Glosario admixtura: se refiere al estado de estar mezclado (del inglés admixture). Ocurre cuando se entrecruzan individuos de dos o más poblaciones que se encontraban previamente separadas y el resultado es la introducción de nuevos genotipos en una población. ADN genómico: es el término que se usa para distinguir al ADN cromosómico (aislado directamente de células o tejidos) de otros tipos de ADN, como el ADN contenido en un plásmido o una mitocondria. ADN heteroduplex: resulta de la hibridación de cadenas sencillas de ADN provenientes de moléculas diferentes durante la reacción en cadena de la polimerasa. ADNcomplementario (ADNc): ADN sintetizado a partir de un molde de ARN empleando las enzimas transcriptasa reversa y ADN polimerasa. agente desnaturalizante de ADN: agente que provoca la desnaturalización del ADN, es decir, la pérdida de la estructura nativa de la molécula al romperse los puentes de hidrógenos que mantienen unidas a las dos cadenas que conforman al ADN. Se distinguen agentes físicos (calor) y químicos (pH, urea o formamida). algoritmo: conjunto ordenado y finito de operaciones e instrucciones que permite hallar la solución de un problema. Dados un estado inicial y una entrada, siguiendo los pasos sucesivos, se llega a un estado final y se obtiene una solución. 251 amplicón: fragmento de ADN formado mediante una amplificación, se suele referir a los productos amplificados en una PCR . amplificación preferencial: fenómeno que se presenta cuando en una reacción en cadena de la polimerasa se amplifican preferentemente ciertas secuencias de ADN. Pueden influir varios factores tales como concentración de ADN, contenido de guanina-citosina, eficiencia de la ADN polimerasa, con- centración de los iniciadores, temperatura de hibridación, etc. anotación: en biología molecular se dice de la información asociada a un gen determinado. base nitrogenada: compuesto orgánico cíclico que incluye dos o más átomos de nitrógeno. Son parte de la estructura de los nucleótidos que conforman a los ácidos nucleicos y se clasifican en dos grupos principales: bases púricas o purínicas (derivadas de la estructura de la purina) y bases pirimidínicas (derivadas de la estructura de la primidina). biblioteca genómica: colección de fragmentos de ADN que han sido clonados en un vector y que pueden ser almacenados y propagados en una población de microorganismos. comunidad microbiana: conjunto integrado de poblaciones microbianas que están presentes e interactúan dentro de un determinado lugar o hábitat. dendrograma: diagrama o representación gráfica en forma de árbol que organiza y agrupa datos en subcategorías que se van dividiendo a su vez en otras. Se utilizan para representar las relaciones entre organismos; dependiendo de sus aplicaciones y características reciben distintos nombres: fenogramas, filogramas o árboles filogenéticos. digestión completa del ADN: tratamiento del ADN con una enzima de restricción durante el tiempo suficiente para que en todos los sitios diana potenciales se produzca el corte. dominio: fragmento, área o región de ADN de tamaño concreto en el genoma de un organismo. electromorfo: variante molecular de un segmento de ADN o proteínas que se distinguen entre sí fenotípicamente por su movilidad en una electroforesis. enzima de restricción: endonucleasa que reconoce y corta una secuencia característica de nucleótidos (entre 4 y 12) dentro de una molécula de ADN, el punto de reconocimiento se llama sitio o diana de restricción. extremo 3’ y 5’: se refiere a la numeración de los átomos de carbón en la desoxirribosa que es el azúcar que forma parte de la molécula de ADN. 252 Herramientas moleculares aplicadas en ecología fingerprinting: fragmentos característicos del material genético que diferencian a un individuo de otro. Conocido también como huella molecular. fluoróforo: componente de una molécula que le confiere la cualidad de ser fluorescente. Puede tratarse de un grupo funcional que absorbe energía a una determinada longitud de onda y después la emite a una longitud de onda diferente. formamida: también conocida como metanamida, es una amida derivada del ácido fórmico. Es un líquido incoloro, higroscópico, viscoso, soluble en agua, de fórmula molecular CH3NO, que actúa como agente desnaturalizante. gen funcional: la secuencia de ADN o de ARN que codifica uno o varios productos capaces de desempeñar una función específica, generalmente fuera de su lugar de síntesis. Sus productos pueden ser polipéptidos (es el caso de la mayoría de los genes) o ARN (ARNt, ARNr). huella molecular: representación gráfica de determinadas secuencias del genoma que funcionan como un código de barras de la identidad de un individuo. El término también se aplica al patrón de bandas que en condiciones determinadas puede generar una muestra integrada por más de un individuo. índices de diversidad: son índices matemáticos que permiten definir y medir la diversidad de especies a partir de conceptos ecológicos como variedad, riqueza, abundancia, dominancia, distribución de especies, etc. Algunos de los más utilizados actualmente son el índice de diversidad de ShannonWeaver y el índice de dominancia de Simpson, los cuales fueron introducidos a mediados del siglo pasado. inferencia filogenética: proceso de estimación que permite inferir la historia de relaciones evolutivas o de ancestría entre varias especies. Se sustenta en el concepto darviniano de “descendencia con modificación”, de forma que los caracteres que se observan en las distintas especies, heredados a partir de un ancestro común, son indicativos de una relación genealógica. iniciadores: también denominados cebadores o primers, son oligonucleótidos sintéticos (utilizados en la PCR) que hibridan con la región complementaria al ADN molde que se desea amplificar y propician el inicio de la reacción de elongación por la ADN