INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOTECNOLOGICAS UNIVERSIDAD NACIONAL DE GRAL SAN MARTIN

INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOTECNOLOGICAS
UNIVERSIDAD NACIONAL DE GRAL SAN MARTIN
TECNICAS DE CULTIVO CELULAR
CURSO TEÓRICO PRÁCTICO
17 de noviembre al 14 de diciembre de 2012
9-13 hs
Coordinadores:
Dra. Marcela Brocco
Dr. Juan Mucci
Curso con evaluación final destinado a graduados o estudiantes del último año
de carreras afines a Biología.
Temario:
Día 1
- La célula en cultivo: características y requerimientos.
- El laboratorio de cultivos celulares: equipos y cuidados. Incubadoras. Flujos
laminares. Microscopios. Material descartable.
- Bioseguridad. Tipos de flujos laminares. Funcionamiento.
- Contaminaciones. Formas de control, identificación y eliminación.
Día 2
- Líneas celulares: mantenimiento y preservación.
- Sistemas de cultivo de células a gran escala.
- Aspectos prácticos: recuento celular (cámara de Neubauer), colorantes vitales
(Trypan blue)
- Células del sistema inmune: cultivo y producción de anticuerpos
monoclonales.
Día 3
- Cultivos primarios. Obtención de células de distintos tejidos: neuronas,
linfocitos, miocardiocitos, fibroblastos, etc.
- Cultivos primarios de células de tejido nervioso. Neuronas, glía. Tejidos
usados para obtener células. Explantos, cultivos organotípicos. Medios
condicionados.
- Cultivos de tejidos primarios: Aplicaciones Biotecnológicas.
Día 4
- Células madre.
- Cultivo de gametas con fines reproductivos.
Día 5
- Expresión de genes heterólogos. Métodos de transfección: electroporación,
reactivos lipofílicos, fosfato de calcio. Interferencia de RNA
- Cultivos de retina entera y aplicaciones.
Clases Prácticas
Lunes
TP1a: Cultivo primario de neuronas de hipocampo.
Martes
TP2: Aislamiento de linfocitos. Ensayos de proliferación celular.
TP1b: Transfección con liposomas.
Miércoles
TP3: Maduración oocitaria.
Continuación de TP2: Marcación con timidina.
Jueves
TP4: Manejo de la línea celular COS-7. Pasajes. Descongelación y congelación.
Electroporación. Recuento con Trypan Blue.
Continuación de TP2: Cosechar linfocitos y cuantificación.
Observación microscópica.
Viernes
Observación y evaluación de los cultivos