El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones

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El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Alejandro Atarés
Grupo de Cultivo in vitro y Mejora Vegetal
I.B.M.C.P. – Departamento de Biotecnología
Universidad Politécnica de Valencia
El cultivo in vitro de plantas:
ventajas y aplicaciones
Introducción al cultivo in vitro de plantas
Definición
Métodos y aparatos
Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas
La multiplicación de plantas
La mejora sanitaria
La mejora genética
El método haplo-diploide
El aprovechamiento de la variación intraespecífica y extraespecífica
La transformación genética
Ventajas del cultivo in vitro
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Definición de cultivo in vitro de plantas
Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las
células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el
aprovechamiento de su totipotencia, así como de su
aptitud para la variación y capacidad de modificación
genética
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Definición de cultivo in vitro de plantas
Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las
células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el
aprovechamiento de su totipotencia, así como de su
aptitud para la variación y capacidad de modificación
genética
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Cultivo de células y tejidos vegetales
Requerimientos para el crecimiento de células y tejidos vegetales
Aire
Luz
Agua
Nutrientes
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Definición de cultivo in vitro de plantas
Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las
células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el
aprovechamiento de su totipotencia, así como de su
aptitud para la variación y capacidad de modificación
genética
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Cultivo axénico
Desarrollado en un ambiente donde no hay ningún otro organismo vivo
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Condiciones axénicas
Métodos de esterilización
P
T
t
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Condiciones axénicas
Esterilización del material vegetal
NaOCl (0,25-1%)
+ 7X (gotas)
Agua desionizada estéril
5 minutos
10 minutos
10-30 minutos
15 minutos
Agitación
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Condiciones axénicas
Trabajo sin contaminación
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Condiciones axénicas
Diseño del laboratorio
Almacenamiento (temperatura ambiente y frío)
Áreas externas
Lavado (puede estar junto a la de esterilización)
Otras (despachos, salas de reunión, recepción, etc)
Preparación-esterilización de los medios de cultivo
Transferencia (condiciones de esterilidad)
Incubación de los cultivos (condiciones controladas)
Transferencia
Áreas protegidas
Incubación
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Definición de cultivo in vitro de plantas
Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las
células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el
aprovechamiento de su totipotencia, así como de su
aptitud para la variación y capacidad de modificación
genética
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Totipotencia
Capacidad de regeneración de una planta entera a partir de una célula o
un grupo de células
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Totipotencia
Células vegetales totipotentes
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Totipotencia
Organogénesis adventicia
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Totipotencia
Embriogénesis somática
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Definición de cultivo in vitro de plantas
Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las
células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el
aprovechamiento de su totipotencia, así como de su
aptitud para la variación y capacidad de modificación
genética
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Aptitud para la variación genética
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Aptitud para la variación genética
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Definición de cultivo in vitro de plantas
Conjunto de técnicas que permiten el cultivo de las
células y tejidos vegetales en condiciones axénicas y el
aprovechamiento de su totipotencia, así como de su
aptitud para la variación y capacidad de modificación
genética
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Capacidad para la modificación genética
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas
La multiplicación de plantas: Micropropagación
La mejora sanitaria: Microinjerto
La mejora genética: Incremento de variabilidad genética
Método haplodiploide
Transformación genética
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Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas
La multiplicación de plantas: Micropropagación
La mejora sanitaria: Microinjerto
La mejora genética: Incremento de variabilidad genética
Método haplodiploide
Transformación genética
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Micropropagación
Multiplication
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Micropropagación
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Micropropagación
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Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas
La multiplicación de plantas: Micropropagación
La mejora sanitaria: Microinjerto
La mejora genética: Incremento de variabilidad genética
Método haplodiploide
Transformación genética
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Microinjerto en cítricos
Variedad
Patrón
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Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas
La multiplicación de plantas: Micropropagación
La mejora sanitaria: Microinjerto
La mejora genética: Incremento de variabilidad genética
Método haplodiploide
Transformación genética
