ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO - BVS

MINISTERIO DE SALUD
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD
CENTRO DE INFORMACIÓN Y DOCUMENTACIÓN CIENTÍFICA
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE
IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
SERIE INFORMES TÉCNICOS Nº38
Q.F. OFELIA VILLALVA ROJAS
Q.F. JUAN ORTIZ BERNAOLA.Q.F. MIGUEL GRANDE ORTIZ
Q.F. JACQUELINE ISASI ROSAS
Q.F. DULA YANTAS VISURRAGA
DR. VÍCTOR FIESTAS SOLÓRZANO
2007
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
1.
IDENTIFICACION
a. Código del Proyecto: 2-01-04-03-072
b. Investigadores
Conducción, coordinación, ejecución y supervisión del proyecto
-
Q.F. Ofelia Villalva Rojas.- Etapa clínica, analítica y estadística.
-
Q.F. Juan Ortiz Bernaola.- Etapa clínica, analítica y estadística
-
Q.F. Miguel Grande Ortiz.- Etapa clínica, analítica y estadística
-
Q.F. Jacqueline Isasi Rosas.- Etapa clínica, analítica y estadística
-
Q.F. Dula Yantas Visurraga.- Etapa clínica.
-
Dr. Víctor Fiestas Solórzano.- Etapa clínica
c. Personal de apoyo:
-
Lic. Maria Elena Tello Chirinos (etapa clínica), Centro Nacional de
Control de Calidad (CNCC) - Instituto Nacional de Salud (INS)
-
Bach. Javier Rodríguez (etapa estadística), CNCC - INS
-
Personal de la Clínica Virgen del Rosario:
02 Médicos
02 Lic. en enfermería
04 Técnicos de enfermería
01 Tecnólogo médico
d. Instituciones que participaron en la ejecución del estudio:
-
Centro Nacional de Control de Calidad - Instituto Nacional de Salud:
Ejecución de la etapa analítica y estadística.
-
Clínica “Virgen del Rosario” (Jr. Castilla 976, Magdalena del MarLima): Ejecución de la etapa clínica
e. Duración del estudio: 07 meses
2.
RESUMEN
Objetivo: Determinar la biodisponibilidad de dos presentaciones de
Ibuprofeno 400 mg tabletas para establecer si el Ibuprofeno 400 mg tabletas
genérico es bioequivalente al medicamento de referencia (Motrin 400 mg
tabletas).
Material y métodos. Estudio abierto, randomizado, cruzado, realizado en
dos periodos con un tiempo de lavado de siete días, en 14 voluntarios sanos
2
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
con edades entre 21 y 48 años, los cuales fueron identificados y separados
en dos grupos administrándoseles los medicamentos según diseño
propuesto. La toma de muestra se realizó a las 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0,
3.5, 4.0, 5.0, 6.0, 8.0 y 12.0 hrs posteriores a la ingesta del medicamento.
La extracción del principio activo fue en fase líquida/líquida y la
cuantificación del mismo fue determinada mediante Cromatografía Líquida
de Alta resolución acoplada a un detector de Masas (LC-MS/MS),
empleando diclofenaco sódico, como estándar interno. Los parámetros
farmacocinéticos que se compararon para determinar Bioequivalencia
fueron: área bajo la curva (AUC) y concentración máxima (Cmax ) a un
p<0.1.
Resultados. Los valores en promedio encontrados son:
AUCGénerio (0-t)
= 86,85 (ug/mL x h)
AUCReferencia(0-t) = 81,20 (ug/mL x h)
AUCGénerio (0-)
= 88,67 (ug/mL x h)
AUCReferencia(0-) = 82,83 (ug/mL x h)
CmáxGénerio
= 16,90 (ug/mL)
CmáxReferencia
= 18,09 (ug/mL)
Aplicando el análisis estadístico para determinar bioequivalencia, se
encontró para AUC intervalos de 0.96 - 1.20 y para Cmáx intervalos de
0.85 - 1.14.
Conclusión.
Los intervalos encontrados para AUC y para Cmáx se
encuentran dentro de los límites establecidos para Bioequivalencia: 0.80 –
1.25, por lo tanto el medicamento genérico es bioequivalente al producto de
referencia.
