SEMANA1 - Instituto de Higiene

DEPARTAMENTO DE BACTERIOLOGIA Y VIROLOGIA
CEFA 2010/UTI III
OBJETIVOS Y CRONOGRAMA DIARIO DE LA SEMANA 1
TEMARIO:
Relación huésped-parásito. Flora normal. Principales agentes de infección de piel y
tejidos blandos *. Modelos: S. aureus y C. perfringens.
*nota: Tomado del libro: Enfermedades Infecciosas, Mandell 2003; la traducción al español
utiliza este termino en sustitución a partes blandas.
OBJETIVOS
1.
Objetivos generales
Al finalizar la semana, el estudiante poseerá nociones respecto a la forma en que los principales
agentes bacterianos causantes de infecciones de piel y tejidos blandos, participan en dichos
procesos. Habrá avanzado en su capacidad de explicar como estos microorganismos causan
infección, pudiendo describir las principales características biológicas y determinantes de
patogenicidad de los modelos infecciosos planteados.
2.
Objetivos específicos:
Cumplida esta semana, el estudiante será capaz de:
- Detallar los principales conceptos de bioseguridad en el laboratorio de microbiología, de
manera de manejarse adecuadamente en el mismo.
- Diferenciar cuales sitios anatómicos contienen flora y cuales son estériles.
- Describir a grandes rasgos la composición de la flora normal en los diferentes sitios
anatómicos diferenciando flora basal y flora transitoria.
- Estudiar las distintas formas de interrelación entre parásito y huésped, definiendo los
conceptos de portador, infección y enfermedad infecciosa.
- Describir las principales características de las siguientes infecciones de piel y tejidos blandos:
impétigo, erisipela, forúnculo, foliculitis, absceso, celulitis, mionecrosis.
- Clasificar al género Staphylococcus, estimando su importancia en nuestra realidad médica.
- Describir y analizar las principales características morfológicas, estructurales y biológicas de
S. aureus.
- Reconocer los principales grupos de antimicrobianos utilizados en el tratamiento de las
infecciones estafilocóccicas.
- Describir el concepto de susceptibilidad y de resistencia a antimicrobianos, aplicada a
Staphylococcus. Definir los perfiles de resistencia de las distintas cepas de S. aureus.
- Clasificar al género Clostridium estimando su importancia en nuestra realidad médica.
- Describir y analizar las principales características morfológicas, estructurales y biológicas de
C. perfringens. Definir esporulación.
- Describir los procedimientos de estudio de estos microorganismos: toma de muestras,
condiciones y medios de cultivo, pruebas de identificación a nivel de género y especie.
3.
Objetivos de destrezas:
- Diferenciar al microscopio óptico células eucariotas de procariotas.
- Realizar la preparación de un frotis y su tinción con técnica de Gram.
- Identificar al microscopio óptico bacterias Gram Positivas y diferenciar morfológicamente
cocos de bacilos.
- Realizar el estudio de sensibilidad antibiótica por el método de disco difusión en agar
(antibiograma) y poder interpretarlo utilizando las tablas estándares.
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CRONOGRAMA
Lunes 5/04.
Bioseguridad en el laboratorio. Relación huésped-parásito, Flora normal.
Bioseguridad en el laboratorio para el correcto manejo en clase.
Flora normal de piel y mucosas. Flora basal y transitoria.
Conceptos de portador, infección y enfermedad infecciosa.
Conceptos de siembra y aislamiento.
Práctico:
- Realización de frotis de mucosas y tinción por Gram.
- Observación microscópica de los frotis realizados y teñidos.
- Observación microscópica de un frotis proveniente de un exudado vaginal normal.
- Toma de muestras y siembra de hisopados de superficies cutáneo-mucosas.
- Viñeta clínica de muestra "A" y siembra de la muestra clínica (hisopado de una lesión de
piel), en agar sangre y agar simple.
Se propone trabajar en 4 subgrupos, 1 procesa la muestra A y los otros 3 realizan frotis y
siembra de hisopados de superficies cutáneo - mucosas.
Monitor:
-Pautas para discutir normas de bioseguridad en el laboratorio.
-Flora normal:
Frotis de exudado vaginal (células epiteliales y lactobacilos)
Placa de agar sangre con exudado faríngeo, exudado nasal y piel;
Observación microscópica de las colonias correspondientes (cocos Gram positivos en
cadenas, cocos Gram positivos en racimos, cocos y bacilos Gram positivos).
Martes 6/04.
Microorganismos asociados a infecciones de piel y partes blandas.
Modelo de estudio: Staphylococcus aureus.
Morfología y estructura de Staphylococcus sp. Introducir conceptos de requerimientos
nutricionales y medios de cultivo. Concepto de cultivo puro.
Practico:
- Evaluación macro y microscópica de los cultivos del día anterior de superficies cutáneo mucosas
(observar las placas, describir los distintos tipos de colonias y realizar Gram).
- Evaluación macro y microscópica de la siembra y aislamiento realizado a la muestra A; se
observará un cultivo puro de S. aureus. Ver requerimientos nutricionales.
Iniciar sistemática de identificación de S. aureus. Realizar prueba de catalasa, clumping factor
(coagulasa en lámina) y DNAsa.
- Se analizará la viñeta “B”. Se llevará al salón muestra B ya sembrada en agar sangre y agar
simple, se le realizará también: prueba de catalasa, clumping factor y DNAsa.
Monitor:
- Diferentes morfologías coloniales.
- Alfa y beta hemólisis en agar sangre.
- Aislamiento de S. aureus y frotis de estas colonias al Gram.
- Pus con S. aureus.
- Esquema de la estructura de la pared bacteriana y de la pared Gram positiva.
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Miércoles 7/04.
Staphylococcus: patogenicidad, métodos de estudio, sensibilidad a antibióticos.
Principales factores de virulencia y patogenicidad de S. aureus.
Practico:
- Identificación presuntiva de Staphylococcus.
- Introducción al estudio de la sensibilidad a antimicrobianos. Realización de antibiogramas a
las cepas de las muestras A y B.
Monitor
Catalasa, clumping factor, DNAsa.
Antibiograma
Fotografías de 3 situaciones clínicas de las que surgieron 3 cepas de S. aureus: infección de
tejidos blandos, impétigo, forúnculo.
Examen microscópico directo de procesos por S. aureus (cocos Gram positivos y células
polimorfonucleares).
Jueves 08/04.
Identificación de S. aureus. Antibiograma.
Practico:
- Lectura e interpretación de los antibiogramas sembrados el día anterior.
- Describir los 3 patrones más importantes de resistencia de S. aureus (sensible, SAMR-com,
SAMR hospitalario).
Viernes 09/04.
Anaerobios e infecciones de piel y tejidos blandos. Modelo: Clostridium perfringens.
-
Observación microscópica de frotis realizados a partir de colonias crecidas en placas de agar
sangre incubadas en anaerobiosis. Las mismas desarrollaron a partir de la siembra de
muestra "C", procesada por nosotros.
- Observación de medio tioglicolato para discusión de requerimientos atmosféricos
- Principales factores de virulencia y mecanismos de patogenicidad de C. perfringens.
- Concepto de esporulación.
Monitor:
Jarra de anaerobiosis.
Cultivo en agar sangre de C. perfringens.
Examen microscópico directo de procesos por C. perfringens.
Frotis al gram de C. perfringens.
Foto de lesión asociada a anaerobios (gangrena).
Examen directo de infección polimicrobiana.
Esquema de esporulación.
Frotis al Gram de C. dificcile y C. tetani (esporos).
Coloración de verde de malaquita para observación de esporos.
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VIÑETAS CLÍNICAS CORRESPONDIENTES A LAS MUESTRAS QUE SERÁN ESTUDIADAS
EN LA SEMANA 1.

