Universidad Nacional de Río Cuarto. UNIVERSIDAD NACIONAL DE RIO CUARTO Facultad de Ciencias Exactas, Físico-Químicas y Naturales Departamento de Ciencias Naturales. Laboratorio de Fisiología Vegetal. Campus Universitario – Río Cuarto. Argentina Ácido Salicílico Ácido salicílico En la Edad Media y Renacimiento se utilizaron con profusión los remedios que contenían salicilatos, elaborados a partir de corteza, hojas y frutos del sauce blanco y de las flores de la Spirea ulmaria. La familia salicáceas comprende dos grandes géneros, el Populus y el Salix. El ácido salicílico forma parte de un amplio grupo de compuestos sintetizados en plantas denominados fenólicos. En el siglo XIX tienen lugar las investigaciones precisas para el aislamiento y purificación del ácido salicílico, su síntesis química y finalmente la síntesis del Ácido Acetil Salicílico (1989). Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 1 Universidad Nacional de Río Cuarto. Vía de síntesis ácido salicílico Ruta identificada por Lee et al. 1995; Chen et al. 2009) Bacterias y algas verdes y rojas – Hongos hemi-biotrofos. Estres abiotico Vacuola COOH O-Glucosa AS Glucosidasa SA synthase SAS Isocorismato sintasa AS Glucosiltransferasa Ej. Aspartico Aminoácido sintása Ácido salicílico SA binding protein 2 HO-SA Fenil alanina amonioliasa Hidroxilación Me-Glu-SA Lignina Flavonoides Ácido 2,5 dihidroxibenzóico (ácido gentísico) Ácido salicílico aminoácido conjugado (SA-aa) ?? Transporte a larga distancia?? Ruta activada por estrés Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas Existen rutas no enzimáticas 2 Universidad Nacional de Río Cuarto. Ácido salicílico SA stimulates thermogenesis primarily by inducing the expression of alternative oxidase, which in turn enhances the capacity of the mitochondrial alternative respiratory pathway. Ácido The remaining potential energy is released as heat. analyses of plants responding to microbial salicílicopathogen infection revealed another function. D’Maris Amick Dempsey, et al, 2011. The arabidopsis book. Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 3 Universidad Nacional de Río Cuarto. T Verticillum growth (%) hormonas y m.o. C 120 a b b SA JA 80 40 0 JA Vs. Alternaria spp. Sclerotinia growth (%) Control B 120 a b 80 c 40 0 Control SA JA A Alternaria growth (%) 120 a b b 80 40 0 Control SA JA Proteínas microbianas, pequeños péptidos y oligosacáridos, Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 4 Universidad Nacional de Río Cuarto. Defensa Pathogen attack University of Delaware • Newark, DE 19716 • USA • Changes in the microtubule network beneath the point of contact Hardham, et al., 2008 Focusing of actin cables at the contact site. Hardham, et al., 2008 Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 5 Universidad Nacional de Río Cuarto. Respuestas a estrés biótico Diversas hormonas vegetales tales como el ácido jasmónico (JA), el ácido salicílico (SA) y el etileno (ET) están implicadas en los mecanismos de defensa a estrés biótico ejerciendo su acción en forma sinérgica y/o antagónica (Shah, 2003; Guo y Ecker, 2004; Pozo y col., 2005). Aplicaciones exógena de SA y JA a bajas concentraciones resultan en una expresión sinérgica de la proteína de respuesta a patogénesis (PR) y proteínas dependientes de JA, mientras que la aplicación a altas concentraciones implicaron la producción de ROS y muerte celular (Mur y col., 2006). Pozo y col., 2005 The cellulose synthase gene CeSA3/CEV1 controls a point of convergence VIRUS HONGOS BIOTROFOS BACTERIAS SAG101 EDS PAD4 - NPR1 FT PR1 Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas Overexpression of WRKY70 leads expression of the SAresponsive PR genes and suppression leads to expression from JAresponsive genes 6 Universidad Nacional de Río Cuarto. A otras oxylipinas con actividad biológica? SA se ha demostrado para controlar la central nuclear translocation o NPR1 través de redox celular changes Con un patógeno, NPR1 que es retenido en el citoplasma como un oligómero a través de redoxsensibles enlaces disulfuro intermoleculares. Después de la inducción, estos enlaces disulfuro se reduce, la liberación de monómeros NPR1 en el núcleo, donde NPR1 actúa como un cofactor para factores de transcripción, tales como TGA, para inducir la defensa. Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 7 Universidad Nacional de Río Cuarto. Gene expression Ácido salicílico Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 8 Universidad Nacional de Río Cuarto. HONGOS NECROTROFOS Ca++ The cellulose synthase gene CeSA3/ CEV1 controls a point of convergence WOUND HERVIBORO S CDPK5 CDPK4 JA JIN1/MYC2 Coordinating a transcriptional cascade (Dombrecht et. al., 2007) FT Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 9 Universidad Nacional de Río Cuarto. 19 Además, los recientes hallazgos demostraron que otras fitohormonas como brasinoesteroides, auxinas, giberelinas, citoquininas y ácido abscísico (ABA) contribuyen a activar una inmunidad eficaz al permitir la reasignación de los recursos, la regulación de la muerte celular y el daño oxidativo, y el equilibrio de la presión del agua asociada a la infección por patógenos Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 10 Universidad Nacional de Río Cuarto. For a long time, an active systemin was found only in tomato (Solanum lycopersicon), but not in tobacco. Herbívoros Herídas Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 11 Universidad Nacional de Río Cuarto. Jasmonatos en la respuesta de las plantas a herbívoros La herida ocasionada por el herbívoro activa un mecanismo de defensa en el tejido dañado directamente (respuesta local), y en hojas no dañadas localizadas a considerable distancia del sitio inicial de ataque (respuesta sistémica). Los JAs actúan indirectamente al ataque del herbívoro generando emisiones volátiles, (similar a que fuera un herida) y directamente a través de la síntesis de proteínas y pequeñas moléculas, (PINs, leucine aminopéptidasa, threonine deaminasa (TD), and arginase), co acción en el tracto digestivo del herbívoro. La TD tendría no solo efecto sobre el herbívoro, sino tambien podría contribuir en la planta a formar Ile, y con ello la síntesis de JA-Ile, la cual esta presente en caso de “wounding”. Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 12 Universidad Nacional de Río Cuarto. Exogenous application of 1 mM COR increased endogenous OPDA levels in CORtreated traps (local) as well as in nonstimulated traps. Venus atrapamoscas, Dionea muscipula, donde OPDA actua en el cierre lento de la trampa y afecta a la secreción de digestivo enzimas (Escalante-Pérez et al., 2011). Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 13 Universidad Nacional de Río Cuarto. Pseudomona syringae INDUCCIÓN DE RESISTENCIA SISTÉMICA INDUCIDA (ISR) POR RIZOBACTERIA Fig.7. Modelo que ilustra el rol de JA en la inducción de resistencia a patógenos. A) El reconocimiento del patógeno por la planta induce la producción de JA, ET y SA. La interacción entre los diferentes compuestos conduce a la inducción de genes de defensa, lo cual determina la respuesta de defensa por parte de la planta. B) Microorganismos benéficos, tales como rizobacterias, o pretratamientos con MeJA determinan una rápida y efectiva inducción de las respuestas de defensa de las plantas dependiente de JA luego del ataque del patógeno. Adaptada de Pozo y col. (2005). Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 14 Universidad Nacional de Río Cuarto. A wide range of cellular responses has been reported to be potentiated by these compounds, including alterations in ion transport across the plasma membrane, synthesis and secretion of antimicrobial secondary metabolites (phytoalexins), cell wall phenolics and lignin-like polymers, and activation of various defense genes (Conrath, 2009). 30 REVIEW ARTICLE Front. Plant Sci., 01 October 2014 | http://dx.doi.org/10.3389/fpls.2014.00488 Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 15 Universidad Nacional de Río Cuarto. 31 Hexanoic acid REVIEW ARTICLE Front. Plant Sci., 01 October 2014 | http://dx.doi.org/10.3389/fpls.2014.00488 Concurso Prof. Adjunto. Tecnicas de Análisis de Semillas 16