Conservación de Muestras Biológicas
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Conservación de Muestras Biológicas Introducción Las muestras biológicas deben ser tomadas, transportadas y conservadas adecuadamente para poder obtener de ellas información fidedigna y que represente el estado real, de salud o enfermedad, del paciente del cual fueron obtenidas. Se debe tener presente que una muestra biológica es un sistema en cual “conviven” proteínas, enzimas, iones, compuestos como glúcidos, lípidos, agua, etc. etc. en un delicado y complejo equilibrio. Las proteínas y las enzimas por ejemplo, al igual que otros compuestos, son temperatura y tiempo dependientes para su correcto funcionamiento e integridad, de manera que una conservación inadecuada alterará su estructura y por lo tanto su función también se verá afectada. Un ejemplo oportuno para nombrar aquí son los anticuerpos, glicoproteínas de nuestro sistema inmune encargadas de reconocer antígenos, si su estructura y por ende su función son alteradas tendremos un test de ELISA para el Ag X falsamente negativo, o sea ese paciente puede tener Acs contra ese Ag pero no lo detectamos porque la muestra no está en condiciones y las proteínas presentes en ella perdieron su viabilidad. En el laboratorio clínico se reciben muestras de sangre y orina (las más comunes), esputo, líquidos corporales (LCR, ascítico, sinovial, etc.), heces, todas ellas permiten conocer el estado del paciente. La sangre es el fluido más estudiado ya que es el de más fácil obtención y el que más información brinda. Igualmente todos los tipos de muestra son importantes y deben ser tomados adecuadamente, su transporte al laboratorio debe ser correcto y cumplir con las normas especificadas al respecto y su conservación (si no pueden ser procesadas inmediatamente) debe ser perfecta (en este punto debemos ser rigurosos con las condiciones de almacenamiento de las muestras). Tipo de Muestras y Análisis más frecuentes en el Laboratorio de Análisis Clínicos ORINA La muestra para orina completa remitida por el paciente debe ser procesada lo más rápido posible, ya que es una muestra de fácil contaminación y por efectos de temperatura o cambios de pH se pueden, por ejemplo, disolver cristales o contaminar con microorganismos. De no ser posible su procesamiento inmediato se debe refrigerar la muestra, el tiempo de almacenado en heladera dependerá de las determinaciones a realizarle a la misma y del criterio empleado por el laboratorio. De todas maneras se recomienda no refrigerar por más de 24 horas. La muestra de orina de 24 horas debe ser remitida inmediatamente al laboratorio una vez terminada su recolección, durante la misma se debe ir guardando el recipiente en la heladera para mantener refrigerada la muestra. Luego de recibida por el laboratorio se debe procesar lo antes posible y si no refrigerar hasta 24 horas. HECES Las heces, excrementos o deposiciones son la materia de desecho que se excreta por el ano. Básicamente están formadas por los restos no digeridos de los alimentos, pero también contienen agua, la pequeña proporción de nutrientes que no absorbemos, algunas sustancias segregadas por el organismo, como sales biliares, y muchas bacterias del colon. El análisis de heces busca la presencia de sangre, de grasa o de gérmenes en estas y especialmente la de parásitos. El cultivo de las heces para buscar gérmenes o parásitos se denomina coprocultivo. La preparación del paciente. En algunos casos es necesario que el paciente modifique su dieta. Estos son algunos ejemplos: - Para evaluar cuál es el contenido en grasa de sus heces, en los días previos debe tomar una dieta estandarizada. Esa pérdida de grasas suele deberse a una enfermedad pancreática. - Para buscar sangre oculta en heces, en los días previos debe evitar la ingestión de alimentos con hierro, como las carnes o los embutidos, y la toma de aspirinas o de fármacos con vitamina C. En cambio, consumirá más verdura, ensalada, fruta, pan integral y nueces. Por otro lado, si la paciente tiene la menstruación conviene retrasar la investigación, para evitar la contaminación de la muestra. - Para buscar parásitos en las heces, los tres días previos debe evitar comer fresas, higos, peras, manzanas, legumbres secas, y pan con semillas. Tampoco tomarán medicamentos que contengan caolín, carbón vegetal, sales de magnesio, aceites laxantes o supositorios laxantes. La recogida de las heces. La muestra la recoge la propia persona, cuando es suficientemente autónoma. Si el caso no es ese, debería acudir un profesional sanitario a su domicilio a recogérsela. Al paciente autónomo hay que explicarle que tiene que tener en cuenta estos aspectos: - Puede recogerla en un