Universidad Nacional de Rio Cuarto Facultad de Ciencias Exactas, Físico-Químicas y Naturales UNIVERSIDAD NACIONAL DE RÍO CUARTO FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS, FÍSICO-QUÍMICAS Y NATURALES DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA E INMUNOLOGÍA CARRERA/S: MICROBIOLOGÍA PLAN DE ESTUDIOS: Versión 3. ASIGNATURA: CÓDIGO: 2148 AÑO: 2012 INMUNOLOGIA DOCENTE RESPONSABLE: Dra. Ana María Maldonado EQUIPO DOCENTE: DNI 4596107 11689607 12144371 26728366 NOMBRE Maldonado,Ana María Witowski, Elizabeth María Rodriguez, Noemí Amalia Passone, Alejandra GRADO ACADEMICO Dra. en Ciencias Biológicas Dra. en Ciencias Biológicas Dra. en Ciencias Biológicas Dra. en Ciencias Biológicas AÑO ACADÉMICO: 2011 REGIMEN DE LA ASIGNATURA: Cuatrimestral RÉGIMEN DE CORRELATIVIDADES: Aprobada Para cursado Para rendir Regular Microbiología II, Cod 2161 Fisiología, Cod 2109 Microbiología II, Cod 2161 Fisiología Animal, Cod 2109 CARGA HORARIA TOTAL: 154 hs TEÓRICAS: 3hsx28 PRÁCTICAS LABORATORIO: 3hsx20 Parciales y recuperatorios 3hs x4 : CARÁCTER DE LA ASIGNATURA: Obligatoria 1 A. CONTEXTUALIZACIÓN DE LA ASIGNATURA Ciclo superior B. OBJETIVOS PROPUESTOS Se dictarán las clases teóricas y prácticas sobre la base de conocimientos de Histología, Química Biológica, Microbiología y Fisiología Animal y Humana. Se desarrollarán los conceptos actualizados de Inmunología Básica orientados a la Inmunopatología y al Inmunodiagnóstico para alcanzar una formación conceptual y práctica que permita al alumno realizar por si mismo las pruebas diagnósticas a su alcance, interpretando los resultados para un correcto diagnóstico clínico. Dentro de las posibilidades docentes se estimulará y apoyarán las inquietudes científicas relacionadas poniendo a disposición de los alumnos que cursan y para los que ya han cursado la materia, todas las oportunidades posibles de realizar experiencias en el ámbito de la Inmunología sobre temas de su interés. C. CONTENIDOS BÁSICOS DEL PROGRAMA A DESARROLLAR Se desarrollarán conceptos sobre los componentes del Sistema inmune. Células, órganos y sistemas involucrado. Antígenos. Anticuerpos. Regulación del Sistema Inmune. El CMH. Moléculas, células y mecanismos de la Inmunidad Innata y de la Inmunidad Adaptativa. El Sistema Inmune de las mucosas. Mecanismos efectores de la respuesta inmune. Activación de células T y de células B, Interacciones celulares. Subpoblaciones celulares. Citoquinas. Moléculas de adhesión. Mecanismos de Citotoxicidad. Sistema Inmune contra Bacterias, Virus, Parásitos y Hongos. Inflamación . Reacciones de Hipersensibilidad. Etiopatogenia de Enfermedades autoinmunes. Tipos de Inmunodeficiencias Primarias y Secundarias. Etiopatogenia de Enfermedades tumorales. Inmunoterapias Activas y Pasivas. Nuevas Vacunas. Inmunodiagnóstico. D. FUNDAMENTACIÓN DE LOS CONTENIDOS Se desarrollan conceptos actualizados sobre la estructura y funcionalidad del Sistema Inmune a nivel celular y molecular, en estado de salud y en enfermedades por microorganismos (bacterianas, virales, fúngicas y parasitarias), enfermedades autoinmunes, por hipersensibilidad, inmunodeficiencias y tumorales. El conocimiento de la dinámica de la Inmunología Básica será orientado hacia la Inmunopatología y el Inmunodiagnóstico, a fin de alcanzar una formación conceptual y práctica que permita al alumno realizar por si mismo las pruebas diagnósticas