Bioquimica II 2011 - Udabol Virtual

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA
CARRERA DE MEDICINA
SALUD
RED NACIONAL UNIVERSITARIA
Facultad de Ciencias de la Salud
Carrera de Medicina
CUARTO SEMESTRE
SYLLABUS DE LA ASIGNATURA
BIOQUIMICA II
Elaborado por los Doctores:
Dra. Rosario Clouzet
Gestión Académica 2011
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UDABOL
UNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA
Acreditada como PLENA mediante R. M. 288/01
VISION DE LA UNIVERSIDAD
Ser la Universidad líder en calidad educativa.
MISION DE LA UNIVERSIDAD
Desarrollar la Educación Superior Universitaria con calidad y
Competitividad al servicio de la sociedad.
Estimada(a) estudiante:
El syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus docentes,
quienes han puesto sus mejores empeños en la planificación de los procesos de
enseñanza para brindarte una educación de la más alta calidad. Este documento te
servirá de guía para que organices mejor tus procesos de aprendizaje y los hagas
mucho más productivos. Esperamos que sepas apreciarlo y cuidarlo.
Aprobado por:
Fecha: marzo 2011
SELLO Y FIRMA
JEFATURA DE CARRERA
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SYLLABUS
Asignatura:
Código:
Requisito:
Carga Horaria:
Horas Teóricas:
Horas Prácticas:
Créditos:
BIOQUIMICA II
MED – 401
MED – 301
80 horas / Semestre
4
I. OBJETIVOS GENERALES DE LA ASIGNATURA.

Describir las características y las estructuras de compuestos biológicamente
activos, como carbohidratos su ingestión y conversión en fuente de energía
inmediata.

Identificar compuestos como los relacionados a los Lípidos, Colesterol y el
esqueleto carbonatado que da origen a muchos compuestos, como la
vitamina D3, los ácidos Biliares, hormonas corticales y sexuales.

Vincular la teoría y la práctica, con una actitud activa ante el aprendizaje,
mediante el desarrollo del método de estudio basado en la observación de la
práctica de laboratorio.
II. PROGRAMA ANALITICO DE LA ASIGNATURA.
UNIDAD I
TEMA 1.1.1. Introducción de la materia
1.2. Importancia de la Bioquímica en Medicina
1.3. Interés central de la ciencia de la salud
1.4. Aplicación Medica de la Bioquímica
TEMA 2.Vitaminas Hidrosolubles
2.1. Estructura química y función de las vitaminas hidrosolubles
2.1. Tipos de vitaminas hidrosolubles
2.3. Digestión y absorción de las vitaminas
2.4. Función de las vitaminas en la nutrición
2.5. Alteración de las vitaminas
TEMA 3.Vitaminas Liposolubles
3.1. Estructura química y función de las vitaminas hidrosolubles
3.2. Tipos de vitaminas hidrosolubles
3.3. Digestión y absorción de las vitaminas
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3.4. Función de las vitaminas en la nutrición
3.5. Alteración de las vitaminas
TEMA 4.Generalidades del Metabolismo
4.1. Funciones del metabolismo
4.2. Tipos de metabolismo
4.3. Metabolismo de las micromoleculas
4.4. Metabolismo de las macromoléculas
4.5. Digestión de las proteínas
4.6. Absorción de los aminoácidos
TEMA 5.Aminoácidos y Proteínas
5.1. Formación de los aminoácidos
5.2. Estructura de las proteínas
5.3. Requerimiento diario de estos nutrientes
5.4. Principales patologías ligadas a su deficiencia
UNIDAD II
TEMA 6.Generalidades de las Hormonas
6.1. Acción general de las hormonas
6.2. Acción especifica de las hormonas
6.3. Acciones químicas en el organismo
6.4. Efectos en la salud
TEMA 7.Hormonas de la Hipófisis
7.1. Hormonas de la Adenohipofisis
7.2. Hormonas de la Pars Intermedia
7.3. Hormonas de la Neurohipofisis
7.4. Función en el Organismo
TEMA 8.Acción Hormonal Específica en cada Órgano
8.1. Hormonas de la Paratiroides
8.2. Hormonas de la Tiroides
8.3. Hormonas del Páncreas
8.4. Hormonas de la Suprarrenales
8.5. Hormonas Sexuales
8.6. Función de cada una de ellas
TEMA 9
Estructura y Función de los Ácidos Nucleicos
9.1. Estructura del ADN
9.2. Estructura del ARN
9.3. Función de cada uno
9.4. Aporte en la genética moderna
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TEMA 10.Bases Química y Genética en las Enfermedades
10.1. Consideraciones de la enférmeles desde el punto de vista químico
10.2. Bases moleculares de las enfermedades
10.3. Tratamiento de enfermedades genéticas
10.4. Efecto de la genética en las enfermedades del futuro
TEMA 11.La Clínica y el Laboratorio
11.1. Aplicaciones medicas del laboratorios
11.2. Interpretación clínica del laboratorio
11.3. Exámenes de rutina en medicina
11.4. Exámenes específicos
11.5. Importancia del laboratorio en le tratamiento
11.6. Control y Evaluación de enfermedades mediante el laboratorio
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V. BIBLIOGRAFÍA
1997
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BLANCO Antonio, “Química Biológica”, Editorial El Ateneo, 6ª Edición, Argentina,

BALCELLS Alfonso, “La Clínica y el Laboratorio”, Editorial Masson, 17ª Edición,
México, 1997
CARDELLA Lidia, “Bioquímica Médica”, Editorial Ciencias Médicas, Cuba, 1999
GAW Allan, “Bioquímica Clínica”, Edit. Harcourt S.A., 2° Edición, España, 1999
LEHNINGER Albert, “Bioquímica”, Editorial Omega, 2ª Edición, España, 1995
MATHEWS Christopher, “Bioquímica”, Editorial Mc Graw Hill, 2ª Edición,
España, 1999
MURRAY Robert, “Bioquímica de Harper, Editorial Manual Moderno, 15ª
Edición, México, 2001
RAMOS José Antonio, “Bioquímica Bucodental”, 1° Edición, Editorial Síntesis.
S.A., España, 1996
STRYER Lubert, “Bioquímica”, Editorial Reverté, 5° Edición, España, 2003


