UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS TESIS DE GRADO PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE INGENIERO AGRÓNOMO TEMA: “CALIDAD DE SEMILLA DE ARROZ EN FUNCIÓN DE LA INCIDENCIA Y SEVERIDAD DE ENFERMEDADES EN LA ZONA DE DAULE” POR: GUILLERMO LUPERCIO BRIONES HUACÓN DIRECTOR: ING. AGR. MARÍA LETICIA VIVAS VIVAS, MSc. DAULE - ECUADOR 2014 UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS La presente tesis de grado titulada “CALIDAD DE SEMILLA DE ARROZ EN FUNCIÓN DE LA INCIDENCIA Y SEVERIDAD DE ENFERMEDADES EN LA ZONA DE DAULE” realizada por el Egdo. Guillermo Lupercio Briones Huacón, bajo la dirección del Ing. Agr. Leticia Vivas Vivas, MSc ha sido aprobada y aceptada con la calificación de 10, 10, 10 equivalente a Sobresaliente por el Tribunal de Sustentación como requisito parcial para obtener el título de: INGENIERO AGRÓNOMO TRIBUNAL DE SUSTENTACIÓN ii Guayaquil 28 de Abril del 2014 CERTIFICADO GRAMÁTICO ING. AGR. LETICIA VIVAS VIVAS, MSc. CON DOMICILIO EN LA CIUDAD DE GUAYAQUIL, POR LA PRESENTE CERTIFICO QUE HE REVISADO LA TESIS DE GRADO ELABORADA POR EL SEÑOR GUILLERMO LUPERCIO BRIONES HUACÓN CON C.I. 0920496486, PREVIA A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE INGENIERO AGRÓNOMO, CUYO TEMA ES: “CALIDAD DE LA SEMILLA DE ARROZ EN FUNCIÓN DE LA INCIDENCIA Y SEVERIDAD DE ENFERMEDADES EN LA ZONA DE DAULE”. LA TESIS DE GRADO ARRIBA SEÑALADA HA SIDO ESCRITA DE ACUERDO A LAS NORMAS GRAMATICALES Y DE SINTAXIS VIGENTE DE LA LENGUA ESPAÑOLA. iii Las investigaciones, resultados, conclusiones y recomendaciones del presente trabajo, son de exclusiva responsabilidad del autor Guillermo Lupercio Briones Huacón C.I.: 0920496486 Email: [email protected] iv DEDICATORIA Dedico la presente tesis a Dios, gracias a él he podido ser cuanto soy, porque sin él no soy nada. También dedico esta tesis a mis queridos padres Sr. Guillermo Briones y Sra. Clarivel Huacón de Briones gracias a sus esfuerzos y sacrificios, por haber depositado su confianza e impartido sus sabios consejos guiándome por los senderos de la vida. A mi tía Grace Huacón Plúas que más que una tía es mi segunda madre, gracias a sus consejos, comprensión y su apoyo incondicional en cada instancia de mi vida. A mis hermanos Dolores y Francisco por haberme brindado todo su cariño y comprensión permaneciendo conmigo en los buenos y malos momentos. A mi novia Isabel Hidalgo por estar conmigo en todos estos años de carrera universitaria, apoyándome para ser mejor cada día, por ser mi amiga, mi compañera, por ser tan incondicional y por su amor sin medida. v AGRADECIMIENTOS A mis padres y hermanos. A la Universidad de Guayaquil en especial a la Facultad de Ciencias Agrarias Paralelo Daule, a todos los profesores que impartieron sus conocimientos y experiencias durante el desarrollo de mi carrera universitaria. Expreso también mi agradecimiento al Instituto Nacional Autónomo de Investigaciones Agropecuarias, Estación Experimental Litoral Sur “Dr. Enrique Ampuero Pareja”, laboratorio de Fitopatología del Departamento Nacional de Protección Vegetal por haberme permitido realizar mi trabajo de tesis. Con gratitud a mi tutora Ing. Agr. MSc. Leticia Vivas Vivas, por su gran calidad humana a quien le debo muchas horas de amable dedicación y paciencia. De manera especial a la Ing. Agr. Elena Corozo Ayoví, por su ayuda y conocimientos compartidos. A todos mis amigos, compañeros y familiares que de muchas formas aportaron con un grano de arena para que logre la culminación de este trabajo investigativo. vi REPOSITARIO NACIONAL EN CIENCIA Y TECNOLOGÍA FICHA DE REGISTRO DE TESIS TITULO Y SUBTITULO: CALIDAD DE SEMILLA DE ARROZ EN FUNCIÓN DE LA INCIDENCIA Y SEVERIDAD DE ENFERMEDADES EN LA ZONA DE DAULE AUTOR/ES: Guillermo Lupercio Briones Huacón INSTITUCIÓN: Universidad de Guayaquil CARRERA: Agronomía FECHA DE PUBLICACIÓN: 25-04-2014 ÁREAS TEMÁTICAS: Cultivo, manejo, rendimiento. TUTOR: Ing. Agr. MSc. Leticia Vivas Vivas REVISORES: Ing. Agr. MSc. Leticia Vivas Vivas Ing. Agr. MSc. Eison Valdiviezo Freire Ing. Agr. Dds. Pedro Vera Asang FACULTAD: Ciencias Agrarias N. DE PAGS: 51 PALABRAS CLAVE: Semillas, microorganismos, reciclada, granos manchados. RESUMEN: Las enfermedades que afectan la calidad de la semilla de arroz son Pyricularia oryzae, Alternaria spp, Bipolaris oryzae, Curvularia spp, Sarocladium oryzae, Ustilaginoidea virens, Pseudomonas fuscovaginae y Fusarium spp. Los objetivos de la presente investigación fueron: 1) Determinar la presencia de microorganismos en las semillas de arroz certificada y reciclad y 2) Evaluar la incidencia y severidad de enfermedades en semillas de arroz certificada y reciclada en condiciones de campo. El trabajo se realizó durante la época seca del 2013 en la Hacienda Santa María, recinto San Pedro, cantón Daule, provincia del Guayas. Se utilizó un diseño de bloques completamente al azar (DBCA), con 3 tratamientos y 4 repeticiones. Los tratamientos fueron semillas de las variedades SFL 11, INIAP 15 e INIAP 11(reciclada). vii Los microorganismos aislados en semillas de la variedad SFL 11 antes de la siembra fueron Bipolaris oryzae, Curvularia sp., Rhizoctonia solani, Fusarium y Aspergillus flavus; en INIAP 15 el género Penicillium y en INIAP 11 A. flavus y Penicilium. Después de la cosecha los hongos más incidentes fueron Curvularia sp., Nigrospora sp., Bipolaris oryzae Aspergillus flavus, A. niger y Penicilium sp. N. DE CLASIFICACIÓN: DIRECCIÓN URL (tesis en la web): ADJUNTO URL (tesis en la web): ADJUNTO PDF: CONTACTO CON AUTORES/ES: CONTACTO EN LA INSTITUCION: Ciudadela Universitaria "Dr. Salvador Allende" Av. Delta s/n y Av. Kennedy s/n Teléfono: 593-42288040 SI ' Teléfono: 042795539 0985484358 NO E-mail: [email protected] Nombre: Ing. Agr. MSc. Leticia Vivas Vivas Teléfono: 593-42288040 E-mail: [email protected] viii ÍNDICE GENERAL Contenido Pág. Carátula i Página de aprobación ii Certificado gramático iii Responsabilidad del autor iv Dedicatoria v Agradecimiento vi Ficha de registro de tesis vii Índice General ix Índice de Cuadros xi Índice de Fotos xii Índice de Figuras xiii Índice de Anexos xiv Resumen xv Summary xvi I. INTRODUCCIÓN 1 Objetivo general 2 Objetivos específicos REVISIÓN DE LITERATURA 2 3 2.1 Enfermedades que se transmiten por semilla en el cultivo de arroz 3 2.1.1 Bipolaris oryzae (Breda de Haan) Shoemaker 3 2.1.2 Sarocladium oryzae (Sawada) 3 2.1.3 2.1.4 2.1.5 2.1.6 2.1.7 2.1.8 Curvularia sp. Bugnicourt Nigrospora spp. Penicillium Link, 1809 Fusarium Link ex Grey, 1821 Pseudomonas fuscovaginae Tanii, et al. 1976 Ustilaginoidea virens (Cooke) Takah., (1896) 4 5 5 5 6 7 II. 2.2 Enfermedades que afectan la calidad de la semilla de arroz 8 2.2.1 Pyricularia grisea (Cooke) Sacc. 8 2.2.2 Alternaria padwickii (Gamguly) M.B. Ellis, (1971) 9 2.2.3 Rhizoctonia solani Kuhn 9 ix 2.3 III. 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 IV. V. VI. VII. 2.2.4 El virus de la hoja blanca (VHB) 10 2.2.5 Entorchamiento del arroz 11 Requerimiento de la calidad de la semilla 12 MATERIALES Y MÉTODOS 15 Ubicación Geográfica 15 Condiciones climáticas 15 Factores estudiados 16 Materiales 16 Tratamientos 17 Diseño experimental 17 Delineamiento experimental 18 Variables registradas 18 Manejo del experimento 19 3.9.1 Fase de laboratorio 19 Aislamiento de microorganismos asociados a semillas de arroz 19 Porcentaje de germinación 20 3.9.2 Fase de campo 21 Practicas agronómicas o Labores culturales 21 Preparación del terreno 21 Semillero 21 Trasplante 21 Riego 21 Nutrición del cultivo 22 Control de malezas 22 Control de insectos plagas 22 Control de enfermedades 22 RESULTADOS 23 Presencia de microorganismos en la semilla de arroz 4.1 23 certificada y reciclada. Incidencia y severidad de enfermedades en semilla de arroz 4.2 29 certificada y reciclada en condiciones de campo. DISCUSIÓN 31 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 32 LITERATURA CITADA 33 ANEXOS 39 x ÍNDICE DE CUADROS Contenido Pág. Cuadro 1. Porcentaje de germinación de semillas de arroz sin y con manchas antes de la siembra Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 25 Cuadro 2. Porcentaje de germinación de semillas de arroz después de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 25 Cuadro 3. Porcentaje de granos llenos y vanos, aparentemente sanos y manchados después de la cosecha Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 26 Cuadro 4. Porcentaje de humedad de la semilla después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 27 Cuadro 5. Rendimiento de arroz (kg / ha) en el estudio de calidad de la semilla. