SISTEMA LIGHTCYCLER 2.0 El Sistema LightCycler es una inteligente innovación para la realización de reacciones de PCR en forma más eficiente. El Sistema LightCycler permite realizar una reacción de PCR rápida en menos de 30 minutos, y simultáneamente cuantificar y analizar los resultados mediante el monitoreo de la fluorescencia producido en el proceso de amplificación. Su exclusivo sistema Melting-Curve Analysis Option permite la rápida detección de mutaciones y caracterización de productos. Principio El Sistema LightCycler es un termociclador veloz que realiza amplificación y detección en forma simultánea de ácidos nucleicos, combinado con un micro-fluorímetro que utiliza un sistema óptico de alta calidad Rodenstock (una reconocida marca de sistemas ópticos). Los procesos de calentamiento y enfriamiento del aire son controlados alternando el calor y el aire del ambiente como medio de transferencia de temperatura, las rampas de calentamiento y enfriamiento son de 20 ºC en 1seg. Gracias a la baja masa del aire es posible obtener muy rápidas transiciones de temperatura dentro de la cámara térmica. Utiliza tubo capilares de boro silicato ó plástico, que permiten rápidamente en el interior del mismo. alcanzar las temperaturas La unidad óptica del Sistema LightCycler contiene seis canales de detección: 530nm, 560nm ((LC Red 640), 610 nm (LC Red 640), 640nm (LC Red 640), 670 nm (LC Red 705). y 710 nm (LC Red 705). La fuente de excitación está constituida por un LED (diodo emisor de luz), libre de recambio y mantenimiento que opera a 470nm +/- 10nm. El Sistema LightCycler trabaja con las siguientes químicas fluorescentes : FRET – Sondas de Hibridización, Sondas Simples, Taqman, SYBRGreen I, Molecular Beacon. Performance La performance del Sistema LightCycler debe permite aprovechar con elevada calidad todas las posibilidades que ofrece la reacción de PCR a tiempo real: Amplio rango dinámico: de 10 a 1010 copias en una corrida. Tamaño de producto amplificado de 100 a 800 pares de bases, en algunos casos con tamaños mayores a 1000 bp. Sensibilidad superior: detecta una copia simple de un gen en un equivalente genómico de DNA. Elevada reproducibilidad: con bajos CV Volumen de reacción óptima para cada aplicación: capilares de 20 ul y 100 ul de capacidad. Aplicaciones El Sistema LightCycler es más que un instrumento que realiza reacciones veloces de PCR, también permite realizar: Análisis Cualitativo Análisis Cuantitativo Absoluto de productos de PCR a tiempo real Análisis Cuantitativo Relativo de productos de PCR a tiempo real PCRs Multiplex Análisis de Curvas “Melting Point”, que permite detección de mutaciones, caracterización de producto. Genotipo por SNP Discriminación alélica de mutaciones complejas Detectar e identificar productos específicos de PCR Genotipificar y cuantificar al mismo tiempo utilizando Hybridization Probes. Ventajas del Sistema LightCycler Visualización del proceso de amplificación cuando éste se va produciendo: la medición de la fluorescencia on-line a tiempo real permite ver los resultados de cada ciclo de PCR. Disminución del tiempo de procesamiento de la reacción de PCR: 30-40 ciclos de reacción de la PCR se realizan en 30-35 minutos, como resultado se obtienen PCR ultrarrápidas, en función de esta ventaja el instrumento puede ser compartido por varios sectores ó laboratorios simultáneamente, obteniendo mayor productividad por día. Verificación de la especificidad de los amplicones y detección de mutaciones. Alta Reproducibilidad, Sensibilidad y Especificidad. Disminución de la contaminación: los procesos de amplificación y detección se realizan simultáneamente y en el mismo tubo capilar con tapa de cierre individual para cada muestra. No necesita calibraciones ni validaciones en ningún momento de la operación. Tamaño de producto de amplificación hasta 1000bp, en el mercado los sistemas ofrecen amplificar amplicones de 100 – 200 pares de bases. Trabaja con todas las químicas fluorescentes presentes en el mercado: FRET – Sondas de Hibridización, Sondas Simples, Taqman, SYBRGreen I, Molecular Beacon. Productos Roche cuenta con provisión de reactivos especialmente desarrollados para el Sistema LightCycler genéricos (SYBRGreen/Hibridization Probes) y específicos para una amplia gama de targets. Servicio Técnico y Mantenimiento Productos Roche S.A.Q. e I. garantiza: Provisión gratuita de una (1) UPS, para estabilizar la tensión y suministrar por tiempo limitado energía en caso de corte de suministro eléctrico. Puesta en marcha, supervisión, ejecución y la provisión de materiales necesarios para la instalación del equipo. Capacitación necesaria para el correcto funcionamiento y operación del equipo, en el lugar de instalación designado. Entrega de manual de operación y mantenimiento del equipo. Servicio de Atención Profesional (Call Center (0-810-810-5650) y Servicio Técnico propio y especializado entrenados en casa matriz. Disponibilidad de un instrumento LightCycler de back-up (en las instalaciones de Productos Roche), para ser utilizado en caso que la reparación del instrumento de la institución/usuario requiera del retiro de su propio instrumento. Garantía por fallas de fabricación 12 meses a partir de la fecha de instalación. Listados de Usuarios Productos Roche cuenta con más de 4000 Sistemas LightCycler instalados en el mundo en Argentina nuestros usuarios son: Mercado de investigación médica básica y clínica: Academia Nacional de Medicina Dra. María Lazzari Centro de Estudios Infectológicos Dr. Stamboulian Dr. Edgardo Sturba Instituto de Medicina Experimental del Hospital Italiano (Fundación para el Desarrollo de Cienicas Básicas) Dr. Pablo Argibay INTA – Laboratorio de Virología Dr. Norberto Fondevila Mercado de Alimentos: Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA) Laboratorio de OGM (organismos genéticamente modificados) Instituto Nacional de Vitivinicultura Dra. María Ester Barbeito SENASA – Laboratorio Dirección de Laboratorio y control Técnico Dra. Susana Binotti Empresa Bunge Portfolio Roche Applied Science Productos Roche cuenta con la siguiente plataforma de instrumentos para el Laboratorio de Biología Molecular: Equipos de extracción de ácidos Nucleicos MagNa Pure LC Instrument, permite realizar la extracción de ácidos nucleicos en forma automática de 32 muestras por corrida. La extracción se puede realizar en capilares, tubos ó placas. MagNa Pure Compact, equipo automatizado, compacto, tiene capacidad de trabajo de 8 muestras por corrida. Equipos RT – PCR LightCycler 480, es un instrumento que trabaja con la técnica de PCR en tiempo real, desarrollado para altos volumen de trabajo. El volumen de trabajo puede ser de 96 a 384 muestras por corridas. Los tiempos de resolución varian entre 40 minutos a 60 minutos. Trabaja con cinco filtros de emisión(450nm, 483nm, 523nm, 558nm, 615nm) y 6 filtros de detección(500nm, 533nm, 568nm, 610nm, 640nm, 670nm), que permiten trabajar con todas las químicas fluorescentes presentes en el mercado FRET – Sondas de Hibridización, Sondas Simples, Taqman, SYBRGreen I, Molecular Beacon. Se pueden realizar análisis cuantitativo, análisis de curva meeting, análisis cualitativo, análisis de SNP. Rápido, especifico, sensible.