Disolución seriada de azul metileno

A PARTIR DE UNA DISOLUCIÓN DE AZUL DE METILENO AL 1% PESO−VOLUMEN
REALIZAR UNA DILUCIÓN EN LA QUE EL FACTOR DE DILUCIÓN (FD) DEL 1er. TUBO SEA
1 / 4 Y ENTRE TUBO Y TUBO 1 / 3.
• ¿Cuántos ml de diluyente y dilución hay en cada tubo?
• ¿Cuál es el factor de dilución del 4º tubo?
• ¿Cuántos mg/ml hay en el 4º tubo?
MATERIAL DE LABORATORIO
• Tubos de ensayo (4) de 10 x 100 mm.
• Tubo de ensayo (1) de 18 x 180 mm.
• Gradilla. (1)
• Pipeta de 2 ml. (1)
• Propipeta de goma o de émbolo. (1)
• Vasos de precipitado (2).
• Papel filtro y parafilm.
• Reactivo: Azul de Metileno al 1%.
• Diluyente: Agua destilada.
ESQUEMA Y CÁLCULOS DEL PROBLEMA
1 / 4 1 / 12 1 / 36 1 / 108
1234
a)
Agua 2'25 ml 2 ml 2 ml 2 ml
Azul met. 0'75ml 1 ml 1 ml 1 ml
VOLUMEN DEL 1er TUBO = 3 ml
3 ml x 1 / 4 = 0'75 ml de azul de metileno.
3 ml x 3 / 4 = 2'25 ml de agua destilada.
b) FD del 4º tubo
1 / 4 x 1 / 3 = 1 /12 1 / 12 x 1 / 3 = 1 / 36
1 / 36 x 1 / 3 = 1 / 108
• mg/ml en el 4º tubo:
Concentración final (Cf) = Concentración inicial (Ci) x Factor de dilución (FD)
Cf = 1 x 1/108; Cf = 9'259 x 10−3 %
1
9'259 x 10−3 / 100 ml x 103 mg / 1 g = 9'259 mg / 100 ml = 9'259 x 10−2 mg/ml
PROCEDIMIENTO
• Rotular el material a utilizar:
Tubos de ensayo de 10x100 mm, hay que indicar: − Nombre del compuesto.
• Nº de tubo.
• Factor de dilución de cada tubo.
• Concentración (si se conoce).
Vasos de precipitado: − Nombre del compuesto.
• Concentración.
• Realizar los cálculos, teniendo en cuenta que el volumen final de cada tubo es el mismo, excepto en el
último tubo.
• Dispensar con la misma pipeta el volumen de diluyente en todos los tubos.
• Tomamos la cantidad necesaria de disolución inicial con una pipeta, la introducimos en el 1er tubo y lo
enjuagamos con diluyente aspirando y expulsando 2 o 3 veces. Esperamos a que se vacíe la punta con ésta
apoyada en las paredes del tubo.
• Tapamos con parafilm.
• Homogeneizar suavemente.
• Con la misma pipeta, tomamos la cantidad necesaria del primer tubo (1ml) y trasvasamos al 2º tubo,
enjuagando, homogeneizando y repetiremos la operación del 2º al 3º tubo y del 3º al 4º tubo.
• Limpieza de material.
• Secado de material.
• Guardado de material.
PRECAUCIONES ESPECIALES
Utilizar en todo momento el equipo de protección individual (guantes, bata, etc.)
El azul de metileno se vierte desde el envase original a un vaso de precipitado para trabajar con él. Asimismo
este compuesto aún siendo de un 1% su concentración, mancha con facilidad aquel sitio lugar o cosa sobre
donde se derrame.
3 ml x 1 / 3 = 1 ml de dilución que hay que trasvasar de tubo a tubo.
2