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


PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD
GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 1
TEMA 1
TITULO: OBSERVACIÓN DE CÉLULAS SANGUÍNEAS
FECHA DE ENTREGA: 2ª semana
FUNDAMENTO
La sangre es considerado un tejido vital para la vida con múltiples funciones que van desde la
oxigenación de las demás células de nuestro cuerpo hasta el mantener integro nuestro
organismo evitando que nosotros perdamos nuestras células indispensables para la vida, así
como el evitar la proliferación microorganismos nocivos para nuestra salud como son los
parásitos, bacterias, virus y otros. Al microscopio se verán con un dominio predominante los
glóbulos rojos, hematíes o eritrocitos, no tienen núcleo y son más delgados por el centro que
por los bordes. Los glóbulos blancos o leucocitos se identifican fácilmente por la presencia de
núcleo, teñido de color intenso. Hay varias clases de leucocitos: Linfocitos de tamaño
aproximado al de los glóbulos rojos, tienen un solo núcleo que ocupa casi todo el glóbulo.
Monocitos, son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, núcleo grande, redondo,
son los más móviles y su función principal es la fagocitosis. Polimorfonucleares núcleo
fragmentado, pueden ser eosinófilos, con abundantes granulaciones teñidas de color naranja,
neutrófilos y basófilos. Y por último las plaquetas, pequeños fragmentos celulares con
membrana poco definida.
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OBJETIVOS
Mediante el uso del microscopio observar y describir la presencia de células por tinción de
Giemsa como parte del tejido sanguíneo
MATERIALES
- Microscopio
- Portaobjetos
- Mechero de alcohol
- Lanceta estéril
- Cubeta de tinción
- Frasco lavador
- Alcohol Metilico
- Colorante Giemsa
PROCEDIMIENTO
- Con la lanceta estéril realizar una punción en un pulgar.
- Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos.
- Colocar un portaobjetos como indica el dibujo y deslizarlo sobre toda la superficie del porta
de manera que se pueda obtener una fina película de sangre.
- Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tinción y añadir unas gotas de alcohol metílico
y dejar que el alcohol se evapore para fijar la preparación.
- Cubrir por 15 minutos con colorante Giemsa diluido 1:10 toda la muestra de sangre
previamente fijada
- Lavar suavemente dejando escurrir el agua sobre la preparación
- Dejar secar aireando el porta o bien al calor muy lento de la llama del mechero.
- Observar al microscopio con aceite de inmersión con objetivo x 100
- Dibuje las células que usted observe al microscopio
CONCLUSIONES:
EVALUACIÓN:
CUESTIONARIO
1. Describa las características morfológicas y funcionales de los leucocitos
2. Cuál es la función que cumplen los eritrocitos y plaquetas en nuestro organismo
3. Qué características debe cumplir un microorganismo para ser considerado “célula”
4. ¿Por qué los Eritrocitos y las plaquetas son considerados células?
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GUÍA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 2
TEMA 2
TITULO: FENOTIPAJE SANGUINEO
FECHA DE ENTREGA: 3ª semana
FUNDAMENTACIÓN
La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO y Rh (Antígeno D) se efectúa
enfrentado los hematíes problemas con antisueros de especificidad conocida Anti-A, Anti-B,
Anti-AB y Anti-D. La presencia o ausencia de aglutinación o hemólisis de los hematíes
ensayados frente a cada uno de los Antisueros, es indicativa de la presencia o no de los
correspondientes Antígenos Eritrocitarios. Los mismos se manifiestan de acuerdo a las leyes de
la herencia mendeliana.
OBJETIVOS
Realizar la Fenotipificación de grupo sanguíneo mediante el empleo de hemoclasificadores
MATERIALES
-
Placas de vidrio para determinación de grupo sanguíneo
Lancetas
Mezcladores
Pipeta Pasteur
Guantes de látex.
Hemoclasificadores Anti-A, Anti-B y Anti-D
PROCEDIMIENTO
1. Masajear previamente el dedo anular a fin de que se observe mejor irrigación sanguínea
2. Realizar asepsia del pulpejo del dedo usando torundas con alcohol yodado
3. Utilizando una lanceta realizar un pinchazo en la región media entre el borde lateral y el
pulpejo del dedo anular
4. Presionar varias veces hasta obtener 3 gotas de sangre, las cuales se depositaran sobre una
placa de vidrio en diferentes lugares
5. Inmediatamente colocar una gota de reactivos hemoclasificadores Anti-A, Anti-B y Anti-D, a
las diferentes gotas de sangre
6. Mezclar suavemente ambas gotas, muestra de sangre y reactivo hemoclasificador
7. Examinar si hay o no aglutinación.
8. Anotar los resultados que serán definitivos, si es que no existen dudas en la interpretación.
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Rvo. Anti-D
-+
Rvo Anti-A
Rvo Anti-B
-+
-+
--+
+
SALUD
Presencia Antigeno “D”
Negativo
Positivo
Grupo
Sanguíneo
O
A
B
Ab
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
- Reacción Negativa. Ausencia de aglutinación, la reacción Antisueros/Hematíes denotan una
suspensión homogénea, luego de resuspendidos por agitación suave.
- Reacción Positiva. Presencia de aglutinación, la reacción Antisueros/Hematíes denotan
agregación grosera entre si una vez resuspendidos por agitación suave, visibles a simple
vista.
RESULTADO
Paciente
Nº 1
Nº 2
Nº 3
Nº 4
Anti-A
Anti-B
Grupo Sanguíneo
Anti-D
Rh “D”
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. ¿Por qué es recomendada la determinación de grupo sanguíneo en tubo como confirmatorio,
en relación a la placa?
2. ¿Por qué generalmente sólo se identifica el sistema ABO y el Rh?
3. Menciona 10 sistemas sanguíneos diferentes a los identificados por rutina
4. ¿Cuándo y por qué es importante la identificación de todos los grupos sanguíneos
clínicamente significativos?
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GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 3
TEMA 3
TITULO:
Tiempo de Coagulación
FECHA DE ENTREGA: 4ª semana de clases
FUNDAMENTACION TEÓRICA
El fenómeno de la coagulación enfrenta muchas teorías, la mas sencilla es la que
divide el fenómeno de la coagulación en dos fases.
PRIMERA FASE
Protombina +
tromboplastina + Ion Calcio +Factor V =
TROMBINA
SEGUNDA FASE TROMBINA + Fibrinogenpo = FIBRINA o formación del coagulo
En el fenómeno de la coagulación intervienen numerosos factores los cuales para su
estudio se dividen e 2 grandes grupos.
1.- Los factores PLASMÁTICOS
2.- Los factores Plaquetarios
LOS FACTORES PLASMÁTICOS SON:
FACTOR I
FIBRINOGENO
FACTOR II
PROTROMBINA
FACTOR III
TROMBOPLASTINA
FACTOR IV
ION CALCIO
FACTORI V
PROACELERINA
FACTOR VII
PROCOMBERTINA
FACTOR VIII
ANTIHEMOFILICO A
FACTOR IX
ANTIHEMOFILICO B
FACTOR X
FACTOR DE STUART
FACTOR XI
ANTIHEMOFILICO C
FACTOR XII
FACTOR DE HAGENAM
FACTOR XIII
FACTOR ESTABILIZANTE DE LA FIBRINA
Entre los factores Plaquetarios tenemos
Factor I Acelerador de la conversión de la Protombina en trombina
Factor II Acelerador de la conversión del fibrinogeno en Fibrina
Factor III Trombo plástico
Factor IV Antiheparinico
En El laboratorio existen numerosas pruebas que permiten conocer si estos factores de
la coagulación se encuentran en cantidades normales en la sangre, permitiéndonos
conocer las alteraciones que se presentan durante este fenómeno.
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II.- PRÁCTICA
TIEMPO DE COAGULACION
OBJETIVOS.- Determinar el tiempo de coagulación de un organismo por el Método de
Lee White
MATERIALED
3 Tubos de hemólisis rotulados 1 2 y T (testigo)
Ligadura Algodón Alcohol Yodado
1 Baño Maria a 37 ºC
Reloj Segundero Cronometro
Métodos y procedimientos
Jeringa de extracción Sanguínea
1. Extraer 3 ml de Sangre y repartirla equitativamente a 1 ml en cada uno de los tubos
2. Introducir los tubos al B.M a 37ºC
3. A los 3 Minutos de obtenida la sangre controlar la coagulación en el tubo Nº 1
inclinando ligeramente el mismo
4. repetir lo mismo cada 30 segundos hasta que se coagule la sangre en el tubo
Realizar la misma técnica con el tubo Nº 2
5. Una vez coagulada la sangre en el tubo Nº 2, proceder exactamente igual con el
tubo testigo.
6. Cuando coagula el tubo testigo recién se obtiene el tiempo de coagulación
7. EL VALOR NORMAL ES DE 5 A 10 MINUTOS, AUNQUE ALGUNOS AUTORES
COMO HOUSAY DAN VALORES COMPRENDIDOS HASTA 15 MINUTOS.
RESULTADOS
El tiempo de coagulación puede estar alterado por deficiencia de alguno de los factores
plasmáticos de la coagulación, por el uso de anticoagulantes y en los estados de
desfibrinación o coagulopatias
Así tenemos en la hemofilia clásica que constituye un ejemplo típico en la que la
coagulación puede tardar mas de una hora.
Debido a presencia de algún anticoagulante circulante
En las hipoprotrobinemias ocasionadas por la falta de vitamina K (Naptaquinonas), en
el recién nacido debido a una absorción deficiente de Vitamina K por obstrucciones
