UNIVERSIDAD NACIONAL DEL LITORAL FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS CÁTEDRA DE TERIOGENOLOGIA Trabajo Práctico N° 13 Tema: INSEMINACIÓN ARTIFICIAL EN CANINOS. Objetivos Que el alumno logre: - Realizar la técnica adecuadamente. - Discernir entre las circunstancias y/o razas en las que debe realizarse inseminación de aquellas que no lo requieran. - Entender los beneficios de esta práctica así como sus desventajas. Recursos auxiliares Tizas, pizarrón, proyector de multimedia, diapositivas. Materiales Vagina artificial de látex o plástico perfectamente esterilizada, o en su defecto un recipiente estéril de boca ancha y bordes redondeados que no lastime el pene. Tubo graduado para medir la cantidad de semen recolectado y las distintas fracciones seminales. Lubricante estéril no espermicida que evite lesiones peneanas, que podrían producir pequeñas hemorragias y contaminar el semen recolectado. Guantes. Microscopio. Material de limpieza. Contenidos 1.- Introducción 2.- Indicaciones para la Inseminación Artificial 3.- Métodos de recolección de semen 3.1.- Técnica de recolección de semen 4.- Técnicas de inseminación 4.1.- Inseminación vaginal con catéter urinario o pipeta de inseminación 4.2.- Inseminación uterina transcervical 4.3.- Inseminación uterina mediante cirugía 5.- Bibliografía 1.- INTRODUCCIÓN La recolección manual y posterior depósito de semen en la bóveda vaginal de una hembra en celo (estro) es un procedimiento bastante empleado por los criadores y veterinarios. En los caninos se utiliza semen fresco sin diluir, semen mezclado con un diluyente o semen congelado. Para asegurar el éxito, el veterinario debe tener un buen conocimiento del ciclo 1 estral, de las técnicas de recolección de semen y de la inseminación propiamente dicha. 2.- INDICACIONES PARA LA INSEMINACIÓN ARTIFICIAL Se indica cuando el macho o la hembra tienen un problema que impide el apareamiento natural. Para la perra estos problemas comprenden: estrechamiento vaginal, defectos de conformación, debilidad del tren posterior, trastornos psicológicos y dolor. En el caso del macho, el apareamiento natural puede estar imposibilitado por debilidad, artritis, dolor lumbar, eyaculación prematura y defectos de conformación que impiden la penetración o el “abotonamiento”. También se puede elegir la inseminación artificial cuando los animales tienen importantes diferencias de tamaño. Los problemas psicológicos (timidez, inexperiencia, desagrado por la pareja, dificultades copulatorias previas) también constituyen motivos de importancia. Se la indica además para preservar al macho de enfermedades infectocontagiosas, transmitidas por vía sexual y ayuda a afrontar los costos y elimina los riesgos asociados con el embarque de la perra. La distancia geográfica también puede ser una indicación para el uso de IA ya sea mediante el transporte de semen fresco refrigerado o congelado. Por supuesto, la extracción del semen y su posterior dilución en múltiples dosis para su uso en IA es también una forma muy eficaz de maximizar la trasmisión genética de un macho de elevado mérito. 3.- MÉTODOS DE RECOLECCIÓN DE SEMEN Deben tenerse en cuenta ciertas condiciones para la recolección de semen en la especie canina, si bien el proceso de obtención es una maniobra sencilla, la observación de estas condiciones favorecerá la extracción y permitirá la obtención de un semen de calidad. Lugar donde se realizará la recolección: debe ser un lugar tranquilo para evitar que el semental se ponga nervioso o se distraiga. Se debe evitar que el perro orine inmediatamente antes de la extracción: para impedir que un resto de orina en la uretra contamine el semen. La maniobra debe realizarse sobre una superficie antideslizante: para evitar que el perro sufra resbalones durante el procedimiento. Estimulación del macho: es conveniente la estimulación del macho con una perra en estro, ya que esto favorecerá el proceso de extracción del semen. La recolección del semen se realiza para: Evaluación de la calidad seminal. Efectuar inseminación artificial. Preparar semen refrigerado. 2 Preservar material genético, a través de semen congelado. 3.1.- Técnica de recolección del semen La tarea más dificultosa en la inseminación artificial es la estimulación del macho para que eyacule. Una vez logrado esto, el resto del procedimiento es bastante sencillo. El propietario sostiene al macho para minimizar sus movimientos y proteger al colector, mientras este masajea suavemente el pene y el bulbo del glande dentro del prepucio. Cuando el bulbo del glande comienza a agrandarse, el prepucio se desliza hacia caudal, y se exteriorizan el pene y el bulbo. Si tal exteriorización fracasa, por lo regular se obtiene una erección incompleta y la eyaculación no se logra o es incompleta, como consecuencia del dolor. Una vez exteriorizados el pene y el bulbo del glande del prepucio, el colector sostiene con firmeza la base del pene, en proximal del bulbo. Se utilizan los dedos pulgar e índice, para proporcionar tanto masajes como movimientos de presión hacia abajo, alrededor de la base del bulbo del glande. Durante o inmediatamente después de haber logrado la erección, comenzarán movimientos de empuje pélvico, que acompañan el inicio de la eyaculación, y que pueden dificultar la colocación de la vagina artificial sobre el pene. El tubo de plástico transparente ya debería estar conectado a la vagina artificial de goma que durante el período de estimulación inicial puede permanecer debajo del brazo del colector para brindarle cierta tibieza. La primera fracción del eyaculado consiste en líquido prostático libre de espermatozoides, y