a su alcance, interpretando los resultados para un correcto diagnóstico clínico. E. ACTIVIDADES A DESARROLLAR CLASES TEÓRICAS: Teórico impartido con recursos didácticos:presentaciones en powerpoint. Se le aporta al alumnado cada clase en fotocopias e impresión, así cuentan con el material al momento del desarrollo del tema. Se dictan dos clases semanales de 3hs cada una. Son 6 hs semanales. CLASES PRÁCTICAS: Para el desarrollo de cada actividad teórico-práctico el alumno dispone de material didáctico específico que detalla los aspectos teóricos y metodológicos a desarrollar y que se expresan en un libro elaborado por los docentes de la asignatura, que fue editado por la editorial de la UNRC. Todas las actividades son interactivas. 6 hs por semana. CICLOS DE SEMINARIOS: Al final del cuatrimestre y cerrando los contenidos teóricos de la asignatura, se desarrollan 4 ciclos de seminarios : dos clases de integración de temas teóricos y 2 de integración de temas prácticos, previos a cada evaluación Parcial. F. NÓMINA DE TRABAJOS PRÁCTICOS G. HORARIOS DE CLASES: Teóricos: lunes Aula 4 Pab 1de 13 a 16h y miércoles:Aula 31 Pab 1 de 13 a 16h Trabajos prácticos de laboratorios: lunes y miércoles Comisión 1 de 9 a 12 hs. Aula Laboratorio 7 Comisión 2 de 9 a 12 hs Aula Laboratorio 8 . HORARIO DE CLASES DE CONSULTAS: Para todas las actividades que se desarrollan en la asignatura, cada docente responsable de las mismas estipula 2 hs. por semana durante todo el cuatrimestre. Se intensifica 2 esta actividad en los días previos a los parciales y a los turnos de exámenes finales fijados por calendario académico. H. MODALIDAD DE EVALUACIÓN: Evaluaciones Parciales: Evaluación Final: Para alumnos regulares: Se realizan escritos de 10 preguntas a responder sobre los temas dictados. Para alumnos libres: Pueden rendir como Libres solamente los alumnos que hayan regularizado la Parte Práctica. No es posible tomar un examen de la parte práctica en cada turno de exámen pues se debe contar con numerosas drogas y reactivos, equipos o kits y disponibilidad de aparatos y personal docente que prepare, disponga y controle las actividades de los examinados. La evaluación exclusivamente escrita de los trabajos prácticos no refleja los conocimientos y manualidad en el laboratorio. CONDICIONES DE REGULARIDAD: Asistir y aprobar el 80% de las clases Prácticas y Aprobar con nota igual o mayor de 5 puntos los exámenes parciales. CONDICIONES DE PROMOCIÓN: Asistir al 80% de las clases Teóricas y Prácticas, Aprobar los exámenes parciales, con nota promedio igual o mayor de 7 puntos y nota de cada parcial igual o mayor de 6 puntos. Responder correctamente al 80% de 100 preguntas (redactadas en 10 guías), referidas a los temas teóricos. HORARIOS DE LAS CLASES DE CONSULTA Docentes DNI Día y Hora Lugar Dra. Ana María Maldonado 4596107 Martes 12-14 Dra. Elizabeth Witowski 11689607 Martes 10 a 12 Dra. Noemí Rodríguez 12144371 Martes 10 a 12 Dra. Alejandra Passone 26728366 Viernes 10 a 12 Box 3 Pab convenir Box 22 Pab convenir Box 22 Pab convenir Box 20 Pab convenir Nuevo o Aula a Nuevo o Aula a Nuevo o Aula a Nuevo o Aula a 3 PROGRAMA ANALÍTICO CONTENIDOS PARTE I INTRODUCCION A LA INMUNOBIOLOGIA. ASPECTOS BASICOS DE LA INMUNIDAD 1. Conceptos Básicos en Inmunología. Los Componentes del Sistema Inmune. Inmunología. Historia. Definición y relaciones con otras ciencias. Principios de Inmunidad Innata y Adaptativa. Conceptos generales de Inmunidad. Barreras naturales. Inmunidad Activa, Pasiva y Adoptiva. Mecanismos de reconocimiento y efectores de la Inmunidad adaptativa. 