ELISA Fase Liquida

Actividades del año 2009
Fiebre aftosa
Eduardo Dionisio Maradei
Dirección de Laboratorios – DILAB - SENASA
Av. Fleming 1653, CP 1640, Martínez, ARGENTINA
Tel.: (54 11) 4836.1995, Fax: (54 11) 4836.1995
[email protected] , [email protected] , www.senasa.gov.ar
Resumen de las actividades generales relacionadas con la enfermedad
Durante este período se desarrollaron tareas vinculadas con el diagnóstico de la enfermedad, el control de vacunas, la
bioseguridad en los laboratorios, la provisión regional de reactivos de referencia, reuniones regionales de
harmonización, capacitación, asesorías y proyectos de investigación.
1.
2.
Pruebas en uso o disponibles para la enfermedad especificada, en su laboratorio.
Prueba
Para
Especificidad
Total
Cultivo cellular
Aislamiento viral
Tipo
72
ELISA Sandwich indirecto
Antígeno
Tipo
411
Fijación de complemento 50%
Antígeno
Tipo
1.788
Virus Neutralización (VN)
Anticuerpo
Tipo
456
ELISA Fase Liquida
Anticuerpo
Tipo
72.735
ELISA 3 ABC
Anticuerpo
Grupo
38.665
Western blott (EITB)
Anticuerpo
Grupo
1.580
Inmunodifusión en agar (IDGA)
Anticuerpo
Grupo
591
ELISA Tipificación monoclonal
Antígeno
Tipo
118
PCR
Acido nucleico
Grupo 3D
102
Producción y distribución de reactivos de diagnóstico.
Sueros hiperinmunes serotipos O 1 Campos, A24 Cruzeiro, A Arg 2001 y C3 Indaial de referencia en cobayo (18
ml uso local) (88 ml distribuidos a otros países).
Hemolisina (Producción 50 ml)
Sueros bovinos. (Producción 860 ml)
Cepas de Virus de referencia para producción y control de vacunas (3viales distribuidos a laboratorios locales).
Suspensión viral para prueba de desafío viral control de vacuna antiaftosa (360 ml)
Informes anuales de los Laboratorios de Referencia y Centros Colaboradores de la OIE, 2009
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Fiebre aftosa
Actividades específicamente relacionadas con el mandato de los Laboratorios de
Referencia de la OIE
3.
Armonización y normalización internacional de los métodos para las pruebas de diagnóstico o la producción y el
análisis de vacunas.
Se participó de pruebas interlaboratorio con Panaftosa en pruebas de ELISA 3 ABC/EITB y en pruebas de ELISA
Sandwich.
Se realizó el control de calidad de vacunas antiaftosa y antigenos que se utilizan en Argentina y que se exportaron
a Bolivia ,Brasil, Colombia, Ecuador,Paraguay, Uruguay y Venezuela.
Vacunas antiaftosa de uso local: 154.695.435 dosis
Vacunas antiaftosa de exportación: 24.632.270 dosis
Antígenos de exportación: 3.420 litros
4.
Preparación y distribución de standards de referencia internacional para pruebas de diagnostico
y vacunas
Sueros de referencia O1 Campos, A24 Cruzeiro, C3 Indaial, A 2001. (distribución 88 ml)
Cepas de virus de referencia origen bovino para produccion de vacunas (distribución 3 viales)
5.
Investigación y desarrollo de nuevos procedimientos para diagnóstico y control.
El Laboratorio de Referencia del SENASA integra la Red Interinstitucional para Investigación y Desarrollo en
Fiebre Aftosa (RIIDFA) de Argentina con quien realiza trabajos en cooperación. Actualmemente con el
financiamiento de la Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica se está desarrollando Proyecto para
Áreas Estratégicas (PAE) 2007: “Acciones coordinadas de investigación y desarrollo en fiebre aftosa para asegurar
el estatus de país libre de la enfermedad”
Este PAE-2007 está conformado por 14 proyectos de investigación, de los cuales el Laboratorio de Referencia
para Fiebre Aftosa de SENASA, participa en los siguientes proyectos:
PID-PAE 2007-74: Desarrollo y optimización de métodos de control alternativos de calidad y eficacia de vacuna
antiaftosa.
PID-PAE 2007-87: Evaluación de la protección cruzada de cepas vacunales del VFA frente a cepas heterólogas en
bovinos
PICT-PAE 2007-67: Cuantificación de la transmisión del virus de fiebre aftosa en bovinos no vacunados y
bovinos vacunados.
PICT-PAE 2007-13: Desarrollo de métodos de PCR en tiempo real para el diagnóstico rápido del VFA.
PFDT-202: Programa de Capacitación en Bioseguridad
PICT-PAE 2007-33: Estudio de la evolución molecular del VFA utilizando el brote Argentino correspondiente a la
cepa A Argentina 2001 como modelo.
PICT-PAE 2007-73: Desarrollo y escalado de producción de reactivos de diagnóstico para la evaluación del VFA
y sus anticuerpos.
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Informes anuales de los Laboratorios de Referencia y Centros Colaboradores de la OIE, 2009
Fiebre aftosa
6.
Recopilación, análisis y difusión de datos epizootiológicos relevantes para el control
internacional de la enfermedad
No hubo en este período.
7.
Provisión de consultorías por expertos a la OIE o a los Miembros de la OIE
No se realizaron.
8.
Provisión de entrenamiento científico y técnico al personal de otros miembros de la OIE
Se brindo entrenamiento a un profesional del laboratorio oficial de la Republica del Paraguay El entrenamiento
estuvo dirigido a la Implementación de Normas ISO 17025.
Se brindo un entrenamiento en servicio a un profesional del Laboratorio de Salud Animal de la República de
Ecuador, en temas de aislamiento viral, tipificación, caracterización, PCR y vaccine matching.
Se participó en el Taller de Capacitación en “Atención Primaria de enfermedades vesiculares y confundibles”
organizado por el “Programa de Acción Mercosur Libre de Fiebre Aftosa”PAMA” con la asistencia de
profesionales de los servicios de salud de Argentina, Uruguay, Paraguay y Bolivia, desarrollado en la ciudad de
Salvador Mazza, provincia de Salta, Argentina, los días 2,3 y 4 de diciembre.
También en el marco del “Programa de Acción Mercosur Libre de Fiebre Aftosa “PAMA” se participó en el
dictado de los cursos de Capacitación Técnica en Fiebre Aftosa, Vigilancia Epidemiológica, realizados en las
ciudades de Gral. Roca provincia de Río Negro (14 y 15 de abril), Mercedes provincia de San Luis (11 y 12 de
agosto), Chivilcoy (9 y 10 de noviembre) y Mar del Plata 17 y 18 de noviembre) provincia de Buenos Aires.
9.
Provisión de servicios de pruebas diagnósticas a otros Miembros de la OIE
Se realizaron pruebas diagnósticas sobre muestras (19) provenientes de brotes de Fiebre Aftosa de Ecuador que
incluyeron aislamiento viral, tipificación (serotipo O), caracterización por anticuerpos monoclonales, PCR,
Secuenciamiento y pruebas de vaccine matching por virusneutralización y fijación de complemento.
Se realizaron pruebas de asilamiento vira y PCR lcon resultado negativo sobre una muestra de Líquido Esofàgico
Faringeo (Probang)de la Zona de Alta Vigilancia de Bolivia
10. Organización de reuniones cientificas internacionales en nombre de la OIE o de otros
organismos internacionales.
Se organizó el “Taller Regional sobre el uso del ELISA en fase liquida aplicado al Control de Potencia de Vacuna
Antiaftosa” entre el 6 y el 9 de Octubre de 2009 con la participación de nueve profesionales de Brasil, Colombia,
Paraguay, Uruguay y Venezuela.
11. Participación en estudios científicos internacionales colaborativos

