales se alojen bajo condiciones intensivas, con poblaciones de cerdos muy
densas, lo que aumenta la incidencia y facilita el contagio de enfermedades infecciosas dentro de la piara, elevando la
mortalidad y produciendo una deficiente ganancia de peso, mala conversión alimenticia, aumento en el número de días
en que los cerdos llegan al rastro, y un excesivo gasto en medicamentos. Todo lo anterior se traduce en pérdidas
económicas.
En México al igual que en otros países las enfermedades infecciosas representan la principal causa de muertes en los
cerdos y, el uso indiscriminado de antibacterianos, ha fomentado la aparición de cepas bacterianas resistentes como
consecuencia del uso inapropiado de antibacterianos, facilitando el establecimiento y prevalencia de enfermedades
infecciosas.
Por lo anterior, una de las alternativas para mejorar los parámetros productivos e inmunes, es el empleo de agentes o
preparados inmunoestimulantes de origen no antibiótico, que a la vez mejoren los parámetros productivos sin la
restricción de la presencia de residuos de antibacterianos que conlleva al establecimiento de los tiempos de retiro de
estas sustancias. Tal es el caso del Viusid-Vet Polvo*.
Viusid-Vet Polvo*es un preparado nutricional, a base de antioxidantes, vitaminas, oligoelementos y, un principio activo
producto de la extracción del regaliz (ácido glicirricínico) con actividades antivirales potenciales.
La activación molecular de sus principios activos, incrementa la actividad de las funciones biológicas de los mismos
(efecto antiviral y antioxidante), sin modificación de la estructura molecular de los principios activos, asegurando
excelente funcionamiento en mejorar los mecanismos de un aumento significativo de las defensas del organismo
Por lo anterior, se consideró conveniente realizar una prueba de eficacia de Viusid-Vet Polvo* en lechones de
engorda para evaluar su efecto en los parámetros productivos y producción de inmunidad humoral (anticuerpos) hacia
la enfermedad de influenza porcina.
Material y métodos.
Lugar:
El estudio se llevó a cabo en el Centro de Enseñanza e Investigación en Producción Porcina (CEIEPP) perteneciente a
la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la UNAM (Universidad Nacional Autónoma de México),
localizado en Jilotepec, Edo de México.
Especie: Se utilizaron 40 lechones recién destetados machos y hembras Duroc-Landrace de aproximadamente 7 Kg,
los cuales se dividieron en dos grupos de 20 lechones cada uno.
Producto: Viusid-Vet Polvo*, producto comercial de Catalysis, distribuido por Laboratorio Dermaceutical México, S. A.
de C. V. en presentación de bolsa de 5 Kg metalizado para aplicación vía alimento. Dosis 2,400 g/ tonelada de
alimento.
Alimentación de los Grupos:
Grupo Viusid Vet Polvo: Previa prueba de eficiencia de mezclado, se utilizó alimento preparado en la misma granja
experimental en presentación en harina manejado por etapas: durante 5 semanas que duró toda la etapa desde
destete hasta la etapa de crecimiento con un consumo estimado de 1.4 toneladas de alimento y 8 semanas de la etapa
de finalización, considerando un consumo estimado de 5 toneladas.
1
Grupo Control: Alimento preparado en la misma granja experimental por etapas desde destete a crecimiento y
finalización ad libitum sin Viusid-Vet Polvo*.
Tiempo de evaluación: desde la etapa del destete hasta la fase de crecimiento 5 semanas y hasta la semana 18 de
finalización. Fecha de inicio 30 de Abril y terminación 05 Septiembre, 2011.

Datos para el diseño experimental.
o Granja Experimental CEIEPP, UNAM.
o Número de animales en prueba
40.
o Animales de grupo control
20.
o Animales de grupo Viusid
20.

Parámetros en evaluación:
o Peso promedio semanal por grupo (gramos).
o Índice de Conversión alimenticia por grupo semanal (Kg).
o Ganancia diaria de peso promedio por grupo (Kg).
o Mortalidad y animales de desecho durante el ensayo.