hepáticas, diarreas prolongadas. Por exceso de Antitrombina, en el Shock anafiláctico
o después de la administración terapéutica de Heparina , Dicumarol.
Conclusiones
Evaluación
1. A que se llama coagulación
…………………………………………………………………………………
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2. Cuales son los 13 factores de la
coagulación………………………………………………
3. Que es la Heparina…………………………………………………
4. que otros anticoagulantes
existen…………………………………………………………………………………
5. Investigue sobre la Hemofilia
…………………………………………………………………………………
6. Con que objeto se mide el tiempo de
coagulación……………………………………………………
7. Que son las Proteinas
Plasmáticas……………………………………………………………………
8. Que es el
Fibrinogeno…………………………………………………………………………………
9. Que tiene que ver la Vitamina K………………………………………………………
10. Que función cumple el Ion
Calcio…………………………………………………………………………………
…………………………………..
Firma y sello del catedrático
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Firma del estudiante
BIBLIOGRAFÍA
1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16
Edición, Editorial Manual Moderno México 2001
5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
México
7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo
Buenos Aires 1995
8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002
9.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 2001
10.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;
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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD
GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 4
TEMA 4
TITULO:
TIEMPO DE SANGRÍA
FECHA DE ENTREGA: 5ª semana de clases
FUNDAMENTACION TEÓRICA
El fenómeno de la coagulación enfrenta muchas teorías, la mas sencilla es la que
divide el fenómeno de la coagulación en dos fases.
PRIMERA FASE
Protombina +
tromboplastina + Ion Calcio +Factor V =
TROMBINA
SEGUNDA FASE TROMBINA + Fibrinogenpo = FIBRINA o formación del coagulo
II.- PRÁCTICA
TIEMPO DE SANGRÍA
OBJETIVOS Determinar el tiempo de sangría, siguiendo la técnica,
MATERIAL
Lancetas de punción
Reloj segundero, Cronometro
Papel filtro
Métodos y procedimientos
8. Realizar la asepsia del lóbulo de la oreja con una torunda de algodón empapada en
alcohol, o alcohol yodado.
9. Realizar la punción con la lanceta de manera de hacer un corte ni muy pequeño ni
muy grueso
10. Limpiar con un pedazo de papel filtro la primera gota,
11. a partir de este momento controlar cada 30 segundos presionando con el papel la
herida
12. Esperar a que cese la hemorragia
Resultado
VALORES NORMALES
Alrededor de 3 a 4 minutos según un método sencillo o de 2 a 5 según DUKE
El tiempo de Sangría esta alterado en los siguientes casos.
Deficiencia de Plaquetas
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Alergias medicamentosas, por ejemplo alergia al yodo, quinina, belladona o por
picadura de insectos.
En las infecciones como el sarampión, escarlatina, tifus, tuberculosis
En la púrpura trombocitopenica fulminante de los niños
Conclusiones
Evaluación
1. Analice por que la importancia de tomar el tiempo de sangría
2. Que medidas tomaría si el tiempo de sangría es superior a 6 minutos
3. Que es la púrpura trombocitopenica
4. Que es la insuficiencia hepática
5. Investigue sobre alergias medicamentosas
…………………………………..
Firma y sello del catedrático
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Firma del estudiante
BIBLIOGRAFÍA
1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16
Edición, Editorial Manual Moderno México 2001
5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
México
7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo
Buenos Aires 1995
8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002
9.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 2001
10.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;
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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD
GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 5
TEMA 5
TITULO:
TIEMPO DE PROTROMBINA
FECHA DE ENTREGA: 6ª semana de clases
FUNDAMENTACION TEORICA
Otro de los métodos de Laboratorio para la investigación de los factores de la
coagulación es el tiempo de Pro trombina
La tromboplastina es una solución de extracto de cerebro de conejo liofilizado e
incubado a una temperatura de 37 º C; las casa comerciales preparan solución de
TROMBOPLASTINA con cloruro de Calcio Cl2Ca incorporado.
II.- PRÁCTICA
TIEMPO DE PROTROMBINA
OBJETIVOS .- Determinar el tiempo de pro trombina
MATERIAL
Tromboplastina
Solución de Cloruro de Calcio Cl2Ca 40 Molar Plasma sanguíneo
Baño Maria a 37 ºC reloj segundero
Cronometro
jeringa extracción sanguínea,
torundas de algodón empapadas en alcohol.
Métodos y procedimientos
13. Colocar 0,2 ml de tromboplastina con Cloruro de Calcio en un tubo de Hemólisis
14. depositar en el Baño Maria a 37 ºC durante 3 minutos
15. Realizar lo mismo con el plasma obtenido
16. Tomar 0,1 ml de plasma y depositarlo en el tubo que contiene la Tromboplastina
17. Inmediatamente empezar a controlar la formación de un coagulo y medir el tiempo
Resultados
VALOR NORMAL.- El tiempo normal de protrombina es de 12 a 14 segundos.
Se alarga normalmente y en pequeña proporción en pacientes que presentan
sudoración profusa por altas temperaturas del ambiente.
Patológicamente por las siguientes causas:
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Por deficiencia de vitamina K, en el recién nacido, por deficiente absorción de la misma
Vitamina, enfermedades hepáticas ; Por ausencia de FIBRINOGENO :por deficiencia
de los factores de la coagulación V, VII, X
Por acción de ciertos inhibidores de la coagulación
Conclusiones
Evaluación
1. Que es el tiempo de PROTROMBINA
2. Como se prepara una solución de Cl2Ca 40 Molar
3. Que reactivos comerciales conoces como TROMBOPLASTINA (investigue)
4. Con que fin se realiza esta prueba
5. Cuales son las pruebas de rutina que pide un medico
6. Que determinaciones toma como Medico con una Protrombina de 25 segundos
…………………………………..
Firma y sello del catedrático
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Firma del estudiante
BIBLIOGRAFÍA
1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16
Edición, Editorial Manual Moderno México 2001
5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
México
7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo
Buenos Aires 1995
8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002
9.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 2001
10.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;
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GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 6
TEMA 6
TITULO:
BLANCOS
RECUENTO de LEUCOCITOS O GLOBULOS
FECHA DE ENTREGA: 8ª semana de clases
FUNDAMENTACION TEORICA
Ese define como recuento de glóbulos blancos al numero de LEUCOCITOS que
existen por mm3 de sangre; en el adulto hombre y mujer el numero oscila entre 8,000 a
10,000 G.B x mm3. en el niño al nacer es de 10,000 a 15,000 GB x mm3. Los Valores
Normales de los Glóbulos Blancos pueden sufrir variaciones numerosas recibiendo un
nombre particular en cada caso.
LEUCOCITOSIS
Es el aumento del numero de leucocitos en relación a los valores normales.
Generalmente se dice que hay leucocitosis cuando se obtiene valores superiores a a
los 10,000 o 12,000 GB x mm3.
Las leucocitosis pueden deberse a muchos factores, además de los patológicos; se
produce Leucocitosis después de ejercicios violentos, Posterior al parto, en los ataques
de Epilepsia, después de la inyecciones de adrenalina, en reacciones emocionales de
ansiedad, dolor, y anoxia, normalmente hay una ligera leucocitosis durante el
embarazo.
En sujetos normales hay una variación del numero de GB durante el día, siendo bajos
en la mañana y aumentando progresivamente durante el transcurso del día alrededor
de 2000 x mm3.
Entre las causas patológicas que producen leucocitosis podemos citar todos los
procesos infecciosos agudos ocasionados por microorganismo piogenos y no
piogenos, en las leucemias, la fiebre reumática, la septicemia, varicela, sarampión,
endocarditis bacteriana sub. aguda, APENDICITIS, PERITONITIS, otitis, amigdalitis,
colecistitis.
LEUCOPENIA.- Se denomina a la disminución del numero de Glóbulos Blancos con
respecto a los valores normales y con cifras inferiores a 5.000 GB x mm3 se considera
LEUCOPENIA.
Las causa de LEUCOPENIA es característica de ciertas infecciones, fiebre tifoidea,
fiebre ondulante, muchas enfermedades por virus y riketsias, rubéola, hepatitis,
infecciones por protozoarios como el KALA-AZAR.
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Otras causas de leucopenia en la cirrosis hepática, anemia perniciosa, leucemia
aleucemica, anemia aplasica, exposición prolongada a rayos x, acción de Fármacos de