Participación en el Proyecto Colaborativo (UE): FP7KBBE-2008 1: 7º Programa de Marco de Trabajo:
“Desarrollo, mejoramiento y complementación en el ahorro de uso de animales en las estrategias para el
control de vacunas en regiones libres y endémicas” (FMD-DISCONVAC).
“Development, enhancement and complementation of animal-sparing, foot-and-mouth disease vaccine-base
control strategies for free and endemic regions” (FMD-DISCONVAC).
Se participa en los siguientes paquetes de trabajo (WP):
Informes anuales de los Laboratorios de Referencia y Centros Colaboradores de la OIE, 2009
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Fiebre aftosa
WP2: Reducción y refinamiento de los test in vivo por métodos in vitro para control de calidad de vacunas
WP3: Determinación y mejoramiento de la protección heteróloga conferida por vacunas antiaftosas.
WP4: Desarrollo de vacunas y alternativos (antivirales) con rápida respuesta humoral y basados en métodos
de producción más seguros.

Acuerdo de colaboración e investigación con el Instituto de Salud Animal- Pirbright, UK (IAH): Defra
Project SE2812:
“Evaluación de vacunas antiaftosas de emergencia del Reino Unido para el mejoramiento de las estrategias
de inmunización y control de la enfermedad”
Objetivos: Análisis de muestras de sueros para el desarrollo de un modelo de medición de la potencia de
vacunas antiaftosas in vitro.
12. Publicación y difusión de información concerniente al trabajo de la OIE (incluida una lista de las
publicaciones científicas, las actividades de publicacion por internet, las presentaciones en
conferencias internacionales)

Presentaciones en conferencias y reuniones internacionales
a) Conferencia Mundial OIE/FAO sobre la Fiebre Aftosa “Hacia el control de la enfermedad a nivel Mundial” 24
al 26 de Junio Asunción, Paraguay.
b) Reunión de la Red de Laboratorios de Referencia para Fiebre Aftosa de la OIE/FAO.
Nueva Delhi (India) 23 al 26 de Noviembre de 2009.
13. Inscripción de kits de diagnóstico en el Registro de la OIE
i)
¿Participó usted a grupos de expertos para asesorar kits candidatos a la inscripción en el
Registro de la OIE? Si la respuesta es positiva, ¿cuáles reactivos fueron asesorados?
No se realizaron
ii)
¿Presentó usted la candidatura de kits para inscripción al Registro de la OIE? Si la
respuesta es positiva, ¿cuáles kits?
No se realizaron
_______________
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Informes anuales de los Laboratorios de Referencia y Centros Colaboradores de la OIE, 2009