2. Células protagonistas de la respuesta inmune. Organos Primarios y secundarios del sistema inmune. El Timo y el desarrollo de los Linfocitos T. Selección Positiva y Negativa de células T. Bursa de Fabricio. Médula Osea. Placas de Peyer y Amigdalas. Tejidos linfoides secundarios. Bazo. Ganglios Linfáticos. Nódulos linfáticos. Circulación Linfática. Vénulas de Epitelio Alto. Tejido Linfoide Asociado a las Mucosas. Marcadores y Receptores celulares. Areas timodependientes y timoindependientes. Filogenia. Ontogenia. Estructura y funciones celulares. Poblaciones de Células T: cooperadoras, citotóxicas y reguladoras. El Repertorio de Linfocitos B. La generación de células B. Selección y Heterogeneidad de células B. Linfoblastos. Plasmocitos. Células de memoria. Células plasmáticas. Marcadores de maduración de células B. Fagocitos mononucleares y polimorfonucleares. Fagocitos libres y fijos. Células Presentadoras de Antígeno (CPA). Células dendríticas. Ubicación y Función. Células de Langerhans. Neutrófilos. Eosinófilos. Mastocitos y Basófilos. Monocitos y Macrófagos. Células NK y NK1.1 PARTE II RECONOCIMIENTO DE ANTIGENOS. ANTICUERPOS.SINTESIS. PRESENTACION DE ANTIGENOS. INTERACCIONES CELULARES. 3. Antígenos. Antígenos e Inmunógenos. Características fundamentales. Factores condicionantes de la antigenicidad. Determinantes antigénicos. Tipos. Valencia. Haptenos. Alteraciones de los antígenos. Tipos de antígenos: Antígenos de bacterias y toxinas microbianas. Antígenos de rickettsias y virus. Antígenos de parásitos. Antígenos de origen animal y vegetal. Antígenos específicos de especie y de órganos. Antígenos heterófilos. Antígenos de glóbulos rojos humanos. Antígenos de histocompatibilidad. Mitógenos y superantígenos. Antígenos exógenos y endógenos. Adyuvantes. Tiempo de permanencia de los antígenos. 4. Anticuerpos. Estructura típica de una molécula de Anticuerpo. Nomenclatura. Interacción de la molécula de Anticuerpo con el Antígeno específico. Cadenas pesadas. Cadenas ligeras. Variaciones estructurales en las Regiones Constantes de las Inmunoglobulinas. Clases y subclases de Anticuerpos. Receptores para la porción Fc de las inmunoglobulinas. IgG. IgM. IgA. IgD. IgE. Propiedades fisicoquímicas, biológicas y metabólicas de las inmunoglobulinas. Inmunoglobulinas de vertebrados. Sitios activos de las inmunoglobulinas. Clivaje enzimático por pepsina, papaína y otros. Variaciones isotípicas, alotípicas e idiotípicas. La superfamilia de las Inmunoglobulinas. Respuesta Inmune Humoral primaria y secundaria. Período de latencia. Vida media de los anticuerpos. 5. Origen de la diversidad de los anticuerpos. Síntesis de Igs. Reordenamiento y Expresión de los genes durante la maduración de las células B. Diversidad originada por recombinación somática. Síntesis de cadenas ligeras y pesadas, variables y constantes. Mecanismo de conmutación o cambio de clase. Mecanismos de regulación de la producción de anticuerpos. Regulación por Antígeno. Regulación por Anticuerpos. Mecanismo de retroalimentación. Mecanismo por antiidiotipos. Regulación por citoquinas. Regulación neuroendócrina. Poblaciones de Células T reguladoras CD4+CD25+ y poblaciones que expresan CD17. Tolerancia. Inmunosupresión. Hibridomas y Anticuerpos monoclonales. Anticuerpos bloqueantes. Anticuerpos coprecipitantes. 