Tecnología Enzimática - Facultad de Ciencias Biológicas

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
(Universidad del Perú, Decana de América)
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE BIOLOGÍA CELULAR Y GENÉTICA
SYLLABUS
SEMESTRE ACADÉMICO: 2015 – II
I.
DATOS GENERALES
1.1. Nombre del curso
1.2. Código del curso
1.3. Número de créditos
1.4. Duración del curso
1.5. Año de estudios
1.6. Número de horas
1.6.1 Teóricas
1.6.2 Prácticas
1.7. Pre requisito
1.8. Profesora responsable
1.9. Horario y ambientes
1.9.1 Teoría y Seminarios
1.9.2 Laboratorio
: Tecnología Enzimática
: B03168
:3
: 17 semanas
: Electivo
:2
:2
: Análisis Químico por Instrumentación
: M.Sc. Patricia Woll Toso
: Sábado: 8:00 - 12:00 h., Aula 309
: Sábado: 8:00 - 12:00 h., Laboratorio 101
II. SUMILLA:
El curso trata sobre las propiedades de las enzimas microbianas, su clasificación, métodos de
obtención, métodos de evaluación y purificación. Se pone énfasis en las principales
aplicaciones de las enzimas en el campo de la salud, industria, agricultura y servicios.
III. OBJETIVOS:
3.1. OBJETIVO GENERAL:
Proporcionar los conocimientos necesarios para que el alumno tenga la capacidad de
interpretar los sistemas enzimáticos diversos que se emplean en la agricultura y la industria
para obtener productos de calidad homogénea, utilizar lo mejor posible su materia prima,
acelerar sus procesos de producción, minimizar sus desperdicios y disminuir el deterioro del
medio ambiente.
3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
Al finalizar el curso el alumno será capaz de:
- Describir e interpretar los mecanismos de la acción enzimática y sus métodos de
evaluación.
- Reconocer las diferentes fuentes de enzimas y los métodos empleados para su
obtención.
1
-
Evaluar y emplear los diferentes métodos para purificar enzimas.
Conocer los mecanismos de recuperación de las enzimas.
IV. EVALUACIÓN:
Se tomarán dos exámenes escritos que incluirán los conocimientos impartidos en las clases
teóricas. Estos exámenes tienen carácter cancelatorio. El promedio de ellos representa el 50%
de la nota final del curso.
Las intervenciones de los alumnos en cada clase interactiva serán calificadas y el promedio
representa el 20% de la nota final del curso.
La nota de práctica representa el 30% de la nota final del curso y está constituida por las
calificaciones del examen práctico, esto es, del seminario en el cual expondrán y discutirán sus
resultados y del desempeño en las prácticas.
Las evaluaciones sustitutorias se tomarán de acuerdo al reglamento vigente. La asistencia a
prácticas y seminario es obligatoria de acuerdo al reglamento vigente, la inasistencia mayor al
30% hace perder el derecho a la nota final de dichas prácticas.
V. METODOLOGÍA:
El desarrollo del curso comprenderá clases teóricas, prácticas y un seminario para la
evaluación de los resultados de las prácticas.
- Clases teóricas: Serán de naturaleza interactiva en su mayoría. Para ello, se distribuirá con
anticipación la bibliografía adecuada a los alumnos y su intervención en estas clases es
obligatoria.
- Clases prácticas: Servirán para que el alumno observe correlacione e integre algunos de los
principales conocimientos discutidos en las clases teóricas.
Para el trabajo de prácticas de laboratorio el alumnado se dividirá en grupos.
VI. PROGRAMACIÓN:
Primera semana (22/08/15)
Patricia Woll
- Introducción
- Purificación de enzimas: Homogenización y centrifugación: preparativa y analítica.
- Precipitación por sales, pH.
Segunda semana (29/08/15)
Patricia Woll
- Diálisis.
- Cromatografía: de exclusión molecular, de intercambio iónico, y de afinidad.
- HPLC, Cromatografía en fase reversa.
- Electroforesis: en condiciones denaturantes y en condiciones no denaturantes
Tercera semana (05/09/15)
Práctica: Elaboración de columnas de filtración en gel.