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 27 Cuadro 6. Evaluaciones de enfermedades presentes en variedades certificadas y recicladas en el campo Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 30 Cuadro 7. Microorganismos presentes a los 120 días en variedades certificadas y recicladas en el campo Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 30 xi ÍNDICE DE FOTOS Contenido Pág. Foto 1. Metodología de siembra e identificación de patógenos: Semillas en cámara húmeda (A), Presencia de patógenos en semillas (B), Preparación de las muestras en el porta objeto (C), Identificación de los microorganismos presentes (D). 19 Foto 2. Microorganismos presentes en semillas de las variedades de arroz SFL 11. INIAP 15, INIAP 11 (Reciclada) por repetición, incubados en caja Petri. 20 Foto 3. Metodología para determinar porcentaje de germinación de semillas de arroz. 20 Foto 4. Metodología de evaluación de la sanidad del cultivo en sus diferentes estados de fenológicos. 21 Foto 5. Metodología de prácticas agronómicas del cultivo de arroz: Preparación del terreno (A), Semillero (B), Trasplante (C), Riego (D), Control manual de malezas (E), Control fitosanitario (F). 22 Foto 6. Microorganismos aislados de semillas de arroz: Curvularia sp. (A), Nigrospora sp. (B), Rhizopus sp. (C), Aspergillus sp. (D), A. flavus (E), A. niger (F). 28 xii ÍNDICE DE FIGURAS Contenido Pág. Figura 1. Porcentaje de microorganismos asociados a semillas aparentemente sanas de arroz antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 23 Figura 2. Porcentaje de microorganismos asociados a semillas manchadas de arroz antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 24 Figura 3. Porcentaje de microorganismos aislados en granos sin manchas después de la cosecha Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 28 Figura 4. Porcentaje de microorganismos aislados en granos manchados de arroz después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 29 xiii ÍNDICE DE ANEXOS Contenido Cuadro 1A. Pág. Porcentaje de microorganismos asociados de semillas de arroz sin manchas antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Porcentaje de microorganismos asociados de semillas de arroz manchadas antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Número de semillas de arroz sin manchas germinadas antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013 Número semillas de arroz manchadas germinadas antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 40 Cuadro 5A. Número semillas de arroz germinadas después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2014. 43 Cuadro 6A. Número de semillas de arroz llenas sin manchas. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Número de semillas de arroz llenas manchadas. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Número de semillas de arroz vanos sin manchas. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Número de semillas de arroz vanos con manchas. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Porcentaje de humedad de la semilla después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Rendimiento de arroz en kg/Ha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Porcentaje de microorganismos aislados de semillas de arroz sin manchas variedad SFL 11 después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Porcentaje de microorganismos aislados de semillas de arroz sin manchas variedad INIAP 15 después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Porcentaje de microorganismos aislados de semillas de arroz sin manchas variedad INIAP 11 (Reciclada) después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Porcentaje de microorganismos aislados de semillas de arroz con manchas después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013 Marbetes de semillas certificadas variedad SFL 11 e INIAP 15. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 44 Cuadro 2A. Cuadro 3A. Cuadro 4A. Cuadro 7A. Cuadro 8A. Cuadro 9A. Cuadro 10A. Cuadro 11A. Cuadro 12A. Cuadro 13A. Cuadro 14A. Cuadro 15A. Foto 1 A. xiv 40 41 42 45 46 47 48 49 50 50 51 51 51 RESUMEN En Ecuador el arroz es el primer componente de la canasta básica, el cual brinda fuente de calorías y genera trabajo para el sector rural, con una producción de 1’565535 Tm en el 2012. Los problemas fitosanitarios no se alejan del cultivo de arroz, las enfermedades que afectan la calidad de la semilla son Pyricularia oryzae, Alternaria spp, Bipolaris oryzae, Curvularia spp, Sarocladium oryzae, Ustilaginoidea virens, Pseudomonas fuscovaginae, Fusarium spp. La utilización de semillas recicladas conlleva a una mayor presencia de problemas fitosanitarios. Por ello, es necesario realizar un análisis a la semilla reciclada y certificada para conocer que microorganismos que están y su implicación en la incidencia de enfermedades. Los objetivos específicos fueron: 1) Determinar la presencia de microorganismos en las semillas de arroz certificada y reciclad y 2) Evaluar la incidencia y severidad de enfermedades en semillas de arroz certificada y reciclada en condiciones de campo. El presente trabajo de investigación se realizó durante la época seca del 2013 en la Hacienda Santa María, ubicada en el recinto San Pedro, cantón Daule, provincia del Guayas. Para el ensayo de campo se utilizó un diseño de bloques completamente al azar (DBCA), con 3 tratamientos y 4 repeticiones. En laboratorio se usó un diseño completamente al azar (DCA), con 100 unidades experimentales (semillas) por tratamiento y 5 repeticiones. Los tratamientos fueron el uso de dos semillas certificadas SFL 11 y INIAP 15; y el uso de una semilla reciclada INIAP 11. Los microorganismos aislados en semillas de la variedad SFL 11 antes de la siembra fueron Bipolaris oryzae, Curvularia sp., Rhizoctonia solani, Fusarium y Aspergillus flavus; en INIAP 15 el género Penicillium y en las semillas INIAP 11 (Reciclada) A. flavus y Penicilium. Después de la cosecha los hongos más incidentes fueron Curvularia sp., Nigrospora sp., Bipolaris oryzae Aspergillus flavus, A. niger y Penicilium sp. No se observó síntomas de enfermedades foliares durante el trabajo de campo. xv SUMMARY In Ecuador rice is the first component of the basket, which provides a source of calories and creates jobs for the rural sector, with a Tm 1'565535 production in 2012. Phytosanitary problems do not depart from rice cultivation, diseases affecting the seed quality are Pyricularia oryzae, Alternaria spp, Bipolaris oryzae, Curvularia spp, Sarocladium oryzae, Ustilaginoidea virens, fuscovaginae Pseudomonas, Fusarium spp. The use of recycled seeds leads to an increased presence of plant health problems. Therefore, it is necessary to analyze the recycled seed and certified for that microorganisms are and their involvement in disease incidence. The specific objectives were: 1) Determine the presence of microorganisms in certified rice seeds and Recycler and 2) Evaluate the incidence and severity of diseases in rice seed certified and recycled under field conditions. This research was conducted during the dry season of 2013 at Santa Maria, located in San Pedro, canton Daule, Guayas province. For the field trial design of a randomized complete block (RCBD) with 3 treatments and 4 replications was used. In laboratory used a completely randomized design (CRD) with 100 experimental units (seeds) and 5 replicates per treatment. Treatments were using two certified seed lNlAP SFL 11 and 15; and the use of recycled seed lNlAP 11. Microorganisms isolated from seeds of the variety SFL 11 before sowing were Bipolaris oryzae, Curvularia sp, Rhizoctonia solani, Fusarium and Aspergillus flavus; in Penicillium spp. lNlAP 15 and seeds lNlAP 11 (Recycled) A. flavus and Penicillium. After harvest the fungi were more incidents Curvularia sp., Nigrospora sp. Bipolaris oryzae Aspergillus flavus, A. niger and Penicillium sp. No symptoms of foliar diseases xvi were observed during fieldwork. I. INTRODUCCIÓN El Arroz (Oryza sativa L), es la gramínea de mayor consumo a nivel mundial