4 6. Complejo Mayor de Histocompatibilidad. Estructura y Función del CMH. Organización genética y polimorfismo del sistema HLA y H-2. Estructura y expresión de moléculas de clase 1 y clase 2 en el humano y en ratón. Moléculas y genes de clase 1. Moléculas y genes de clase 2. Funciones de las moléculas de Histocompatibilidad. Respuesta inmune contra los Antígenos de Histocompatibilidad. Tipificación del Sistema HLA. Función biológica de reconocimiento dual. HLA y genética poblacional. HLA y enfermedades. HLA y trasplantes. 7. Captación de Antígenos. Células Presentadoras de Antígeno (CPA). Molélulas de membrana de las CPA que se unen a Antígenos. Receptores de reconocimiento de patrones, Receptores Toll Like, Receptores scavenger, Receptores para péptidos formilados, Receptores para el Complemento, Receptores para citoquinas, Receptores para quimiocinas, Receptores para la porción Fc de las IGs, Receptores para Proteína que une manosa, Receptores para Proteína C Reactiva y otros. Ligandos de las moléculas captadoras de Antígeno. Presentación antigénica y activación linfocitaria. Procesamiento y presentación antigénica. Via exógena o endocitica. Vía endógena o biosintética. Activación de las células B. Maduración del sistema inmune. Marcadores y receptores de las células B. Subpoblaciones. Maduración y funciones de las célulasT. Marcadores y receptores de superficie. Clasificación funcional de las células T. Diferenciación de células T: Th1, Th2, Th3 y Células T CD17. Marcadores genéticos de cada subpoblación. Citoquinas involucradas en las desviaciones celulares y citoquinas que libera cada subpoblación. Moléculas CD de distintas poblaciones celulares y principales características. Citoquinas involucradas en la ontogenia T y B. Captación de los antígenos en los órganos secundarios. 8.Inmunidad innata en los tejidos profundos. Inflamación. Papel de las citoquinas en la respuesta inflamatoria aguda. Células protagonistas del sistema inmune. Fagocitos. Células agresoras naturales. Fagocitosis. Mecanismos de muerte celular. Interferones. Tipos. Mecanismo de Síntesis de IFNs. Mecanismos de regulación de la síntesis de IFNs por citoquinas. Mecanismos efectores de los IFNs. Complemento. Componentes. Vía de activación clásica. Vía de activación alterna. Vía de activación por MBP. Receptores de componentes del sistema complemento. Mecanismos biológicos de la activación del Complemento. Mecanismos regulatorios. Síntesis, ontogenia y filogenia de los componentes. Valoración de los niveles séricos de los componentes. Valoración de la actividad funcional. 9. Respuestas Innata y Adaptativa a la infección. Efectos de Citoquinas secretadas por macrófagos en respuesta a productos bacterianos. IL-1, IL-6, IL-8, IL-12 y FNT-α;. La Migración de leucocitos. Quimoquinas. Clases. Células productoras. Receptores de quimoquinas. Células quimo-atraídas. Efectos principales. Moléculas de Adhesión. Superfamilia de las integrinas. Familia de las Selectinas. Moléculas de adhesión de la superfamilia de las inmunoglobulinas. Ligandos específicos. Expresión y función. Papel de las moléculas de adhesión en el tráfico linfocitario. La migración transendotelial. Tráfico de linfocitos, neutrófilos y eosinófilos. Recirculación normal. Reclutamiento de linfocitos en los sitios inflamados. 