Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA DEPARTAMENTO DE NUTRICIÓN ANIMAL Y BIOQUIMICA MANUAL DE PRÁCTICAS PROFUNDIZACIÓN EN ALIMENTOS Y ALIMENTACION MVZ EPA MC YOLANDA CASTAÑEDA NIETO OBJETIVO Conocerá las características nutricias, usos y limitantes de los ingredientes y aplicara dicho conocimiento para la formulación y evaluación de sistemas de alimentación en diferentes especies domésticas. Habilidades Adquirir destreza en el uso e interpretación de cuadros de requerimiento nutricionales y de composición nutricia de las materias primas, para la evaluación e implementación de sistemas de alimentación en diferentes especies domésticas. 1 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación INDICE Pag. IDENTIFICACIÓN DE MATERIAS PRIMAS, FORMULACIÓN Y EVALUACIÓN DE DIETAS MUESTREO DE SACOS. TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS AL LABORATORIO. EVALUACIÓN DEL TIEMPO DE MEZCLADO ANALISIS QUIMICO PROXIMAL DETERMINACIÓN DE HUMEDAD DETERMINACIÓN DE NITROGENO DETERMINACIÓN DE EXTRACTO ETEREO DETERMINACIÓN DE CENIZAS FIBRA CRUDA CALCULO DE LA FIBRA CRUDA EN (BH) REPORTE DE RESULTADOS ANÁLISIS QUÌMICO PROXIMAL CONVERSION DE DATOS A DIFERENTES PORCENTAJES DE MATERIA SECA CALCULO DE DIFERENTES EXPRESIONES DE ENERGÍA APARTIR DE LOS PRINCIPIOS INMEDIATOS DEL AQP. REFERENCIAS IDENTIFICACIÓN DE MATERIAS PRIMAS, FORMULACIÓN Y EVALUACIÓN DE DIETAS Introducción Se realizará un recorrido por las diferentes áreas de producción de la explotación visitada, y se impartirá una plática para conocer y describir las prácticas de alimentación del pollo de engorda y gallinas de postura, durante el periodo de crianza y fases de producción empleadas en la granja y utilizando los cuadros de recomendaciones del NRC conocerá los requerimientos nutricionales en cada etapa. 2 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación Objetivo Conocer las características nutricias y limitantes de los principales materias primas utilizadas en las diferentes especies domésticas. Estimación de los requerimientos nutricionales de los animales de acuerdo con su etapa productiva, nivel de producción o estado fisiológico. Actividades Identificar y clasificar según su calidad nutricia las principales materias primas utilizadas en la alimentación animal Interpretar y utilizar diferentes cuadros de requerimientos nutrimentales para los animales Elegir o proponer los ingredientes a emplear en la elaboración de una dieta balanceada, considerando su calidad nutritiva, limitantes, disponibilidad y costo. Usará software especifico para la formulación de raciones Indicar el orden de adición a la mezcladora de los ingredientes utilizados en la elaboración de la dieta balanceada Elaborar el alimento balanceado o una premezcla en una de las explotaciones visitadas Procedimiento Consulta los cuadros de necesidades nutricionales según la especie (la etapa productiva, nivel de producción, etc.), para la que se va a formular la ración e identifica los principales nutrientes a considerar en la formulación, realiza un cuadro indicando los requerimientos mínimos y máximos recomendados. Especie etapa productiva: REQUERIMIENTO Nutriente Unidades Mínimo 3 Máximo Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación Realiza un inventario de las materias primas disponibles en la explotación que podrían usarse en la formulación de la ración. Realiza una tabla que indique el nombre de los ingredientes, sus limitantes en la alimentación de esa especie en particular, porcentaje de inclusión mínimo o máximo (según la especie, el equipo utilizado para el mezclado de la dieta y su disponibilidad ) y su dosis o concentración en aquellos ingredientes que así lo requieran. Materia prima Clasificación NRC Limitantes % Inclusión mínimo 4 máximo Concentración Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación