Laboratorio III - Sistema de Información de la UNRC
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2011-Año Internacional de la Química Universidad Nacional de Río Cuarto Facultad de Ciencias Exactas, Físico-Químicas y Naturales FORMULARIO PARA LA PRESENTACIÓN DE LOS PROGRAMAS DE ASIGNATURAS UNIVERSIDAD NACIONAL DE RÍO CUARTO FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS, FÍSICO-QUÍMICAS Y NATURALES DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA E INMUNOLOGÍA CARRERA/S: TECNICO DE LABORATORIO PLAN DE ESTUDIOS: 1993 versión 1 (Consignar Orientación si existiere) ASIGNATURA: LABORATORIO III CÓDIGO: 2154 DOCENTE RESPONSABLE: DRA. LILIANA PASCUAL EQUIPO DOCENTE: DRA. LILIANA PASCUAL- JTP EXCLUSIVO DRA. ADRIANA TORRES -PAS SEMIEX DRA. SILVIA ZANON-PAD EXCLUSIVO DRA. ELIZABETH WITOUSKI-PAD EXCLUSIVO DRA. NOEMÍ RODRIGUEZ-JTP EXCLUSIVO AÑO ACADÉMICO: Ciclo Superior VI cuatrimestre (Nombre y Apellido, Grado Académico) REGIMEN DE LA ASIGNATURA: CUATRIMESTRAL RÉGIMEN DE CORRELATIVIDADES: (para cursado) Aprobada Laboratorio I CARGA HORARIA TOTAL: 98 horas TEÓRICO-PRÁCTICAS: 98 horas CARÁCTER DE LA ASIGNATURA: OBLIGATORIA Regular Laboratorio II Microbiología gral CONTEXTUALIZACIÓN DE LA ASIGNATURA Segundo Cuatrimestre- Ciclo Superior VI cuatrimestre A. OBJETIVOS PROPUESTOS OBJETIVO GENERAL Brindar las herramientas metodológicas básicas para el desempeño en el laboratorio de Microbiología clínica y alimentaria. OBJETIVOS PARCIALES a) Brindar las bases teóricas de los métodos y técnicas utilizadas en el laboratorio microbiológico. b) Estimular la destreza manual y la comprensión de los procedimientos metodológicos empleados. (Competencias a lograr por los alumnos y/o actividades para las que capacita la formación impartida) B. CONTENIDOS BÁSICOS DEL PROGRAMA A DESARROLLAR Modulo Inmunología Materiales y reactivos empleados en el inmunodiagnóstico. Métodos y técnicas empleados en el inmunodiagnóstico. Métodos y técnicas para la valoración de la inmunidad mediada por celulas (IMC). Modulo Bacteriología Medios de cultivo, soluciones y reactivos empleados en el diagnostico bacteriológico. Métodos y técnicas empleados en el diagnostico bacteriológico. Métodos para la conservación de cepas bacterianas. Modulo Micología Métodos y técnicas empleados en el diagnostico micológico. Detección de metabolitos secundarios de cepas fúngicas. Métodos para la conservación de cepas fúngicas Modulo Virología Métodos y técnicas empleados en ensayos virológicos. Cultivos celulares. Detección viral. (Consignar los ejes temáticos estructurantes de la asignatura y sus contenidos básicos) C. FUNDAMENTACIÓN DE LOS CONTENIDOS La asignatura Laboratorio III comprende clases teórico-prácticas, en las que fundamentalmente se pretende transmitir los conocimientos de manera integrada de forma interactiva con los alumnos, como así también aplicar los conocimientos adquiridos en asignaturas anteriores y en la presente para lograr el mejor desempeño del profesional en el laboratorio. El objetivo de esta asignatura consiste en explicar los conceptos básicos necesarios para realizar la selección, recolección, transporte y procesamiento de muestras clínicas y de alimentos para el análisis microbiológico. Además se complementa con el empleo de métodos de siembra, esterilización, de diagnóstico rápido y de serodiagnóstico que se utilizan actualmente en laboratorios o centros de referencia. Se pretende brindarles las herramientas necesarias para poder desempeñarse de manera satisfactoria en laboratorios de análisis bacteriológico, micológico, virológico empleando técnicas microbiológicas e inmunológicas. (Breve descripción del campo temático y metodológico específico de la asignatura. Consignando competencias que se favorecen con relación al perfil del egresado, su práctica profesional y el alcance del título. Indicar los requisitos previos que se esperan traigan los alumnos aprendidos de las asignaturas correlativas. Incluir criterios de selección de contenidos, actividades y formas de evaluación) D. ACTIVIDADES A DESARROLLAR La asignatura se desarrolla mediante Clases Teórico-prácticas (discusiones teóricas y prácticas de laboratorio).Durante las mismas se trabaja con un