Innovac®1 rND-H5®2

Innovac
®1
®2
rND-H5 .
Vacuna recombinante del virus de la
enfermedad de Newcastle conteniendo el
gen HA del subtipo H5 del Virus de
Influenza Aviar.
Soto, E., Gay, M., Escamilla, J., Castro, F., Antillón, A., Camacho, E.,
Murillo, M. A., Montoya, D., Méndez, M., Sarfati, D. y B. Lozano.
Laboratorio Avimex SA de CV, México
www.avimex.com.mx
Introducción.
El éxito en la prevención y control de algunas de las enfermedades virales más
importantes para la avicultura se ha logrado a nivel mundial, a través de la
inmunización de las aves con la aplicación simultánea de vacunas emulsionas
(inmunidad humoral) y de vacunas activas (inmunidad a nivel de mucosas e
interferencia viral), como es el caso de la enfermedad de Newcastle (ENC). El
agente causal de la ENC, es un virus ARN perteneciente al género Rubulavirus
(también conocidos como Paramyxovirus 1), el cual naturalmente es muy estable,
no se recombina genéticamente y no muta en su antigenicidad ni en su
patogenicidad, por lo que principalmente las cepas virales que naturalmente son
lentogéncias son seleccionadas y utilizadas como vacunas en la mayoría de las
explotaciones avícolas de todos los continentes (OIE, 2005b). La aplicación
simultánea de vacunas emulsionadas y vacunas activas protege a las aves de los
efectos de la infección con virus patógenos, disminuyendo su replicación en el
organismo y su excreción al medio ambiente.
La infección de parvadas con virus de influenza aviar (VIA) ha sido controlada
exitosamente en diversas partes del mundo con la aplicación de vacunas
emulsionadas (subtipos H1 y H3 en pavos de USA; el subtipo H5 en América, Asia,
África y Europa; el subtipo H6 en gallinas de postura de USA; el subtipo H7 en
Italia y Pakistán; y el subtipo H9 en Asia y Medio Oriente).
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Innovac* es una Marca Registrada de Laboratorio AVI-MEX, S.A. de C.V.
rND-H5*
es
una
Marca
Registrada
de
Laboratorio
AVI-MEX,
S.A.
de
C.V.
Las aves vacunadas desarrollan protección hacia los signos clínicos, bajas de
postura y hacia la mortalidad, aunque continúan sufriendo la infección en mucosas
y aparato respiratorio superior y por ende, la excreción viral al medio ambiente
(Beard, 1986, Halvorson, 1986, OIE, 2005a), por lo que los programas de
erradicación de esta enfermedad se han dificultado (OIE, 2005 y OIE, 2005a). El
uso de vacunas elaboradas con virus activos completos de influenza aviar (IA)
para proveer a las aves de inmunidad en mucosas e interferencia viral, no es
factible debido a que este Orthomyxovirus que contiene ARN segmentado, se
caracteriza por su elevada tasa de mutación a la patogenicidad y recombinación
genética, por lo que ha sido prohibido a nivel mundial (OIE, 2005a).
La presencia de VIA de diferentes subtipos en la avicultura comercial es cada vez
más común, existiendo en la actualidad una cepa altamente patógena para las
aves perteneciente al subtipo H5N1, que además de causar elevadas
mortalidades en aves domésticas (gallinas, pavos, patos, gallinas de Guinea),
aves silvestres (anátidos, cuervos, rapaces), y felinos (gatos domésticos, tigres,
leopardos), el virus también ha afectado a humanos sin que al momento exista la
transmisión humano-humano, por lo que la comunidad científica considera que
esta cepa pudiese tener el potencial de causar una nueva pandemia, motivo por el
cual su prevención y control son de vital importancia y se encuentra vigilada por la
OMS. Esta cepa fue detectada por primera vez en China en 1996 (provincia de
Guangdong) y durante el periodo 2003 al 2006 ha sido reportada en la mayoría de
los países asiáticos, pero también en lugares distantes como Europa y África.
Desarrollo del Virus Recombinante.
Dada la necesidad de proveer a las aves de protección a nivel de mucosas y a la
imposibilidad de vacunarlas con virus activos elaborados con virus completos de la
IA, se desarrolló primeramente un vector que tuviera las mejores características
posibles para ser utilizado en la vacunación de las aves.