con una superficie de siembra de 165.1 millones de hectáreas (FAO, 2012), En Ecuador es el primer componente de la canasta básica, el cual brinda fuente de calorías y genera trabajo para el sector rural, con una producción de 1’565535 Tm en el 2012 (INEC, 2012). En el país la superficie sembrada en el 2012 fue 411.459 Has, distribuida la mayor área prácticamente en dos provincias, Guayas dedica el 62.53 %, Los Ríos el 30.69 %, el 6.78 % restante es cultivada en otras provincias del Litoral, Sierra (Loja, Cañar, Cotopaxi, Bolívar) y Amazonia (INEC, 2012). Los problemas fitosanitarios no se alejan del cultivo de arroz, a nivel mundial es afectado por más de 70 enfermedades provocadas por hongos, bacterias, virus, y nematodos, de las cuales se estima alrededor de una docena limitan la producción en Latino América. En el país las enfermedades que afectan la calidad de la semilla en el campo son Pyricularia oryzae, Alternaria spp, Bipolaris oryzae, Curvularia spp, Sarocladium oryzae, Ustilaginoidea virens, Pseudomonas fuscovaginae, Fusarium spp, durante el almacenaje también se presentan diferentes microorganismos como Aspergillus, Penicillium, Mucor, Rhizopus (Espinoza y Vivas, 2007). El Programa de Arroz del INIAP ha liberado 13 variedades las mismas que fueron evaluadas en varias localidades, mismas demostraron potencial de rendimiento y tolerante a los principales insectos plagas y enfermedades. Por su parte, PRONACA también ha lanzado dos variedades con características de rendimiento, calidad de grano y culinaria; sin embargo, el ingreso de “semilla” desde países vecinos ha traído consigo nuevas patologías a este cultivo (Benítez, 2012). La utilización por parte del agricultor de semillas que no posee las características varietales de una semilla certificada, conlleva a una mayor presencia de problemas fitosanitarios, que aumentan el costo de producción y disminuyen el rendimiento. Por ello es necesario realizar un análisis a la semilla reciclada y certificada para conocer sus microorganismos y su implicación en la incidencia de enfermedades, de allí la importancia de la producción de semillas de alta calidad en el país, permite incrementar los rendimientos por unidad de superficie. Por lo anteriormente expuesto se realizó esta investigación para cumplir con los siguientes objetivos: Objetivo general Determinar la calidad de la semilla sobre la presencia de enfermedades en el cultivo de arroz. Objetivos específicos 1. Determinar la presencia de microorganismos en las semillas de arroz certificada y reciclada. 2. Evaluar la incidencia y severidad de enfermedades en semillas de arroz certificada y reciclada en condiciones de campo. 2 II. REVISIÓN DE LITERATURA 2.1 Enfermedades que se transmiten por semillas en el cultivo de arroz 2.1.1 Bipolaris oryzae (Breda de Haan) Shoemaker Considerada en segundo lugar de importancia económica entre las enfermedades que afectan al cultivo de arroz, B. oryzae se aloja principalmente en las glumas, pero se encuentra en todos los componentes de la semilla de arroz; la sobrevivencia del hongo en las semillas de arroz depende de la temperatura al momento del almacenaje siendo 3 C la menos favorable para la sobrevivencia del hongo (Ojeda y Subero, 2004). Cueva (sf) describe que B. oryzae afecta a los tallos, hojas y semillas, se presentan manchas pardas que se tornan color café al extenderse, las lesiones tienen forma ovalada y circular con un halo externo de color amarillo. Sus estructuras de reproducción pueden ser alargadas, cilíndricas, oscuras y curvas. Pruebas de patogenicidad realizadas en plantas de arroz de 21 días, mostraron síntomas de la enfermedad a los 5 y 7 días después de la inoculación y pudieron ser reaisladas de los tejidos enfermos, comprobándose así la capacidad patogénica de este hongo (Cardona y González, 2008). Ojeda y Subero (2004) mencionan que existe una correlación altamente positiva entre el grado de manchado de la semilla de arroz y la transmisión del hongo B. oryzae a las plántulas, es decir, que a mayor grado de manchado de la semilla, mayor porcentaje de transmisión del hongo a la planta. 2.1.2 Sarocladium oryzae (Sawada) Espinoza (2007) manifiesta que S. oryzae posee una gran viabilidad fisiológica y patogénica. La alta humedad favorece se presencia en el campo, 3 formando una capa blanca de micelio y conidios entre la vaina infectada y el tallo. Puede sobrevivir en los residuos de la cosecha y ser transmitido por semillas lo que constituye una de las fuentes de inóculo primario en la plantación y punto de partida para que los conidios se diseminen por diferentes vías. Los síntomas que presenta la enfermedad son lesiones oblongas y alargadas con borde café y centro grisáceo que aparecen en las vainas superiores y de la hoja bandera, conforme progresa la enfermedad las lesiones se alargan y coalescen. El ataque severo del patógeno en edades tempranas no permite que la panícula emerja completamente y en algunas ocasiones se pudra; si las panículas logran emerger presentan flores curvas y de color café oscuro. También puede causar esterilidad y el vaneamiento de los granos (Meneses et al, 2008). 2.1.3 Curvularia sp. Bugnicourt Gutierrez y Mazzanti (2001), mencionan a C. oryzae como parte de los patógenos asociados al manchado del grano y su relevancia en la transmisión por medio de la semilla. Estrada y Sandoval (2004), indican que los síntomas en las hojas se presentan con manchas puntiformes y ojivales, pardo-rojizas con halos amarillento alrededor que pueden unirse y secar gran parte de la hoja. Las especies de Curvularia provocan marchitez del semillero, coloración negruzca del grano, marchitez de la panícula y manchado del grano Nenínger et al (2003) Esta enfermedad se manifiesta con manchas amarillas a marrón en el ápice de la hoja y deformidad en la semilla; la incidencia que puede presentar en semilla certificada es de 1,81% y 22,88% en las plantas (Pineda et al, 2007). Estudios realizados por Nenínger et al (2003), indican los mayores niveles de incidencia en semillas de arroz al presentar el 61%. 4 2.1.4 Nigrospora spp. Este género desarrolla conidios unicelulares, castaños, de forma globosa o subglobosa, sobre conidióforos simple cortos, oscuros y algo ensanchados, con micelio aéreo de crecimiento radial, blanquecino a grisáceo (Batalla, 2014). Las especies de Nigrospora causan infecciones en láminas foliares y granos, presentando manchas necróticas puntuales que miden alrededor de 3 mm y son de color café rojiza, en el caso que se forme una necrosis generalizada, la forma angular en el extremo apical del grano ocupa entre ½ y 1/3 de la longitud (Marín y Jiménez, 1981) Pineda et al, (2007), indican que en algunos casos este patógeno muestra un escaldado de color marrón desde el ápice foliar, pueden presentar incidencia en las plantas en un 3.88 % y en semillas certificadas en un 0,39%. 2.1.5 Penicillium Link, 1809 Este género incluye más de 300 especies, puede encontrarse en casi todas partes, siendo el género de hongos más abundante en suelos. Son de fácil proliferación, sobre todo en los alimentos, algunas especies producen toxinas perjudiciales para los seres humanos (Wikipedia, 2014). Jurado (1982), considera a Penicillium sp como hongos de almacén el cual presenta una mayor incidencia, si mayor es el tiempo de almacenaje. Arias (1996), destaca a P. sp como un excelente controlador biológico del chinche Tibraca limbativentris en el cultivo de arroz. 2.1.6 Fusarium sp. Link ex Grey 1821 Este organismo es patógeno de la semilla y puede causar oscurecimiento y manchado del grano de arroz, mermando la germinación y provocar la muerte post emergencia (Nenínger et al, 2003). 5 Rivera y Gómez (2012), indican la patogenicidad de Fusarium después de 10 a 15 días de la inoculación, causa marchitez y amarillamiento de las hojas, además, manchado de la panícula, la cual está asociada al oscurecimiento y manchado de los granos. En infecciones severas puede causar hasta el 90% de pérdidas en la cosecha (Marín y Jiménez, 1981). 