recipiente de vidrio, aunque los más utilizados son los de plástico de boca ancha y con tapón de rosca. Para estudios microbiológicos, los recipientes han de ser necesariamente estériles. - Ha de evitar la presencia de orina en las muestras de heces, porque las deteriora. - Si las heces son consistentes, bastará con un volumen similar al de una avellana; si son diarreicas, debe poner unos 20 ml, aproximadamente medio bote de los usuales. - No se debe llenar demasiado el recipiente, porque el gas que se forma con las heces puede hacer saltar la tapa con cierta violencia. Como en todos los casos, el transporte de especimenes hasta el laboratorio debe hacerse de una forma adecuada, para evitar alteraciones que falseen los resultados del análisis. La persona guardará el bote, convenientemente protegido, en la nevera, hasta que pueda llevarlo al laboratorio para su inmediato procesamiento. SANGRE Las muestras sanguíneas tomadas o remitidas al laboratorio deben ser procesadas idealmente lo antes posible (en el día). Esto no ocurre así en la práctica diaria, por lo que debemos tener en cuenta ciertas reglas generales de conservación. A continuación se detalla una tabla con las determinaciones más frecuentes, tiempo y modo de almacenamiento. DETERMINACION Ácido Úrico Albúmina Bilirrubina (Total y directa) CPK QUIMICA CLINICA ESTABILIDAD ESTABILIDAD REFRIGERADO A 4ºC FRIZADO A -18ºC 1 semana 6 semanas 1 mes 6 meses 1 semana 1 semana Calcio 1 dia Cloro Colesterol (Total) Creatinina Eritropoyetina Fosfatasa ácida 4 semanas Fosfatasa alcalina Glucemia Hemoglobina glicosilada Hierro sérico 6 meses 1 año 1 año Hacer en el día 1 semana 2 meses 1 mes 2 dias Estable 4 hs. a temperaura ambiente Procesar lo antes posible 5 dias 1 semana Ionograma plasmático 1 dia 1 año Procesar antes de las 8 horas de tomada la Triglicéridos muestra Urea 1 semana 6 meses COAGULACION TIPO DE MUESTRA suero suero suero suero suero o plasma heparinizado suero o plasma heparinizado suero suero suero o plasma con EDTA suero suero o plasma heparinizado suero o plasma (urgencia) sangre total anticoagulada con EDTA suero o plasma heparinizado suero o plasma heparinizado suero o plasma heparinizado suero o plasma heparinizado El Tiempo de Protrombina (TP) y el Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada (APTT) requieren sangre entera anticoagulada con citrato (1 parte de anticoag. Y 9 partes de sangre), se centrifugan rápidamente 10 a 15 min. a 3500 rpm y se deben procesar antes de las 2 hs. (lo ideal es separar el plasma del paquete globular y procesar dentro de las 4 hs.) Las determinaciones de Anticoagulante Lúpico (tambien llamada Inhibidor Lúpico), Proteína C, Proteína S, Antitrombina III y Resistencia a la proteína C Activada (RPCA) requieren las mismas muestras que las utilizadas en las pruebas de rutina (TP y APTT), solo que aquí debemos hacer una segunda centrifugación para obtener un plasma pobre en plaquetas. Una vez separado el plasma podemos guardar las muestras congeladas a -20 ºC por un mes. La determinación de Fibrinógeno y Dímero D requieren sangre entera anticoagulada con citrato (1 parte de anticoag. Y 9 partes de sangre), se centrifugan rápidamente 10 a 15 min. a 3500 rpm y se deben procesar antes de las 2 hs. (lo ideal es separar el plasma del paquete globular y procesar dentro de las 4 hs.). El plasma separado puede guardarse a -20ºC una semana para el Fibrinogeno y un mes para el Dímero D. HEMATOLOGIA El hemograma es estable hasta 4 hs. a temperatura ambiente, lo recomendable es procesarlo inmediatamente o refrigerarlo. La muestra es sangre entera anticoagulada con EDTA. Con ella se hace el recuento de eritrocitos, leucocitos, plaquetas, concentración de hemoglobina, hematocrito y se calculan los índices hematimétricos. Eritrosedimentación Estable 4 hs. a temperatura ambiente Se puede refrigerar a 4ºC hasta 12 horas. Sangre entera anticoagulada con citrato (1 parte de citrato y 4 partes de sangre). La muestra de hemograma puede utilizarse para realizar una Electroforesis de hemoglobina, en este caso y solo para esta prueba se puede guardar el tubo con sangre entera anticoagulada con EDTA en heladera hasta una semana. INMUNOLOGIA Según que anticuerpo se determine, la muestra puede ser suero (la mayoría) o plasma (citratado para Ac Anticardiolipinas por ejemplo o heparinizado para Ac anti DNA-Nativo). Conservar en freezer a - 20ºC. Como última recomendación general, cuando se trabaja con suero o plasma congelados (guardados a -18 o 20 ºC), solo se deben descongelar en el momento de usar y debe hacerse en baño termostatizado a 37ºC. Una vez hecho esto se procesa la muestra y se descarta, no se puede volver a congelar para utilizarla nuevamente mas adelante.