C-314-docu

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CURVA DOSIS-EFECTO DE LA TIMULINA SOBRE LA SECRECIÓN DE ESTEROIDES
POR LAS CÉLULAS DE LA GRANULOSA DE LOS OVARIOS DE RATÓN. Cabrera ML1,
Vázquez F2, Chavira R3, Ortega C1, Domínguez R1 y Rosas P1. 1Lab. de Neuroinmunoendocrinología, UIBR, UMIEZ, FES-Zaragoza, UNAM, 2Lab. de Neurofisiología Celular,
Instituto de Neurobiología, Campus Juriquilla, Querétaro, UNAM, 3Lab. de Hormonas
Esteroides, INCMN Salvador Zubirán, México, D.F.
La timulina es una hormona sintetizada exclusivamente por el timo la cual interactúa con el
eje de regulación neuroendócrina de la reproducción. Estudios realizados en células de la
granulosa de ovario de cerda muestran que timulina tiene un efecto estimulante sobre la
actividad aromatasa y la síntesis de progesterona (1). Estudios recientes de nuestro
laboratorio muestran que la inyección de timulina en la bursa del ovario del ratón prepúber
estimulado con gonadotropinas incrementa las concentraciones de 17-estradiol en suero
(2). Por lo que planteamos el siguiente Objetivo: estudiar los efectos de la timulina sobre la
secreción de 17β-estradiol y progesterona sobre las células de la granulosa del ovario de
ratón. Método: Se utilizaron ratones hembra de la cepa CD1 adultos sacrificados en proestro
por dislocación cervical. Los ovarios se extrajeron de manera aséptica, se colocaron en
medio de cultivo DMEM/Ham-F12 y se punzaron los folículos grandes. Se colectaron las
células, se centrifugaron y se resuspendieron en medio de cultivo. Se sembraron en una caja
de cultivo y se incubaron a 37o C con una atmósfera húmeda y saturada con 95% de aire y
5% de CO2 por 24 h. Se realizó un lavado y posteriormente se incubó 5 min con tripsina, se
agregó medio fresco, se sembraron 1x105 células/ml y se incubó 24 h. Se hizo cambio de
medio y se adicionaron concentraciones crecientes de timulina (0, 0.001, 0.01, 0.1, 1.0
ng/ml). A todos los cultivos se les adicionó androstenediona (AD) como sustrato para la
síntesis de 17β-estradiol. Las células se incubaron por 24 h más. Posteriormente se colectó
el medio de cultivo para cuantificar las concentraciones de 17β-estradiol y progesterona por
RIA de fase solida. Resultados: No se observaron diferencias significativas en las
concentraciones de 17β-estradiol entre el grupo con AD y los diferentes tratamientos de
timulina (Fig.1). En cuanto a la secreción de progesterona sólo la concentración de 1 ng/ml
de timulina disminuyó significativamente la concentración de progesterona (Fig.2).
Discusión: Las concentraciones de 17-estradiol obtenidas in vitro no reflejan lo que ocurre
in vivo, sin embargo las células respondieron a la concentración más alta de timulina
disminuyendo la secreción de progesterona. Estas diferencias probablemente se deben a las
concentraciones de timulina utilizadas, ya que tanto en el cultivo de células de la granulosa
de cerda como en la microinyección directamente en el ovario del ratón las concentraciones
del péptido tímico fueron más altas. En estos modelos también se ha observado que los
efectos de la timulina sobre la actividad aromatasa y la secreción de esteroides dependen de
la presencia de gonadotropinas (1,2). Apoyado por DGAPA-PAPIIT IN228709, PAEP y
CONACyT CVU294478.
1. Ledwitz-Rigby F y Scheid P. (1990). Thymulin (Serum Thymic Factor) modulation of
porcine granulose cell responsiveness to gonadotrophins in vitro. VII ovarian Workshop.
Maryville, Tennessee. 473-478.
2. Rosales B, Loaiza D, Reyes C, Chavira R y Rosas P. (2010). Estudio de la respuesta
esteriodogénica del ratón prepúber a la administración intraovárica de diferentes
concentraciones de timulina. LIII Congreso Nacional de Ciencias Fisiológicas.
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