3.
INTRODUCCIÓN
Para realizar la sustitución de medicamentos innovadores por medicamentos
multifuentes (genéricos) o similares con nombres comerciales se debe contar
con la evidencia científica basada en estudios tales como de equivalencia
terapéutica in vivo (estudios de bioequivalencia) o in vitro (perfiles de
disolución).
Con los estudios de bioequivalencia se podría demostrar que el principio
activo del medicamento multifuente tiene el mismo comportamiento
3
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
farmacocinético que
el innovador, por lo tanto se considerarían
intercambiables.
En el consumo de fármacos en el mercado nacional, (Septiembre-2002), los
anti-inflamatorios no esteroideos (AINEs) se encuentran en el 3er lugar de
requerimiento, dentro de los cuales el Ibuprofeno es uno de los más
consumidos, por lo cual se hace necesaria la verificación de su calidad y
establecer su bioequivalencia con respecto al medicamento de referencia.
Farmacocinética de Ibuprofeno.- El Ibuprofeno se absorbe en el tubo
digestivo
y
la
concentración
plasmática
máxima
se
alcanza
aproximadamente entre 1 y 2 horas tras la ingestión. También se absorbe por
vía rectal. Existe cierta absorción a través de la piel tras la aplicación tópica.
El ibuprofeno se une en un 90 a un 99% a las proteínas plasmáticas y tiene
una semivida plasmática de unas 2 horas. Se excreta rápidamente por la
orina sobre todo en forma de metabolitos y sus conjugados por la orina se
excreta alrededor de un 1 % de ibuprofeno inalterado y cerca de un 14%
conjugado. La distribución a la leche materna si existe, parece ser escasa.
4.
MATERIAL Y METODOS
4.1
MATERIALES
a. Muestras
-
Medicamento de multifuente: Ibuprofeno 400 mg, tabletas, Lote
004176 y F.V. Abril 2009, adquirido en la farmacia de DIGEMID
(Genérico nacional)
-
Medicamento de referencia: Motrin tabletas 400 mg, Lote U9553, de
laboratorio Pharmacia Upjohn, F.V. 06 2007, (Química Suiza)
b. Muestras Biológicas
-
Plasma normal
-
Plasma hiperlipémico.
-
Plasma hemolizado
-
Plasma obtenido de los voluntarios conteniendo ibuprofeno
c. Estándares
-
Ibuprofeno USP, Lote: J1E043
4
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
-
Diclofenaco sódico USP (estándar interno), lote H0B150
d. Solventes, reactivos y materiales
-
Acido fosfórico 85%
-
Hidróxido de amonio 25%
-
Acetonitrilo, grado HPLC
-
Hexano grado HPLC
-
Éter dietílico, p.a.
-
Metanol grado HPLC
-
Agua tridestilada, purificada
-
Tips descartables de 20 – 200 uL y de 200 – 1000 uL
-
Tubos descartables de vidrio de 13 x 100 mm
-
Tubos de centrífuga de polipropileno con tapa de 15 y 50 mL
-
Microviales de vidrio de 0.3 mL
-
Probetas de vidrio
-
Micropipetas automáticos de 50, 100, 200 y 1000 uL
-
Columna cromatográfica RP-18 (100 x 4,6 mm i.d.), 3u, VARIAN,
MonoChrom.
-
Dispensador automático de 1mL – 5mL x 50 mL, Handy Step, Brand.
e. Equipos
-
Equipo de cromatografía líquida Surveyor Thermo Finnigan (Thermo
Electron Corporation) con detector espectrofotómetro de Masas TSQ
Quantum
Discovery
Max
(Termo
Electrón
Corporation),
procesamiento de datos mediante software del equipo (Xcalibur);
-
Espectrofotómetro UV-Vis, HP 8453
-
Disolutor automatizado, VK7025 VARIAN
-
Balanza analítica, Sartorius 215P Genius
-
Agitador vórtex, IKA MS1
-
Baño ultrasonido, 9323-1, ELMA
-
Purificador de agua Toraypure LV-408,
-
Congelador -70ºC (Isotemp low temperature Fisher Scientific),
-
Microcentrífuga de velocidad variable (Sartorius modelo 1-15).