las leucemias Cáncer. Otros fármacos que producen leucopenia como efecto
secundario Cloranfenicol, fenilbutazona, antitiroideos y anticonvulsivos
Este recuento de Glóbulos blancos se realiza con la pipeta de TOMA llamada así por
aproximadamente a las dos terceras partes de su altura lleva un ensanchamiento o
bulbo que sirve para favorece la mezcla de la sangre con el liquido de dilución. El
extremo largo de la pipeta se halla dividida en 10 partes iguales presentando a la mitad
de la graduación 0,5 y la graduación 1, donde empieza la dilatación, por encima del
bulbo la numeración 11.
Se aspira sangre hasta la marca 0,5, luego se aspira liquido de dilución hasta la marca
11, se agita la pipeta durante 2 minutos obteniéndose una dilución de 1 /20.
El liquido de dilución que se utiliza es el liquido de TURK una solución de ácido acético
al 3% disuelto en agua destilada, la que tiene pequeñas cantidades de azul de
metileno, únicamente para darle color al reactivo. El liquido de Turk tiene la propiedad
de destruir a los Glóbulos Rojos, para poder observar así a los glóbulos blancos
II.- PRÁCTICA
RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCOS
OBJETIVOS
Realizar un conteo de Glóbulos Blancos en Laboratorio, para determinar
Leucocitosis, leucopenia,
MATERIAL
Pipeta de TOMA ; Solución de Turk, Cámara de Neubahuer, Manguera de aspiración,
Sangre recién extraída, Microscopio, Jeringas, Torundas, Alcohol, Tinción de
observación de frotis sanguíneo.
Métodos y procedimientos
18. Realizar la extracción sanguínea en un tubo de ensayo (sangre con anticoagulante)
19. Cargar la pipeta de TOMA ( aspirando con la manguerita hasta la marca 0,5)
20. Cargar el diluyente o solución de Turk.
21. Agitar o dar vueltas la pipeta de toma
22. Eliminar las 2 primeras gotas de la pipeta de toma y cargar la cámara de neuwawer
23. Proceder al conteo dentro de la misma con el lente de 10
Resultados
Para los cálculos se toma en cuenta la dilución, el volumen, y el numero de cuadrados
en el que se ha efectuado el conteo aplicando la siguiente formula B x 10 x 20 / 4 =
50
B= Nº de células blancas. 10 = Volumen 20= Dilución 4 Nº de cuadros. En la
practica para obtener el resultado por mm3 de sangre se multiplica el numero de
células contadas por 50.
Conclusiones
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Evaluación
1. Que es una Leucocitosis
2. Que es una Leucopenia
3. Que es el liquido de Turk
4. A que se llama Leucocitos
5. Explique y haga un dibujo de como es la cámara de Neuwawer
6. Haga un esquema y dibuje la Pipeta de Toma
7. Que acción tiene el Ácido acético en la sangre
8. Para que nos sirve conocer esta técnica
9. Que otros métodos existen actualmente para el recuentro de Leucocitos
10. Cual es la dilución de la sangre dentro de la pipeta de Toma
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BIBLIOGRAFÍA
1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16
Edición, Editorial Manual Moderno México 2001
5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
México
7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo
Buenos Aires 1995
8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002
9.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 2001
10.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;
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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD
GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 7
TEMA 7
TITULO:
GLUCOSURIA
FECHA DE ENTREGA: 9ª semana de clases
FUNDAMENTACION TEÓRICA.
Normalmente no debe existir glucosa en la orina debido a que la glucosa que llega a
los tubulos renales a través de la circulación sufre un proceso de reabsorción y pasa
nuevamente a la circulación sin llegar a atravesar los glomérulos renales. La
reabsorción que sufre la glucosa a nivel de las células renales se debe a que en el
interior de dichas células la glucosa sufre un proceso de Fosforilacion semejante al que
se lleva en el intestino. La glucosa se fosforiliza a un valor de 170 mg% de glucosa en
sangre, cuando en la sangre existen valores superiores a 170 mg% se excede la
capacidad de Fosforilacion, por lo que el excedente de glucosa que no se fosfata
atraviesa las células renales y es eliminada a través de la orina.
El grupo funcional orgánico CHO que se encuentra en la glucosa tiene propiedades
reductoras. Aprovechando esta propiedad que tienen los carbohidratos es utilizamos
un reactivo que fácilmente se reduce de Sal cúprica (AZUL) a Sal cuprosa (Roja) por
la acción reductora de este grupo funcional. El Reactivo recibe el nombre de Licor de
Fehling o Reactivo de Fehling. Consta de 2 soluciones una solución A de sulfato
cuprico azul y otro frasco de solución B o solución alcalina que se mezclara en el
momento de su uso.
II.- PRÁCTICA
OBJETIVOS
Determinar Glucosa en orina por el método de Fehling, en pacientes que se
sospecha puedan eliminar Glucosa
MATERIAL
Orina, Reactivo de Fehling, Pipetas de 5 ml, goteros, tubos de ensayo, Baño Maria,
pinzas de Madera, Solución de Glucosa pura como reactivo testigo.
Métodos y procedimientos
1) Cargar un tubo de ensayo con 1 ml de orina
2) Añadir al mismo 1 ml de solución A (Licor de Fehling)
3) Añadir al mismo 1 ml de solución B (Licor de Fehling)
4) Agitar este tubo y llevar a Baño Maria
5) Esperar anotar los cambio que se observa
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6) Realizar los mismos pasos con una solución de Glucosa sirve como testigo
Resultados
Si el tubo de ensayo en el baño María, cambia de color azul a color rojo ladrillo , la
prueba se considera como positiva, esto se comprueba con el tubo testigo de glucosa
pura anidra que llevo el mismo tratamiento
Conclusiones
Evaluación
1. Que es Glucosuria
2. Que es Glicemia
3. Explique en un ensayo corto científico por que se elimina Glucosa por Orina
4. Como puedo medir esta glucosa eliminada por orina
5. Que diagnostico piensa si Ud. ve una prueba positiva de Glucosuria
6. Cual es el fundamento del cambio de color de este reactivo
7. que composición tiene el Licor de Fehling
8. Como puedo confirmar este diagnostico , con que otras pruebas de laboratorio
9. Existen parientes con diabetes en su familia, abuelos, tíos hermanos, se hicieron esta
prueba?
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BIBLIOGRAFÍA
1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16
Edición, Editorial Manual Moderno México 2001
5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
México
7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo
Buenos Aires 1995
8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002
9.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 2001
10.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;
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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD
GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 8
TEMA 8
TITULO:
DETERMINACIÓN DE LA GLICEMIA SANGUÍNEA
Fotocolorimetrico y por el GLUCOMETRO
FECHA DE ENTREGA: 10ª semana de clases
FUNDAMENTACION TEORICA
Numerosas determinaciones bioquímicas de la sangre, se encuentran basadas en reacciones
colorimétricas, para lo cual se utiliza aparatos especiales conocidos con el nombre de foto
colorímetros o fotómetros colorimétricos.
Numerosas sustancias tienen la propiedad de poseer un color propio o bien de adquirirlo por
el agregado de un determinado reactivo.
Las reacciones colorimétricas se basan en la propiedad que tiene las substancias de dejar
pasar la luz a través de una solución coloreada.
En todas las determinaciones fotocolorimetricas se utiliza soluciones patrones o soluciones
testigo de concentración conocida, con la que se efectúa una serie de cálculos o curvas de
calibración que nos van a permitir la concentración de la sustancia que estamos determinando.
La transmisión de onda está comprendida entre 400 a 700 milimicrones, en una coloración
que va de del azul al rojo.
Todas las determinaciones calorimétricas siguen la Ley de Baer que es la relación que existe
entre la concentración de la sustancia y la transmisión de la onda.
Existen numerosas clases y marcas de foto colorímetros y espectrofotómetros , siendo
imposible describir cada uno de ellos. Existen la ventaja que cada casa comercial junto con el
aparato elabora un manual de instrucciones sobre el manejo y el funcionamiento, además
incluye las técnicas adecuadas para cada aparato.
Las partes más importantes de que consta un foto colorímetro son:
1- Filtros de color, que pueden ir incluidos en el mismo aparato, haciéndolos rotar por
medio de un tornillo especial o puede encontrarse en forma de placas individuales. El
color varia del azul , al verde, y al rojo, teniendo cada uno una numeración especial de
acuerdo a su tonalidad