2.1.7 Pseudomonas fuscovaginae Tanii, et al. 1976 Armijos (2007), menciona que en el año 1987 la presencia del manchado del grano en Ecuador fue reportada como una nueva enfermedad, la cual es causada por una bacteria P. fuscovaginae. Los síntomas pueden observarse a las 48 horas después de la emergencia de la espiga. Las glumas son las primeras en afectarse, a los 7 días de la emergencia de la enfermedad de la panícula, luego se extiende hasta las glumas más inferiores. La mancha inicial es irregular de color pardo claro, casi imperceptible, al desarrollarse se torna pardo oscuro cubriendo en algunos casos toda la superficie. El deterioro de la semilla es evidente, tanto en su aspecto interno y externo originando pérdidas en la calidad de la semilla (Armijos, 2007). En base a los registros de Agrocalidad (2013), uno de los requisitos fitosanitarios para la importación de semillas de arroz provenientes de Brasil es que el producto se encuentre libre de varios patógenos entre ellos P. fuscovaginae. La alta humedad con periodos prolongados de lluvia son importantes en el desarrollo de la enfermedad. Desde el inicio de la floración P. fuscovaginae se aloja en las anteras y ovario, invadiendo todos los tejidos de la semilla; lo cual provoca su diseminación, el patógeno se transmite hasta por semillas 6 aparentemente sanas, encontrándose la bacteria infestando semillas no manchadas (Armijos, 2007). 2.1.8 Ustilaginoidea virens (Cooke) Takah., (1896) Este patógeno es de poca importancia, adquiere relevancia cuando afecta las plantaciones de arroz destinadas a la producción de semilla certificada, ya que de acuerdo con el reglamento vigente para certificación de semillas no se pueden utilizar para este fin lotes que contengan más del 0.1 % de enfermedades transmisibles por semillas (Espinoza, 2007). Según los registros de Agrocalidad (2013), uno de los requisitos fitosanitarios para la importación de semillas de arroz provenientes de Colombia es que el producto se encuentre libre de U. virens. Cova et al, (2007) mencionan que esta enfermedad se puede presentar en las últimas etapas del cultivo en áreas con alta humedad relativa. No obstante, la infección puede suceder antes y después de la formación del grano. Un factor favorable para la presencia de U. virens es el exceso de fertilización nitrogenada. De acuerdo a Espinoza (2007), en el estado temprano de la floración el hongo puede invadir el ovario o granos maduros. Los conidios, secundarios y las ascosporas son capaces de provocar infección. El hongo sobrevive como esclerocio contenido en la cápsula globosa. Los conidios pueden sobrevivir en condiciones de campo por más de cuatro meses. Se pueden observar los síntomas cuando el endospermo de la semilla es reemplazado por una cápsula globosa aterciopelada con más de 1 cm de diámetro, la misma que crece hacia afuera entre las glumas. Sólo unos pocos granos de la panícula son afectados, pero se ha reportado que los granos adyacentes se producen estériles (Espinoza, 2007). 7 2.2 Enfermedades que afectan la calidad de la semilla de arroz 2.2.1 Pyricularia grisea (Cooke) Sacc. Conocida como añublo o quemazón es una de las enfermedades más importantes en nuestro país y a nivel mundial, las pérdidas varían de acuerdo a las condiciones ambientales que favorecen el desarrollo del hongo; las variedades susceptibles y la excesiva fertilización nitrogenada ocasionan la pérdida parcial o total del cultivo (Armijos, 2007). Carreres (2005) manifiesta que la primera infección comienza en una espora invernante que puede ser diseminada por el agua o viento hasta unos 35 Km de distancia y 25 m de altura hasta llegar a una planta. Cuando germina la espora se desarrolla una mancha, la mayoría de las esporas se concentran a menos de un metro. Una mancha típica de Pyricularia llega a producir por día entre 2000 a 6000 esporas, durante unos 10 días, y pueden causar una severa infestación. Los ataques críticos ocurren en plántulas y en el periodo de floración; los síntomas se presentan con lesiones foliares típicas, son alargadas con extremos puntiagudos, de bordes marrón - rojizo y centros grisáceos. Cuando estas manchas coalescen producen secamiento parcial o total de la lámina foliar (Rodriguez y Nass, 1991). Se detecta con facilidad cuando la enfermedad incide en el cuello de la panícula, esta presenta lesiones de color pardo rojizo alrededor de la base, provocando un debilitamiento de los tejidos y la caída de la panícula por la pudrición y rotura de su base lo que desencadena reducciones en la cosecha. Los ataques tempranos, antes de emerger la panícula, originan granos vanos; mientras que los tardíos, los producen livianos y lechosos (Armijos, 2007). 8 2.2.2 Alternaria padwickii (Gamguly) M.B. Ellis, (1971) Lovato y Gutiérrez (2012) indican que Alternaria padwickii es el principal patógeno asociado a las semillas de arroz cuando hay una disminución en el crecimiento y vigor de las plántulas. En el campo se puede presentar con una alta incidencia de manchas foliares, este hongo causa reducción de los rendimientos del cultivo de arroz por el manchado de los granos (Méndez y Reyes, 2009). Rivero et al (2012) mencionan que A. padwickii produce manchas de color pardo oscuro a negros en las glumas, fundamentalmente hacia los extremos del grano. Cuando crece abundante micelio y se produce conidióforos y conidios, estas manchas de tornan posteriormente grisáceas o blanquecinas, en algunos casos pueden delimitarse con un borde pardo oscuro. Al invadir el grano el patógeno penetra el endospermo y produce un manchado negruzco en los bordes. Los síntomas pueden extenderse hasta la mitad de la longitud del grano, resecándolo y haciéndolo quebradizo. A. padwickii puede estar presente en semillas enteras, preferentemente en el endospermo, la palea y en la lema (Lovato, Gutiérrez y Carmona, 2011). 2.2.3 Rhizoctonia solani Kuhn Según Espinoza, 2007 el tizón de la vaina cuyo agente causal es Rhizoctonia solani forma esclerocios en las lesiones, que son estructuras de resistencia, al inicio son blanco y luego se tornan café oscuro, estas lesiones se desprenden, flotan en el agua, germinan y al ponerse en contacto con la planta penetran e inicia el desarrollo de la enfermedad. 9 Las pocas horas de luz y la alta humedad relativa, son los factores que condicionan la presencia de R. solani. Las lesiones de esta enfermedad se inician cerca del nivel de la lámina de agua, luego se desarrolla hacia arriba y a los lados de los macollos, la vaina afectada se debilita y posteriormente se produce el acame, esto aumenta el número de granos estériles y disminuye el peso (Espinoza, 2007). 2.2.4. El virus de la hoja blanca (VHB) Esta enfermedad se ha encontrado en todas las zonas arroceras de nuestro país, en algunos años su alta incidencia ha ocasionado graves pérdidas en los rendimientos o la eliminación comercial de la variedad (Armijos, 2007) Vivas y Astudillo (2008), menciona que el VHB es transmitido por el insecto Tagosodes oryzicolus, el cual produce dos daños en el cultivo arroz, directo por las incisiones que hace en las hojas al alimentarse y ovipositar; y el daño indirecto al inocular el virus de la hoja blanca. La enfermedad no se transmite mecánicamente ni por semilla (Calvert, 1999). Observar en las hojas rayas o bandas longitudinales blancas, paralelas a la nervadura es el síntoma más característico de la enfermedad (Armijos, 2007). La panícula sufre deformación y la distorsión en espiral del eje; las espiguillas sufren manchas y vaneamiento, estos síntomas se presentan en infecciones tardías (Vivas y Astudillo, 2008). Según Armijos (2007), otro síntoma distintivo se observa en las glumas, que presentan una decoloración pardusca y repentino secamiento, a menudo tienen un desarrollo muy anormal. La severidad de los síntomas depende de la edad de la planta en que se produce la infección, lo cual afecta los rendimientos. 10 Reyes (1999), indica que cuando las plantas son infectadas en edad temprana presentan enanismo, necrosis y hasta la muerte; si la infección es tardía puede afectar las panículas, reducir la calidad y el número de granos. 