Pruebas serológicas y RT-PCR. (Polymerase Chain Reaction)
Monitoreo:
Inhibición de Hemoaglutinación para Influenza Porcina (HI-IP): para realizar las pruebas se tomaron 20 muestras a
7 días y al final de la engorda de sangre completa sin anticoagulante para separación de sueros y realizar la prueba de
inhibición de hemoaglutinación contra virus de Influenza porcina por grupo.
El propósito fue corroborar el comportamiento del sistema inmune en la generación de anticuerpos hacia la
enfermedad presente en la granja (influenza porcina).
La determinación de los títulos de anticuerpos contra la enfermedad de influenza porcina en el suero de cada cerdo se
utilizó la prueba de Inhibición de la Hemoaglutinación con el virus de referencia A/swine/New Jersey/11/76 (H1N1)
GeneBank access K00992 y con el subtipo A/swine/Minnesota/9088-2/98 (H3N2). Número de acceso al GeneBank
AF153234.
Para considerar a los animales expuestos al virus de influenza porcina subtipos H1N1 y H3N2 como animales
positivos, deberían tener una dilución 1:80 o mayores o su expresión logarítmica respectiva equivalente a 1.9 log. La
interpretación de los animales negativos a la prueba se basa en los títulos de anticuerpos localizados en la dilución
1:40 o menores o ser menor a 1.9 log.
Días de edad
15 días
30 días
45 días
70 días
105 días
Pruebas de laboratorio
HI-IP
HI-IP
HI-IP
HI-IP
HI-IP
Grupos
Control y Viusid Vet. Polvo *
Control y Viusid Vet. Polvo *
Control y Viusid Vet. Polvo *
Control y Viusid Vet. Polvo *
Control y Viusid Vet. Polvo *
RT-PCR Tiempo real: se tomaron 20 hisopos nasales por cada grupo para realizar la prueba de RT-PCR en tiempo
real para evaluar excreción viral. Durante la segunda semana de iniciado el destete 8, 10, 12,14, 16, 18, 20 y 22 de
Mayo, dando un total de 8 monitoreos para este estudio.
Los hisopos recolectados se sumergen en MEM y el exceso de medio del hisopo se retira presionando el hisopo sobre
las paredes del tubo. El medio se centrifuga y filtra, para posteriormente obtener 700 µl para extracción de RNA viral.
Una vez extraído el RNA se utiliza para RT-PCR en tiempo real. La interpretación de ésta prueba se basa en
determinar la presencia del virus de Influenza Porcina a través de la concentración viral presente en los hisopos
nasales expresada en logaritmos. Los animales con una concentración viral mayor o igual a 2.0 logaritmos
corresponden a los animales positivos. Los animales que contengas una concentración viral menor a 2.0 logaritmos
corresponden a los animales negativos.
2
Fecha de inicio 30 de Abril, Grupos Control y Viusid-Vet Polvo*
Monitoreo
Fechas
Pruebas
Grupos
Control y Viusid Vet. Polvo *
1
08-Mayo-2011
RT-PCR H1N1 y H3N2
Control y Viusid Vet. Polvo *
2
10-Mayo-2011
RT-PCR H1N1 y H3N2
Control y Viusid Vet. Polvo *
3
12-Mayo-2011
RT-PCR H1N1 y H3N2
Control y Viusid Vet. Polvo *
4
14-Mayo-2011
RT-PCR H1N1 y H3N2
Control y Viusid Vet. Polvo *
5
16-Mayo-2011
RT-PCR H1N1 y H3N2
Control y Viusid Vet. Polvo *
6
18-Mayo-2011
RT-PCR H1N1 y H3N2
Control y Viusid Vet. Polvo *
7
20-Mayo-2011
RT-PCR H1N1 y H3N2
Control y Viusid Vet. Polvo *
8
22-Mayo-2011
RT-PCR H1N1 y H3N2
Resultados.