criterio práctico e integrado los conceptos básicos necesarios para la realización de las diferentes pruebas diagnósticas partiendo de situaciones relacionadas a su práctica profesional. Se desarrollarán con la participación activa del alumno mediante la discusión de los temas previamente estudiados. Los alumnos distribuidos en grupos, realizarán las actividades previstas para el logro de los objetivos de las Clases Teórico-Prácticas. (Consignar las formas metodológicas) CLASES TEÓRICO- PRÁCTICAS: (modalidad y carga horaria) Los alumnos deberán cumplimentar con el 80% de asistencia y aprobación de los Teórico-Prácticos, considerando la carga horaria total de 96 horas. E. NÓMINA DE TRABAJOS PRÁCTICOS Laboratorio I: Inmunodiagnóstico. Pruebas de interacción secundaria en muestras clínicas humanas y animales y en el análisis de muestras de alimentos Laboratorio II: Inmunodiagnóstico. Pruebas de interacción primaria humanas y animales y en el análisis de muestras de alimentos. en muestras clínicas Laboratorio III: Métodos y técnicas para la valoración de la inmunidad mediada por células (IMC). Técnicas empleadas en cultivos celulares: linfocitos. Laboratorio IV: Materiales y métodos empleados en el aislamiento e identificación de bacterias en muestras de alimentos. Laboratorio V: Materiales y métodos empleados en el aislamiento e identificación de bacterias en muestras de origen clínico. Laboratorio VI: Métodos de conservación de cepas bacterianas. Laboratorio VII: Materiales y métodos empleados en el aislamiento e identificación de hongos en muestras de alimentos y de origen clínico. Laboratorio VIII: Detección de metabolitos secundarios. Laboratorio IX: Métodos de conservación de cepas fúngicas. Laboratorio X: Materiales y técnicas empleados en ensayos virológicos. Laboratorio XI: Cultivos celulares. Laboratorio XII. Detección viral. F. HORARIOS DE CLASES: Módulo de Bacteriología y Micología: Martes: 14 a 18 horas. Jueves: 10 a 14 horas. Módulo de Inmunología y Virología: Martes y Jueves de 08 a 12 horas. HORARIO DE CLASES DE CONSULTAS: 1 clase de consulta semanal. G. MODALIDAD DE EVALUACIÓN: Evaluaciones Parciales: En número de 2 (dos). Abarcarán conceptos teóricos y prácticos y consistirán en pruebas objetivas desarrolladas en forma individual y escrita por los alumnos. (Características y/o modalidad) Evaluación Final: Los alumnos que estén en condición regular podrán rendir el examen final, en el que deberán aprobar cada uno de los módulos que componen la asignatura. El promedio de éstas corresponderá a la nota del examen final. Los alumnos que presenten la condición de libre no podrán rendir el examen final de la asignatura. Este punto se fundamenta en el hecho de que la materia es de carácter netamente práctico, en donde también se plantean situaciones problemáticas con discusiones tendientes a resolverlas, en relación a la rutina profesional. Además es importante tener en cuenta que uno de los objetivos principales es el de reafirmar los conocimientos metodológicos, enseñar nuevas técnicas y métodos como así también incentivar la habilidad práctica durante el desarrollo de las clases correspondientes a cada uno de los módulos de la asignatura. En consecuencia, en el caso de los alumnos libres, los docentes no tendrían la posibilidad de evaluar lo anteriormente descripto. (Características y/o modalidad) (Consignar si la asignatura no puede rendirse en condición de libre) CONDICIONES DE REGULARIDAD: Los alumnos deberán cumplimentar con el 80% de asistencia y aprobación de los TeóricoPrácticos y aprobar los dos parciales con una calificación mínima de cinco puntos establecida por el régimen vigente de enseñanza de grado. Tendrán opción a recuperar los dos parciales para mantener la condición de regular. CONDICIONES DE PROMOCIÓN: No hay promoción en esta asignatura. PROGRAMA ANALÍTICO A. CONTENIDOS MODULO INMUNOLOGIA UNIDAD I: MATERIALES Y REACTIVOS EMPLEADOS EN EL INMUNODIAGNÓSTICO Medidas de bioseguridad en el laboratorio de Inmunología. Conceptos generales del inmunodiagnóstico. Conceptos de antígeno e inmunógeno. Clasificación de las reacciones Ag-Ac in vitro. Concepto de sensibilidad y especificidad. Serodiagnóstico. Consideraciones