2.2.5. Entorchamiento del arroz Identificada en Ecuador en el 2003, la enfermedad viral conocida como entorchamiento, ingreso al país desde Colombia, en granos y semilla de variedades de arroz introducidas ilegalmente para siembras comerciales (Paz, 2007). Aristizabal et al, (1999) determinaron que el hongo del género Polymyxa graminis es el agente transmisor del virus de la necrosis rayada del arroz (RSNV) este patógeno puede sobrevivir en el suelo por largos periodos de tiempo a través de estructuras denominadas cistosoros, los cuales dan origen a zoosporas móviles que transportan el RSNV de plantas enfermas a plantas sanas de arroz y a algunas malezas. Esta enfermedad se inicia cuando las semillas cuando las semillas y plántulas de arroz se siembran en un campo infestado con cistosoros con presencia de RSNV (Paz, Espinoza y Yasuji, 2011). La sintomatología que presenta esta enfermedad se puede observar en condiciones de invernadero y en el campo 30 días después de la siembra. Las plantas afectadas manifiestan un secamiento que comienza en el ápice extendiéndose a toda la planta causando la muerte (Paz, 2007). Según (Paz 2007), P. graminis se encuentra en el sistema radical de las plantas de arroz y otras especies, catalogándose como parásito biotrofo obligado. El uso de semillas procedentes de campos de arroz con problemas de “entorchamiento” constituye un riesgo de infestación en su cubierta con partículas de suelo que lleven cistosoros portadores del RSNV. 11 2.3 Requerimiento de la calidad de la semilla MAG (1978), MINISTERIO DE AGRICULTURA Y GANADERIA, señala en el Reglamento General de la ley de semillas vigente desde 1978 en el CAPITULO X DE LAS NORMAS DE CALIDAD describe lo siguiente: Art. 42. Toda semilla que se expenda en el territorio nacional deberá cumplir las normas específicas mínimas de calidad que se establecen en este capítulo. Referente a las ESPECIES DE MALEZAS estipula: Art. 43. Para efecto de determinar los niveles permisibles de malezas en el campo y la tolerancia de su semilla, por kilogramo de material analizado, se consideran malezas nocivas y altamente nocivas, de acuerdo con su agresividad, difícil control en el campo, vehículo de diseminación de plagas y enfermedades y eliminación por el procesamiento. Referente a las SEMILLAS CERTIFICADAS hay consideraciones generales y específicas detalladas desde el artículo 45 hasta el 51, especificando en este último varios factores de campo para determinar la sanidad de la semilla. 12 FACTORES Aislamiento (metros) BÀSICA REGISTRADA CERTIFICADA 5 5 5 Enfermedades (%inflorescencias) Ustilago nuda 0.0 0.1 0.5 Ustilago Hordei 0.0 0.1 0.5 0 0 Claviceps purpurea 0 Al momento de la fiscalización, el campo de Malezas nocivas Multiplicación no debe contener en total más de 250 plantas por hectárea. Malezas altamente nocivas 0 20 40 1:2.500 1:1.500 1.500 1:5.000 1:3.000 1:1.000 (Pl/ha.) Otras variedades (inflorescencias) Otros cultivos (inflorescencias) Germinación (% mínimo) 85 85 85 Semilla pura (% mínimo) 97 97 97 2 2 2 2 4 8 1 2 3 0 1 2 2 4 8 2 10 20 14 14 14 Materia inerte (% máximo) Malezas comunes (sem./kg.máx.) Malezas nocivas (sem./kg.máx.) Malezas altamente nocivas (sem./kg.máx.) Otros cultivos (sem./kg.máx.) Otras variedades (sem./kg.máx.) Humedad (% máximo) 13 Quiroz (s.f) destaca el trabajo de INIAP al satisfacer la demanda de los productores, industrias y consumidores ha obtenido 10 variedades de arroz con rendimientos superiores, óptima calidad de grano, resistencia o tolerancia a enfermedades e insectos plagas, alta calidad culinaria y precocidad de su ciclo de vida. La variedad de arroz INIAP 11 es considerada una alternativa en condiciones de riego, con un ciclo vegetativo de 97 a 110 días puede producir de 60 a 75 sacas/ha, otras característica de esta variedad son sus granos largos, una latencia de 4 a 6 semanas y en la parte fitosanitaria es moderadamente susceptible a Pyricularia oryzae, resistente al virus de la hoja blanca VHB y moderadamente resistente al manchado de grano (Andrade, s.f). Andrade, Celi y Hurtado (2006) describen a INIAP 15 como una variedad de arroz de alto rendimiento y calidad de grano superior, tiene un ciclo vegetativo de 117 a 128 días, con un rendimiento de 64 a 91 sacas/ha, granos de 7,5 mm de longitud, latencia de 4 a 6 semanas, es resistente a la presencia de Pyricularia grisea y moderadamente resistente al VHB. Esta semilla certificada tiene un porcentaje mínimo de germinación del 80% (Marbete INIAP 15). Los requerimientos que cumple la semilla SFL 11 es 97% de pureza mínima y porcentaje mínimo de germinación del 80% (Marbete SFL11). 14 III. MATERIALES Y MÉTODOS 3.1 Ubicación geográfica El presente trabajo de investigación se realizó durante la época seca del 2013 en la Hacienda Santa María, ubicada en las coordenadas S 01° 51' 58,79"W, 79° 58' 55,16" longitud occidental en el recinto San Pedro, cantón Daule, provincia del Guayas y en el Laboratorio de Fitopatología del Departamento Nacional de Protección Vegetal, Instituto Nacional Autónomo de Investigaciones Agropecuarias (INIAP), Estación Experimental del Litoral Sur “Dr. Enrique Ampuero Pareja”, está ubicada entre las coordenadas geográficas 2º 15’ 15’’ latitud Sur y 79º 3 ’ 4 ’’ de longitud Occidental, en el km 26 al este de Guayaquil en la vía Durán – Tambo, parroquia Virgen de Fátima, cantón Yaguachi, provincia del Guayas. 3.2 Condiciones climáticas El lugar donde se realizó la investigación, según la clasificación ecológica de Holdrige1/, pertenecen al bosque tropical seco y de acuerdo a la posición geográfica posee las siguientes características climáticas: Altura: Temperatura promedio: Estación Experimental del Litoral Sur2/ 17 msnm 24 a 26.7ºC 19 msnm 25.6 a 36ºC Humedad relativa: 75 a 83 % 75 % Precipitación anual: 1025 mm / año 1587.5 mm/año Heliofanía: 898.66 horas / año 997,5 horas / año Características climáticas Hda. Santa Maria3/ ---------1/ Clasificación Ecológica de Holdridge. Datos tomados en el Instituto Nacional de Meteorología del Ecuador. (Año 2013). 3/ Datos proporcionados por Departamento de Catastro de la Ilustre Municipalidad de Daule (Año 2013). 2/ 15 3.3 Factores estudiados Durante el trabajo se estudiaron los siguientes factores: a) Dos variedades de semillas certificadas (SFL 11), (INIAP 15). b) Semilla reciclada (cultivada por el Agricultor INIAP 11). 3.4 Materiales Ácido láctico Cajas Petri Calculadora Cámara fotográfica Cinta adhesiva transparente Cinta para medir Determinador de humedad Estacas de caña guadua Fundas plásticas Grapadora Libreta de campo Lonas Lupa de bolsillo Marcadores indeleble Microscopio Piola Porta y cubre objetos Semillas de arroz variedad (INIAP 15 y SFL11) Semilla de arroz variedad INIAP 11( Reciclada) Servilletas Tarjetas plásticas (identificación) Tijera 16 3.5 Tratamientos El estudio constó con tres tratamientos tanto para los ensayos de laboratorio y campo que se detallan a continuación: 1. Semillas de arroz SFL 11 2. Semillas de arroz INIAP 15 3. Semillas de arroz INIAP 11 (Reciclada) 3.6 Diseño experimental En el ensayo de laboratorio se usó un diseño completamente al azar (DCA), con 100 unidades experimentales (semillas) por tratamiento y 5 repeticiones. La comparación de las medias se realizó con la prueba de Duncan al 5% de probabilidad como se describe en el análisis de varianza: ESQUEMA DEL ANALISIS DE VARIANZA Fuente de Variación Grado de Libertad Total Tratamientos Error experimental 1499 2 1497 En el ensayo de campo se utilizó un diseño de bloques completamente al azar (DBCA), con 3 tratamientos y 4 repeticiones, La comparación de las medias se realizó con la prueba de Duncan al 5% de probabilidad. El esquema del análisis de varianza se describe a continuación: ESQUEMA DEL ANALISIS DE VARIANZA Fuente de Variación Grado de Libertad Repetición Tratamientos Error experimental Total 3 2 6 11 17 3.7 Delineamiento experimental Número de repeticiones 4 Número de tratamientos 3 Número de parcelas 12 Distancia entre repeticiones 1,00 m Distancia entre tratamientos 1,50 m Distancia entre hileras 0,25 m Distancia entre plantas 0,25 m Largo de la parcela 20 m Ancho de parcela 20 m Área total de cada parcela (20 x 20m) 400 m2 Área útil de cada parcela (10 x 10m) 100 m2 5229 m2 Área total del ensayo 3.8 Variables registradas Las variables registradas fueron las siguientes: Microorganismos presentes en las semillas Porcentaje de germinación Incidencia y severidad de enfermedades 18 3.9 Manejo del experimento 3.9.1. Fase de laboratorio Aislamiento de microorganismos asociados a semillas de arroz En los laboratorios del DNPV-Sección Fitopatología y de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad de Guayaquil antes de realizar el semillero y después de cosecha se hicieron cámaras húmedas y aislamiento en medio de cultivo papa dextrosa agar (PDA) para determinar los microorganismos presentes en las semillas de los tres cultivares estudiados. Las semillas previamente fueron desinfectadas con hipoclorito de sodio al 10% durante cinco minutos y enjuagadas tres veces con agua destilada estéril (ADE) para eliminar los residuos del cloro. La cámara húmeda consistió en colocar las semillas en cajas Petri, que contenían servilleta estéril humedecida con agua destilada estéril. Luego se incubaron a temperatura ambiente durante una semana, para luego identificarlos en el microscopio simple de luz (Foto 1). A B D C © Guillermo Briones, U. G. 2014 Foto 1. Metodología de siembra e identificación de patógenos: Semillas en cámara húmeda (A), Presencia de patógenos en semillas (B), Preparación de las muestras en el porta objeto (C), Identificación de los microorganismos presentes (D). 