2- Calda de luz, que es donde se encuentra la lámpara fotocolorimetrica.
3- Caldas o cubetas que sirven para introducir os tubos fotocolorimetricos que contiene la
solución a analizar, se encuentra situados por delante de la cámara de luz.
4- Tornillos macro y micro que sirven para llevar el aparato a Cero, o sea graduarlo según
que las determinaciones sean macro o micrométricas.
5- Escala graduada. Consta de una aguja que mueve en toda la extensión de la misma
garcías a un tornillo que se encuentra situado por delante de la misma y que sirve para
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recorrer l aguja y llevaría a la graduación correspondiente. En algunos fotocolorimetros
la escala graduada posee graduaciones que corresponden al porcentaje de actividad y
a la densidad óptica.
6- Interruptor que sirve para prender y apagar el aparato.
Los fotocolorimetros son aparatos sumamente delicados y costosos, debiendo tenerse
mucho cuidado en el manejo. Cuando no se lo usa debe tapar con una funda de plástico o
de una tela que no deje pelusa. Es necesario utilizar un estabilizador de la corriente a fin de
que las oscilaciones de la luz debido al alza o a la disminución del voltaje quemen la
lámpara fotocolorimetrica , por otra parte cuando se produce estas alteraciones durante la
determinación estas susceptibles de dar resultados erróneos.
La lámpara del foto colorímetro debe encontrarse prendida por lo menos unos cinco
minutos antes de la determinación a fin de que el filtro que se va utilizar tome la temperatura
adecuada.
Se recomienda siempre tener la precaución de llevar la aguja a cero antes de
apagar el aparato, lo mismo debe hacerse cuando se va a cambiar el filtro color.
II.- PRÁCTICA
DETERMINACIÓN DE GLICEMIA (METODO FOTOCOLRIMETRICO) Y POR EL
GLUCOMETRO
OBJETIVOS Determinar los valores normales de Glicemia. Glucosa en sangre por los
métodos Fotocolorimetrico y por el Glucómetro
MATERIAL
Tubos de ensayo, Foto colorimetro, espectrofotometro, reactivos de Wiener, Glucosa
pura, Jeringa, Sangre venosa, Paciente en ayunas.
Métodos y procedimientos
DETERMINACIÓN DE LA GLUCOSA METODO DE WIENER
Fundamento
La glucosa reacciona específicamente con la ( toluidina, una amina aromática primaria) , en
medio acético y por la acción del calor, originando una mezcla a partes iguales de glicosilamina
y base de Schiff. El color obtenido se lo determina filtro Nº 63 67
REACTIVOS
REACTIVOS CROMOGENICO
Solucion 990 mol/L de acetato o-tuluidina y 20 mol/L de tooca r bamidaen ácido acético al
88% con catalizador. Estable a temperatura ambiente.
ESTÁNDAR
4 ml de solución estabilizada de glucosa de una concentración igual a 1 g/ L. Estable a
temperatura ambiente .
MUESTRA SANGUINEA
Puede usarse suero o plasma. Cuando se usa plasma, se aconseja utilizar como
anticoagulante EDTA y fluoruros.
TECNICA
En tres tubos fotocolorimetrica marcados B (blanco) , S ( Standard ) y D ( desconocido )
colocar :
Agua destilada
B
S
D
Standard
20 ml
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Muestra
Reactivo
-
20 ml
2.5 ml
2.5 ml
SALUD
2.5 ml
Llevar los tubos al baño de agua hirviente durante 4 y medio a 5 minutos. Retirar y colocar
en agua fría de 2 a 5 minutos. Leer en foto colorímetro filtro rojo Nº 67, llevando al aparato a
cero con el blanco. El color es estable durante 45 minutos.
Resultados
CÁCULO
Se usa la siguiente fórmula:
Glucosa g / L
=
F = 1.00 g / L
________
S
Conclusiones
D
xF
1. Evaluación
2. Diferencia entre Glicemia y Glucosuria
3. Que es un espectrofotómetro, o un foto colorímetro
4. Cual es el valor normal de Glucosa en un Paciente
5. Que hipoglucemia
6.
Que es hiperglucemia
7. Cuando debo pedir un examen de Glicemia
8. Que es Polidipsia, Polifagia, Poliurea
9. En caso de no realizar la prueba fotocolorimetrica que otro método puedo utilizar
10. Que es el Glucómetro
11. Que otros métodos existen a parte del Fotocolorimetrico, el glucómetro. Actualmente 2006
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BIBLIOGRAFÍA
1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16
Edición, Editorial Manual Moderno México 2001
5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
México
7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo
Buenos Aires 1995
8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002
9.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 2001
10.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;
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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD
GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 9
TEMA 9
TITULO:
DETERMINACIÓN DE UREA
NH2-C=O-NH2
FECHA DE ENTREGA: 11ª Semana de clases
FUNDAMENTACION TEÓRICA
La Urea NH2-C=O-NH2 es el principal producto del catabolismo proteico, químicamente
es una carbamida que tiene un peso molecular de 60 gr/ml, es una molécula pequeña
donde el nitrógeno representa aproximadamente el 50 % de su peso total.
Se presenta como un polvo blanco, completamente soluble en el agua que atraviesa
fácilmente las membranas celulares y capilares. Desde el punto de vista farmacológico
actúa como diurético suave.
La Urea consttuye el principal producto del catabolismo proteico, se enfoca el interés
en su metabolismo, en su absorción, transporte, almacenamiento, y excreción de las
proteinas y de los aminoácidos
Las proteinas son introducidas al organismo mediante la alimentación sufren una
transformación enzimatica a lo largo del tubo gastrointestinal hasta degradarse a
polipetdidos pequeños y aminoácidos los cuales luego de atravesar las vellosidades
intestinales llegan al hígado donde van a sufrir una nueva transformación.
En el hígado los aminoácidos sufren dos procesos
1.- DESAMINACION.
2.- TRASAMINACION
En ambos casos se libera NH3 ( amoniaco) que va a constituir el compuesto
fundamental para la formación de la Urea.
SÍNTESIS DE LA UREA.- En la síntesis de la Urea interviene 4 aminoácidos que son
Argirina, citrulina, Ontina y el ácido aspartico
Sintetizamos el ciclo de la urea conocido con el nombre de CICLO de Krebs
HENSELEID en los siguientes pasos.
1.- El NH3 se une con el CO2 y el ATP en presencia de la enzima sintetasa de fosfato
de carbamilo para forma el FOSFATO DE CARBAMILO.
2.- El fosfato de carbamilo reacciona con la Ornitina en presencia de la enzima
sintetaza de Ornitina para formar la Citrulina.
3.- La citrulina reacciona con el ácido aspartico en presencia de la enzima
arginosuccinica para formar el ácido argino succínico.
4.-el ácido argino succínico es atacado por la enzima argino succinasa originando
argirina y ácido fumarico.
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5.-La argirina es atacada por la enzima arginasa, formando Urea y Ornitina la que
iniciara nuevamente el ciclo.
La formación de urea constituye un proceso fisiológico sumamente rápido y eficaz que
permite utilizar grandes cantidades de NH3, que es en un compuesto toxico ya que
diluciones hasta de 1 en 70.000 ocasiona la muerte de los mamíferos.
La Urea como tal no es toxica, se encuentra contenida en diversos líquidos Biológicos
siendo eliminada por medio de la orina con suma facilidad.
Los aminoácidos a nivel del intestino son atacados por las bacterias intestinales
originando NH3, el que por medio del sistema porta llega al hígado donde va a ser
utilizado para sintetizar Urea, cuando existen alteraciones anatómicas y funcionales del
Hígado, el NH3 no penetra en el tejido hepático, por lo que retorna a la sangre, como
presenta una gran afinidad por el tejido Nervioso va a localizarse a nivel del sistema
cerebral ocasionando el cuadro patológico, conocido con el nombre de SHOCK
HIPERUREMICO, COMA UREMICO que se caracteriza por onnibulaciones,
alteraciones mentales, produciéndose trastornos graves que pueden ocasionar la
muerte
La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico mas importante en la mayoría
de los líquidos biológicos. En el hombre es el principal producto final del metabolismo
proteico.
Se produce en el Hígado y es excretado por la orina a través de los riñones.
Una elevación de la concentración serica de urea, se interpreta generalmente como
una posible difusión renal. Sin embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los
valores séricos de urea se encuentra íntimamente relacionados con la dieta y el
metabolismo proteico, por lo que cualquier alteración en estas variedades se traducirán
en un cambio de la concentración de urea en suero.
Fundamentos del Método:
La ureasa descompone específicamente la urea produciendo dióxido de carbono y
amoniaco. Este reacciona en medio alcalino con salicilato e hipoclorito para dar
indofenol color verde.
II.- PRÁCTICA
DETERMINACIÓN DE UREA SANGUINEA
OBJETIVOS Determinar fotocolorimetricamente la cantidad e Urea presente en el
organismo humano
MATERIAL

