EFECTO DEL LAVADO POSQUIRÚRGICO SOBRE EL INSTRUMENTAL Y SU INCIDENCIA EN EL TIEMPO DE ESTERILIZACIÓN MEDIANTE EXPOSICIÓN A GAS FORMOL – COMUNICACIÓN PRELIMINAR BIMONTE, D.*; de SOUZA, G.**; GIGENA, S.***1 Resumen Se presenta un avance del proyecto de interés para la esterilización de instrumental en condiciones de campo que procura determinar los tiempos de exposición de gas formol sobre el instrumental, y la incidencia del lavado de los mismos previos a su exposición, Se inocularon n=16 pinzas de disección, (n=8) con Staphylococcus aureus y (n=8) con Pseudomonas aeruginosa, y se dividieron en a su vez en dos grupos. Un grupo (n=4) se sometió a lavado con agua potable y detergente neutro mientras que el otro (n=4) permaneció sin lavar y se expusieron a un gramo de Paraformaldehido a 26ºC de temperatura ambiente, retirando muestras a los 60, 120, 180 y 240 minutos para cultivo y determinación de Unidades Formadoras de Colonias (UFC). Para ambos microorganismos y para todos los tiempos de exposición, los cultivos no desarrollaron UFC. Summary We present an advance of the Project the important for sterilization in field conditions, that wants to determine the exposition times from formol gas on the instrumental and the effects to prior washing before exposition. We inoculated n=16 dissections forceps, (n=8) with Staphylococcus aureus y (n=8) with Pseudomonas aeruginosa, and divided them in two groups. One of them (n=4) forceps were washed with potable water and neutral detergent, while the other (n=4) were not washed. Both of them were exposed to one grame of Paraformaldehide to 26ºC ambiental temperature. We take simples at 60, 120, 180 and 240 minutes for culture and Colonies Formation Units (CFU) determination. For both bacteria and for all of time to exposition, the cultures did not develop CFU. 1 *) UDELAR – Facultad de Veterinaria – Centro Hospital Veterinario – Área Técnica Quirúrgica – Av. A. Lasplaces 1550 [email protected] Tel. 622 46 29 **) UDELAR - Facultad de Veterinaria – Centro Hospital Veterinario – Área de Ciencias Microbiológicas – Av. A. Lasplaces 1550, Tel. 622 73 11 ***) UDELAR – Facultad de Veterinaria – Centro Hospital Veterinario – Farmacia - Av. A. Lasplaces 1550, Tel. 622 90 45 Introducción El Gas Formol es un agente germicida y virucida de gran potencia, utilizado históricamente en la desinfección de incubadoras y como desinfectante gaseoso a nivel de quirófanos. Recientemente se lo utiliza para el mantenimiento de la esterilidad en instrumentos de cirugía de mínima invasión (Fuller, 1988; Geiss, 1994; Graziano, 2001; Mecke, 1984; Meyers, 1959). El uso se ha extendido de la cirugía, a la odontología y a la profesión veterinaria, siendo un método práctico usado rutinariamente por los veterinarios a nivel rural (Fuller, 1988; Graziano, 2001; Lubbe et al, 1997; Valyi, 1999). El objetivo es determinar el tiempo y la incidencia del lavado quirúrgico previo a la esterilización por gas formol sobre instrumental quirúrgico. Materiales y Métodos Se inocularon n=16 pinzas de disección esterilizadas en autoclave (Memmert ®) 121 ºC 1,5 Atm , (n=8) con Staphylococcus aureus y (n=8) con Pseudomonas aeruginosa, y se dividieron en a su vez en dos grupos. Un grupo (n=4) se sometió a lavado con agua potable y detergente neutro mientras que el otro (4) permaneció sin lavar y previo secado a estufa 37ºC por 24 hs, se expusieron a Paraformaldehido (1gramo x 600 cm-3) a 26ºC de temperatura ambiente, retirando muestras a los 60, 120, 180 y 240 minutos, para cultivo de enriquecimiento en Caldo nutritivo, incubándose a 37ºC por 24 horas. Se sembraron medios sólidos (Triptosa Agar (Biorad ®) para Staphylococcus aureus y Agar Cetrimida (Biorad ®) para Pseudomonas aeruginosa) con 0,1 ml. de cultivo líquido homogeneizado, correspondiente a cada microorganismo y tiempo