Niño de 2 años, Consulta por lesiones de piel en diferentes áreas del cuerpo y en distintos
estadios evolutivos; algunas máculas, vesículas y lesiones costrosas con reacción
inflamatoria perilesional. Las lesiones están ubicadas principalmente a nivel de surco
nasogeniano derecho (con extensión a fosa nasal derecha) y en extremidades superiores
e inferiores. A nivel intranasal la lesión es costrosa. Sin fiebre y sin otra sintomatología.
Se realiza un exudado de lesión ubicada en el surco nasogeniano, con hisopo estéril, y se
envía al laboratorio para su estudio (muestra "A").

Varón de 18 años sin antecedentes patológicos a destacar. Hace 4 días recibe medicación
intramuscular a nivel de glúteo derecho por contractura muscular. El día de ayer
comienza con dolor en dicha región, por lo cual consulta, no presenta fiebre ni otra
sintomatología a destacar. Al examen físico el paciente se presenta apirético, con buen
estado general. Se constata en glúteo derecho, tumefacción de 3 cm de diámetro
eritematosa, caliente y fluctuante. Se punciona dicha tumefacción con jeringa y se extrae
secreción mucopurulenta que se envía al laboratorio para su estudio (muestra "B").

Paciente de 45 años que ingresa hace 5 días al Instituto de Traumatología por fractura
expuesta de tibia derecha por accidente de moto; se realiza cirugía. A los 2 días comienza
con dolor en MID. Al examen se observan fijadores externos y amplias suturas de
colgajos, con tejido necrótico, áreas fluxivas y escasa supuración; a la palpación
crepitación. Ingresa a block quirúgico para debridación y se envía al laboratorio muestra
de tejido en caldo Tioglicolato muestra "C". Se siembra en agar sangre y se incuba en
anaerobiosis. Se obtiene el cultivo que ud. observa.
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