Espectrofotómetro

Tubos de ensayo

Micro pipetas y pipetas

Vasos precipitados
para
medir
los

Jeringas,
Guantes,
volúmenes indicados.
Torundas

Baño María
.
Muestra

Suero, Plasma u Orina
Métodos y procedimientos
Técnicas para Suero o Plasma
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a)En tres tubos B (Blanco), D (desconocido) y S (Estándar ) Colocar:
Standard
B
S
D
-
10 ul
-
Suero o Plasma
10 ul
Reactivo 1 +
Ureasa
1ml
1ml
1ml
Mezclar: Incubar 5 minutos a 37º C o 10 minutos a
temperatura Ambienté luego agregar
Reactivo 2
1ml
1ml
1ml
Mezclar: Incubar 5 minutos a 37 oC o 10 minutos a
temperatura Ambiente. Leer en espectrofotómetro a
570 nm.
Valores de Referencia
Los valores normales esperados en son:
Suero o Plasma: 0,10 – 0,45 g / l
0,30 g% en suero 0,40 g%
30 mg % 40 mg% Limite máximo 50 mg%
Resultados
Desde el punto de vista clínico tiene importancia únicamente el aumento de la urea
sanguínea, la que recibe el nombre de Hiperuremia ( hiper azotemia .) La
Hiperuremia se presenta en la insuficiencia renal orgánica.
Hiperuremia RENAL AGUDA Y CRÓNICA
Hiper Uremia Aguda
Acompañada de anuria, oliguria, generalmente se alcanzan cifras muy elevadas de
urea, sin embargo la mayor parte de los casos son fácilmente reversibles, volviéndose
fácilmente a los valores normales. Se presenta en los siguientes casos
1.- En la glomérulo nefritis aguda, en la cual la reacción Xantoproteica es negativa,
debido que no hay retención de compuestos aromáticos.
2.- En la Necrosis maligna anurica que se presenta en ciertas alteraciones que
pueden ser ocasionadas por reacciones tras funcionales.
3.-En Necrosis de tejido renal, por intoxicación con cloruro de mercurio u otro toxico.
4.- En obstrucción por calculo renal o inflamación de la próstata
Hiperuremia CRÓNICA.- esta va acompañada de una eliminación normal de la orina
o incluso una poliurea compensadora. Los valores altos de la urea son de tipo
irreversible, presentándose en todas las alteraciones crónicas del riñón. Se presenta
en los siguientes casos
1.- En la Glomérulo nefritis crónica, la que se diferencia de la aguada por que la
reacción Xantoproteica es positiva.
2.- En la esclerosis renal secundaria.
3.- En intervenciones quirúrgicas.
4.-en Mielomas múltiple de riñón.
HIPER UREMIA EXTRA RENAL.
Este tipo de uremia no va acompañada de una alteración renal orgánica, aunque en
ciertos casos puede presentarse una alteración renal funcional, se presenta en los
siguientes casos:
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1.- Insuficiencia circulatoria, donde existe una deficiente irrigación de la sangre del
riñón
2.- Insuficiencia cardiaca congestiva que es una de las causas mas frecuentes de
hiper uremia extra renal.
3.-insuficiencia cardiaca periférica
4.- Deshidratación cloropenica, es decir por deficiencia de cloro ocasionada por
vómitos, diarreas, lavados gástricos, en este caso la Hiperuremia ce por la
administración de cloro.
5.- en el coma diabético
en los TEC Traumatismos encéfalo craneanos
Conclusiones
Evaluación
1. Que es la Urea , cuales son los valores normales de Urea
2. A partir de que aminoácido se realiza el ciclo de la Urea
3. A que se denomina HIPEUREMIA
4. Que es hiper uremia extra renal
5. que significa las palabras anuria, poliurea, glucosuria
6. Explique el coma diabético
7. Que valores considera normales de urea
8. es lo mismo hablar de 30 mg% a 40 mg% que 0,30 g/ litro a 040 gr/lt
9. Diferencie Hiperuremia aguda de crónica
10. que significa afinidad por el tejido Nervioso
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BIBLIOGRAFÍA
1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16
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5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
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7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo
Buenos Aires 1995
8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002
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PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD
GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 10
TEMA 10
TITULO:
SANGUINEO
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL
FECHA DE ENTREGA: 12ª semana de clases
FUNDAMENTACION TEÓRICA
El Colesterol es un lípido simple que deriva de los Esteroles, se encuentra
normalmente en la sangre en la proporción de 150 a 250 mg %
Su presencia en el organismo tiene un doble origen, exógeno y endógeno.
El origen exógeno se refiere al colesterol que es introducido mediante la
alimentación, principalmente a base de grasas, huevos, jamones, mantequillas,
etc.
El origen endógeno se refiere al colesterol que es sintetizado en el organismo,
siendo el principal órgano sintetizador el hígado y siguiéndole en importancia la
piel, el bazo, los riñones y las arterias.
La cantidad de colesterol que se sintetiza en el hígado oscila de 1.5 a 2
gramos y en
los tejidos extrahepaticos de 0.5gramos en las 24 horas o sea
que normalmente se sintetiza mayor cantidad de colesterol del que introduce
mediante la alimentación
El colesterol tiene tendencia a depositarse en las paredes arteriales. Esta
propiedad y el hecho de que las paredes arteriales sinteticen colesterol, ha
cobrado gran importancia y ha sido objetivo de numerosos estudios ya que se
ha demostrado que puede ser una e las causas para originar la arteriosclerosis
o ateroesclerosis, que se caracteriza por el endurecimiento de las paredes
arteriales la que pierden su flexibilidad natural por lo que la sangre es enviada
con dificultad a todo el organismo y principalmente al cerebro.
El colesterol tiene gran importancia por ser el precursor de compuestos de
gran interés fisiológico como ser: las hormonas corticales y sexuales , los ácidos
y sales biliares y la vitamina “·D”. es eliminado del organismo por medio de la
materia fecal al estado de coprosterol y por medio de los ácidos y sales biliares.
Las Lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que contienen cantidades
variables de colesterol, triglicéridos fosfolípidos y proteínas. Estas partículas
solubilizan y trasportan el colesterol en el torrente sanguíneo.
La proporcion relativa de proteina y lípido determina la densidad de estas
lipoproteínas.
La función principal de estas lipoproteínas de alta densidad en el metabolismo
lipidito es la capacidad y trasporte de colesterol desde los tejidos perifericos al
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higado en un proceso conocido como trasporte reverso de colesterol.(
mecanismo cardioprotectivo).
El DHL colesterol bajo, esta asociado con un alto riesgo de enfermedades
cardiacas. Por este motivo la determinación de HDL colesterol es una
herramienta util en la identificación de individuos de alto riesgo.
Fundamento del Método
Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan precipitando
selectivamente las lipoproteínas de baja y muy densidad (LDL y VLDL)
mediante el agregado de sulfato dextran de PM 50.000 en presencia de iones
Mg++.
En el sobrenadante separado por centrifugación, quedan las HDL y se realiza la
determinación del colesterol ligado a las mismas, empleando el sistema
enzimático Colesterol oxidasa / Peroxidasa con colimetria según Trinder (fenol/4Aminofenazona).
II.- PRÁCTICA
OBJETIVOS:
Determinar el colelesterol sanguíneo bioquímicamente
MATERIAL