Utilizando esta información, formula una ración para dicha especie. Evalúa la ración formulada comparando los requerimientos nutricionales con el aporte de nutrientes de la dieta calculada. INGREDIENTE KG /BH MINIMO REAL MÁXIMO Realiza los ajustes necesarios Nutriente Unidades Requerimiento 5 Aporte de la Balance ración Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación En el Cuadro 2, anota el nombre y la duración de las diferentes etapas de alimentación para el pollo de engorda y gallinas de postura. En el Cuadro 3, anota las características nutritivas de las raciones para aves administrada en la explotación y compáralas con los cuadros de requerimientos para aves del NRC, y anota tus observaciones.MUESTREO DE SACOS. El muestreo de materias primas es el procedimiento mediante el cual se obtiene una parte representativa del lote, para verificar su calidad y decidir la aceptación o rechazo del producto en base a las especificaciones establecidas. Objetivo Comprenderá la importancia y aplicará sus conocimientos para obtener una muestra representativa del lote muestreado. Actividades Realizar el muestreo de materias primas y alimento terminado en por lo menos una de las explotaciones visitadas Realizar la toma y envió de muestras al laboratorio de las materias primas utilizadas en la explotación Calcular el número de muestras primas a tomar de un lote y determinar los sitios a muestrear considerando la materia prima y su presentación Emplear el método de cuarteo para obtener la cantidad de muestra contractual requerida para realizar los análisis de laboratorio Elaborar las etiquetas y realizar el envío de muestras al laboratorio Material Calador para sacos Bolsa de plástico de 1 kilogramo Marcador indeleble Etiquetas Tabla de números aleatorios 6 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación Calculadora PROCEDIMIENTO PARA EL MUESTREO DE SACOS 1. Una vez descargado el alimento balanceado en sacos 2. Cuenta y numera los sacos usando un marcador indeleble 3. Usando el siguiente cuadro, calcula el número de sacos a muestrear según el tamaño del lote. NÚMERO DE COSTALES A MUESTREAR SEGÚN EL TAMAÑO DEL LOTE Y CANTIDAD DE MUESTRA CONTRACTUAL. No. costales del No. de costales a Cantidad de muestra lote muestrear contractual 1 – 10 Todos 10 a 100 20% >100 2% 500 a 1000 gramos 4. Utiliza una tabla de números aleatorios o genera una serie de números aleatorios usando la calculadora, considera el número de sacos que se muestrearan, para determinar que sacos muestrear. 5. Separa los sacos a muestrear, colócalos en el piso y con ayuda de un compañero homogeniza su contenido. 6. Introduce en forma diagonal el calador para sacos y obtener las muestras primas de cada saco (mínimo un kg de muestra por saco). 7. Después de muestrear los sacos junta las muestras primarias para conformar la muestra bruta y obtén por medio del método de cuarteo la muestra que se enviará al laboratorio. TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS AL LABORATORIO. Material Etiquetas Marcador indeleble Procedimiento 7 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación 1. En un lugar limpio junta las muestras primarias obtenidas durante el muestreo para obtener la muestra bruta. 2. Homogeniza la muestra bruta 3. Divide la muestra bruta en cuadro partes iguales 4. Selecciona dos de los cuadrantes que se encuentren en forma diagonal y elimínalos. 5. Junta los 2 cuadrantes restantes, homogeniza la muestra y divídela nuevamente en cuatro partes iguales. 6. Selecciona los dos cuadrantes opuestos a los seleccionados en el paso 4 y procede a eliminarlos. 