19 Para el aislamiento de microorganismos asociados a semillas después de la cosecha se procedió igual con la desinfección de las mismas y colocadas en medio de cultivo (Papa Dextrosa Agar) (Foto 2), se incubaron a temperatura ambiente durante siete días, luego se procedió a la identificación mediante el uso de claves especializada (Ainsworth, Sparrow y Sussman, 1973; Barnet y Hunter, 1983). Se usaron 100 semillas de cada cultivar y por repetición lo que totaliza 1200, los datos se expresan en porcentaje de microorganismos. SFL 11 INIAP 15 INIAP 11 (Reciclada) © Guillermo Briones, U. G. 2014 Foto 2. Microorganismos presentes en semillas de las variedades de arroz SFL 11. INIAP 15, INIAP 11 (Reciclada) por repetición, incubados en caja Petri. Porcentaje de germinación La prueba de germinación se realizó dos veces, la primera antes de la siembra y la segunda con semillas de la cosecha, para cada una se utilizaron 400 semillas al azar, 100/repetición semillas; estas fueron confinadas en un lugar con las condiciones propicias para favorecer su germinación y provistas de riego todos los días, luego de siete días emergieron las semillas, se contabilizó el número de germinadas y sin germinar para establecer el porcentaje de germinación (Foto 3). © Guillermo Briones, U. G. 2014 Foto 3. Metodología para determinar porcentaje de germinación de semillas de arroz de arroz 20 3.9.2. Fase de campo Se realizó en la Hacienda Santa María, lote Tablones; en cada uno de los cultivares se evaluaron la incidencia de enfermedades a los 10, 20, 30 40, 50, 60, 70, 80, 90 y 100 día de edad, para este propósito se evaluaron 10 plantas al azar por cada cultivar y repetición (Foto 4). © Guillermo Briones, U. G. 2014 Foto 4. Metodología de evaluación de la sanidad del cultivo en sus diferentes estados de fenológicos Además se realizaron las siguientes prácticas de cultivo: Practicas agronómicas o Labores culturales Preparación del terreno Consistió en dos pases de rastra pesada de disco (rome plow) y se fangueó el suelo a cultivar (Foto 4 A). Semillero Para el semillero se realizó una cama húmeda de 1m de ancho por 15m de largo (Foto 4 B). Trasplante Se colocó de 5 a 6 plantas a los 17 días en el sitio definitivo a una distancia de 0,25 x 0,25 m. (Foto 4 C) Riego Se regó cada 15 días, en base al requerimiento del cultivo (Foto 4 D). 21 Nutrición del cultivo La fertilización del cultivo se realizó de acuerdo al resultado del análisis de suelo y requerimientos del cultivo. Control de malezas Durante el manejo del cultivo hubo la presencia de Echinocloa sp. Se realizó control mecánico con rabón (Foto 4 E). Control de insectos plagas En base a las evaluaciones realizadas la presencia de insectos plaga no supero el umbral económico, motivo por el cual no se tomó medidas de control. Control de enfermedades A los 38 días después del trasplante se aplicó de manera preventiva el fungicida Juwel (Kresoxim-methyl + Epoxiconazole) (dosis 350 cc/ha.), para evitar enfermedades (Foto 4 F). A B C D E F © Guillermo Briones, U. G. 2014 Foto 5. Metodología de prácticas agronómicas del cultivo de arroz: Preparación del terreno (A), Semillero (B), Trasplante (C), Riego (D), Control manual de malezas (E), Control fitosanitario (F). 22 IV. RESULTADOS 4.1. Presencia de microorganismos en semillas de arroz certificada y reciclada. En la Figura 1 (Anexo 1A), se observan los microorganismos presentes en semillas aparentemente sanas de arroz antes de la siembra. La variedad SFL 11 mostró el mayor porcentaje de microorganismos, siendo Bipolaris oryzae el más incidente, seguido de Curvularia sp. Rhizoctonia solani, además, Fusarium y Aspergillus flavus. En semillas reciclada A. flavus tuvo el mayor porcentaje; en la variedad INIAP 15 solamente se observó al género Penicillium. Figura 1. Porcentaje de microorganismos asociados a semillas arroz sin manchas antes de la siembra. Hda Santa María Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Los microorganismos aislados en las semillas de arroz manchadas en la variedad SFL 11 fueron B. oryzae y A. flavus con un mayor porcentaje, seguido de Rhizopus y Fusarium; las semillas reciclada tuvo mayor incidencia de A. flavus y en la variedad INIAP 15 no se observaron microorganismos (Figura 2, Anexo 2A). 23 Figura 2. Porcentaje de microorganismos asociados a semillas manchadas de arroz antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. El porcentaje de germinación de las diferentes variedades difieren estadísticamente; la variedad INIAP 15 mostró un 77% tanto en las semillas sin manchas y manchadas fue estadísticamente diferente de los demás tratamientos, seguidas SFL 11 con un 52 y 47% respectivamente, la variedad INIAP 11 (Reciclada) presentó el porcentaje más bajo tanto en semillas sin y con manchas un 15 y 24% en su orden (Cuadro 1, Anexo 3A y 4A). 24 Cuadro 1. Porcentaje de germinación de semillas de arroz sin y con manchas antes de la siembra Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) Porcentaje de germinación Sin manchas con manchas b1/ SFL 11 52 INIAP 15 77 A INIAP 11 (Reciclada) 15 Significancia ** ** 5,33 3,31 CV (%) 47 b1/ 77 A c 24 C 1/ Las cifras de la columna con la misma letra son iguales estadísticamente de acuerdo a la prueba de rangos múltiples de Duncan =0,05 En el Cuadro 2 (Anexo 5A), se observa los porcentaje de germinación de las semillas después de la siembra, mismas que no fueron significativo entre los cultivares. La variedad INIAP 15 presentó 95,75 %, seguido por SFL 11 con 87,25 % y la semilla INIAP 11 (Reciclada) con 84%. Cuadro 2. Porcentaje de germinación de las semillas de arroz después de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Porcentaje de germinación TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) Después de la cosecha SFL 11 87,25 INIAP 15 95,75 INIAP 11 (Reciclada) 84,00 Significancia Ns CV (%) 4,73 ns = no significativo 25 El mayor porcentaje de semillas llenas sin manchas los presentó la variedad SFL 11 con 87 %, seguido de las variedades INIAP 15 e INIAP 11 (Reciclada) con 72 y 67% respectivamente. El porcentaje de semillas llenas con manchas en las variedades INIAP 15 e INIAP 11 (Reciclada) con 24 y 22 % en su orden fueron iguales estadísticamente entre sí. Mientras que la semilla SFL 11 presento el 6% siendo altamente significativo; INIAP 15 mostró el menor porcentaje de granos vanos sin manchas y las semillas INIAP 11 (Reciclada) y SFL 11 se mostraron estadísticamente iguales con 8 y 7 % respetivamente; el porcentaje de granos vanos con manchas no mostró diferencia estadística (Cuadro 3, Anexos 6A, 7A, 8A y 9A). Cuadro 3. Porcentaje de granos llenos y vanos, aparentemente sanos y manchados después de la cosecha Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Semillas llenas Semillas vanas TRATAMIENTOS Sin Con Sin (Variedades de arroz) manchas manchas manchas Con manchas SFL 11 87 a1/ INIAP 15 72 b 24 A 2 INIAP 11 (Reciclada) 67 b 22 A 8 a Significancia CV (%) b1/ 6 7 a1/ 0 b 2 4 ** ** ** ns 3,71 14,14 13,90 6,70 1/ Las cifras de la columna con la misma letra son iguales estadísticamente de acuerdo a la prueba de rangos múltiples de Duncan =0,05 El Cuadro 4 (Anexo 10A), muestra el porcentaje de humedad de la semilla después de la cosecha de las diferentes variedades, siendo la semilla SFL 11 quien presentó el mayor porcentaje con 28,49 %, seguida por INIAP 15 e INIAP 11 (Reciclada) con 25,75 y 23,79% respectivamente. 