10. Sistema inmunitario de las mucosas. Estructura y Síntesis. Clases de Igs de las mucosas. La IgAS. LB en mucosas. Células T en mucosas. Tejidos linfoides asociados a las mucosas. MALT, BALT, GALT y PALT. Transporte y secreción de Igs en las mucosas. Función biológica del sistema inmune mucosal. Ciclo celular de IgA. Transcitosis de IgG. Poblaciones de mastocitos en mucosas. Células Dendríticas Tipos 1 y 2. Células T CD4, Células T CD8. Regulación neuroendócrina. 11. Inmunología de la Reproducción. Inmunidad en el feto y en el recién nacido Ontogenia del Sistema Inmune. Transferencia de la Inmunidad de la madre al producto. Calostro y Leche materna. Secreción, composición y absorción. Respuesta inmune en el recién nacido. Transferencia de anticuerpos y de la inmunidad celular de la madre al feto. Inmunología del embarazo. Transferencia pasiva en las aves. Inmunología de la reproducción. Expresión antigénica de las células del trofoblasto. Respuesta a Antígenos HLA. Anticuerpos IgG asimétricos. Factores inmunomoduladores del trofoblasto. Factores linfocitarios moduladores de la respuesta inmune. PARTE III ACTIVACION DE LINFOCITOS B Y T. MECANISMOS EFECTORES DE LA RESPUESTA INMUNE. 12. Reconocimiento de Antígenos por Linfocitos. El Receptor T. Re-acomodamiento de genes del RcT y su 5 expresión. Generación de los ligandos de las células T. Receptores RcT;α-β y RcTγ-δ;. Complejo CD3. Estructura del RcT y reconocimiento del antígeno.Señales a través de Receptores de Linfocitos. Principios Tipos. Hipersensibilidad de tipo 1. Bases genéticas. Alergenos. Regulación de la síntesis de IgE. Receptores Generales de Señales Transmembranas. Mecanismos de transducción en LT. Vía de señales de transducción. El Receptor B, Estructura y reconocimiento del antígeno. Mecanismos de transducción en LB. Efectos que se producen por estimulación antigénica en LB y LT. 13.Citoquinas. Propiedades. Clasificación funcional. Receptores de citoquinas. Interleuquinas: IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL13, IL-14, IL15, IL-16, IL-17, IL-18. Células productoras, Rcs y efectos principales de cada una. IFNs: IFNalfa;, IFN-beta; e IFNgamma;. Factores estimulantes de colonias: GM-CSF, M-CSF, G-CSF. Factor Transformante del Crecimiento beta;. Factores de Necrosis Tumoral: TNFalfa; y TNF-beta;. Células productoras Rcs y efectos principales. Señales de activación celular mediadas por citoquinas. Efectos de las citoquinas en el swich de isotipos. 14. La Respuesta Inmune Adaptativa. La Respuesta Inmune Humoral. Producción de Anticuerpos por Células B. Distribución y Función de Isotipos de Inmunoglobulinas. Células Accesorias que expresan Rc Fc en la Inmunidad Humoral. El sistema Complemento en la inmunidad humoral. Inmunidad mediada por Células T. La producción de células T efectoras, armadas La diferenciación de Células T CD4+ en Th1 y Th2. Mecanismos de cooperación y supresión. Regulación e interrelaciones linfocitarias. Citoquinas. Citotoxicidad mediada por Células T. Activación de Macrófagos por células CD4 Th1. Mecanismos Citotóxicos mediados por células. Fagocitosis. Sistemas microbicidas dependientes e independientes del oxígeno. Citotoxicidad mediada por LT. Citotoxicidad mediada por células NK. Citotoxicidad inducida por IL-2. Citotoxicidad celular dependiente de Acs. Citotoxicidad celular dependiente de Complemento. Apoptosis. Vías de apoptosis. Apoptosis mediada por Fas/Fas-L. Apoptosis mediada por TNF-α, TNF-β y otras vías. Secreción de granzimas, perforinas y protectinas. Activación de Cascadas de caspasas. PARTE IV EL SISTEMA INMUNE EN SALUD Y EN ENFERMEDAD. INMUNOPATOLOGIAS. 