7. Junta nuevamente los cuadrantes restantes y repite el procedimiento hasta obtener la cantidad de muestra contractual requerida tomando en cuenta el número de análisis que se solicitaran al laboratorio. Forma de envío de muestras al laboratorio y cantidad minima requerida. Tipo de muestra Raciones y/o Concentrados Materias primas Líquidos con alta densidad (melazas, mieles, leches, etc. Forrajes frescos Forrajes ensilados Forrajes secos o henificados Envío Bolsas o botes de plástico limpios. Bolsas o botes de plástico limpios Botes de plástico o vidrio limpios mantenidos en refrigeración a 4 C, en hieleras o cajas de unicel con refrigerantes Bolsas de papel estraza, Bolsas de plástico limpias en refrigeración (4 C), en hieleras o cajas de unicel con refrigerantes Bolsas de papel estraza, Cantidad minima requerida 500g. 500 g 500 a 1000 mL 1000 g 1000 g 500g Nota: Toda las muestras deben ser remitidas al laboratorio con su respectiva identificación. 8 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación 8. Coloca la muestra contractual en una bolsa de plástico, elabora y etiqueta cada muestra.DETERMINACIÓN DE HUMEDAD EN GRANOS La determinación del porcetaje de humedad durante la recepcion o almacenamiento de la materias primas es un punto crítico en la elaboración de alimentos ya que porcentajes mayores de humedad a los establecidos, diluyen el contenido de nutrimentos y hacen más susceptibles a sufrir fenómenos de descomposición por enzimas tisulares, bacterianas y hongos. Materiales Medidor eléctrico de humedad Procedimientos Coloca dentro del medido eléctrico de humedad la materia prima a evaluar Enciende el medidor eléctrico de humedad, espera unos segundos y anota tu lectura. Compara tu resultado con los cuadros de calibración, para determinar la humedad de la muestra. EVALUACIÓN DEL TIEMPO DE MEZCLADO Introducción. Uno de los puntos críticos en la elaboración de alimento balanceado es lograr un mezclado homogeneo que garantice la misma cantidad de nutrientes en toda la mezcla. Objetivo Evaluar la homogeneidad del mezclado. Actividades Evaluará el tiempo óptimo de mezclado de un alimento balanceado, en términos de coeficiente de variación. Material 9 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación Marcador Bolsas de plástico Marcador indeleble Cronómetro Calador para sacos Tabla de números aleatorios Calculadora Procedimiento 1. Pesa 2 kilogramos del marcador 2. Agrega el marcador a la mezcladora junto con los otros ingredientes del alimento balanceado (considerando sus características físicas y su porcentaje de inclusión). 3. Después de incorporar el último ingrediente en la mezcladora, usa un cronómetro para tomar el tiempo de mezclado recomendado, según el tipo de mezcladora 4. Una vez transcurrido el tiempo de mezclado, descarga la mezcladora y encostala el alimento balanceado. 5. Con un marcador indeleble numera los costales y calcula el número de costales a muestrear según el tamaño del lote. NUMERO DE COSTALES A MUESTREAR SEGÚN TAMAÑO DE LOTE No. costales del lote No. de costales a muestrear 1 – 10 Todos 10 a 100 20% >100 2% 6. Selecciona al azar los costales a muestrear, usando una tabla de números aleatorios o generándolos mediante una calculadora.. 7. Separa los costales a muestrear, utilizando un calador para sacos obtén las 1 0 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación muestras primarias necesarias de cada costal, hasta obtener 1 kg de muestra bruta por cada uno. 8. Empaca e identifica debidamente las muestras en bolsas de polietileno, indicando el número de saco. 9. Extiende en una superficie limpia por separado la muestra bruta de cada saco muestreado y determina la cantidad de marcador en cada muestra y llena el cuadro siguiente: Cuadro ****. Datos para evaluar la homogeneidad del mezclado No. de saco Cantidad de marcador (Xi)2 Xi N= Xi = Promedio = (Xi)2 (Suma Xi al cuadrado)= Donde Xi = es la cantidad de marcador encontrado en cada una de las muestras primas. Xi2 = Xi elevadas al cuadrado n =Número de muestras primas tomadas 10. Utilizando los datos de la tabla calcula la varianza S2 = (Xi)2 – ( Xi ) 2 n . n-1 11. Calcula la desviación estándar usando la siguiente formula S = S2 1 1 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación 12. Calcula el porcentaje del coeficiente de variación (CV(%)) para los resultados, empleando la formula siguiente: CV (%) = (S/promedio) X 100 13. Interpreta tus resultados usando el siguiente cuadro. Interpretación de las pruebas de mezclado. % Coeficiente Rango Acciones correctivas <10 % Excelente Ninguna 10 a 15 % Bueno Inspección de la mezcladora 15 a 20 % Aceptable Incrementar el tiempo de mezclado, verificar de variación por partes desgastadas, llenado del mezclador o secuencia en la adición de los ingredientes. >20 % Pobre Posible combinación de todos los anteriores. Boletín MF-112 de la Universidad Estatal de Kansas de los EU ANÁLISIS QUIMICO PROXIMAL Introducción Conocer la composición nutricional de los ingredientes utilizados en la alimentación es de vital importancia para proporcionar a los animales una nutrición adecuada. Uno de los análisis mas empleados en la valoración nutricia de los ingredientes es el análisis químico proximal ya que nos da un panorama general de la calidad nutricia de los ingredientesanimal. Objetivo general. Realizar el Análisis Químico Proximal para evaluar la calidad nutricional de los alimentos y conocer el fundamento de cada uno de los principios inmediatos del análisis para su correcta interpretación. Objetivos específicos Conocer el fundamento de cada uno de los principios inmediatos del análisis químico proximal Determinar los principios inmediatos del análisis químico proximal (humedad, materia seca, proteína cruda, extracto etéreo, cenizas, fibra cruda y elementos libres de nitrógeno). 1 2 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación Conocer las limitantes de los principios inmediatos en la valoración nutricional de los ingredientes. Actividades: Procesar por lo menos una de la materias primas o la dieta elaborada remitida al laboratorio. Realizar un análisis de laboratorio para evaluar la calidad nutricional de la ración elaborada o de los ingredientes usados en su elaboración Determinar el porcentaje de húmedad y materia seca de materia prima o dieta (estufa de aire forzado, microondas, etc.) Realizar el Análisis Químico Proximal para evaluar la calidad nutricional de los alimentos y conocer su fundamento Aplicar el fundamento de los principios inmediatos del AQP, en la evaluación nutricional de materias primas e interpretación de resultados Determinar los análisis de laboratorio con base en las características nutricias o limitantes de la materia prima Conversión de los principios inmediatos del AQP de base húmeda a base seca Calcular a partir de los principios inmediatos del AQP, diferentes expresiones de energía (calorías) y aplicación en diferentes especies (TND, EM, ED, ENm, ENp, ENg, ENl). DETERMINACIÓN DE HUMEDAD Introducción El agua es un nutrimento esencial que el animal necesita en cantidades relativamente grandes. Sin embargo el agua no contribuye al valor nutritivo de un alimento, excepto en condiciones especiales de aridez. Por el contrario diluye el contenido de nutrimentos sólidos y los hace más susceptibles a sufrir fenómenos de descomposición por enzimas tisulares, bacterianas y hongos. Aparatos Horno a 50 a 80 C Balanza de precisión Material 1 3 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación Pesafiltro (caja de cartón, latas de acero inoxidable, charolas de aluminio, moldes de gelatina). Espátula Desecador Bata blanca Procedimiento 1. Pesa en la balanza de precisión los recipientes que se utilizaran como pesafiltro y registra el peso (TARA), en la hoja de resultados del análisis químico proximal. 