Los resultados productivos semanales para los grupos Control y Viusid-Vet Polvo* (peso, consumo de alimento,
ganancia diaria de peso, conversión alimenticia) se presentan como sigue:
Grupo Control
Semanas
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
Peso inicial
Semanal
(g)
119.70
133.30
182.10
227.60
281.70
362.90
460.20
555.50
656.00
745.00
865.00
957.90
969.50
1058.50
1160.00
Peso final
Semanal
(g)
132.40
182.10
237.30
281.70
362.90
460.20
555.50
656.00
745.00
865.00
957.90
1062.50
1058.50
1160.00
1256.50
Prom. Gral 15 Semanas
16
17
18
Prom. Gral 18 Semanas
1256.50
1325.00
1370.25
1325.00
1428.25
1438.00
Consumo
Promedio
(Kg)
0.51
0.34
0.50
0.62
0.92
1.30
1.31
1.32
1.62
1.85
1.79
2.02
2.32
2.22
2.39
GDP
Promedio
(Kg)
0.042
0.350
0.394
0.408
0.608
0.732
0.726
1.028
0.655
0.899
0.742
0.729
0.775
0.894
0.788
C.A.
(Kg)
1.10
0.96
1.24
1.52
1.50
1.75
1.81
2.10
2.46
2.04
2.62
3.33
3.10
2.48
3.03
1.40
0.651
2.07
2.45
2.57
2.44
0.699
0.824
0.806
4.37
3.13
3.97
1.50
0.637
2.24
3
Grupo Viusid Vet Polvo*
Semanas
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
Prom. Gral 15 semanas
16
17
18
Prom. Gral 18 Semanas
Peso inicial
Semanal
(g)
121.50
133.30
168.20
226.40
279.10
371.50
469.20
572.50
687.00
785.00
843.00
963.60
1035.00
1143.00
1248.50
Peso final
Semanal
(g)
133.30
168.20
226.40
279.10
371.50
469.20
572.50
687.00
785.00
843.00
963.60
1082.00
1143.00
1248.50
1364.00
Consumo
Promedio
(Kg)
0.12
0.34
0.58
0.68
0.98
1.30
1.41
1.62
1.77
2.02
2.17
2.38
2.65
2.76
2.92
1.58
GDP
Promedio
(Kg)
0.472
0.293
0.470
0.400
0.691
0.733
0.776
0.858
0.745
0.685
0.949
0.917
0.907
0.890
0.989
0.718
C.A.
(Kg)
1.29
1.15
1.23
1.71
1.43
1.77
1.81
1.88
2.39
2.95
2.26
2.69
2.90
3.05
2.95
2.10
1364.00
1245.00
1343.25
1481.50
1343.25
1446.50
2.75
3.08
3.07
1.71
0.925
1.050
1.038
0.726
3.58
2.98
2.95
2.15
Resumen de los resultados productivos por grupo a 15 semanas:
GDP (gr)
Control
651
Viusid Vet Polvo*
%
718
+10.3%
Consumo
Promedio
(Kg)
1.40
1.58
+12.9%
Conversión
(Kg)
Peso
Promedio
(kg)
2.07
73.91
2.10
+1.4%
80.24
+8.6%
El grupo Viusid Vet Polvo* en un análisis preliminar a 15 semanas de iniciado el ensayo presentó mayor ganancia de
peso (10.3%), mayor consumo promedio de alimento (12.9%), mayor indice de conversión alimenticia (1.4%) y mejor
peso promedio (8.6%) que el grupo de cerdos control. A pesar de que la conversión es ligeramente favorable para el
grupo control, Viusid Vet Polvo* generó mas peso promedio y mayor ganancia diaria de peso.
Resumen de los resultados productivos por grupo a 18 semanas:
GDP (gr)
Control
637
Viusid Vet Polvo*
%
726
+14.0%
Consumo
Promedio
(Kg)
1.50
1.71
+14.0%
Conversión
(Kg)
Peso
Promedio
(kg)
2.24
89.88
2.15
-4.0%
103.32
+15%
El grupo Viusid Vet Polvo* a termino del ensayo, tuvo mayor ganancia de peso (14%), mayor consumo promedio de
alimento (14%), menor indice de conversión alimenticia (4%) y mejor peso promedio (15%) que el grupo de cerdos
control. La conversión alimenticia remontó favorablemente a 18 semanas en relación al grupo control.
4
Análisis de Laboratorio.
Inhibición de la Hemoaglutinación para el virus de Influenza Porcina subtipo H1N1.