Por un lado, se seleccionó una cepa de virus de la ENC (VENC) lentogénico para
actuar como virus vector (vND). Este virus fue totalmente estudiado y
caracterizado. Por medio de técnicas de Ingeniería Genética se preparó el ácido
nucleico de tal forma que permitiera la inserción de un gen del virus de IA.
Por otro lado, se obtuvo el gen de la hemoaglutinina del VIA subtipo H5N2 (HA-H5)
a partir del VIA de baja patogenicidad (VIABP).
El gen HA-H5 del VIA fue entonces clonado e insertado en el ácido nucleico del
vND. Por medio de técnicas de Genética Inversa, el ácido nucleico del vND
modificado fue transformado nuevamente en VENC conteniendo ahora el gen HAH5.
Una vez terminado el proceso, el virus recombinante (rND-H5®) fue nuevamente
estudiado y caracterizado. El resultado de las pruebas indica que el virus rND-H5®
es una cepa lentogénica del VENC que mantiene todas sus propiedades originales,
en el cual el gen HA-H5 del VIA se expresa adecuadamente, que es
genéticamente estable y que puede ser identificado por medio de diversas
técnicas de diagnóstico.
Características de la Cepa Vacunal rND-H5®
• Es un virus vacunal de la ENC (ARN) que naturalmente no se recombina
genéticamente, y no muta en su antigenicidad ni en su patogenicidad
• Replica normalmente en embrión de pollo SPF (EPO-SPF) y presenta un
tiempo letal medio (TLM) de aproximadamente 128 horas (lentogénico)
• El gen HA del VIA contenido, se expresa adecuadamente y se puede
identificar a través de técnicas de laboratorio (inmunotinción; PCR; Western
blotting)
• El gen HA-H5 del VIA es totalmente estable (secuenciación)
• Es segura e inocua para las aves de corral, las aves silvestres, los mamíferos
y el hombre
Desarrollo de la Vacuna Recombinante
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Innovac® rND-H5®
A partir del Virus Original del rND-H5®, fueron elaboradas la Semilla Maestra y las
Semillas de producción, las cuales dieron lugar al virus activo vacunal
recombinante de la ENC conteniendo el gen HA de VIA subtipo H5 denominado
Innovac® rND-H5®.
Propiedades de la Vacuna.
Las propiedades biológicas de Innovac® rND-H5® fueron probadas en diversas
pruebas controladas en Unidades de Aislamiento de Alta Seguridad (Nivel 3) del
CENID-MICROBIOLOGÍA del INIFAP, SAGARPA, México, utilizando aves SPF.
Las aves fueron vacunadas por diferentes vías (ocular, oral y por aspersión), y
desafiadas con VENC velogénico vicerotrópico (VENCVV), con VIA de alta
patogenicidad (VIAAP) y con VIABP.
Se realizaron pruebas serológicas utilizando la prueba de inhibición de la
hemoaglutinación (HI o IH) para la ENC (con 10 UHA y diluciones dobles seriadas)
y para el VIA (con 4UHA con diluciones dobles seriadas modificadas) de acuerdo
a las sugerencias de la OIE (OIE, 2005).
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Innovac® rND-H5® se encuentra genéticamente marcada. Queda estrictamente prohibido
reproducir la cepa vacunal o realizar en ella ingeniería molecular inversa.
Los resultados de las pruebas biológicas realizados a Innovac® rND-H5® indican
que:
• Innovac® rND-H5® es totalmente inocua para las aves, incluso a 10 veces
la dosis normal vía ocular y a 100 veces la dosis normal vía intramuscular,
presentando menores reacciones histológicas en epitelios respiratorios y
órganos linfoides que la inducidas por la cepa LaSota
• Innovac® rND-H5® induce niveles de anticuerpos detectables contra la
ENC por la prueba de HI, similares a los que se obtienen con el uso de la
cepa LaSota
• Innovac® rND-H5® no induce anticuerpos circulantes detectables contra la
IA por medio de la prueba de HI
• Innovac® rND-H5® protege a las aves ante el desafío con VENCVV, de
manera similar a lo obtenido con el uso de la cepa LaSota
• Dos o más aplicaciones de Innovac® rND-H5® ofrecen una buena
protección a las aves ante altas dosis de desafío con el VIAAP
• Innovac® rND-H5® previene la replicación del VIABP en epitelios
respiratorios y su excreción de tráquea y cloaca.