15. Defensas del organismo frente a microorganismos. Inmunidad Innata, respuesta no-adaptativa e Inmunidad adaptativa en la Infección. Memoria Inmunológica. Inmunidad frente a bacterias extracelulares. Inmunidad frente a toxinas. Inmunidad frente a bacterias intracelulares. Fagocitos profesionales. Mecanismos que utilizan las bacterias para eludir la respuesta inmune. Reacciones Inmuno-Patológicas. Inmunidad frente a los virus. Papel de los interferones en la inmunidad antiviral. Diagrama de la evolución de marcadores específicos en una infección viral aguda primaria. Respuesta inmune en Poliomielitis, Respuesta inmune en rubeola. Respuesta inmune en la infección herpética. Respuesta inmune en Hepatitis B. Respuesta inmune en la infección por HIV. Consecuencias indeseables de la respuesta inmune antiviral. Inmunidad frente a protozoarios y helmintos. Mecanismos de defensa humorales y celulares Mecanismos empleados por los parásitos para eludir la respuesta inmune. Mecanismos patogénicos dependientes de la respuesta inmune en infecciones parasitarias. Métodos de Inmunodiagnóstico. Inmunología de las micosis. Micosis sistémicas. Micosis oportunistas. Utilidad e interpretación de las pruebas diagnósticas. Valor pronóstico y diagnóstico de las pruebas cutáneas. 16. Inmunoprofilaxis e Inmunoterapia. Inmunización activa y pasiva. Inmunoprofilaxis e Inmunoterapia. Tipos de vacunas. Método general de preparación de una vacuna. Pruebas de protección. Vacunas antibacterianas. Vacunas antivirales. Vacunas con microorganismos vivos, atenuados o inactivados. Microorganismos genéticamente modificados. Vacunas sintética. Vacunas de subunidades celulares. Vacunas de recombinación del ADN. Vacunas de antiidiotipos. Vacunas mixtas. Vacunas Polivalentes. Esquema actual de vacunaciones. Vacunas para niños, ancianos o viajeros a regiones endémicas. Antisueros específicos homólogos y heterólogos. Gammaglobulinas humanas. Inmunomoduladores. Factores linfocitarios. Levamisol y otros. Extractos tímicos. Injertos y Trasplantes. Reacción Injerto vs huesped. 6 17. Hipersensibilidad Protagonistas de la Hipersensibilidad. Células y moléculas involucradas. Tipos. Hipersensibilidad de tipo 1. Bases genéticas. Alergenos. Regulación de la síntesis de IgE. Receptores celulares para IgE. Pruebas para evaluar la hipersensibilidad. Anafilaxia. Shock anafiláctico. Pruebas in vivo e in vitro. Eventos bioquímicos en la activación de mastocitos y basófilos. Mediadores químicos preformados y mediadores liberados como prefactores por mastocitos y basófilos. Sus efectos. Vías de liberación de mediadores. Hipersensibilidad de tipo 2. Mecanismos de citotoxicidad. Enfermedades hemolíticas. Daños en membranas Hipersensibilidad basales, piel y otros órganos. Reacciones de comienzo tardío. Hipersensibilidad de Tipo 2. Mecanismos de Anemias, granulocitopenia, plaquetopenia , y otras. Hipersensibilidad de tipo 3. Enfermedad del suero. Fenómeno y Reacción de Arthus. Vasculitis, nefritis, artritis, alveolitis. Hipersensibilidad de tipo 4. Reacciones mediadas por LTh1.Reacciones mediadas por activación de macrófagos. Reacciones mediadas por