Monitoreo
Control
Viusid
Promedio Promedio
Log
Log
Dif
Viusid
vs
Control
Dif
Viusid
vs
Control
Control
Viusid
desviación Desviacion
Estándar
Estandar
Control
Viusid
%
%
Positivos Positivo
Dif
Viusid vs
Control
15 días
1.80
1.80
0.00
0.18
0.32
0.14
61.11
47.37
-13.74
120 días
2.16
1.88
-0.28
0.49
0.25
-0.24
86.66
71.43
-15.23
%Promedio
Grupal
1.98
1.84
-0.14
0.34
0.29
-0.05
73.88%
59.40%
-14.49%
Inhibición de la Hemoaglutinación para el virus de Influenza Porcina subtipo H3N2.
Monitoreo
Control
Viusid
Promedio Promedio
Log
Log
Dif
Control
Viusid
Viusid
Desviación desviación
vs
Estándar
Estándar
Control
Dif
Viusid
vs
Control
Control
Viusid
%
%
Positivos Positivo
Dif
Viusid
vs
Control
15 días
1.60
1.54
-0.06
0.23
0.27
0.04
22.22
15.79
-6.43
120 dias
1.82
1.41
-0.41
0.13
0.25
0.12
73.33
0
-73.33
%Promedio
Grupal
1.71
1.48
-0.235
0.18
0.26
0.08
47.78%
7.90%
-39.88%
PROMEDIOS GLOBALES
TITULO H1N1
Grupos
TITULO H3N2
Promedio
%
Promedio
%
Log
Positivos
Log
Positivos
Control
98.30
49.26%
35.59
31.85%
Viusid
55.04
39.60%
20.18
5.26%
% Diferencia
-43.26
-9.66%
-15.41
-26.59%
En el primer monitoreo a 15 dias se observa que el grupo tratado con Viusid-Vet Polvo* tiene menor porcentaje de
sueros positivos con respecto al grupo control, (H1N1:47.3% Viusid vs 61.1% Control y H3N2: 15.8% Viusid vs 22.2%
Control), lo anterior indica mejor comportamiento del sistema inmune.
En el primer monitoreo a 15 dias la respuesta inmunológica que generan ambos grupos es similar en cantidad de
anticuerpos, el mecanismo de defensa general del organismo del cerdo tratado con Viusid-Vet Polvo* ayuda a
defenderlo de la infeccion hacia el virus de Influenza Porcina, esto explica el resultado de menor positividad a los dos
subtipos (H1N1 Y H3N2).
En el segundo monitoreo a 120 dias se observa de manera significativa un menor porcentaje de animales positivos con
el uso de Viusid Vet Polvo*(H1N1: 71.4% Viusid vs 86.6% Control y H3N2: 0% Viusid vs 73.3% Control). Esto indica
que el organismo del cerdo tiene mayor capacidad para reaccionar y defenderse de la infeccion de influenza porcina,
desarrolla menor infeccion y menor eliminación viral.
5
Graficas de Serologia.
Gráfica 1. Inhibición de hemoaglutinación para el virus de influenza porcina subtipo H1N1 para los grupos control y
Viusid-Vet Polvo* a 15 y 120 días de tratamiento.
Grafica 1
Encontramos que los cerdos con un numero mayor de infectados generan mayor titulo de anticuerpos contra el virus de
influenza porcina correspondientes a los cerdos del grupo control, los cerdos del grupo tratado con Viusid Vet Polvo*
desarrollaron menor infección y menor título de anticuerpos a la infección de influenza porcina subtipo H1N1.
Gráfica 2. Inhibición de hemoaglutinación para el virus de influenza porcina subtipo H3N2 para los grupos control y
Viusid-Vet Polvo* a 15 y 120 días de tratamiento.
Grafica 2
Hacia el subtipo H3N2 se presentó el mismo comportamiento, en donde cerdos tratados con Viusid-Vet Polvo*
expuestos al mismo antígeno viral desarrollaron menor infección, menores títulos de anticuerpos y menor eliminación
viral.
En conclusión las pruebas de serología en el grupo con Viusid-Vet Polvo*
sentó mejores resultados
(menor porcentaje de positivos H1N1 Y H3N2). El producto mejora el sistema inmune del cerdo antes de la madurez
inmunológica.
