A PARTIR DE UNA DISOLUCIÓN DE AZUL DE METILENO AL 1% PESO−VOLUMEN REALIZAR UNA DILUCIÓN EN LA QUE EL FACTOR DE DILUCIÓN (FD) DEL 1er. TUBO SEA 1 / 4 Y ENTRE TUBO Y TUBO 1 / 3. • ¿Cuántos ml de diluyente y dilución hay en cada tubo? • ¿Cuál es el factor de dilución del 4º tubo? • ¿Cuántos mg/ml hay en el 4º tubo? MATERIAL DE LABORATORIO • Tubos de ensayo (4) de 10 x 100 mm. • Tubo de ensayo (1) de 18 x 180 mm. • Gradilla. (1) • Pipeta de 2 ml. (1) • Propipeta de goma o de émbolo. (1) • Vasos de precipitado (2). • Papel filtro y parafilm. • Reactivo: Azul de Metileno al 1%. • Diluyente: Agua destilada. ESQUEMA Y CÁLCULOS DEL PROBLEMA 1 / 4 1 / 12 1 / 36 1 / 108 1234 a) Agua 2'25 ml 2 ml 2 ml 2 ml Azul met. 0'75ml 1 ml 1 ml 1 ml VOLUMEN DEL 1er TUBO = 3 ml 3 ml x 1 / 4 = 0'75 ml de azul de metileno. 3 ml x 3 / 4 = 2'25 ml de agua destilada. b) FD del 4º tubo 1 / 4 x 1 / 3 = 1 /12 1 / 12 x 1 / 3 = 1 / 36 1 / 36 x 1 / 3 = 1 / 108 • mg/ml en el 4º tubo: Concentración final (Cf) = Concentración inicial (Ci) x Factor de dilución (FD) Cf = 1 x 1/108; Cf = 9'259 x 10−3 % 1 9'259 x 10−3 / 100 ml x 103 mg / 1 g = 9'259 mg / 100 ml = 9'259 x 10−2 mg/ml PROCEDIMIENTO • Rotular el material a utilizar: Tubos de ensayo de 10x100 mm, hay que indicar: − Nombre del compuesto. • Nº de tubo. • Factor de dilución de cada tubo. • Concentración (si se conoce). Vasos de precipitado: − Nombre del compuesto. • Concentración. • Realizar los cálculos, teniendo en cuenta que el volumen final de cada tubo es el mismo, excepto en el último tubo. • Dispensar con la misma pipeta el volumen de diluyente en todos los tubos. • Tomamos la cantidad necesaria de disolución inicial con una pipeta, la introducimos en el 1er tubo y lo enjuagamos con diluyente aspirando y expulsando 2 o 3 veces. Esperamos a que se vacíe la punta con ésta apoyada en las paredes del tubo. • Tapamos con parafilm. • Homogeneizar suavemente. • Con la misma pipeta, tomamos la cantidad necesaria del primer tubo (1ml) y trasvasamos al 2º tubo, enjuagando, homogeneizando y repetiremos la operación del 2º al 3º tubo y del 3º al 4º tubo. • Limpieza de material. • Secado de material. • Guardado de material. PRECAUCIONES ESPECIALES Utilizar en todo momento el equipo de protección individual (guantes, bata, etc.) El azul de metileno se vierte desde el envase original a un vaso de precipitado para trabajar con él. Asimismo este compuesto aún siendo de un 1% su concentración, mancha con facilidad aquel sitio lugar o cosa sobre donde se derrame. 3 ml x 1 / 3 = 1 ml de dilución que hay que trasvasar de tubo a tubo. 2