activación de eosinófilos. Reacciones mediadas por células Tc. Reacción tuberculínica y otras reacciones de hipersensibilidad tardía. Utilidad e Interpretación de las pruebas cutáneas retardadas. Hipersensibilidad de contacto. Rechazo de Injertos 18. Inmunodeficiencias. Inmunodeficiencias Primarias. Clasificación. Carácterísticas inmunológicas y clínicas. Inmunodeficiencias Combinadas. Inmunodeficiencias de Anticuerpos. Inmunodeficiencias asociadas a otras anomalías. Inmunodeficiencias hereditarias: autosómicas recesivas y ligadas al sexo. Sindromes ligados a inmunodeficiencias. Defectos de la Función de la Fagocitosis. Deficiencias del Sistema Complemento. Deficiencias en la expresión de moléculas de Adhesión. Evaluación de las enfermedades mediadas por inmunodeficiencias. Métodos de evaluación de la función fagocítica. Inmunodeficiencias secundarias. SIDA. Efectos de la infección por HIV sobre el sistema inmune. Pruebas diagnósticas para HIV. Inmunodeficiencia fisiológica. Inmunodeficiencia transitoria. 19. Autoinmunidad. Enfermedades autoinmunes. Etiología. Modelos de autoinmunidad espontánea. Modelos de autoinmunidad experimentalmente inducidos. Enfermedades autoinmunes organoespecíficas y sistémicas. Respuesta humoral o celular en cada enfermedad. Enfermedades autoinmunes tiroideas. Diabetes mellitus. Miastenia Gravis. Esclerosis múltiple. Enfermedades autoinmunes del sistema hematopoyético. Enfermedades autoinmunes de la piel. Lupus Eritematoso Sistémico. Principales autoanticuerpos. Otras enfermedades con compromiso sistémico. Pruebas diagnósticas en enfermedades autoinmunes. 20. Inmunología Tumoral. Antígenos tumorales. Respuesta inmune anti-tumoral. Antígenos tumorales reconocidos por LT. Antígenos tumorales detectados por anticuerpos. Inmunodiagnóstico. Inmunoterapia. Inmunodiagnóstico de enfermedades tumorales. Características. Factores genéticos. PARTE V INMUNODIAGNOSTICO Temas a desarrollar en clases prácticas.1. Histología del Sistema Inmune. Observación por Microscopía de inmersión de las células de Muestras de sangre, Timo, Ganglio linfático, Bazo, Médula ósea, Amígdalas, Placas de Peyer y Bursa de Fabrizio. La inducción, medición y manipulación de la Respuesta inmune. La inducción y detección de la Respuesta Inmune. Medición y uso de los Anticuerpos. Estudio de los Linfocitos. Temas a desarrollar en clases prácticas. 1. Histología del Sistema Inmune. Observación por Microscopía de inmersión de las células de Muestras de sangre, Timo, Ganglio linfático, Bazo, Médula ósea, Amígdalas, Placas de Peyer y Bursa de Fabrizio. 2. Interacción primaria. Inmunofluorescencia. Métodos directos e indirectos. Electroforesis en geles e Inmunotransferencia. EIA. 3. Reacciones antígeno-anticuerpo "in vitro". Interacción secundaria I. Precipitación cualitativa, Medios líquidos. Medios gelosados. Investigación de haptenos. Reacción de floculación. Electroforesis. Inmunoelectroforesis. 7 Electroinmunodifusión. Precipitación cuantitativa en medios líquidos. Inmunodifusión radial. 4. Reacciones antígeno-anticuerpo "in vitro". Interacción secundaria II. Aglutinación directa. Pruebas cualitativas y cuantitativas. Empleo del 2ME. Pruebas para diagnóstico de brucelosis Pruebas para diagnóstico de grupos sanguíneo. Aglutinación condicionada o pasiva. Aglutinación pasiva invertida. Empleo de soportes inertes y biológicos. Pruebas de Coombs. 