2. Pesa en balanza de precisión y por duplicado, sobre el pesafiltro, las siguientes cantidades dependiendo del tipo de muestra. Forrajes verdes 200g Forrajes o alimento grosero seco 100g Concentrados, polvos pellets, croquetas o 100g granos Alimento húmedo enlatados. 50 g 3. Registrar el peso (TARA + M.F.) 4. Introduce los pesa filtro junto con la muestra en el horno a una temperatura de 45-55 C o de 70 a 80 C. 5. Retira la muestra con su pesa filtro, colócala en un desecador durante 20 minutos y pésala en la balanza de precisión. 6. Registrar el peso (T + MD). 7. Utilizando la siguientes formulas calcula el % de humedad y materia seca de la muestra. CÁLCULOS % HUMEDAD = (TARA + MF) - (T + MD) X 100 (TARA+MF) – TARA Donde: TARA = peso en gramos del pesafiltro vacío. TARA + MF = peso en gramos de pesafiltro con la muestra fresca. T + MD = peso en gramos del pesafiltro con la muestra deshidratada. CALCULO % DE MATERIA SECA 1 4 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación % MATERIA SECA = 100 + % HUMEDAD DETERMINACIÓN DE NITRÓGENO Dado que elemento característico de las proteínas es el nitrógeno, los métodos de cuantificación de proteínas se basan esencialmente en la determinación del contenido de nitrógeno de la muestra, suponiendo que todo el nitrógeno está en forma de proteína. Cuando la muestra contiene nitrógeno de otras fuentes como urea, frecuentemente adicionada en raciones para rumiante, o aminas y amidas provenientes de la descomposición de proteína, el método de Kjendahl sobre estimara el contenido de proteína. Equipo Balanza analítica Digestor Büchi K 435 Lavador de gases büchi B414 Destilar Büchi Kjelflex K 360 Campana de extracción Tubos de digestión Matraz erlenmeyer 250 ml Procedimiento Digestión acida 1. Pesa 1 gramo de muestra molida 2. Agrega 1 gramo de catalizador y 20 mil de ácido sulfúrico 3. Coloca los tubos en el digestor precalentado, dejalo ebullir de 45 a 60 minutos. Destilación 4. Coloca los tubos en el destilador Kjelflex K360 5. Titula con una solución valorada de HCl 1 Normal. CALCULO DE LA CANTIDAD DE E.E. TOTAL EN BASE HUMEDA % PC (BH) = ml HCl * 0.1 *0.014*6.25 * %MS GM Donde: ml HCl = Cantidad de HCl para titulación 1 5 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación 0.1 = Normalidad de HCl GM = gramosde muestra DETERMINACIÓN DE EXTRACTO ETÉREO El extracto etéreo representa los lípidos contenidos en la muestra, dado que los lípidos son sustancias orgánicas heterogéneas insolubles en agua, pero solubles en disolventes orgánicos, su extracción se realiza utilizando un disolvente orgánico (éter etílico, etc). Sin embargo, no todos los lípidos contenidos en los ingredientes tienen importancia nutricional, por lo que esta técnica puede sobreestimar el contenido de grasa de los ingredientes. Reactivos Éter etílico Material y Equipo Espátula Desecador, Extractor Soxhlet Balanza analítica Condensador Matraz bola de fondo plano de 250 ml Perlas de ebullición Cartuchos de celulosa Pinzas de disección Campana de extracción Procedimiento 1. Coloca los cartuchos de celulosa a desecar en un horno a 50 C o 80 C 2. Retira los cartuchos de celulosa del horno y dejarlo enfriar en un desecador 3. Pesa los cartuchos (PCS), registra los datos en la hoja de resultados del análisis químico proximal. 4. Enciende el aparado de Soxhlet 1 6 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación 5. Coloca en los cartuchos de celulosa desecados los gramos de muestra (GM), necesarios dependiendo el tamaño del cartucho y el tipo de materia prima, Forrajes Concentrados Cartucho (3 cm) 2g 3g Cartucho (8 cm) 4g 5g 6. Coloca 200 ml de éter etílico en los matraces de bola de fondo plano. 7. Coloca en el extractor Soxhlet, primero el cartucho de celulosa de 8 cm y encima el de 3 cm. 8. Colocar en el extractor Soxhlet, mantén la extracción durante 4 horas. 