Lo anterior concuerda con el hecho de que el grupo con Viusid-Vet Polvo* presentó los promedios de títulos más bajo
al final (inmunidad más estable).
6
Los resultados coinciden con los obtenidos de la prueba de PCR (Polymerase Chain Reaction), ya que el grupo sin
Viusid-Vet Polvo* presentó más circulación viral, lo cual resulta en una mayor cantidad de anticuerpos.
Resultados de la prueba de RT-PCR (polymerase Chain Reaction) tiempo real.
El siguiente cuadro presenta los resultados de la prueba RT-PCR trabajada a partir de hisopos nasales de ambos
grupos, control y Viusid Vet Polvo*.
Muestras (+) >2.0 copias/reacción.
Monitoreo
1
2
3
4
5
6
7
8
%Promedio
Grupal
Control
Viusid
Promedio Promedio
Log
Log
Dif
Dif
Control
Viusid
Control
Viusid Dif Viusid
Viusid
Viusid
Desviacion Desviacion
%
%
vs
vs
vs
Estandar
Estandar
Positivos Positivo Control
Control
Control
1.88
1.83
1.66
2.24
1.92
1.90
1.79
1.91
1.87
1.58
1.93
1.85
1.94
1.64
1.44
1.44
-0.01
-0.25
0.27
-0.39
0.02
-0.26
-0.35
-0.47
0.45
0.31
0.36
0.42
0.30
0.33
0.42
0.42
0.63
0.39
0.37
0.42
0.49
0.35
0.20
0.20
0.18
0.08
0.01
0.00
0.19
0.02
-0.22
-0.22
35%
30%
5%
70%
35%
45%
35%
50%
25%
5%
45%
25%
45%
20%
0%
0%
-10%
-25%
40%
-45%
10%
-25%
-35%
-50%
1.89
1.71
-0.18
0.38
0.38
0.01
38.13%
20.63%
-17.50%
El grupo tratado con Viusid Vet Polvo* presenta menor porcentaje de animales positivos (20.6%) con respecto al
grupo sin Viusid Vet Polvo* (38.1%) lo cual confirma los resultados encontrados en las pruebas de inhibición de
hemoaglutinación en donde se observa un menor número de animales infectados, menor concentración viral debido a
una menor permanencia en el organismo del cerdos esto es menor porcentaje de positividad y menor eliminación
viral.
En este grupo tratado con 2500 ppm (partes por millon) del producto, se observó mucho menor porcentaje de
animales positivos, lo cual indica que la dosis aplicada estimula el sistema inmune y permite controlar mejor las
infecciones por los virus de influenza porcina.
Gráficas de RT-PCR tiempo real.
Gráfica 3. Carga viral del virus de influenza porcina para los grupos control y Viusid-Vet Polvo* expresada en
logaritmos por medio de la prueba RT-PCR tiempo real.
Grafica 3
7
Grafica 4. Porcentaje de animales positivos al virus de influenza porcina expresada en Logaritmos por medio de la
prueba RT-PCR tiempo real.
Grafica 4
En la mayoría de los monitoreos la carga viral siempre es menor que en el grupo control, lo que refleja una mejor
reacción general del organismo del cerdo a no desarrollar una infección viral es por esto que es menor el número de
cerdos positivos a influenza porcina subtipo H1N1.
8
Conclusiones:
1.
Con el uso de Viusid-Vet Polvo* en el alimento de crecimiento y finalización a una dosis de 2.4 Kg/ tonelada
de alimento, mejoró los parámetros productivos hasta las 18 semanas de duración del ensayo.
2.
Viusid Vet Polvo* a las 15 semanas mejoró la ganancia diaria de peso en 67 gramos (718gr Viusid vs 651gr
Control), el consumo de alimento en 180 gramos promedio, el índice de conversión alimenticia en 30 gramos
promedio de alimento por Kilogramo de peso vivo (2.10 kg Viusid vs 2.07 kg Control) y el peso promedio final
en 6.33 Kg.
3.
