MANUAL DE PROCEDIMIENTOS
UNIDAD DE ADMINISTRACIÓN TALLERES Y
LABORATORIOS
PROGRAMA INDIVIDUAL DE PRÁCTICAS
Código:
LAB-PO-01-01
Revisión: 1
Página:
1 de 5
CICLO ESCOLAR: 2014-2015P
NOMBRE DEL DOCENTE:
Ing. José Dolores Lira Maas
CARRERA(S): Ingeniería en Materiales
ASIGNATURA: Técnicas de Análisis
SEMESTRE: Cuarto
GRUPO(S): A
PARCIAL: Primero
NOMBRE DE LABORATORIO :
Laboratorio de Biotecnología
NÚMERO Y NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
Elaboración de una curva de calibrado
FECHA Y HORA PROPUESTA DE LA PRÁCTICA:
6 de Marzo del 2015 de 14 a 17 hrs
Introducción.
Un procedimiento analítico muy utilizado en análisis cuantitativo es el
llamado de calibración que implica la construcción de una “curva de
calibración”. Una curva de calibración es la representación gráfica de una señal
que se mide en función de la concentración de un analito. La calibración incluye la
selección de un modelo para estimar los parámetros que permitan determinar la
linealidad de esa curva. y, en consecuencia, la capacidad de un método analítico
para obtener resultados que sean directamente proporcionales a la concentración
de un compuesto en una muestra, dentro de un determinado intervalo de trabajo.
En el procedimiento se compara una propiedad del analito con la de estándares de
concentración conocida del mismo analito (o de algún otro con propiedades muy
similares a éste). Para realizar la comparación se requiere utilizar métodos y
equipos apropiados para la resolución del problema de acuerdo al analito que se
desee determinar.
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La etapa de calibración analítica se realiza mediante un modelo de línea
recta que consiste en encontrar la recta de calibrado que mejor ajuste a una serie
de “n” puntos experimentales, donde cada punto se encuentra definido por una
variable “x” (variable independiente, generalmente concentración del analito de
interés) y una variable “y” (variable dependiente, generalmente respuesta
instrumental). La recta de calibrado se encuentra definida por una ordenada al
origen (b) y una pendiente (m), mediante la ecuación y = mx + b .
Objetivo: Elaborar e interpretar una curva de calibración con diferentes
concentraciones de glucosa.
Materiales:
 Pipetas de 1, 5 y 10 mL
 Vasos precipitados de 50, 100 y 250 mL
 Matraces aforado de 50 a 100 mL
 Varilla de Vidrio
 Hielo
 Celdas cuarzo
 Agua destiladas
 Reloj
 Guantes
 Perillas
 Gradillos
 Tubos de ensayos
 Cinta para marcar y marcadores
 Espátula
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Equipos
 Espectrofotómetro
 Balanza analítica
 Vortex
Reactivos.
 Fenol
 Glucosa
 Ácido sulfúrico
Procedimiento:
Preparación de la solución madre
Pesar 1 gr de glucosa diluir en un vaso precipitado con un poco de agua y aforarlo
en un matraz de 100 ml. Mezclarlo bien y dejarlo reposar en baño de agua fría por
diez minutos.
Preparación de fenol al 5%
Pesar 5 gr de Fenol, diluir en poco de agua en vaso precipitado y aforarlo en un
matraz de 100 ml.
Elaboración de las disoluciones a partir de la solución madre.
Tomando en cuenta la siguiente tabla formar las disoluciones siguientes 20, 50,
70. 100 y 150 ppm respectivamente en matraz aforado de 50 ml.
Matraz
Concentración
mL agua
mL de Solución madre
1
20 ppm
1
49
2
50 ppm
2.5
47.5
3
70 ppm
3.5
46.5
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4
100 pm
5
45
5
150 ppm
7.5
42.5
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Agitar bien cada una de las disoluciones y dejarlos reposar por cinco minutos.
Procedimientos para la elaboración de la curva calibrado.
 Etiquetar los tubos de acuerdo a la concentración 20, 50, 70, 100 y 150
ppm y añadir
1 mL de solución madre en cada tubo de acuerdo a su
concentración respectivamente.
 Colocar 0.5 ml de Fenol al 5% en cada uno de los tubos.
 Adicionar con mucho cuidado 2.5 ml de H2SO4 concentrado en cada uno de
los tubos.
 Agitar por cinco minutos en el vortex
 Dejar reposar por diez minutos
 Colocar lo tubos en un baño de hielo por 10 minutos
 Posteriormente transferir cada una de las disoluciones en una celda de
cuarzo y realizar la lectura de cada una de ellas en un espectrofotómetro
UV-Visible a 490 nm.
Resultados
Anotar en los resultados en la siguiente tabla:
Concentración
20 ppm
50 ppm
70 ppm
Absorbancia
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100 ppm
150 ppm
Realizar la curva de calibrado por Excel obtener la ecuación de la recta.
Realizar el siguiente cuestionario.
¿Qué es una curva de calibración?
¿Para qué sirve una curva de calibración?
¿Cuál es aporte de conocimiento de esta práctica en tu carrera?
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