Patricia Woll
Cuarta semana (12/09/15)
Patricia Woll
- Las enzimas como catalizadores: Clasificación de las enzimas.
- Mecanismos de la actividad enzimática: Cinética enzimática.
- Inhibición reversible e irreversible. Acción de las coenzimas y los minerales.
Quinta semana (26/09/15)
Patricia Woll
- Fuentes de enzimas.
- Aplicación de enzimas en la industria: procesamiento de alimentos, fabricación de
detergentes, curtido de pieles, fabricación de productos médicos y farmacéuticos.
- Aplicación de enzimas en el tratamiento de desechos.
- Producción de enzimas a gran escala.
2
Sexta semana (03/10/15)
- Recuperación de las enzimas después de ser utilizadas.
- Inmovilización de enzimas para su empleo en medios acuosos.
- Tipos de matrices utilizadas.
Patricia Woll
Sétima semana (10/10/15)
Patricia Woll
Práctica: Elaboración de estándares para la cuantificación de proteínas.
Octava semana (17/10/15)
EXAMEN PARCIAL
Patricia Woll
Novena semana (24/10/15)
Patricia Woll
- Manipulación de enzimas: mejoramiento de organismos mediante la inserción de
secuencias de enzimas en el genoma.
- Manipulación directa de la secuencia enzimática.
- Secuenciamiento y determinación de la masa molecular de enzimas.
Décima semana (31/10/15)
Práctica: Inmovilización de enzimas.
Patricia Woll
Undécima semana (07/11/15)
Práctica: Cinética enzimática, actividad de la beta galactosidasa
Patricia Woll
Duodécima semana (14/11/15)
Práctica: Purificación parcial de una enzima. Primera fase.
Patricia Woll
Décimo tercera semana (14/11/15, 14-18 h.)
Práctica: Purificación parcial de una enzima. Segunda fase.
Patricia Woll
Décimo cuarta semana (21/11/15)
Práctica: Cálculos de los resultados de prácticas
Patricia Woll
Décimo quinta semana (28/11/15)
Patricia Woll
Seminario: Presentación de resultados de las prácticas. Discusión.
Décimo sexta semana (05/12/15)
EXAMEN FINAL
Patricia Woll
Décimo sétima semana (12/12/12)
EXAMEN SUSTITUTORIO
Patricia Woll
VII.BIBLIOGRAFÍA:
Alan Wiseman
Manual de Biotecnología de los Enzimas. Editorial
Arancibia. Zaragoza, España.1991.
Reinhard Rennenberg
Biotecnología para Principiantes. Editorial Reverté.
Barcelona, España. 2008.
J. M. Gonzáles de Buitrago
Técnicas y Métodos de Laboratorio Clínico. Elsevier
– Masson. Barcelona, España. 2010.
M.D. Trevan, S. Boffey, K.H.
Goulding y P. Stanbury.
Biotecnología: Principios Biológicos. Editorial
Arancibia. Zaragoza, España. 1990.
3
P.D.G. Dean, W.S. Johnson and
F.A. Middle (Eds.)
Affinity Chromatography, a practical approach.
IRL Press. Oxford. 1987.
B.D. Hames and D. Rickwood
Gel Electrophoresis of Proteins,
Approach. IRL Press. Oxford. 1990.
International Union of Biochemistry.
Nomenclature Comitee
Enzyme Nomenclature. Academic Press Inc.
New York. 1992.
http://www.chem.qmul.ac.uk/iupac/jcbn/index.html#6
A.L. Lehninger
Bioquímica. Editorial Omega S.A. Barcelona. 1987.
C. K. Mathews y K. E. Van Holde
Bioquímica. 2°ed. McGraw- Hill. Inter-americana.
Madrid. 2001.
M. Villavicencio
Bioquímica. CONCYTEC. Lima. 2010.
Z. H. Zaidi and S. Naqvi
High Performance Liquid Chromatography. TWEL
Publishers. Karachi. 1994.
a
Practical
Enzyme and Microbial Technology (revista)
Acceso a través de HINARI.
4