-
Equipo de filtración al vacío EMERSON. SA55NXGTE-4870
-
Baño María, WB-22. Memmert
-
pH Meter Metrohm,
5
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
4.2
-
Vaporizador rápido a nitrógeno RAPID VAP N2/48 LABCONCO
-
Congelador freezer -10 a -40°C, Solfarma
METODOS
4.2.1 EVALUACION “in vitro”
Las tabletas de ibuprofeno de los medicamentos multifuente y de referencia
fueron analizados según la farmacopea de Los Estados Unidos (USP 29), para
los ensayos de identificación del principio activo, contenido, disolución y
uniformidad de contenido por variación de pesos (ver anexo 01); para el ensayo
de peso promedio se usó la farmacopea británica (BP 2005), (ver anexo 01) y los
perfiles de disolución se realizaron según las especificaciones de la
Organización Mundial de la Salud (OMS) Reporte Técnico 937 - Informe 40,
(2006). Se trabajó con 12 unidades de cada medicamento a pH: 1,2; 4,5 y 6,8. Se
compararon mediante el factor de similitud f2, (ver anexos 02, 03 y 04).
4.2.2 EVALUACION “in vivo”
4.2.2.1 Etapa clínica
a. Criterios de inclusión:
 Hombres y mujeres con edad entre 18 hasta 50 años.
 El voluntario debe tener un peso que no exceda el 10% de su índice
de masa corporal.
 Sea sometido a una historia clínica y examen físico, ECG, y
exámenes de laboratorio complementarios, siendo considerado
saludable (cuando los resultados obtenidos de los exámenes se
encuentran dentro de los rangos considerados normales).
 Aceptó y firmó libremente el consentimiento informado, después de
que todos los elementos esenciales del protocolo hayan sido
aclarados antes de la administración del medicamento.
Los exámenes de ECG, despistaje de hepatitis B, hepatitis C y de VIH,
sólo se realizaron en el pre-estudio, los demás exámenes se realizaron
antes y después del estudio.
b. Criterios de exclusión:
6
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
1. Si los resultados de los siguientes exámenes complementarios del
laboratorio están fuera de los valores considerados normales (10%),
a menos que sean considerados clínicamente irrelevantes:
 Examen físico, ECG.
 Análisis
hematológico:
hemoglobina,
hematocrito,
recuento
diferencial de leucocitos, recuento de plaqueta.
 Análisis bioquímico: úrea, creatinina, bilirrubina total, albúmina,
glucosa en ayunas, fosfatasa alcalina, GOT, GPT, colesterol total,
triglicéridos, ácido úrico.
 Análisis serológico: hepatitis B, C, HIV
 Orina completa.
 Examen de heces (coproparasitario).
2. Los voluntarios han participado de cualquier estudio experimental o
han ingerido cualquier droga experimental dentro de los 3 meses que
anteceden al inicio de este estudio.
3. Tiene una medicación regular dentro de las 2 semanas que anteceden
al inicio de este estudio, o inicia cualquier medicación una semana
antes de iniciar el estudio, incluyendo medicamentos herbales.
4. Fue internado por cualquier motivo hasta 8 semanas antes del inicio
de este estudio.
5. Tiene historia de abuso de alcohol o drogas ilícitas, o ingiere bebidas
alcohólicas dentro de las 24 horas que anteceden al periodo de
internamiento para iniciar el estudio.
6. Tiene
historia
de
enfermedad
hepática,
renal,
pulmonar,
gastrointestinal, epiléptica, hematológica o psiquiátrica; tiene hipo o
hipertensión de cualquier etiología que necesite tratamiento
farmacológico; tiene historia de leve infarto del miocardio, angina
y/o insuficiencia cardiaca.
7. El voluntario dona o pierde 450 mL o más de sangre dentro de los
tres meses que anteceden al estudio, o que dona más de 1500 mL
dentro de los 12 meses precedentes al estudio.