de exposición utilizando una pipeta descartable (Brand Products ®) (Fig. 1). Luego de una incubación a 37ºC por 24 horas, se procedió a realizar la lectura de UFC. B - Grupo Lavado Inicio Cultivos Staphylococcus spp. y Pseudomonas spp. Lavado Secado Exposición a 60, 120, 180 y 240 minutos Inoculación del instrumental Esterilización del instrumental y demás equipos A - Grupo Sin Lavar Cultivo de enriquecimiento en caldo nutritivo Para cada grupo 4 placas de Petri con Triptosa Agar (Staphylococcus spp. ) 4 placas de Petri con Agar Cetrimida (Pseudomonas spp. ) Cultivos en medio sólido en Placas de Petri Conteo de UFC (Unidades Formadoras de Colonias) Fin ETAPA 1 Fig. 1 – Flujograma del experimento Resultados Para ambos microorganismos y para todos los tiempos de exposición mencionados en la sección anterior, los cultivos de enriquecimiento no desarrollaron crecimiento bacteriano evidenciable a simple vista (turbidez, sedimentación, floculación, membranas etc.). Los inóculos que fueron sembrados en las Placas de Petri respectivas para cada género bacteriano, no desarrollaron colonias y por lo tanto no se determinaron las UFC, concluyendo la esterilidad de los mismos. Discusión y Conclusión Según esta etapa del proyecto, se puede afirmar que a exposiciones de Paraformaldehido (1gramo x 600 cm-3) por 60 minutos a 26 ºC, son suficientes para lograr la esterilización del instrumental quirúrgico metálico en las condiciones experimentales fijadas. Que ,la potencia desinfectante del gas formol, logró esterilización en material contaminado durante un intervalo de 60 minutos a 26º C de temperatura ambiente, en cada uno de los grupos con o sin aplicación de lavado y secado previo. Otros autores obtuvieron esterilizaciones totales luego de 24 horas a una concentración de gas formol de 14 ppm. y a una temperatura ambiente situada entre los 22 y 24 ºC. La exposición se hizo en gabinetes de 3,7 litros de capacidad y 5 gramos de paraformaldehido en polvo (Lubbe et al. 1997). Se estima que las concentraciones alcanzadas en esta fase experimental fueron superiores a las 14 ppm., siendo una parte del trabajo que se encuentra en etapa de ajuste metodológico. La posibilidad que persistan restos de gas formol en los instrumentos, ha sido descrito por otros autores como un problema de contaminación química de tejidos con potenciales riesgos sanitarios para el animal. (Fleck, 1989; Frosin, 1983; Graziano, 2001) Bibliografía 1. Fleck, H. (1989). Comparison of residuos of glutaraldehyde and formaldehyde in urologic instruments alter sterilization in aseptic conditions of in a formaldehyde gas sterilizer. Pharmazie 44:345-347. 2. Fuller, G. (1988). Principios de microbiología, esterilización y desinfección Capitulo 4 en Instrumentación Quirúrgica , 2da. Edición, 33-52. 3. Frosin, V.K.; Tsibikov, V.B.; Izvekova, G.I.; Pakhomov, S.V.; Vyshegorodskaia, R. A. (1983). Sterilization of rubber medical equipment with formaldehyde. Med. Tekh. Nov-Dec; 6:22-27. 4. Geiss, H.K. (1994). New sterilisation technologies – are they applicable for endoscopic surgical instruments?. Endosc. Surg. Allied Technol. 2:276-278. 5. Graziano, K.U. (2001). Use of paraformaldehyde tablets by Brazilian health institutions – Part I. Rev. Esc. Enferm. USP. 35:191-199. 6. Lubbe, A.M. ; Henton, M.M. (1997). Sterilization of surgical instruments with formaldehyde gas., Vet.Rec. 140:450-453. 7. Mecke, P. (1984). Desinfection and sterilization or thermolabile instruments with gaseous formaldehyde. Zentralbl.Bakteriol Mikrobiol Hyg (B). 179:529-543. 8. Meyers Jones, L. (1959). Parte VIII Quimioterapia Medicamentos Antiinfecciosos Locales en Farmacología y Terapéutica Veterinarias. 1ra. Ed. 371-377. 9. Valyi, P.; Gorzo, I.; Mari, A. (1999). Infection control in dentistry. II. 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