LABORATORIO AGROINDUSTRIA ANIMAL II Prof(as). Jacovelin Morales y Patricia Rojas UNELLEZ PRÁCTICA 2: PASTEURIZACIÓN DE LA LECHE Y ANÁLISIS DE LECHES COMERCIALES TRATADAS TÉRMICAMENTE OBJETIVOS. Conocer el funcionamiento del Pasteurizador de Placas HTST. ACTIVIDAD DE PRE- LABORATORIO. 1.- Lea atentamente la teoría que sustenta la pasteurización HTST de la leche y los análisis finales que deben realizarse para la comprobación de la calidad de la misma. Leche Pasteurizada Cualquiera sea el destino de la leche (ya sea para su venta en cualquiera de sus tipos, o para la elaboración de derivados lácteos), debe ser sometida a un tratamiento térmico. Se puede conceptuar la pasteurización como el tratamiento térmico por debajo del punto de ebullición, y en un tiempo mínimo, que permite destruir la totalidad de los agentes microbianos patógenos (Nasanovsky et al., s/f). La leche pasteurizada es la leche cruda homogeneizada o no, que ha sido sometida a un proceso térmico aprobado por la autoridad competente, en condiciones tales que garanticen la destrucción de los microorganismos banales Auxiliar: Lic. Frank Contreras 1 LABORATORIO AGROINDUSTRIA ANIMAL II Prof(as). Jacovelin Morales y Patricia Rojas UNELLEZ que pudiesen estar presentes, sin que se alteren sensiblemente las características organolépticas y físico – químicas de la misma (COVENIN 798). El objeto de este tratamiento es, en primer lugar, destruir todos los microorganismos que puedan ser causa de enfermedades (patógenos) y en segundo término, disminuir el número de aquellos agentes microbianos que puedan afectar la calidad de la leche y sus productos derivados. Pasteurización lenta: Este método consiste en calentar la leche a temperaturas entre 62,8 y 64ºC y mantenerla a esta temperatura durante 30 minutos. Pasteurización Rápida: Llamada también pasteurización continua o bien HTST (Heigh Temperature Short Time), este tratamiento consiste en aplicar a la leche una temperatura de 72 - 73ºC en un tiempo de 15 a 20 segundos. Fosfatasa Alcalina Es una enzima que se encuentra en la leche cruda asociada a los microsomas presentes en los glóbulos grasos, tiene un pH óptimo de actividad 9.75 y se destruye progresivamente con el calor, razón por la cual su determinación sirve para controlar la eficiencia de la pasteurización (COVENIN 573). ANÁLISIS DE LA FOSFATASA ALCALINA MÉTODO DE REFERENCIA (COVENIN 573) Reactivos: • Solución amortiguadora que va a contener fenilfosfato (sustrato). • Solución fenólicas patrón (de concentraciones conocidas según lo indicado en la norma). Auxiliar: Lic. Frank Contreras 2 LABORATORIO AGROINDUSTRIA ANIMAL II Prof(as). Jacovelin Morales y Patricia Rojas • Dibromo-quinona-cloroimida o folin-ciocalteau. • Butanol. • Solución catalizadora. UNELLEZ METODOLOGÍA COVENIN: 1. Preparar soluciones fenólicas de concentraciones conocidas (en µg/mL o unidad Sharer). 2. Se coloca 0,5 mL muestra y 5 mL de solución amortiguadora que va a contener fenilfosfato (sustrato) en un tubo de ensayo. 3. Se mezcla e incuba a 40 ºC durante 15 min.. 4. Adicionar 6 gotas C.Q.C (dibromo-quinona-cloroimida o Folin Ciocalteau) y 2 mL de solución catalizadora. 5. Incubar 5 min a 40ºC. 6. Enfriar y adicionar 3 mL de Butanol. 7. Centrifugar y separar el extracto butanólico (decantar) 2 veces. 8. Unir los precipitados butanólicos y comparar el color con las muestras patrón de fenol (observar color azul). 9. Multiplicar por 2 el valor obtenido y expresar en µg/mL o unidad Sharer. EXPRESION DE REULTADOS DE LACTOPEROXIDASA. Un color azul en el extracto butanólico de la muestra indica la presencia de fosfatasa alcalina y por consiguiente que el producto no ha sido pasteurizado, o se ha contaminado con productos crudos después del proceso de pasteurización. ACTIVIDAD PRÁCTICA Auxiliar: Lic. Frank Contreras 3 LABORATORIO AGROINDUSTRIA ANIMAL II Prof(as). Jacovelin Morales y Patricia Rojas UNELLEZ Escuche con atención la descripción que el técnico de laboratorio realizará del equipo pasteurizador, basado en la teoría estudiada previamente realice las preguntas que crea convenientes y familiarícese al máximo con el funcionamiento del equipo. REPORTE FINAL. Elabore en pareja con un(a) compañero(a) un diagrama de flujo del pasteurizador (siguiendo las normas de dibujo e Instalaciones Industriales para el gráfico), numere cada componente y explique el funcionamiento de cada uno de ellos y del equipo en general. Investigue y anexe el procedimiento práctico a realizar para la comprobación de la calidad de la leche pasteurizada – homogeneizada anexo a la Norma COVENIN 573 y el límite máximo de fosfatasa alcalina permitido en leche pasteurizada. Entregue el reporte a la entrada de la próxima práctica. (Recuerde dejar un borrador de este reporte para usted) Auxiliar: Lic. Frank Contreras 4 LABORATORIO AGROINDUSTRIA ANIMAL II UNELLEZ Prof(as). Jacovelin Morales y Patricia Rojas REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. NASANOVSKY, M. GARIJO, R. KIMMICH, R. LECHERÍA. DISPONIBLE EN: http://www.hipotesis.com.ar/hipotesis/Agosto2001/Catedras/Lecheria.htm NORMA VENEZOLANA. COVENIN 573-79. LECHE Y SUS DERIVADOS. DETERMINACIÓN DE ACTIVIDAD FOSFATÁSICA. MÉTODO DE REFERENCIA. NORMA VENEZOLANA. COVENIN 798-94. LECHE PASTEURIZADA (2da) REVISIÓN. Auxiliar: Lic. Frank Contreras 5