9. Una vez concluida la extracción, retirar los cartuchos con ayuda de pinzas de disección largas 10. Deja que el cartucho se seque en la campana de extracción 11. Coloca los cartuchos seco en el horno a 50 o 80 C, donde permanecerán mínimo 60 minutos. 12. Sacar de la estufa y dejar enfriar en un desecador por 20 minutos. 13. Pesar los cartuchos y registra los datos (PC+M). 14. Utilizando la siguiente formula calcula el % de grasa total de la muestra. CALCULO DE LA CANTIDAD DE E.E. TOTAL EN BASE HUMEDA % GRASA TOTAL (BH) = (PCS + GM) – (PC + M) x % MS GM Donde: PCS = peso en gramos del cartucho vacío GM = gramos de muestra colocada en los cartuchos PC + M = peso en gramos del cartucho con la muestra desengrasada % MS = porcentaje de materia seca de la muestra. DETERMINACIÓN DE CENIZAS Es el residuo de la calcinación de la muestra es decir la eliminación de la materia orgánica y el agua. Nutricionalmente esta fracción demasiado cruda y carece de importancia, ya que no indica que minerales la componen y en que proporción se encuentran, sin embargo, es el punto de partida en las 1 7 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación determinación de minerales específicos, además es necesario para el cálculo de la materia orgánica de un alimento. Aparatos y equipo Horno a 50 o 80 C Balanza analítica Platina Mufla a 500 C Material Crisoles de porcelana de 5ml Espátula Desecador Pinzas para crisol Procedimiento 1. Poner a desecar los crisoles de porcelana en la estufa de 50 -80 C durante 24 horas. 2. Retira los crisoles de la estufa y colocarlos en un desecador, dejalos enfriar durante 20 minutos hasta igualar la temperatura ambiente. 3. Pesa los crisoles en balanza analítica (PCS), y registra los datos en la hoja de resultados del análisis químico proximal. 4. Añade un gramo de muestra (GM) en cada crisol. 5. Realiza una primera incineración en una platina, hasta que la muestra adquiera una coloración blanquecina. 6. Coloca los crisoles en la mufla e incinera a 500 C durante 12 horas. 7. Apaga la mufla, dejar enfriar el crisol. 8. Con ayuda de pinzas para crisol, saca los crisoles. Colócalos en el desecador hasta que alcancen la temperatura ambiente y pésalos (PC+M) 14. Utilizando la siguiente formula calcula el % de cenizas en BH. CALCULO DE LA CENIZAS EN BASE HUMEDA % CENIZAS (BH) = P.C.+M – P.C.S. x % MS G.M. Donde: P.C.+M = peso en gramos del crisol con las cenizas 1 8 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación PCS = peso en gramos del crisol con las cenizas GM = peso en gramos de la muestra % MS = porcentaje de materia secaFIBRA CRUDA La fibra cruda representa a los carbohidratos estructurales de la muestra. Aparatos Aparato de reflujo (parrilla de calentamiento) Balanza analítica Equipo de vacío para filtración con trampa Horno a 50-80 C Campana de extracción Reactivos Agua destilada Acido sulfúrico concentrado 93-95% Hidróxido de sodio Agua potable Material Espátula Vasos de precipitado de 400 mL Embudos Buchner de10 cm de diámetro Rodajas de papel de filtración rápida adecuadas al tamaño del embudo Buchner Picetas Pinzas de disección 10 cm largo Desecador. Procedimiento Digestión ácida con acido sulfúrico al 1.25 % 1. Pesa un gramo de la muestra molida y desengrasada (GM), registra los datos en la hoja de resultados del análisis químico proximal. 2. Colócala en el vaso de Berzelius 3. Agregar 100 ml de ácido sulfúrico al 1.25% 4. Coloca los vasos de Berzelius en la platina de calentamiento con su correspondiente refrigerante. 