polimerasa. iniciadores modificados: iniciadores de PCR que contienen “extensiones” o secuencias adicionales en el extremo 5´, de manera que los productos amplificados en la reacción también incorporan las “extensiones” añadidas a los Glosario 253 iniciadores. Los iniciadores se modifican para incorporar sitios de enzimas de restricción, un codón de inicio, secuencias promotoras o bien, para proporcionar mayor estabilidad al producto amplificado. marcador molecular: un marcador genético o marcador molecular es un segmento de ADN con una ubicación física identificable en un cromosoma y cuya herencia se puede rastrear. Un marcador puede ser un gen, o puede ser alguna sección del ADN sin función conocida. marcador codominante: en genética de poblaciones se trata de marcadores moleculares en los que pueden distinguirse todos los genotipos (tanto los homócigos como los heterócigos). marcador dominante: en genética de poblaciones se trata de marcadores moleculares en los que pueden observarse sólo dos clases genotípicas: AA + Aa y aa; es decir, una de las clases homócigas se confunde con el heterócigo. matriz de distancias: es un tipo de medida de similitud. Matemáticamente se define como una matriz cuyos elementos representan las distancias entre los puntos, tomados por pares, de un conjunto. moléculas quiméricas: moléculas de ADN híbridas que se forman cuando una molécula de ADN parcialmente elongada sirve como iniciador en el siguiente ciclo de una reacción en cadena de la polimerasa. Las secuencias quiméricas pueden detectarse fácilmente con ciertos programas informáticos. multiplex: análisis simultáneo de más de una molécula blanco, que puede llevarse a cabo usando iniciadores o sondas marcados con diferentes fluoróforos en una misma reacción. mutaciones puntuales: son cambios que afectan a pares de bases únicos. nucleótido: monómero de los ácidos nucleicos, integrado por la combinación de una base nitrogenada (purina o pirimidina), un azúcar (ribosa o desoxirribosa) y un grupo fosfato. Se obtiene como producto de la hidrólisis de ácidos nucleicos por acción de nucleasas. oligonucleótidos firma: marcadores moleculares frecuentemente utilizados en Ecología Microbiana, pues consisten en secuencias cortas de ADN que aparecen en todos (o en la mayor parte de) los miembros de un determinado grupo filogenético y nunca (o sólo raramente) están presentes en otros grupos, incluidos los más próximos. poliacrilamida: soporte empleado frecuentemente en electroforesis en gel, químicamente inerte, de propiedades uniformes, capaz de ser preparado 254 Herramientas moleculares aplicadas en ecología de forma rápida y reproducible. Forma geles transparentes con estabilidad mecánica, insolubles en agua, relativamente no iónicos y que permiten buena visualización de las bandas durante tiempo prolongado. Los geles de poliacrilamida resultan de la polimerización vinílica del monómero acrilamida y del monómero entrecruzador N, N’-metilen-bis-acrilamida. pozol: bebida refrescante y nutritiva, de origen mesoamericano, que resulta de la fermentación de maíz molido que posteriormente es diluido con agua para producir una suspensión blanca. Se puede agregar a la bebida sal y chile molido, azúcar, cacao o miel, según el gusto o los fines a que se destine. puente de hidrógeno: fuerza intermolecular relativamente débil que actúa entre moléculas polares. Se forma entre un átomo pequeño altamente electronegativo (como flúor, nitrógeno u oxígeno) y un átomo de hidrógeno unido covalentemente a otro átomo electronegativo. Atracción dipolo-dipolo entre moléculas polares que contienen las uniones F-H, O-H y N-H. rampa de tiempo: durante la PCR , es el tiempo necesario para que el bloque del termociclador vaya de una temperatura a la siguiente. Esta temperatura dependerá del modelo del termociclador y de si el bloque es calentado por lámpara o sistema peltier. rasero: medida arbitraria, que se utiliza para determinar que dos o más cosas tienen el mismo tamaño, intensidad, cantidad, etc. reloj molecular: es una técnica que deduce el tiempo de divergencia de dos taxa a partir del número de diferencias entre dos secuencias de ADN. ruido basal: fluorescencia intrínseca emitida por los componentes de la mezcla de reacción al incidir en ellos fotones derivados de una fuente de luz externa. solución desnaturalizante de “alta densidad”: en DGGE es la solución con mayor concentración de urea y formamida y que determina el límite de mayor concentración en el gradiente desnaturalizante formado a lo largo del gel de poliacrilamida. solución desnaturalizante de “baja densidad”: en DGGE es la solución con menor concentración de urea y formamida y que determina el límite de menor concentración en el gradiente desnaturalizante formado a lo largo del gel de poliacrilamida. spot: del inglés, punto o mancha de interés geométricamente localizada en un espacio. Glosario 255 swap: del inglés, invertir o intercambiar, en microarreglos se refiere al cambio de un fluoróforo de la muestra control por el de la muestra experimental y viceversa. temperatura de fusión (Tm): se define como la temperatura a la cual se ha desnaturalizado la mitad de ADN de doble hélice de una mezcla desconocida que se ha sometido a calentamiento. Cuanto mayor es el contenido en GC , mayor cantidad de calor se deberá suministrar para desnaturalizar al ADN . transcripción reversa: síntesis de una molécula de ADN catalizada por la enzima retrotranscriptasa a partir de un molde de ARN. urea: la urea, también conocida como carbamida, carbonildiamida o ácido arbamídico, es el nombre del ácido carbónico de la diamida. Es un compuesto orgánico cristalino, blanco, higroscópico, soluble en agua, de fórmula molecular CO(NH2)2. Es el principal producto del metabolismo de proteínas en el hombre y en los demás mamíferos. 256 Herramientas moleculares aplicadas en ecología