Seminario Práctico Nº 1 LA CURVA DOSIS

La curva dosis-respuesta
Seminario Práctico nº 1
Facultad de Medicina
Departamento de Farmacología y Terapéutica
Seminario Práctico Nº 1
LA CURVA DOSIS-RESPUESTA.
UN EXPERIMENTO EN ÓRGANO AISLADO.
Con este seminario práctico se pretende conocer la forma en que se obtienen los datos
sobre la relación existente entre las concentraciones o dosis crecientes de un fármaco y
los cambios de un parámetro biológico, por ejemplo, la presión arterial, la frecuencia
cardiaca o el tono vascular (vasodilatación o vasoconstricción). Esta relación se suele
ajustar a una sigmoidea, la curva dosis (o concentración) – respuesta. Una vez
construidos, se analizarán las características de dichas curvas y se harán las
comparaciones estadísticas correspondientes, a fin de conocer el grado de significación
de las diferencias entre las curvas controles (agonista) y problema (agonista más
antagonista). Con este seminario práctico se pretende que el alumno tenga una idea clara
de la rica información que proporciona una curva dosis-respuesta, base de la
Farmacología.
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
En un miógrafo para pequeños vasos (Figura 1) se montaron tres segmentos obtenidos
del lecho arterial mesentérico de rata, con un diámetro de entre 200 y 400 µm. Los
vasos estaban bañados con una solución fisiológica de Krebs-bicarbonato a pH 7.4 y
oxigenada a 37 ºC. La tensión basal se ajustó aproximádamente a 0.5 g (5mN,
aproximádamente). La adición al baño de noradrenalina (NA; 2µM) produjo una
respuesta vasoconstrictora que alcanzó un tono estable en dos o tres minutos. En ese
momento, se inició la administración de concentraciones crecientes y acumulativas de
acetilcolina (AC, de 10-9 a 10-5 M), lo que produjo una respuesta vasodilatadora
concentración-dependiente (Figura 2). Estas respuestas se cuantifican en la Tabla 1:
Fármaco
NA (2 µM)
ACh, 10-9 M
ACh, 3x10-9 M
ACh, 10-8 M
ACh, 3x10-9 M
ACh, 10-7 M
ACh, 3x10-7 M
ACh, 10-6 M
ACh, 3x10-6 M
ACh, 10-5 M
Segmento 1
7,02
6,19
5,63
4,20
2,94
0,92
0,52
0,73
0,76
0,76
Farmacología General. Tercer Curso
Segmento 2
8,78
8,42
7,43
7,11
6,09
1,15
0,40
0,38
0,30
0,30
Segmento 3
9,98
8,75
8,38
6,71
5,57
1,08
0,39
0,25
0,25
0,25
1
La curva dosis-respuesta
Seminario Práctico nº 1
Las cifras corresponden al tono de la pared de los microvasos, expresado en mNewtons
(1 mN equivale aproximádamente a 0,1 g), tras la administración de la concentración de
fármaco respectiva.
A continuación, se lavó la preparación varias veces con solución fisiológica hasta que
los microvasos alcanzaron su tensión basal inicial. Entonces se adicionó un antagonista
específico de receptores muscarínicos (atropina) y, tras 15 minutos de incubación, se
repitió la adición de NA (2 µM) y la curva dosis-respuesta a AC (10-9 a 10-5 M). Las
respuestas obtenidas en estas circunstancias se muestran en la Tabla 2:
Fármaco
NA (2 µM)
ACh, 10-9 M
ACh, 3x10-9 M
ACh, 10-8 M
ACh, 3x10-9 M
ACh, 10-7 M
ACh, 3x10-7 M
ACh, 10-6 M
ACh, 3x10-6 M
ACh, 10-5 M
Segmento 1
9,07
9,07
9,07
9,07
8,94
7,37
6,22
4,15
1,18
0,21
Segmento 2
9,67
9,67
9,40
8,80
8,80
8,23
7,04
4,09
1,15
0,21
Segmento 3
11,61
11,61
11,61
10,22
9,53
8,66
6,88
4,33
1,24
0,33
Como en la Tabla 1, las cifras corresponden al tono de la pared de los microvasos,
expresadas en mN, tras la administración de la concentración respectiva de fármaco.
CUESTIONES
1ª. Determine el efecto máximo producido por la AC en cada caso. Otorgue al efecto
máximo el valor de 100% y exprese el resto de los datos en porcentaje sobre el mismo.
Valores en condiciones basales:
Fármaco
NA (2 µM)
ACh, 10-9 M
ACh, 3x10-9 M
ACh, 10-8 M
ACh, 3x10-9 M
ACh, 10-7 M
ACh, 3x10-7 M
ACh, 10-6 M
ACh, 3x10-6 M
ACh, 10-5 M
Segmento 1
Farmacología General. Tercer Curso
Segmento 2
Segmento 3
2
La curva dosis-respuesta
Seminario Práctico nº 1
Valores en presencia del antagonista:
Fármaco
NA (2 µM)
ACh, 10-9 M
ACh, 3x10-9 M
ACh, 10-8 M
ACh, 3x10-9 M
ACh, 10-7 M
ACh, 3x10-7 M
ACh, 10-6 M
ACh, 3x10-6 M
ACh, 10-5 M
Segmento 1
Segmento 2
Segmento 3
2ª. Represente en forma semilogarítmica las curvas dosis-respuesta de cada segmento,
tanto en condiciones basales como en presencia del antagonista. Determine la CE50.
Analice el significado del Efecto Máximo y CE50 en relación con la ocupación de
receptores, según los postulados de la Teoría de Clark. Determine la KD y calcule la pD2
en cada curva de AC.
3ª. Analice el concepto de variabilidad biológica. Proponga el posible análisis
estadístico de los datos y represente la gráfica correspondiente.
4ª. Comente el tipo de antagonista empleado. Discuta sus características y compárelas
con otros tipos de antagonistas.
5ª. Recuerde el concepto de pA2 para un antagonista. Discuta si la concentración de
antagonista empleada en este experimento está en el rango de su pA2
6ª. Defina las características de un agonista parcial. Comente los conceptos de potencia
y eficacia de un agonista.
Farmacología General. Tercer Curso
3
Miógrafo para pequeños vasos
Transductor
Figura 1
Figura 2
Protocolo experimental
ACh (log M)
-8
-7,5
-7
-6,5
-6
NA
-5,5