5. Reacciones de Hipersensibilidad Inmediata. Prueba de degranulación de basófilos. Estudio de exudados nasales y citograma de mucosas. Pruebas cutáneas de hipersensibilidad inmediata. 6. Valoración de la inmunidad mediada por células. Cuantificación de poblaciones y subpoblaciones linfocitarias. Evaluación de la proliferación de células mononucleares de angre periférica in vitro. Proliferación inducida por Mitógenos o Antígenos. Estudio de la funcionalidad de linfocitos B y T a través de la síntesis de citoquinas determinadas y cuantificadas por EIA o ensayos biológicos. 7. Inmunofluorescencia. Métodos utilizados para la identificación y cuantificación de Antígenos. Metodología para evaluación de células inmunocompetentes. Citometría de Flujo. Fundamento e Interpretación. Temas a desarrollar en Seminarios 1. Interacción antígeno-anticuerpo "in vitro", Interacción primaria. Fuerzas reguladoras. Separación y purificación de anticuerpos. Fraccionamiento de Inmunoglobulinas. Filtración por geles. Electroforesis en gel de poliacrilamida. Inmunotransferencia. Técnicas de electroforesis con anti Acs marcados con enzimas (Immunoblotting). Radioinmunoanálisis. 2. Prueba hemolítica de fijación de complemento. Fundamento. Variedades. Valoración de los niveles séricos de los componentes. Valoración de la actividad funciona. Valoración del Complemento en dosis hemolíticas 50% (CH50). 3. Pruebas de neutralización. Fundamento de la inhibición de la hemaglutinación. Neutralización de toxinas, virus o enzimas. Unidades empleadas. Titulación de toxinas y antitoxinas. 4. Anafilaxia activa y pasiva. Pruebas para determinar la anafilaxia. Pruebas cutáneas inmediatas y duales. Pruebas cutáneas para determinar hipersensibilidad: mediatas y tardías 5. Pruebas que emplean anticuerpos monoclonales: CD4, CD8.Pruebas de la inhibición de la migración de macrófagos. Pruebas de citotoxicidad. Interpretación de las pruebas cutáneas retardadas. 6. Evaluación de las enfermedades mediadas por déficiencias humorales, celulares y combinadas. Métodos de evaluación de la función fagocítica. Pruebas diagnósticas para HIV. 7. Aislamiento de poblaciones celulares inmunocompetentes. Purificación de Linfocitos B y LT. Citometría de flujo. Fundamento de la metodología para detectar el fenotipo celular, la clasificación de células y el análisis del ADN. 8 BIBLIOGRAFIA: Recomendada: Murphy Kenneth: Janeway´s IMMUNOBIOLOGY. Gardland Science Taylor & Francis Group London and New York. 2012, ISBN: 978-0-8153-4243-4. Maldonado AM; Gutierrez P, Cariddi LN: Temas De Inmunología. Editorial Fundación de la UNRC. Con CD. 2009. ISBN 978-950-665-435-1. CDD 616.079. Abbas Abul K. and Andrew H. Lichtman Cellular and Molecular Immunology, Updated Edition, 5th edition Boston, MA ISBN 1416023895 • Paperback • 562 Pages Saunders • Published March 2005. De Consulta: Roit I, Brostoff J, Male D: Regulation of the immune response . En Roit I, Brostoff J, Male D: Inmunología Imprenta Juvenil SA. Edición Española Barcelona ISBN 0-906923-35-2 , 2001 y ediciones posteriores. Fainboim L, Geffner J:Introducción a la Inmunología Humana 5da ed, Edit Médica Panamericana, Buenos Aires, ISBN 950-06-0797-2, 2005 Tizard IR: Inmunología Veterinaria. Ed Interamericana Ultima Ed 2001, y ediciones posteriores. Margni RA: Inmunología e Inmunoquímica. Fundamentos. 5ºEd. Buenos Aires Edit Med Panamericana ISBN 950-06-1459-6, 1996. 9