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 PROYECTO DVB ( Diarrea Viral Bovina). Aspectos Generales de la Diarrea Viral Bovina. Definición. La DVB es una infección viral que se caracteriza por producir hemorragias y erosiones en la mucosa oral, gástrica e intestinal, además de diarrea. Tiene alta morbilidad y baja mortalidad. Etiología. Es una enfermedad producida por un Pestivirus de la familia Togaviridae que tiene antigenicidad cruzada con el cólera porcino. La única especie que se afecta son los bovinos, aunque se han observado signos similares en venados y búfalos. La incidencia es mayor en bovinos jóvenes entre los ocho meses y dos años de edad y vacas a término de gestación. La enfermedad se presenta mas en los meses de invierno en animales estabulados y en pastoreo. Transmisión. Se transmite por ingestión de material procedente de animales enfermos mediante el contacto directo a través de animales, o el indirecto a través de fómites o alimentos contaminados con heces ,orina o fetos abortados de animales enfermos. El periodo de incubación es de 1 a 3 semanas, siendo variable el tiempo de presentación de los signos. Signos Clínicos La DVB tiende a presentarse de forma subclínica , y cuando se presenta los signos clínicos, estos incluyen: fiebre, depresión, salivación, anorexia, descarga nasal seromucosa, tos, polipnea y diarrea profusa de olor fétido que puede ser muco sanguinolenta. En casos agudos la muerte se presenta en 48 h. El curso de la enfermedad puede durar entre 3 a 7 semanas y hasta varios meses, produciendo abortos y claudicaciones que presentan enrojecimiento de la piel y la pezuña. Diagnóstico. El diagnóstico mediante signos clínicos y lesiones a la necropsia no es concluyente , por lo que se recomienda aislar el virus de secreciones nasales, heces u orina. En el caso de los persistentemente infectados se requiere de toma de muestras de suero para seroneutralización y de tejido ( oreja) para aislamiento viral. Tratamiento No existe un tratamiento específico, solo se recomienda terapia de sostén mediante la administración de electrolitos parenterales y soluciones astringentes vía oral. Prevención y control. La vacunación se debe realizar en terneros entre 6 y 10 meses de edad y a las vacas no gestantes, ya que puede provocar efectos teratogénicos. Los animales positivos deben de aislarse y se deben llevar a cabo medidas de bioseguridad como: desinfectar corrales así como las áreas por donde transitan los animales y restringir el acceso a personal para eliminar los vectores. Otras medidas recomendadas son la lotificación de animales por edades, vacunar a las hembras en periodo abierto y a las vaquillas primerizas. Las vacunas que existen son vivas e inactivadas, a la fecha no se puede establecer que vacuna es la más recomendada, ya que depende de cada situación. Para el proyecto de detección de DVB en los CEIE se creó el siguiente comité, conformado por diversos representantes de los departamentos de la FMVZ involucrados para el adecuado diagnóstico de la enfermedad. El Comité para DVB quedó conformado de la siguiente manera: Dra. María Elena Trujillo Directora de la FMVZ Dr. Iván Sánchez Betancourt. Jefe del Departamento de Cerdos. Dr. Jorge Ávila Departamento de Rumiantes Dra. Rosa Elena Sarmiento Departamento de Microbiología. Dra. Rosa Elena Miranda Jefa del Departamento de Microbiología. Dr. Sergio Angeles Campos Jefe de la Secretaría de Medicina, Zootecnia y Extensionismo. Dra. Gabriela López Navarro Jefa del Departamento de Medicina. Dr. Javier Gutierrez Molotla Jefe del CEPIPSA. Dr. Héctor Basurto Jefe CEIEGT Dr. Angel Pulido Jefe CEIEPAA Dra. Myrna Vicencio Coordinadora del Laboratorios Microbiología CEIEPAA Objetivo. Identificar a los animales tolerantes o permanentemente infectados con el virus de Diarrea Viral Bovina en los CEIE de la FMVZ para tener un diagnóstico situacional de las enfermedades persistentes y poder determinar medidas de tratamiento, prevención y control que además se encuentren accesibles en línea. Metodología: Se tomaron muestras de sangre y de tejido de la oreja, de hembras con problemas reproductivos ( infertilidad y aborto) en el caso de CEIEGT y CEIEPAA, y en el caso de CEPIPSA se tomaron muestras del hato completo. Las muestras de sangre fueron centrifugadas a 15 000 rpm y refrigeradas a 2ºC hasta su procesamiento. Las muestras tomadas de la oreja fueron colocadas en tubos de eppendorf y conservadas en nitrógeno líquido hasta su procesamiento. En el laboratorio del Departamento de Microbiología y del Departamento de Medicina y Zootecnia de Cerdos de la FMVZ, se realizó el montaje de las columnas para las extracciones del material genético (DNA y RNA) con el método MagMax Pathogen RNA/DNA kit. Se realizaron extracciones y se corrió el RT-­‐PCR Multiplex (IBR, DVB, PI3 y BRSV) de la siguiente forma: Carril 1Control Negativo Carril 2. Control positivo. VACUNA LA PISA. MÉTODO DE EXTRACCIÓN QIAMP. Minelute virus (Estas columnas extraen DNA y RNA) Carril 3. Control positivo. Virus de referencia. MÉTODO DE EXTRACCIÓN QIAMP. Minelute virus (Estas columnas extraen DNA y RNA). Carril 4. Cotrol positivo. VACUNA LA PISA. MÉTODO DE EXTRACCIÓN (RNA TRIZOL/DNA Columna DNAeasy). Carril 5. Control positivo. Virus de referencia. MÉTODO DE EXTRACCIÓN (RNA TRIZOL/DNA Columna DNAeasy). Carril 6. MUESTRA 306. EXTRACCIÓN CON QIAMP. Minelute virus, CON LOS SUEROS QUE TENEMOS DEL MUESTREO. Carril7. MUESTRA 2294. EXTRACCIÓN CON QIAMP. Minelute virus, CON LOS SUEROS QUE TENEMOS DEL MUESTREO. Método utilizado en el CEIEPAA: Se muestrearon 10 bovinos pertenecientes a este Centro (5 del hato lechero y 5 del hato de carne), y se sometieron a la prueba de SNAP-­‐BVD (IDEXX) para detectar la presencia de antígeno viral a partir de una muesca de oreja, resultando negativos los 10 animales. RESULTADOS DE ANIMALES INFECTADOS CON DVB: CEPIPSA • BOVINOS 25.58 % CEIEGT • BOVINOS: 4 % CEIEPAA • BOVINOS 0% El número de animales positivos a DVB se puede deber a que no se realizan pruebas para detectar a los animales que son tolerantes o permanentemente infectados antes de incluirlos al hato y por que no se vacuna contra DVB de forma periódica en los CEIE.