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Incremento de la variabilidad genética
Variación somaclonal: alternativa a otros agentes mutagénicos
Ficus benjamina
SC-Fb-’Green snow’
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Incremento de la variabilidad genética
Rescate de embriones: solución de incompatibilidad sexual
Polen
Especie A
Polinización
Esterilización
Fruto inmaduro
Pistilo
Especie B
Aislamiento de
semillas inmaduras
con proembriones
Semilla inmadura
con embrión híbrido
Híbrido
interespecífico
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Incremento de la variabilidad genética
Rescate de embriones: solución de incompatibilidad sexual
Lilium
auratum
x
Lilium
henry
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Incremento de la variabilidad genética
Hibridación somática
Permite la unión de dos materiales
con incompatibilidad sexual
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Incremento de la variabilidad genética
Hibridación somática
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Incremento de la variabilidad genética
Hibridación somática
En función de la información
genética que se combina de
ambos parentales se habla de:
- hibridación simétrica
- hibridación asimétrica
- cibridación
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Incremento de la variabilidad genética
Hibridación somática
Hay distintos métodos de fusión de
protoplastos:
- químicos
- eléctricos
- combinados
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Incremento de la variabilidad genética
Hibridación somática
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Incremento de la variabilidad genética
Hibridación somática
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Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas
La multiplicación de plantas: Micropropagación
La mejora sanitaria: Microinjerto
La mejora genética: Incremento de variabilidad genética
Método haplodiploide
Transformación genética
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El método haplo-diploide
Obtención de plantas haploides
Estadios florales
Cultivo de anteras
Regeneración plantas haploides
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El método haplo-diploide
Ejemplo de mejora del arroz
Oryza sativa x O. glaberrima
Obtención de dobles haploides
Selección
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Aplicaciones del cultivo in vitro de plantas
La multiplicación de plantas: Micropropagación
La mejora sanitaria: Microinjerto
La mejora genética: Incremento de variabilidad genética
Método haplodiploide
Transformación genética
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La transformación genética
Cocultivo de explantes con Agrobacterium
(+)
Plántula de tomate
Cultivo sin PS (2-3 días)
Precultivo
A. tumefaciens
Selección
Infección
Desarrollo
Co-cultivo
TG1
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La transformación genética
Soja
Algodón
Maíz
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La transformación genética
Informe anual del I. S. A. A. A.
(INTERNATIONAL SERVICE FOR THE ACQUISITION OF AGRI-BIOTECH APPLICATIONS)
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
La transformación genética
Presente y futuro
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Micropropagación
Uniformidad y reproducibilidad
El cultivo in vitro de plantas: ventajas y aplicaciones
Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Micropropagación
Uniformidad y reproducibilidad
Obtención de un producto “superior”
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Micropropagación
Uniformidad y reproducibilidad
Obtención de un producto “superior”
Mayor control sanitario
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Micropropagación
Uniformidad y reproducibilidad
Obtención de un producto “superior”
Mayor control sanitario
Aplicable a un amplio espectro de especies
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Micropropagación
Uniformidad y reproducibilidad
Obtención de un producto “superior”
Mayor control sanitario
Aplicable a un amplio espectro de especies
Mejor planificación durante el año
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Micropropagación
Uniformidad y reproducibilidad
Obtención de un producto “superior”
Mayor control sanitario
Aplicable a un amplio espectro de especies
Mejor planificación durante el año
Ahorro de espacio
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Micropropagación
Uniformidad y reproducibilidad
Obtención de un producto “superior”
Mayor control sanitario
Aplicable a un amplio espectro de especies
Mejor planificación durante el año
Ahorro de espacio
Alta tasa de multiplicación
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Micropropagación
Uniformidad y reproducibilidad
Obtención de un producto “superior”
Mayor control sanitario
Aplicable a un amplio espectro de especies
Mejor planificación durante el año
Ahorro de espacio
Alta tasa de multiplicación
Disminución de costes
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Mejora sanitaria
Saneamiento del material cultivado
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Mejora sanitaria
Saneamiento del material cultivado
Eliminación de enfermedades de origen vírico
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Mejora sanitaria
Saneamiento del material cultivado
Eliminación de enfermedades de origen vírico
Aumenta la seguridad en el intercambio de germoplasma
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Mejora genética
Mayor rapidez en la obtención de ciertos logros
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Mejora genética
Mayor rapidez en la obtención de ciertos logros
Objetivos difíciles de conseguir por los métodos clásicos
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Ventajas del cultivo in vitro de plantas
Mejora genética
Mayor rapidez en la obtención de ciertos logros
Objetivos difíciles de conseguir por los métodos clásicos
Objetivos inabordables por los métodos convencionales
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