Viusid Vet Polvo* a las 18 semanas mejoró la ganancia diaria de peso en 89 gramos (726gr Viusid vs 637gr
Control), el consumo de alimento en 210 gramos promedio, el índice de conversión alimenticia en 90 gramos
promedio de alimento por Kilogramo de peso vivo (2.24 kg Viusid vs 2.15 kg Control) y el peso promedio final
en 13.44 Kg.
4.
Con el uso de Viusid-Vet Polvo* como inmunomodulador en el alimento de crecimiento y finalizador de
cerdos en engorda mejoró las defensas del organismo del cerdo medido a través de la pruebas de inhibición
de Hemoaglutinación y RT-PCR tiempo real para el Virus de influenza Porcina subtipos H1N1 y H3N2.
5.
En este grupo tratado con 2500 ppm (partes por millon) del producto, se observó un mucho menor porcentaje
de animales positivos con la dosis apliacada de Viusid-Vet Polvo*, lo cual indica que estimula el sistema
inmune y permite controlar mejor las infecciones por los virus de influenza porcina.
Aplicar Viusid-Vet Polvo* a cerdos en engorda no causa ninguna alteración de la homeostasis ni signología
alguna tras la aplicación del producto pero si favorece una expresión productiva en las razas de engorda de alta
productividad
****Marca registrada, Viusid-Vet Polvo* Catalysis, España, distribuido por Dermaceutical México, S. A. de C. V.
ATENTAMENTE
MVZ LUIS OCAMPO CAMBEROS
PROFESOR TIEMPO COMPLETO
DEPARTAMENTO DE FARMACOLOGIA
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA (FMVZ)
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO (UNAM)
9
Bibliografía.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
Dai, JH. Et al. Glycyrrhizin enhances interleukin-12 production in peritoneal macrophages. Immunology 103 (2): 235-43,
2001.Sugawara, I, et al: Human interferon-gamma (IFN-gamma) containing cells bear various surface
Growth Promoters. The Pig Site.
Hirabayashi, K: Antiviral activities of glycyrrhizin and its modified compounds against human immunodeficiency virus
type 1 (HIV-1) and herpes simplex type 1 (HSV-1), in vitro. Research Laboratory, Minophagen Pharmaceutical. Japan,
1990.
Hughes, P.; Heritage, J.: Antibiotic Growth Promoters-Promoters in food animals. (2002). University of Leeds, United
Kingdom.
Krausse, R. et al: In vitro anti-Helicobacter pylori activity of extractum liquiritae, glycyrrhizin and its metabolites. J.
Antimicrobial Chemother. 54 (1):243-6, 2004.
Lin, JC: Mechanism of action of glycyrrhizic acid in inhibition of Epstein-Barr virus replication in vitro. Antiviral. Res:
59 (1): 41-47, 2003.
Lo, HH. Et al. Glycyrrhizinic acid inhibits arylamine N-acetyltransferase activity in Klebsiella pneumoniae in vitro. J
Appl. Toxicol. 17 (6), 385-90, 1997.
Mordenti, A.: Probiotics and new aspects of growth promoters in pig production. Chiem-ptions Mediterraneennes.
Ohtsuki, KIahida, N: Inhibitory effect of glycyrrhizin on polypeptide phosphorylation by polypeptide dependent protein
kinase (kinase P) in vitro. Biochem-Biophys-Res-Commun 157/2, 1988.
Phenotypic markers. Microbiol. Immunol. 30(10): 1049-59, 1986.
Pompei, R, Marccialis, MA: Effect of glycyrrhizinic acid on herpes simplex virus type 1 glycoprotein synthesis.
Universitá di Cagliari, Italy.1G-MOD.83/2, 1985.
Tanaka, Y, et al: Antibacterial compounds of licorice against upper airway respiratory tract pathogens; J. Nutr. Sci.
Vitaminol (Tokyo) 47 (3):270-73, 2001.
Vondruskova, H.; Slamova, R.; Trckova, M.: Alternatives to antibiotic growth promoters in prevention of diarrhea in
weaned pigs: a review Veterinarian Medicine, 55, 2010 (5): 199-224.
Yechering Industrial Products, Co, LTD (2006). E-mail: infoechering.com.
Zdzislaw, M.: Organic acids as potential alternatives to antibiotic growth promoters for pigs. Advances in pork
production. Vol. 18 (2008).
10
Descargar