8. El voluntario ingiere más de 5 tazas de café o té por día.
9. El voluntario es fumador.
7
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
10. El voluntario sabe que tiene hipersensibilidad al Ibuprofeno; historia
de reacciones adversas serias o hipersensibilidad a cualquier droga o
presencia de alergia que necesite de tratamiento específico.
11. El voluntario tiene cualquier condición que lo impida de participar
del estudio según criterio del investigador.
12. Resultado positivo de embarazo para una voluntaria mujer.
c. Reclutamiento. La captación de los voluntarios se realizó por medio de
invitación a estudiantes de universidades, personal que labora en el INS y
sus familiares o amigos, a través de comunicados. Los interesados en
participar en el estudio fueron registrados, evaluados y seleccionados.
d. Diseño del estudio
Se llevó a cabo un estudio de tipo abierto, randomizado, dos
tratamientos, dos secuencias cruzadas en dos periodos. Con un tiempo de
lavado de siete días entre periodos, donde cada voluntario recibió una
tableta de ibuprofeno 400 mg de uno de los medicamentos por vía oral en
dosis única en cada periodo, con 200 mL de agua, según el esquema de
randomización.
e. Aspectos éticos
El protocolo del ensayo fue aprobado por el comité de ética en
investigación del INS y fue conducido bajo los principios de la
Declaración de Helsinki y sus revisiones de Tokio, Venecia, Hong Kong
y Edimburgo.
El Consentimiento Informado fue firmado por cada voluntario durante la
selección, donde se les informó del diseño, objetivos, riesgos y
beneficios del estudio.
f. Confidencialidad. Toda la información obtenida durante el estudio
referente al estado de salud del voluntario fue archivada en forma
individual y está disponible solo para el personal médico y los
investigadores del proyecto. Terminado el estudio cada voluntario
recibió una copia de los exámenes de laboratorio realizados en el pre y
post estudio, incluyendo a quienes se les practicaron los exámenes
clínicos pero no cumplieron con los criterios de inclusión.
8
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
g. Internamiento de voluntarios. El internamiento de la Fase I se realizó el
día 13 de octubre del 2006 y la Fase II el 20 de octubre del 2006, en la
clínica “Virgen del Rosario”, donde los voluntarios pernoctaron desde la
noche anterior del estudio, debiendo permanecer en ayunas a partir de las
diez de la noche hasta 4 hrs. después de la ingesta del medicamento.
Transcurrido este tiempo se les sirvió un desayuno leve y un almuerzo
estandarizado. Después de 10 horas de la administración del
medicamento, se le sirvió una cena estandarizada y fueron dados de alta
después de la última toma de muestra, previa evaluación médica.
Los voluntarios no ingirieron bebidas alcohólicas, café u otros alimentos
conteniendo xantinas 48 horas antes y durante el estudio.
h. Colecta de muestras de sangre: Antes de cada toma de muestra de
sangre se evaluó la presión sanguínea, frecuencia cardiaca y la
temperatura corporal.
Después de 10 horas de ayuno (8.00 a.m.), se inició el estudio con una
colecta de 25 mL de sangre, para control individual, curvas patrones,
controles de calidad y validación pre-estudio. Las posteriores tomas de
muestra fueron de 4 mL a los siguientes intervalos: 0,5 h; 1,0 h; 1,5 h;
2,0 h; 2,5 h; 3,0 h; 3,5 h; 4,0 h; 5,0 h, 6,0 h; 8,0 h; 12 h. después de la
administración del medicamento, utilizando Edetato de potasio como
anticoagulante.
Las muestras de sangre se centrifugaron a 3500 rpm por 10 minutos, a
temperatura ambiente. Se separó el plasma de cada muestra (aprox. 2,0
mL) y se almacenaron en un criovial a -20 °C.
4.2.2.2 Etapa Analítica
a. Muestras de retención - Inventario
Culminado el estudio se contó el total remanente de los medicamentos
genérico y de referencia, los que han sido almacenados en el CNCC, a
una temperatura entre 15°C – 25°C, con humedad controlada no mayor de
65% hasta la fecha de vencimiento indicada en su rotulado.
