limnologia TP7

TRABAJO PRACTICO N° 7
1. FITOPLANCTON
La enumeración de las células individuales del fitoplancton no siempre es fácil
porque algunas formas se presentan reunidas en colonias o filamentos. En este caso es
necesario contar el número promedio de células por colonia o filamentos.
Básicamente se conocen dos métodos de concentración del fitoplancton sobre una
superficie:
1) por filtración (a baja presión menos de 0,5 atmósferas para no dañar las células)
2) por sedimentación (en cámaras de Utermohl).
Cámaras tubulares: con capacidad de 1, 5,10, 25,50 y 100ml.
El tiempo de sedimentación en horas resulta de multiplicar la altura de la cámara por tres.
El contaje debe hacerse en microcospio invertido. El microscopio se denomina invertido
porque los objetivos del mismo están dirigidos desde abajo hacia arriba (enfocando en
primer lugar el fondo de las cámaras).
Cámaras no tubulares:
-Kolkwitz
-Segwick- Rafter
Se pueden usar con microscopios normales, no permiten por su altura aumentos mayores
de 400x.
-Palmer Maloney es de menor altura pero tiene una capacidad muy pequeña para 0,1 ml.
Los oculares más usados son lo que tienen la retícula de Whipple y la de bandas paralelas
de ancho ajustable.
Abundancia
Se puede contar todas la células que se encuentran en la cámara o sólo las que encontramos
en dos bandas diametrales de preferencia en el centro.
Se recomienda contar por lo menos 400 individuos o células.
a) Método de Edmonson
N° total de ind. por gota: primero debe conocerse el volumen de la gota (1ml = 1mg)
Area de cubre objeto
x individuos contados
Area de una transecta
S: número de tiras contadas
b) Método de Lund et al. (1958) en microscopio invertido
Luego de contadas las algas de n cuadrados, se deberá calcular el número de células
por mililitro (cel/ml) de la siguiente manera:
Cel /ml =
( N ° a) ( So)
( N ° c) ( Sc)
/V
N ° a = número de algas contadas.
So =superficie de la cámara de Utermöl utilizada.
N ° c = número de cuadrados contados.
Sc =superficie del cuadrado.
V=volumen de la cámara.
c) Contador de células en cámara de Sedgwick-Rafter
Cámara de S-R tiene aproximadamente:
50 mm de longitud
20 mm de ancho
1 mm de profundidad
Area del fondo es de 1000 mm2
Volumen es 1000 mm3
En el práctico el recuentro se realizará en microscopio óptico optando por la fórmula
que se encuentra en el recuadro.
N ° de células por mL= Cx 1000mm3
AxDxF
Referencias
C: número de organismos contados
A: Area (cubre objeto) en mm2
D: profundidad en mm de la cámara de Sedgwick-Rafter
F: número de campos contados
Cuestionario
1. ¿Cómo puede definir el plancton? ¿Qué fracción comprende el
fitoplancton?
2. ¿Cómo tomó la muestra de fitoplancton y cómo la fijó?
3. ¿Hubo diferencias cuantitativas entre réplicas? Explique brevemente.
NOTA: Se necesitará calculadora ()
2. ZOOPLANCTON
Procedimiento de laboratorio:
Homogeneizar la muestra
Tomar una submuestra observando las siguientes recomendaciones:
organismos grandes: Submuestreador de Folsom.
organismos pequeños: Pipeta de Hensen o pipeta de 1ml con pera de goma.
Proceder al llenado de la cámara de recuento:
organismos grandes: Cámara de Bogorov.
organismos pequeños: Cámara de Sedgwick-Rafter
Recuento de organismos pequeños en microscopio común, y organismos grandes
en microscopio estereoscópico, empleando la fórmula:
Ind.l -1 = (Vcf )(Ni )
(Vti )Vc
Referencias
Ind. = individuos
l-1 = litro
Vcf = volumen de la concentración filtrado
Ni = número de individuos contados
Vti = volumen total inicial
Vc = volumen de la muestra contado
Cuestionario
1. Analice si la abundancia fue comparativamente similar entre los recuentos
de cada grupo. Trate de explicar por qué hubo o no diferencias.
2. ¿La abundancia fue mayor en Rotifera , Cladocera o Copepoda? Relacione
con el método de muestreo y con las características ambientales del cuerpo
de agua.
3. ¿Existe diferencia entre el nanoplancton y el plancton de red?
NOTA: Se necesitará calculadora ()