26 Cuadro 4. Porcentaje de humedad de la semilla de arroz después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) Porcentaje de humedad SFL 11 28,49 c1/ INIAP 15 25,75 INIAP 11 (Reciclada) 23,79 Significancia b a ** CV (%) 1,64 1/ Las cifras de la columna con la misma letra son iguales estadísticamente de acuerdo a la prueba de rangos múltiples de Duncan =0,05 El mayor rendimiento se obtuvo en la variedad SFL 11 con 6073,86 kg /ha, seguido de las variedades INIAP 15 e INIAP 11 (Reciclada) con 5823,86 y 5681,82 en su orden (Cuadro 5, Anexo 11A). Cuadro 5. Rendimiento de arroz (kg / ha) en el estudio de calidad de la semilla. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) Rendimiento (Kg/ha) SFL 11 6073,86 INIAP 15 5823,86 INIAP 11 (Reciclada) 5681,82 Significancia ns CV (%) 8,86 ns = no significativo Después de la cosecha, los microorganismos mayormente aislados de granos de arroz sin manchas (Foto 5) en la variedad SFL 11 fueron: Curvularia sp., Nigrospora sp., Aspergillus niger, Penicilium sp., A. flavus, Aspergillus. sp, Fusarium sp., y Rhizopus sp (Foto 5) con 22, 20, 18, 12, 10, 2, 2 y 2 en su orden; seguida por la 27 variedad INIAP 15 donde se encontró Nigrospora sp., Curvularia sp., A. niger, A. flavus, Penicilium sp. y Bipolaris oryzae con 32, 24, 9, 9, 9, y 4 % respectivamente; en la variedad INIAP 11 (Reciclada) se aisló Curvularia sp., Nigrospora sp., B. oryzae, A. flavus, Penicilium sp., A. niger y Rhizopus sp. 45, 23, 7, 7, 5, 3 y 2% en su orden (Figura 3, Anexos 12A, 13A y 14A). Figura 3. Porcentaje de microorganismos aislados en granos sin manchas después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Foto 6. Microorganismos aislados de semillas de arroz: Curvularia sp. (A), Nigrospora sp. (B), Rhizopus sp. (C), Aspergillus sp. (D), A. flavus (E), A. niger (F). 28 En la Figura 5 (Anexo 15A), se muestran los microorganismos aislados de granos manchados de arroz, la variedad INIAP 11 (Reciclada) presentó Curvularia sp., Nigrospora sp., Bipolaris oryzae, A. niger, Penicilium sp. y Chalariopsis con 40, 20, 10, 10, 10 y 10% en su orden; mientras que en INIAP 15 se aisló Nigrospora sp., Curvularia sp., A. niger, con 50, 25 y 25 % respectivamente; la variedad SFL 11 no mostró microorganismos. Figura 4. Porcentaje de microorganismos aislados en granos sin manchas después de la cosecha Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013.. 4.2. Incidencia y severidad de enfermedades en semilla de arroz certificada y reciclada en condiciones de campo. De acuerdo a las evaluaciones desde los 10 hasta los 100 día no se observaron síntomas de enfermedades foliares en ninguno de los cultivares (Cuadro 6). 29 Cuadro 6. Evaluaciones de enfermedades presentes en variedades certificadas y recicladas en el campo Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Evaluación en campo ddt TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 SFL 011 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 INIAP 15 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 INIAP 11 (Reciclada) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 No obstante a los 120 días se observó síntomas de varias enfermedades en los tres cultivares, las cuales fueron identificadas como Sarocladium oryzae, Rhizoctonia sp. y Gaeunommanonyces graminis var. graminis en las variedades SFL 11, INIAP 15 e INIAP 11 (Reciclada) (Cuadro 7). Cuadro 7. Microorganismos presentes a los 120 días en variedades certificadas y recicladas en el campo Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Microorganismos INIAP 11 SFL 11 INIAP 15 Sarocladium sp. 33 26 32 Rhizoctonia sp. 37 40 29 30 24 39 Gaeunommanonyces graminis var. Graminis 30 (Reciclada) V. DISCUSIÓN 5.1. Presencia de microorganismos en la semilla de arroz certificada y reciclada. La presencia de B. oryzae en las variedades INIAP 11 (Reciclada) e INIAP 15 con mayor porcentaje de granos manchados fue evidente, datos que concuerdan con Ojeda y Subero (2004), quienes mencionan que a mayor grado de manchado de la semilla, mayor porcentaje de transmisión del hongo a la planta. Curvularia sp. y Nigrospora sp. se aisló de las semillas SFL 11, INIAP 15 e INIAP 11 (Reciclada), corroborando con Pineda et al (2007) que la incidencia de estos microorganismos se puede presentar en semillas certificadas. La baja incidencia de Penicillium en las variedades de arroz fue evidente como menciona Wikipedia (2014), debido a que este hongo es de fácil proliferación sobre todo en alimentos. La variedad INIAP 15 presentó el mayor porcentaje de granos manchados y no se aisló Fusarium sp. de sus semillas, información que difiere de Rivera y Gómez (2012) que asocian el oscurecimiento y manchado de grano con la patogenicidad de Fusarium sp. 5.2. Incidencia y severidad de enfermedades en semilla de arroz certificada y reciclada en condiciones de campo. Al no manifestarse síntomas de enfermedades en 100 días del cultivo se pone en contradicho la información generada por Pineda et al (2007), que Nigrospora sp. muestra escaldado de color marrón desde el ápice foliar; al igual Estrada y Sandoval (2004), indica que Curvularia sp. presenta manchas puntiformes y ojivales con halos amarillos que pueden unirse y secar gran parte de la hoja. 31 VI. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES Basándose en los resultados obtenidos en la presente investigación se concluye y recomienda. Conclusiones: 1. Los microorganismos aislados en semillas de arroz antes de la siembra con mayor incidencia fue en la variedad SFL 11 con Bipolaris oryzae, Curvularia sp., Rhizoctonia solani, Fusarium y Aspergillus flavus; en INIAP 15 el género Penicillium y en las semillas INIAP 11 (Reciclada) A. flavus y Penicilium. 2. Después de la siembra los hongos más incidentes fueron Curvularia sp., Nigrospora sp., Bipolaris oryzae, Aspergillus flavus, A. niger y Penicilium sp. 3. La semilla INIAP 15 presentó el mayor porcentaje de granos manchados después de la cosecha. 4. La variedad SFL obtuvo el mayor porcentaje de granos sin manchas y mayor rendimiento. Recomendaciones: 1. Utilizar semillas certificadas para evitar la presencia de microorganismos que afecten la calidad de la misma. 2. Realizar investigaciones que permitan conocer las condiciones que favorecen la presencia de microorganismos en semillas certificadas. 32 VII. LITERATURA CITADA Ainsworth, G. C.; Sparrow, F. K.; Sussman, A. S. 1973. 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Porcentaje de microorganismos aislados de semillas de arroz sin manchas antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule. 2013. INIAP 11 Microorganismos SFL 11 INIAP 15 (Reciclada) Aspergillus flavus 10 0 98 Bipolaris 20 0 0 Curvularia 10 0 0 Rhizoctonia 9 0 0 Fusarium 5 0 0 Penicillium 0 10 2 Sin presencia 46 90 0 Cuadro 2A. Porcentaje de microorganismos aislados de semillas de arroz con manchas antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule. 2013. Microorganismos SFL 11 INIAP 15 INIAP 11 (Reciclada) Aspergillus flavus 37 0 81 Bipolaris 39 0 0 Fusarium 3 0 0 Rhizopus 9 0 19 Sin presencia 12 100 0 40 Cuadro 3A. Número de semillas de arroz sin manchas germinadas antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule. 2013. TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) REPETICIONES TOTAL PROMEDIO 48 208 52 76 84 308 77 24 8 16 60 15 184 144 148 576 144 I II III IV SFL 011 36 64 60 INIAP 15 52 96 INIAP 11 (Reciclada) 12 TOTAL 100 A N A L Y S I S Fuente de Variación O F V A R I A N C E G.L S.C Repeticiones 3 12.67 Tratamientos 2 7784.00 Error 6 39.33 Total 11 T A B L E C.M F ”C” 4.22 3892.00 F “T” 5 % 1 % 0.64 NS 4.76 9.78 593.69 ** 5.14 10.92 6.56 7836.00 Coefficient of Variation= 5.33% Test: Duncan Alfa=0.05 TRATAMIENTOS INIAP 15 SFL 011 INIAP 11 (Reciclada) Medias con una letra diferentes (p<= 0,05) Medias n E.E. 77.00 4 1.28 52.00 4 1.28 15.00 4 1.28 son significativamente común 41 no a b c Cuadro 4A. Número semillas manchadas germinadas antes de la siembra. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) REPETICIONES TOTAL PROMEDIO 32 188 47 86 74 308 77 24 36 16 96 24 192 158 122 592 148 I II III IV SFL 011 40 80 36 INIAP 15 60 88 INIAP 11 (Reciclada) 20 TOTAL 120 A N A L Y S I S Fuente de Variación G.L O F V A R I A N C E S.C C.M Repeticiones 3 36.00 Tratamientos 2 5650.67 Error 6 16.00 Total 11 12.00 2825.33 T A B L E F “T” F ”C” 4.50 NS 1059.50 ** 5 % 1 % 4.76 9.78 5.14 10.92 2.67 5702.67 Coefficient of Variation= 3.31% Test: Duncan Alfa=0.05 TRATAMIENTOS Medias n E.E. INIAP 15 77.00 4 0.82 SFL 011 47.00 4 0.82 a b INIAP 11 (Reciclada) 24.00 4 0.82 c Medias con una letra común no son significativamente diferentes (p<= 0,05) 42 Cuadro 5A. Número semillas germinadas después de la cosecha. Hda. Santa Maria, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. REPETICIONES TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) TOTAL PROMEDIO 84 349 87,25 90 98 383 95,75 92 88 85 336 84,00 280 265 267 1068 267,00 I II III IV SFL 011 88 90 87 INIAP 15 97 98 INIAP 11 (Reciclada) 71 TOTAL 256 A N A L Y S I S Fuente de Variación O F G.L V A R I A N C E S.C Repeticiones 3 98.00 Tratamientos 2 Error 6 215.50 Total 11 608.00 294.50 Coefficient of Variation= T A B L E C.M F ”C” 32.67 0.91 NS 147.25 F “T” 4.10 NS 5 % 1 % 4.76 9.78 5.14 10.92 35.92 4.73% Test: Duncan Alfa=0.05 TRATAMIENTOS Medias n E.E. INIAP 15 95.75 4 3.00 a SFL 011 87.25 4 3.00 a b INIAP 11 (Reciclada) 84.00 4 3.00 c Medias con una letra común no son significativamente diferentes (p<= 0,05) 43 Cuadro 6A. Número de semillas de arroz llenas sin manchas. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro. Daule, 2013. REPETICIONES TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) I 98 63 70 231 SFL 011 INIAP 15 INIAP 11 (Reciclada) TOTAL A N A L Y S I S O F Fuente de Variación G.L II 80 78 74 232 III 83 71 55 209 IV 87 75 70 232 V A R I A N C E TOTAL PROMEDIO 348 287 269 904 87 72 67 226 T A B L E S.C C.M F ”C” F “T” 5 % 1 % Repeticiones 3 48.67 16.22 2.08 NS 4.76 9.78 Tratamientos 2 857.17 428.58 54.91 ** 5.14 10.92 Error 6 46.83 7.81 Total 11 952.67 Coefficient of Variation= 3.71% Test: Duncan Alfa=0.05 TRATAMIENTOS Medias n E.E. SFL 011 87.00 4 1.40 a INIAP 15 72.00 4 1.40 INIAP 11 (Reciclada) 67.00 4 1.40 Medias con una letra común no son significativamente diferentes (p<= 0,05) 44 b b Cuadro 7A. Número de semillas de arroz llenas manchadas. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. REPETICIONES TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) TOTAL PROMEDIO 6 22 6 23 19 94 24 16 26 20 86 22 42 55 45 202 51 I II III IV SFL 011 3 7 6 INIAP 15 33 19 INIAP 11 (Reciclada) 24 TOTAL 60 A N A L Y S I S O F Fuente de Variación V A R I A N C E G.L T A B L E S.C C.M F ”C” 5.67 Repeticiones 3 17.00 Tratamientos 2 778.67 Error 6 34.00 Total 11 389.33 F “T” 5 % 1 % 1.00 NS 4.76 9.78 68.71 ** 5.14 10.92 5.67 829.67 Coefficient of Variation= 14.14% Test: Duncan Alfa=0.05 TRATAMIENTOS Medias n E.E. INIAP 15 24.00 4 1.19 a INIAP 11 (Reciclada) 22.00 4 1.19 a 6.00 4 1.19 SFL 011 Medias con una letra diferentes (p<= 0,05) común 45 no son b significativamente Cuadro 8A. Número de semillas de arroz vanos sin manchas. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. REPETICIONES TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) TOTAL PROMEDIO 7 29 7 2 2 10 2 1 16 10 30 8 14 29 19 69 17 I II III IV SFL 011 1 10 11 INIAP 15 3 3 INIAP 11 (Reciclada) 3 TOTAL 7 A N A L Y S I S Fuente de Variación O F G.L V A R I A N C E S.C C.M Repeticiones 3 0.92 0.31 Tratamientos 2 63.50 31.75 Error 6 3.83 0.64 Total 11 68.25 Coefficient of Variation= T A B L E F ”C” F “T” 5 % 1 % 0.48 NS 4.76 9.78 49.70 ** 5.14 10.92 13.90% Test: Duncan Alfa=0.05 TRATAMIENTOS Medias n E.E. INIAP 11 (Reciclada) 8.00 4 0.40 a SFL 011 7.00 4 0.40 a INIAP 15 3.00 4 0.40 Medias con una letra común no son significativamente diferentes (p<= 0,05) 46 b Cuadro 9A. Número de semillas de arroz vanos con manchas. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. REPETICIONES TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) TOTAL PROMEDIO 0 0 0 4 4 9 2 9 3 0 15 4 9 7 4 24 6 I II III IV SFL 011 0 0 0 INIAP 15 1 0 INIAP 11 (Reciclada) 3 TOTAL 4 A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E F “T” Fuente de Variación G.L S.C C.M F ”C” 5 % 1 % Repeticiones 3 0.00 0.00 0.00 NS 4.76 9.78 Tratamientos 2 2.67 1.33 0.00 NS 5.14 10.92 Error 6 0.00 0.00 Total 11 2.67 Coefficient of Variation= 6.70 Test: Duncan Alfa=0.05 TRATAMIENTOS Medias n E.E. INIAP 11 (Reciclada) 4.00 4 0.00 a INIAP 15 2.00 4 0.00 a SFL 011 0.00 4 0.00 Medias con una letra común no son significativamente diferentes (p<= 0,05) 47 b Cuadro 10A. Porcentaje de humedad de la semilla después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. REPETICIONES TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) TOTAL PROMEDIO 22,20 91,00 22,75 18,20 19,00 75,50 18,88 16,00 16,40 16,40 65,10 16,28 57,90 57,50 57,60 231,60 57,90 I II III IV SFL 011 22,50 23,40 22,90 INIAP 15 19,80 18,50 INIAP 11 (Reciclada) 16,30 TOTAL 58,60 A N A L Y S I S Fuente de Variación O F G.L V A R I A N C E T A B L E S.C C.M F ”C” F “T” 5 % 1 % Repeticiones 3 0.13 0.04 0.24 NS 4.76 9.78 Tratamientos 2 44.50 22.25 122.07 ** 5.14 10.92 Error 6 1.09 0.18 Total 11 45.73 Coefficient of Variation= 1.64% Test: Duncan Alfa=0.05 TRATAMIENTOS Medias n E.E. INIAP 11 (Reciclada) 23.79 4 0.21 INIAP 15 25.75 4 0.21 A SFL 011 28.49 4 0.21 Medias con una letra común no son significativamente diferentes (p<= 0,05) 48 B C Cuadro 11A. Rendimiento de arroz en kg/Ha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. TRATAMIENTOS (Variedades de arroz) REPETICIONES TOTAL PROMEDIO 5681,82 24295,45 6073,86 5681,82 5965,91 23295,45 5823,86 6250,00 5113,64 22727,27 5681,82 17761,36 17897,73 17897,73 16761,36 70318,18 17579,55 I II III IV SFL 011 6681,82 5965,91 5965,91 INIAP 15 5965,91 5681,82 INIAP 11 (Reciclada) 5113,64 6250,00 TOTAL A N A L Y S I S O F V A R I A N C E T A B L E F “T” Fuente de Variación G.L S.C C.M Repeticiones 3 301651.35 Tratamientos 2 315168.09 Error 6 1616986.96 Total 11 2233806.39 Coefficient of Variation= F ”C” 0.37 NS 0.58 100550.45 157584.04 NS 5 % 1 % 4.76 9.78 5.14 10.92 269497.83 8.86% Test: Duncan Alfa=0.05 TRATAMIENTOS SFL 011 INIAP 15 Medias 6073.87 5823,87 n 4 4 E.E. 259.57 259.57 A A INIAP 11 (Reciclada) 5681.82 4 259.57 A Medias con una letra común no son significativamente diferentes (p<= 0,05) 49 Cuadro 12A. Porcentaje de microorganismos aislados de semillas de arroz sin manchas variedad SFL 11 después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Microorganismos Bipolaris oryzae Nigrospora sp Curvularia sp. Fusarium sp. Penicilllium sp. Aspergillus sp. Aspergillus niger Aspergillus flavus Rhizopus sp. Sin crecimiento Total I 0 20 28 5 22 0 2 11 0 12 100 II 0 24 20 2 7 4 12 14 7 10 100 SFL 11 III 0 18 32 2 6 0 10 12 2 18 100 IV 0 18 8 0 12 2 20 34 0 6 100 Total Promedio 0 80 88 9 47 6 44 71 9 46 400 0 20 22 2 12 2 11 18 2 12 100 Cuadro 13A. Porcentaje de microorganismos aislados de semillas de arroz sin manchas variedad INIAP 15 después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Microorganismos Bipolaris oryzae Nigrospora sp Curvularia sp. Fusarium sp. Penicilllium sp. Aspergillus sp. Aspergillus niger Aspergillus flavus Rhizopus sp. Sin crecimiento Total I 3 48 9 0 11 0 13 0 0 16 100 INIAP 15 II III 2 4 36 33 16 18 1 0 9 7 1 0 11 8 5 18 1 0 18 12 100 100 50 IV 8 12 46 0 10 0 4 14 0 6 100 Total Promedio 17 129 89 1 37 1 36 37 1 52 400 4 32 22 0 9 0 9 9 0 13 100 Cuadro 14A. Porcentaje de microorganismos aislados de semillas de arroz sin manchas variedad INIAP 11 (Reciclada) después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. Microorganismos Bipolaris oryzae Nigrospora sp Curvularia sp. Fusarium sp. Penicilllium sp. Aspergillus sp. Aspergillus niger Aspergillus flavus Rhizopus sp. Sin crecimiento Total I 0 26 40 0 8 0 11 3 0 12 100 INIAP 11 (Reciclada) II III 0 28 24 20 56 38 0 0 4 2 0 0 4 6 2 2 2 4 8 0 100 100 IV 0 20 47 0 7 0 8 6 2 10 100 Total Promedio 28 90 181 0 21 0 29 13 8 30 400 7 23 45 0 5 0 7 3 2 8 100 Cuadro 15A. Porcentaje de microorganismos aislados de semillas de arroz con manchas después de la cosecha. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013 Microorganismos Bipolaris oryzae Nigrospora sp Curvularia sp. Aspergillus niger Penicilllium sp. Chalariopsis Suman SFL 11 INIAP 15 0 0 0 0 0 0 100 0 50 25 25 0 0 100 INIAP 11 Reciclada 10 20 40 10 10 10 100 Foto 1A. Marbetes de semillas certificadas variedad SFL 11 e INIAP 15. Hda. Santa María, Rcto. San Pedro, Daule, 2013. 51