Espectrofotómetro

Micro pipetas y pipetas
para
medir
los
volúmenes indicados.

Baño María
Reactivos

Suero



Tubos de ensayo
Vasos precipitados
Jeringas,
Guante,
Torundas.
Métodos y procedimientos
1. Poner en un tubo de ensayo 0,5 ml (500ul) de muestra,
2. agregar 50 ul de reactivo Precipitante. Homogeneizar agitando (sin
verter) durante 20 segundos y dejar 30 minutos en refrigerador o
15 minutos en baño de agua a 10 oC no colocar en congelador.
3. Centrifugar 15 mit. A 3000 r.p.m. Usar el sobrenadante liquido
como muestra y repartir en tre tubos de ensayo marcados de la
siguiente manera.
B
S
D
Sobrenadante
-
-
100 ul
Standard
20 ul
Reactivo
de
Trabajo
2 ml
2 ml
2ml
Mezclar e incubar 15 minutos a 37 oC retirar del baño y enfriar. Leer a 505 nm en
espectrofotomeyro o en colorimetro con filtro verde ( 490 – 530 nm), llevando a cero
con el blanco.
Valores de Referencia
Los valores normales esperados para HDL colesterol son los siguientes:
Hombres: 0,30 – 0,70 g/l
Mujeres: 0,30 – 0,85 g/l
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Resultados
Conclusiones
Evaluación
1. Que es el colesterol, dibuje su formula
2. como se determina el colesterol en sangre
3. Como se forma el colesterol endógeno
4. Que complicaciones trae el aumento del colesterol
5. Cual es el colesterol malo el LDL o el HDL (investigue)
6. Cual es el valor normal de Colesterol Total, LDL, HDL, y triglicéridos
7. Que es el 7 dihidrocolesterol
8. De donde proviene la Vitamina D2
9. Que sustancia es activada por la influencia de los rayos infrarrojos
10. Por que ingresamos al laboratorio, a verificar que...................?
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Firma del estudiante
BIBLIOGRAFÍA
1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16
Edición, Editorial Manual Moderno México 2001
5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
México
7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo
Buenos Aires 1995
8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002
9.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 2001
10.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;
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GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 11
TEMA 11
TITULO:
determinación de Ácido Úrico
FECHA DE ENTREGA: 14ª semana de clases
Fundamentacion teórica
El ácido úrico proviene de la degradación de las purinas, compuestos orgánicos que se hallan
formando una parte fundamental de los ácidos nucleicos y desoxirribonucleicos. El ácido úrico
construye el principal producto del catabolismo de las purinas en El hombre y en los mamíferos
superiores ,
En seres inferiores es atacado por la enzima uricaza siendo transformado en alantoína que se
elimina por medio de la orina.
En el hombre la mayor parte del ácido úrico que se forma proviene de la degradación de la
guanosina.
El ácido úrico tiene una reacción francamente ácida, es poco soluble en el agua, se
disuelve en una proporción de 6.5 g/100 ml. En el plasma sanguíneo debido al PH de la sangre
tiene la propiedad de combinarse con diversos cationes, formando sales monoalcalinas que
tiene una solubilidad mayor a la del ácido puro, aproximadamente de 20 a 25 gr/º.
El ácido úrico que se encuentra circulando en la sangre tiene un doble origen: endógeno y
exógeno.
El origen endógeno es que el que se produce debido a la degradación de los aminoácidos y
de las nucleoproteínas en el interior del organismo.
El origen exógeno se refiere al ácido úrico que penetra al organismo por medio e la
alimentación, ya que existen cierto grupo de sustancias que se caracterizan por su gran
riqueza en ácido úrico, como por ejemplo: los casos , y los riñones principalmente, los cuales
se los conoce con el nombre de genérico de ureinas .
El ácido úrico es eliminado del organismo a través de la orina. Ya sea al estado de ácido
úrico puro o de sales conocidas con el nombre de uratos. Su solubilidad en la orina es
relativamente mediana, en las orinas muy ácidas pero en las orinas alcalinas o neutras es
muy grande, aproximadamente de 100 a 110 gr%º.
La acumulación de este ácido Úrico en nuestro organismo se conoce como la enfermedad de
los ricos o la llamada GOTA, que se caracteriza especialmente por producir unos dolores
agudos, como agujas que pinchan en el dedo gordo del pie, y que deja al paciente adolorido
profundamente e incapacitado de realizar ninguna labor, postrado en espera de bajar este
ácido.
DETERMINACIÓN FOTOCOLORIMETRICA DEL ÁCIO URICO.
METODO DL URICOSTAL
FUNDAMENTO
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El suero se desproteiniza por la acción del ácido tunstico. El líquido claro obtenido de la
desproteinización contiene ácido úrico, el que reacciona con el reactivo fosfo-litio-tungsteno
con el que forma un complejo de tungstato de ácido úrico, de color azul, cuya intensidad es
directamente proporcional a la cantidad de ácido úrico presente en el suero.
REACTIVOS
1. Ácido tunsgtico pre-formado.
2. Reactivo nº 1- Contiene: 1.84 mol/litro de CO3Na2, este reactivo en la época del invierno
se lo debe conservar en estufa a 37ºC, si presentara precipitaciones por efecto del frío, se
debe introducir el frasco a un recipiente que contenga agua a 37ºC hasta disolución
completa.
3. Reactivo nº 2- Se halla constituido por partes equimoleculares de ácido fosfórico y ácido
tungstico a los que se añade 294 mililitros de SO4 Li2.
4. Muestra- Está representada por suero sanguíneo, se aconseja separar el suero del coágulo
antes de las horas de obtenida la sangre.
El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nucleicos y nucleoproteínas.
Habitualmente la concentración de acido urico en suero varia de un individuo a otro de
acuerdo a varios factores tales como: sexo, dieta, origen étnico, constitución genética,
embarazo.
Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de desorden en el metabolismo
de las sustancias que lo originan o de defecto en su eliminación.
Fundamentos del método
El acido urico de la muestra desproteinazada con acido tusgstico preformado,
reacciona en medio alcalino de carbonato sodico con el reactivo fosfo-litio-túngstico,
produciendo un color azul, que es proporcionado a la concentración de ácido úrico de
la muestra, y se mide colorimetricamente.
II.- PRÁCTICA
DETERMINACIÓN DE ACIDO URICO
OBJETIVOS
Determinar el ácido Úrico normal del organismo
MATERIAL

Espectrofotómetro

Micro pipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.