• La vía de aplicación más recomendada es la ocular seguida de la oral
• Los programas de vacunación aplicando el método simultáneo
con
Innovac® rND-H5® y vacunas emulsionadas resultaron en protección
completa contra la mortalidad y signología clínica ante el desafío con
VENCVV y VIAAP
• La aplicación simultánea de Innovac® rND-H5® y vacunas emulsionadas
fueron capaces de prevenir la replicación traqueal del VIABP , con dosis
altas de desafío, y previnieron también su excreción al medio ambiente
Control Epidemiológico del VIA.
Los resultados de la aplicación simultánea de Innovac® rND-H5® con vacunas
emulsionadas ha demostrado prevenir la replicación y excreción de VIA, por lo que
su uso intensivo a nivel de campo en conjunto con buenas medidas de
bioseguridad, resultará en la mejor herramienta disponible para facilitar el control
epidemiológico de esta enfermedad de aquellas áreas o zonas en donde el VIABP
subtipo H5 sea endémico.
Así mismo, en aquellas áreas o granjas libres que se encuentran en riesgo de
infección con el VIA subtipo H5, el uso de Innovac® rND-H5® resulta también en
una excelente herramienta preventiva, ya que al ser incluido en los programas
convencionales de vacunación las aves estarán adecuadamente inmunizadas
contra la ENC pero tendrán una protección adicional contra la posible infección
con VIA, sin que exista una respuesta serológica que pueda interferir con un
diagnóstico adecuado.
Registro del Producto en México.
Innovac® rND-H5® fue sometida a pruebas de constatación por parte de las
autoridades mexicanas, obtenido su registro el día 18 de octubre de 2005. Gracias
a sus propiedades de no inducir anticuerpos detectables por medio de la prueba
de HI-IA, y a no representar un riesgo para la salud pública o de los animales,
Innovac® rND-H5® es una vacuna activa de libre venta en el país. De esta forma,
Innovac® rND-H5® es la primera vacuna recombinante activa conteniendo al
vector Newcastle y con la inserción del gen HA del VIA registrada a nivel mundial.
Indicaciones de uso.
Innovac® rND-H5® es una vacuna dosis dependiente, por lo que deberán
utilizarse siempre dosis completas. En aves jóvenes se sugiere aplicar la vacuna
inicialmente por la vía ocular, pudiendo ser revacunadas por vía oral a través del
agua de bebida. Ninguna otra ruta es sugerida.
En pollo de engorda.
Se sugieren al menos dos aplicaciones de Innovac® rND-H5® con 10 a 15 días
de diferencia entre ellas. La primera deberá aplicarse por vía ocular y la siguiente
puede realizarse de preferencia por la vía ocular, y de no ser factible, se podrá
aplicar a través del agua de bebida. El programa deberá ajustarse según el riesgo
epidemiológico de infección con cualquiera de los dos virus (ENC e IA) y de
acuerdo al criterio del Médico responsable.
En aves de reemplazo.
Se sugieren al menos tres aplicaciones de Innovac® rND-H5® en las etapas de
crianza y desarrollo, según el riesgo epidemiológico y de acuerdo a los programas
diseñados por el Médico responsable. En cualquier caso, se sugiere que la primer
aplicación sea vía ocular, mientras que las subsiguientes pueden ser realizas por
vía ocular o a través del agua de bebida.
En aves en producción.
Se sugiere la aplicación de Innovac® rND-H5® cada 4 a 12 semanas, según el
riesgo epidemiológico de la granja y de acuerdo al criterio del Médico responsable.
En todos los casos, la vacuna deberá ser aplicada a través del agua de bebida.
Bibliografía consultada
• Beard, C. B. (1986). To vaccinate or not to vaccinate. Proceedings of the
second international symposium on avian influenza. pp:258-263.
• FAO/OIE/WHO. (2004). Technical consultation on the control of avian
influenza. Conclusion and recommendations.
• Halvorson, D. A. (1986). Avian Influenza. Proceedings of the second
international symposium on avian influenza. pp:327-336.
• OIE. (2005). Contingency Manual for Avian Influenza. OIE Reference
laboratory for Newcastle disease and avian influenza.
• OIE. (2005a). Manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial
animals.Part 2. Section 2.1. Chapter 2.1.14.
• OIE. (2005b). Manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial
animals.Part 2. Section 2.1. Chapter 2.1.15.
• Soto, E., Gay, M., Lozano, B., and D. Sarfati. (1985). Isolation and
identification of a non pathogenic avian influenza virus in Mexico. Proceedings
of the forty-fourth Western Poultry disease Conference. pp:11-12.