1 9 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación 5. Cuenta 30 minutos a partir de que empieza la ebullición, si la muestra sube y se adhiere a las paredes bájala, usando un poco de la solución de ácido sulfúrico al 1.25% 6. Transcurridos los 30 minutos, retirarlos del aparato de reflujo y agrega agua corriente hasta alcanzar en el vaso 300 ml. 7. Filtra el contenido en rodajas de papel de filtración rápida, usando vació en el embudo Buchner con ligera aplicación de vacío, enjuagando con agua de la llave caliente hasta que no dé reacción ácida. Digestión alcalina (con hidróxido de sodio al 1.25%) 8. Coloca las rodajas con muestra en su vaso correspondiente y sosteniéndolas con las pinzas de disección, utilizando solución de hidróxido de sodio al 1.25% limpia la rodaja, dejándola totalmente limpia. 10. Llena el volumen del vaso de precipitado hasta 100 ml con la solución de hidróxido de sodio al 1.25%. 11. Colocar los vasos de nuevo en la platina, durante 30 minutos a partir de la ebullición. 12. Filtra la muestra nuevamente en el embudo Buchner, en una rodaja de peso conocido (PRS), enjuaga el vaso con agua caliente, aplicando vacío ligeramente, procurando que la muestra quede en el centro de la rodaja. 13. Doblar la rodaja y colócala en el horno a 50 – 80 C, déjala toda la noche. 14. Sacar de la estufa, colocarla en el desecador, dejar enfriar y pesar (PR+M). 15. Utilizando la siguiente formula realiza el calculo correspondiente. CALCULO DE LA FIBRA CRUDA EN (BH) % FIBRA CRUDA (BH) = % MS – (%EE + % Cen) – ((PR + M – PRS) / GM) Donde: % MS = Porcentaje de materia seca % EE = Porcentaje de extracto etéreo % Cen = el porcentaje de cenizas PR + M = peso en gramos de la rodaja con el residuo de fibra PRS = peso en gramos de la rodaja sola GM = gramos de muestra utilizada en la determinaciónREPORTE DE RESULTADOS ANÀLISIS QUÌMICO PROXIMAL 2 0 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación INFORMACIÓN DE LA MUESTRA: _________________________________ MUESTRA NO.____________ MUESTRA: ___________________________ FECHA DE RECIBIDO _____________FECHA DE REPORTE _____________ REALIZÓ _______________________________________________ MUESTRA REPLICA MATERIA SECA Y HUMEDAD TARA % MAT. SECA = ______ TARA+MF % HUMEDAD= ________ T+MD PROTEINA CRUDA ml titulación BH NORMALIDAD DEL ACIDO GRAMOS MUESTRA EXTRACTO ETEREO P.C.S. G.M. P.C.+M CENIZAS P.C.+M P.C.S. G.M. FIBRA CRUDA P.R.+M P.R.S. G.M. ELN (%) = CONVERSIÓN DE DATOS A DIFERENTES PORCENTAJES DE MATERIA SECA BH B90 HUMEDAD (%) MATERIA SECA (%) 2 1 B100 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación P.C. (%) E.E. (%) F.C. (%) CEN (%) E.L.N (%) CALCULO DE DIFERENTES EXPRESIONES DE ENERGÍA APARTIR DE LOS PRINCIPIOS INMEDIATOS DEL AQP. BH BS B100 TND (%) EM Mcal/kg ED Mcal/kg OBSERVACIONES REFERENCIAS 1. Avila GE. Alimentación de la Aves 2a. de. Trillas, México, 1992 2. Castellanos R., Llamas LG, Shimada SA. Manual de Técnicas de Investigación en Rumiología. Sistema de educación continua en producción animal. México 1980. 3. Church DC. Pond WG y Pond KR. Fundamentos de Nutrición y Alimentación de Animales 2a. Ed. Limusa Wiley, México, 2006. 4. Garnsworthy PC. Wiseman J. Recent Advances in Animal Nutrition. Nottingham University Press. England, 1999. 5. Gillespie, C. Modern Livestock and Poultry Production. 5a. de. New York, 1997. 6. Nutrient requeriment of dairy cattle. National Academy Press. Washington, USA. 2001. 7. Nutrient requeriment of small ruminants Sheep, goats, cervids and new World. National Academy Press. Washington, USA. 2007. 2 2 Departamento de Nutrición Animal y Bioquímica FMVZ-UNAM Practicas de Profundización en Alimentos y Alimentación 8. Official Methods of Analysis 15th ed. USA: Association of Official Analytical Chemistric 1990, 920.39 9. Shimada MA. Nutrición animal Ed. Trillas. México 2003. 10. Spross SAK. Alimentación de Bovinos. División Sistema Universidad Abierta y Educación a Distancia, FMVZ-UNAM. México, 2000. 11. Tejada HI. Control de calidad y análisis de alimentos para animales. Sistema de Educación Continua en Producción Animal, A.C. México D.F. 1992. 2 3