Baño María

Tubos de ensayo de centrifuga

Vasos precipitados

Jeringas, Guantes, Torundas.

Suero
Muestra
Métodos y procedimientos
En tres tubos de ensayo debidamente marcados colocar.
Desproteinizado
-
-
2,5 ml
Agua destilada
2,5 ml
5 ml
-
-
50 ul
1 ml
1 ml
2ml
0,5 ml
0,5 ml
Standard
Reactivo 1
Reactivo 2
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Mezclar por inmersión y colocar en bañó de agua entre 22 y 28 ºC. Entre 30 y 45
minutos después, leer en espectrofotómetro a 660 nm, llevando al equipo a cero con el
blanco.
Resultados
Valores de referencia
Suero:
Hombres :35 a 70 mg/ I
Mujeres 25 a 60 mg / l
Conclusiones
Evaluación
1. Que es el ácido úrico explique el origen endógeno y exógeno
2. Por que llaman al ácido Úrico Gota
3. A que se llama degradación de las purinas
4. Que es la guanosina
5. Que medicamentos existen para disminuir la Gota o acumulación de ácido Úrico
6. Cual el fundamento de hacer una medición fotocolorimetrica
7. Que significa desproteinisar la sangre
8. Que color da el Desproteinizado de ácido úrico
9. Que significa la eliminación de Uratos por orina
10. A que se viene al laboratorio de Bioquímica Clínica
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Firma del estudiante
BIBLIOGRAFÍA
1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16
Edición, Editorial Manual Moderno México 2001
5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
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GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 12
TEMA 12
TITULO:
DETERMINACIÓN DE LA CREATININA EN SANGRE
FECHA DE ENTREGA: 15ª semana de clases
FUNDAMENTACION TEÓRICA
La Creatinina es un compuesto nitrogenado que se encuentra contenida en gran proporción en
el músculo donde desempeña un papel importante en el fenómeno de la contracción muscular.
Es un compuesto nitrogenado que se obtiene a partir de la degradación de las proteinas
interviniendo en su formación 3 aminoácidos. GLICINA, ARGIRINA, METIONINA.
El paso inicial consiste en que al reaccionar la glicina con la argirina origina el compuesto
conocido con el nombre de GLICOCIAMINA, la que al unirse a la metionina forma la
CREATINA.
La CREATINA no se elimina del organismo al estado de creatina pura si no como su anhídrido
conocido con el nombre de CREATININA.
Solo en el hombre adulto la orina contiene CREATININA. En La mujer adulta en la época del
embarazo y de la lactancia y en el niño en ambos sexos, la orina contiene creatina y
CREATININA.
La cantidad de Creatinina que se encuentra circulando en la sangre es independiente del peso
del individuo y de la masa muscular.
En la actualidad juntamente con la UREA la Creatinina constituye uno de los principales
productos del catabolismo PROTEICO; su determinación reviste gran importancia para
determinar la gravedad de la lesión RENAL.
La Creatinina se elimina muy fácilmente del organismo y su determinación tanto como para el
diagnostico y el pronostico de ciertas enfermedades tiene gran importancia, encontrándose
principalmente relacionada con el aumento de la urea el acido URICO. Las alteraciones mas
importantes de la CREATININA se presentan en los siguientes casos:
1. Nefropatias cuando se alcanzan valores superiores a 5 mg% el pronostico es fatal a corto
plazo esto solo se presenta cuando las enfermedades renales se encuentran sumamente
avanzadas
2. En una nefritis aguda existe un aumento de la Creatinina pero es fácilmente reversible.
3. En las enfermedades cardiacas avanzadas
4. En obstrucciones reales, alteraciones de la próstata. O por presencia de cálculos renales y
uréteres tapados.
5. En el Gigantismo y la acromegalia
II.- PRÁCTICA DETERMINACIÓN DE CREATININA SANGUINEA
OBJETIVOS .Determinar la cantidad de creatinina presente en la sangre
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MATERIAL:
1) Reactivo Nº 1 Ácido Pícrico
2) Reactivó Nº 2 Solución Buffer de Glicina en NaOH
3) Solución testigo de Creatinina 20 mg/Litro de Creatinina pura estable
4) Muestra sanguínea SUEO FRESCO ( Sangre sin anticoagulante)
METODO
La Creatinina reacciona con el picrato alcalino , previa desproteinizacion del suero con
el ácido pícrico, se forma una coloración estable que se la determina
fotocolorimetricamente con el filtro color verde Nº 53.
1. Colocar en un tubo de ensayo 1,5 ml de suero y 7,5 ml del reactivo Nº1, mezclar ,
reposar 10 minutos
2. Centrifugar a 3000 rpm 5 minutos
3. Prepara 3 tubos de ensayo (B) Blanco (S) STANDART (D)Desconocido
B
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Sobrenadante
6 ml
Standart
1 ml
Agua
3,5 ml 2,5 ml
Reactivo Nº 1
3,5 ml 3,5 ml
Reactivo Nº 2
1 ml1 1 ml 1 ml
Mezclar los tubos por inversión dejar reposar entre 20 y 30 minutos luego proceder a su lectura
en el foto colorímetro
Para los cálculos se utiliza la siguiente formula
Creatinina mg /lt = D x f
Factor 20/Standart
RESULTADOS
VALORES NORMALES
Los valores normales en Suero son de 0,8 mg % a 1,4 mg%
ORINA 0,9 mg % a 1,5 mg %
Clearence de Creatinina 80 a 140 mg % 125 mg% termino medio
Algunos autores coinciden en que el termino medio de la Creatinina puede oscilar entre 1 y 2
mg%, encontrándose mas en el hombre que en la mujer debido a la masa muscular.
CONCLUSIONES
EVALUACIÓN
1. Que es La Creatinina
2. Como se forma la Creatinina
3. Que es la Creatina
4. En que enfermedades suele estar aumentada la Creatinina
5. En un caso de Insuficiencia Renal como están los valores de Creatinina
6. Como se determina la cantidad de Creatinina en sangre
7. Que es el asido Pícrico
8. Que otros usos se le da al ácido pícrico
9. Ultimas técnicas de investigación de la Creatinina
10. Esta dosificación para que le sirve en el transcurso de su carrera
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BIBLIOGRAFÍA
1.- A BLANCO química biológica 7 edición. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMÉNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Química Orgánica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioquímica de Harper 16
Edición, Editorial Manual Moderno México 2001
5.- LEHNINGER Bioquímica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioquímica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
México
7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biología Molecular y celular Editorial el Ateneo
Buenos Aires 1995
8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002
9.-ANTONIO BLANCO Química Biológica Edito 2001
10.-BLOOMFIELD , MOLLY Química de los organismos Vivos Edit America 1997;
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