la segunda fracción, rica en espermatozoides, comienza cuando los movimientos pélvicos tienden a finalizar. Inmediatamente después de detenerse las estocadas de la pelvis, muchos machos tratan de “pasar sobre” el brazo del colector, como si se desmontaran de la hembra. El colector simplemente debe permitir este movimiento del animal, que produce una rotación de 180° del pene congestivo, éste protruye hacia caudal entre los miembros posteriores. La presión digital sobre el bulbo del glande debe mantenerse y la recolección continúa hasta que el eyaculado comience a aclararse. La obtención del semen dura entre 2 y 5 minutos (esto representa la duración de la segunda fracción de la eyaculación). Mientras el eyaculado sea blancuzco o cremoso y opalescente (normal y rico en espermatozoides), se continúa la recolección. Una vez que se vuelve transparente (libre de espermatozoides), el procedimiento puede ser suspendido. La perra debe ser inseminada dentro de los 5 a 10 minutos de la recolección del semen. 4.- TÉCNICAS DE INSEMINACIÓN Para la perra existen técnicas de inseminación vaginal y uterina. Para la primera, el semen se deposita dentro de la vagina craneal, en cercanías del cuello uterino, con una pipeta de inseminación larga. Esta técnica suele utilizarse con el semen fresco o refrigerado. Para la inseminación uterina, el semen se introduce directamente en el útero. Esta última técnica requiere equipamiento especializado o cirugía y se recomienda cuando se emplea semen congelado y descongelado, debido a la viabilidad reducida de los espermatozoides sometidos a tal proceso. 3 4.1.- Inseminación vaginal con catéter urinario o pipeta de inseminación Como rutina se emplea jeringa de 12ml, catéter urinario flexible descartable para macho o pipeta de inseminación plástica y guantes quirúrgicos. El catéter o la pipeta deben ser lo suficientemente largos como para alcanzar la vagina craneal, longitud que se puede estimar como la mitad de la distancia existente entre los labios de la vulva y el arco costal. Estos implementos deben estar estériles. Una vez colocados los guantes, se aspira la muestra de semen fresco con la jeringa, se le acopla el catéter estéril y se carga con la jeringa un adicional de 1 a 3ml de aire. El tren posterior de la hembra se eleva por encima de su cabeza durante e inmediatamente después de completar la inseminación. Se sostiene el rabo hacia un lado, y se introduce el dedo índice enguantado y sin lubricar dentro de la bóveda vaginal, con la palma hacia arriba. El catéter se desliza sobre la punta del dedo y se inserta dentro de la cavidad vaginal, evitando la introducción accidental dentro de la uretra. Esta maniobra también ayuda a evitar la fosa del clítoris. El catéter sigue la curvatura dorsal de la bóveda vaginal y se inserta hasta encontrar resistencia. El catéter debe ser avanzado suavemente hacia craneal todo lo que sea posible antes de depositar el semen, de modo que se asegure la colocación de espermatozoides cerca del cuello uterino. Cuando se ha descargado el semen de la jeringa, se desconecta del catéter, se llena con unos pocos mililitros adicionales de aire, se reconecta y se vacía nuevamente, depositando así cualquier remanente de semen que hubiera quedado dentro del catéter. Evitar inyectar demasiado aire dentro de la vagina, ya que esto podría causar la pérdida de semen fuera de la vulva. Se extrae el catéter, los miembros posteriores de la perra deben permanecer elevados por encima de su cabeza por un mínimo de 20 minutos, de modo de facilitar la migración anterior del semen en el aparato reproductor y dentro del útero. La inserción de un dedo enguantado y el masaje delicado de la pared dorsal de la vagina durante este tiempo estimula contracciones musculares dentro del aparato reproductor, lo cual potencia el movimiento de los espermatozoides. Después de que se ha completado el tiempo de elevación de los miembros posteriores, la perra debe guardar reposo durante 1 hora o más para reducir la pérdida de semen fuera de la vagina. 4.2.- Inseminación uterina transcervical Este método requiere el empleo de un catéter rígido que se introduce en forma ciega dentro de la vagina y cérvix, después de la fijación digital del cuello a través de la pared abdominal. Otro método consiste en el pasaje de un catéter a través del cérvix, mediante la visualización endoscópica de la abertura cervical externa. Estas técnicas están indicadas para la inseminación con semen congelado y descongelado. 4.3.- Inseminación uterina mediante cirugía El cuerpo del útero es expuesto a través de una incisión caudo ventral sobre la línea media, dentro de la cavidad abdominal. Se coloca un catéter EV sobre la aguja de calibre 22 dentro del lumen del cuerpo del útero y se clampea la porción caudal del lumen para impedir que el semen ingrese en la vagina; éste se vierte lentamente dentro de la cavidad uterina y se permite que progrese hacia proximal dentro de los cuernos. Las desventajas de esta técnica 4 comprenden la necesidad de anestesia general, la posibilidad de morbilidad secundaria a la técnica quirúrgica y la limitación ética de una única inseminación para tratar de lograr una gestación. Esta metodología debe considerarse sólo para la utilización con semen congelado y descongelado. 5.- BIBLIOGRAFÍA - FELDMAN, E.C.; NELSON, R. (1991). Endocrinología y reproducción canina y felina. Editorial Inter-Médica. Buenos Aires. Argentina. SORRIBAS, C.E. (1999). Reproducción en los animales pequeños. Ed. Intermédica. Buenos Aires. Argentina. SORRIBAS, C.E. (2005). Atlas de reproducción canina. Ed. Intermédica. Buenos Aires. Argentina. 5