sobre las pruebas de inmunidad humoral. Principales interferencias en las muestras. Antígenos: Procesamiento de los antígenos para su empleo como reactivo en el serodiagnóstico. Procesamiento, toma y conservación de las muestras. Problemas técnicos en el procesamiento de las muestras. Materiales y reactivos empleados en el inmunodiagnóstico. UNIDAD II: METODOS Y TECNICAS EMPLEADOS EN EL INMUNODIAGNÓSTICO Métodos para diagnosticar una enfermedad infecciosa. Indicadores empleados en el Inmunodiagnóstico. Interpretación de las pruebas serológicas. Modos de expresar los resultados de una prueba. Métodos para demostrar la presencia de anticuerpos o antígenos. Fallas en la detección de anticuerpos. Técnicas de marcación isotópica y enzimática. Técnica de marcación mediante el empleo de anticuerpos conjugados con fluoresceína. Tratamiento y eliminación de los materiales infectados (muestras biológicas, material descartable, objetos punzantes). UNIDAD III: METODOS Y TECNICAS PARA LA VALORACION DE LA INMUNIDAD MEDIADA POR CELULAS (IMC). Obtención de células mononucleares a partir de diferentes materiales biológicos: sangre venosa periférica, médula ósea, ganglio, bazo. Pruebas para determinar la viabilidad celular. Identificación de poblaciones y subpoblaciones linfocitarias. Cuantificación de linfocitos T y linfocitos B. Detección de antígenos de membrana con anticuerpos mononucleares. Técnicas de inmunofluorescencia directa e indirecta. Cultivos celulares de linfocitos. Lavado y decontaminación del material de vidrio. Esterilización del material para cultivos linfocitarios. Acondicionamiento del flujo laminar. Características y formulaciones de los medios de cultivo para células de mamíferos. Esterilización de medios de cultivo para el cultivo de células. Características de los diferentes equipos de filtración. MODULO BACTERIOLOGIA UNIDAD IV: MEDIOS DE CULTIVO, SOLUCIONES Y REACTIVOS EMPLEADOS EN EL DIAGNOSTICO BACTERIOLÓGICO. Formulación y preparación de colorantes y reactivos para la observación microscópica de bacterias. Formulación, preparación, esterilización y conservación de diferentes medios de cultivo (moderadamente y marcadamente selectivos y diferenciales) y soluciones para el aislamiento e identificación de bacterias en muestras clínicas y de alimentos. UNIDAD V: METODOS Y TECNICAS EMPLEADOS EN EL DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO. Medidas de bioseguridad en el laboratorio de Bacteriología Médica. Tratamiento y eliminación de los materiales infectados. Recepción e identificación de las muestras. Selección, recolección, transporte y procesamiento de muestras clínicas y de alimentos para su análisis bacteriológico. Métodos ópticos para el diagnóstico. Métodos y técnicas microbiológicas convencionales y rápidas empleados en el aislamiento e identificación de bacterias en muestras clínicas y de alimentos. Métodos de enriquecimiento selectivos y no selectivos. Métodos de recuento. Métodos de estudio para determinar la sensibilidad a antimicrobianos de las cepas bacterianas. UNIDAD VI. METODOS PARA LA CONSERVACION DE CEPAS BACTERIANAS Principales métodos de conservación de cepas bacterianas. Métodos de mantenimiento por subcultivo, desecación, congelación, en nitrógeno líquido y liofilización. Criterios considerados para la elección de un método adecuado. Colecciones internacionales. MODULO MICOLOGIA UNIDAD VII. METODOS Y TECNICAS EMPLEADOS EN EL DIAGNOSTICO MICOLOGICO. Medidas de bioseguridad en el laboratorio de Micología Médica. Tratamiento y eliminación de los materiales infectados. Organización del laboratorio y control de calidad. Recepción e identificación de las muestras. Selección, recolección, transporte y procesamiento de muestras clínicas y de alimentos para su análisis micológico. Características generales de los hongos patógenos y contaminantes de alimentos. Métodos ópticos para el diagnóstico. Métodos y técnicas microbiológicos convencionales y rápidos empleados en el aislamiento e identificación de hongos en muestras clínicas y de alimentos. Métodos de recuento. Reglamentaciones vigentes. Marcha diagnóstica para distintos tipos de alimentos. Métodos de estudio para determinar la sensibilidad a antimicrobianos de las cepas fúngicas. Informes de laboratorio. UNIDAD VIII. DETECCIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS DE CEPAS FUNGICAS. Precursores y vías del metabolismo secundario. Producción de penicilinas y micotoxinas. Pruebas de detección de metabolitos secundarios. Métodos de cuantificación .Técnicas biológicas y químicas. UNIDAD IX. METODOS PARA LA CONSERVACION DE CEPAS FUNGICAS Principales métodos de conservación de cepas fúngicas. Métodos de mantenimiento por subcultivo, desecación, congelación, en nitrógeno líquido y liofilización. Criterios considerados para la elección de un método adecuado. Colecciones internacionales. MODULO VIROLOGIA UNIDAD X. METODOS Y TECNICAS EMPLEADOS EN ENSAYOS VIROLÓGICOS Preparación de materiales para uso virológico. Desinfección de materiales contaminados.Criterios a considerar en la preparación de soluciones y reactivos. Métodos de esterilización, mecanismos de acción. Control de calidad de la esterilización. UNIDAD XI. CULTIVOS CELULARES. Tipos de cultivos celulares empleados en el diagnóstico virológico. Mantenimiento de los cultivos celulares. Requerimientos esenciales para la propagación celular. Técnicas de dispersión celular. Recuento de células viables. Metodología para congelación de células. UNIDAD XII. DETECCIÓN VIRAL. Metodologías empleadas en el diagnóstico virológico para detección de crecimiento viral en cultivos celulares. Infección viral de una monocapa celular. Conservación de cepas virales. Técnicas empleadas en microscopía electrónica. PROGRAMA PRÁCTICO Laboratorio I: Inmunodiagnóstico. Pruebas de interacción secundaria en muestras clínicas humanas y animales y en el análisis de muestras de alimentos Procesamiento, toma y conservación de muestras. Métodos para diagnosticar una enfermedad infecciosa. Reacción Ag-Ac de interacción secundaria. Precipitación y aglutinación. Demostración de la presencia de anticuerpos y/o antígenos. Interpretación de las pruebas serológicas. Laboratorio II: Inmunodiagnóstico. Pruebas de interacción primaria en muestras clínicas humanas y animales y en el análisis de muestras de alimentos. Métodos para identificar la presencia de antígeno y/o anticuerpo por reacciones de interacción primaria. Inmunofluorescencia directa e indirecta. Enzimoinmunoanálisis, quimioluminiscencia. Materiales y reactivos empleados. Interpretación de las pruebas . Laboratorio III: Métodos y técnicas para la valoración de la inmunidad mediada por células (IMC). Técnicas empleadas en cultivos celulares: linfocitos. Identificación de poblaciones y subpoblaciones linfocitarias. Cuantificación de poblaciones y subpoblaciones linfocitarias T y B. Cultivos celulares de linfocitos. Lavado y decontaminación del material de vidrio. Esterilización del material y de medios de cultivos para cultivos linfocitarios. Laboratorio IV: Materiales y métodos empleados en el aislamiento e identificación de bacterias en muestras de alimentos. Procesamiento de muestras de alimentos. Preparación de medios de cultivo, soluciones y reactivos. Métodos y técnicas empleados en la observación microscópica, aislamiento e identificación de bacterias en alimentos. Técnicas de recuento. Laboratorio V: Materiales y métodos empleados en el aislamiento e identificación de bacterias en muestras de origen clínico. Procesamiento de muestras clínicas. Preparación de medios de cultivo, soluciones y reactivos. Métodos y técnicas empleados en la observación microscópica, aislamiento e identificación de bacterias en muestras clínicas de orina. Métodos de estudio para determinar la sensibilidad a antimicrobianos de las cepas bacterianas. Prueba de sensibilidad por difusión en agar. Laboratorio VI: Métodos de conservación de cepas bacterianas. Métodos de mantenimiento por subcultivo, congelación y liofilización. Laboratorio VII: Materiales y métodos empleados en el aislamiento e identificación de hongos en muestras de alimentos y de origen clínico. Procesamiento de muestras de alimentos. Preparación de medios de cultivo, soluciones y reactivos. Métodos y técnicas empleados en la observación microscópica, aislamiento e identificación de hongos en alimentos y muestras clínicas. Técnicas de recuento. Laboratorio VIII: Detección de metabolitos secundarios. Pruebas para la determinación de aflatoxinas. Laboratorio IX: Métodos de conservación de cepas fúngicas. Métodos de mantenimiento por subcultivo, congelación y liofilización. Laboratorio X: Materiales y técnicas empleados en ensayos virológicos. Procedimientos generales de lavado, preparación y esterilización de materiales para uso virológico. Material nuevo de vidrio o de goma: procesamiento, lavado, preparación y esterilización. Desinfección de material contaminado. Preparación y esterilización de soluciones y reactivos para uso virológico: criterios a considerar.. Laboratorio XI: Cultivos celulares. Dispersión celular. Recuento de células viables. Obtención y mantenimiento de monocapas celulares. Observación de monocapas celulares al microscopio óptico invertido. Elaboración de informe. Laboratorio XII. Detección viral. Infección viral de una monocapa celular.Visualización del efecto citopático y de la formación de placas de lisis. Cosecha y preparación de la muestra viral para la observación por microscopía electrónica. Elaboración de informe. B. CRONOGRAMA DE CLASES Y PARCIALES Teórico- práctico 1 SEMANA 1 Módulo Bacteriología Teórico- práctico 2 SEMANA 2 Módulo Bacteriología Teórico- práctico 3 SEMANA 3 Módulo Bacteriología Teórico- práctico 4 SEMANA 4 Módulo Micología Teórico- práctico 5 SEMANA 5 Módulo Micología Teórico- práctico 6 SEMANA 6 Módulo Micología Teórico- práctico 7 SEMANA 7 Módulo Inmunología Teórico- práctico 8 SEMANA 8 Módulo Inmunología Teórico- práctico 9 SEMANA 9 Módulo Inmunología Teórico- práctico 10 SEMANA 10 Módulo Virología Teórico- práctico 11 SEMANA 11 Módulo Virología Teórico- práctico 12 SEMANA 12 Módulo Virología Clase de consulta- Primer Parcial Primer Parcial Recuperatorio de primer parcial Clase de consulta - Segundo Parcial Segundo parcial Recuperatorio de segundo parcial Clase de consulta de Examen final: 1-2 días antes de la fecha asignada para cada turno de examen final ordinario y turnos especiales. (Recordar las fechas de parciales deberán ser consensuadas con los responsables de las demás asignaturas del cuatrimestre correspondiente, en acuerdo con la Res. C.S. 356/10) C. BIBLIOGRAFÍA (Consignar bibliografía obligatoria y de consulta) 1. Allaert Vandevenne Corrie.. 2002. Métodos de análisis microbiológicos de los alimentos. Editorial Diaz de Santos. 2. Bayley/Scott, 2007. Diagnóstico Microbiológico. Editorial Panamericana. 11º Edición. 3. Bernice M. Martín, 1994. Tissue Culture Techniques: an introduction. Birkhäuser. Boston. Basel. Berlin. 4. Brock. 2008. Biología de los Microorganismos .10 ed. Editorial Pearson. Prentice Hall. 5. Collins, C.H. y Lyne, P.M., 1989. Métodos Microbiológicos. Editorial Acribia. Zaragoza. España.. 6. Coto, C., González Cappa, S., Dellepiane, N., González, J., Lucero, N., Valdez, I., 1992. Manual de Bioseguridad para Técnicos de Laboratorio. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana, supl. N 2. Edic. Fed. Bioq. De la Provincia de Buenos Aires y Asoc. Arg. de Microbiología. 7. Floccari, M.E., 1998. Métodos de conservación de cultivos bacterianos. Revista Argentina de Microbiología. 30:42-51. 8. Harrigan, W.F. y Mc Cance E., 1968. Métodos de Laboratorio en Microbiología. Editorial Academia. 9. Koneman - Diagnóstico Microbiológico 6ª edición. Winn(h.)-Allen-JanfaKoneman-Procop-Schrenckenberger-Woods, (aut.). Médica Panamericana (2008) 10. Mahy, Brian W.J. and Kangro Hillaw O., 1996. Virology Methods Mannual.. Academic Press Harcourt Brace Company, Publishers. 11. Manual de Bioseguridad en el laboratorio. Tercera edición. Organización Mundial de la Salud. 2005. 12. Margni, R.A., 1996. Inmunología e Inmunoquímica. Editorial Médica Panamericana. 5º edición. Bs.As.. 13. Pitt, J.I. and Hocking, A.D., 1985. Fungi and Food Spoilage. Schweigert B.S. an Steward 6 F (eds) Academic Press, Sidney. 14. Ripon, J.W., 1988. Micología Médica. Hongos y Actinomicetos patógenos. Editorial Interamericana. 15. Sobol, R., Ruscica, M., Fourcade L., 1995. Manual de Procedimientos para análisis microbiológico de alimentos. Cuadernos UADE. Univ. Nac. de la Empresa. 16. Tizard, I., 1995. Inmunología Veterinaria. Editorial Interamericana, 4º ed.