9
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Las muestras de plasma se encuentran almacenadas a –20ºC y
permanecerán, hasta un año después de culminado el estudio.
b. Procesamiento del plasma (extracción de Ibuprofeno)
1. Se toma 200 uL de plasma en cada tubo.
2. Se adiciona 0,05 mL de estándar interno (diclofenaco sódico 0.1
ug/mL) y se mezcla en el vórtex 10 s
3. Se añade 100 uL de solución ácida (ácido fosfórico 1.4 M), se mezcla
en el vórtex por 10 s
4. Se añade 4 mL de la mezcla éter dietílico: hexano (80:20 v/v) y se
mezcla en el vórtex por 40 s
5. Se congela a -70 °C por 10 minutos para separar las dos fases.
6. Se transvasa la fase orgánica a un tubo limpio.
7. Se evapora el solvente orgánico de los tubos usando corriente de
nitrógeno a 37°C
8. Se reconstituye el residuo con 200 uL de fase móvil y se mezcló en el
vórtex por 15 s
c. Cuantificación del principio activo
La cuantificación del principio activo en plasma extraído fue realizada en
el cromatógrafo líquido acoplado a un detector de masas (LC-MS/MS)
marca Thermo Finnigan, modelo TSQ Quantum Discovery Max (USA),
empleando diclofenaco sódico, como estándar interno.
d. Condiciones Cromatográficas:
 Columna cromatográfica RP-18 (100 mm x 4,6 mm i.d.), 3u,
VARIAN, MonoChrom
 Flujo: 0,30 mL/min.,
 Temperatura de la columna: 40°C,
 Temperatura del automuestreador: 4.0ºC,
 Volumen de inyección: 5 uL.
Como fase móvil se empleó una solución de amoniaco, agua y
acetonitrilo (0,35 mL:200 mL: 800 mL).
10
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Las muestras se analizaron por duplicado y se procesaron mediante el
software Xcalibur Core Data System – versión 1,4 del equipo LCMS/MS.
e. Desarrollo del método
o Tiempo aproximado de la corrida: 4.0 min.
o Tiempos de retención aproximados:
Tiempo de Retención (min)
Estándar
Ibuprofeno
(SRM de 204.91>161.02)
1.5
Diclofenaco
(SRM de 294.91>249.91)
1.6
f. Validación pre estudio
Se desarrolló utilizando plasma blanco contaminado con el principio
activo (ibuprofeno) y el estándar interno (diclofenaco sódico). Se empleó
tres controles de calidad (QCA: 0,1537; QCB: 1,7930; QCC: 17,9300
ug/mL). Para algunos parámetros se utilizó estándar blanco (plasma sin
principio activo y sin estándar interno), estándar cero (plasma sin
principio activo, con estándar interno). Evaluándose los siguientes
parámetros:
1. Especificidad. Se determinó la habilidad del método analítico
para
diferenciar ibuprofeno y diclofenaco en presencia de otros constituyentes
en la muestra extrayéndose por duplicado plasma hiperlipémico, normal
y hemolizado, siguiendo el procedimiento de extracción.
2. Exactitud. Se comparó los valores obtenidos de los controles de calidad
(QCA, QCB, QCC), con respecto a los valores reales de los mismos.
3. Precisión. La determinación de precisión intradía e interdía se realizó en
los QCA, QCB y QCC por quintuplicado.
4. Recuperación. Se determinó al comparar las áreas de los picos en los
QCA, QCB y QCC con las áreas obtenidas de las mismas en fase móvil.
5. Prueba del límite de detección (LOD). Se determinó la concentración
más baja de Ibuprofeno que sea detectable, inyectándose en el equipo un
estándar de Ibuprofeno en fase móvil, observándose que el pico del
mismo sea tres veces la señal ruido.
11
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
6. Prueba del límite de cuantificación (LOQ).
Se determinó la
concentración más baja de Ibuprofeno que sea cuantificable, la cual debe
ser cinco veces el LOD.
7. Linealidad. Fue realizada contaminando plasma blanco con ibuprofeno
en nueve concentraciones: 0,05; 0,1; 0,2; 0,5; 1; 2; 5; 10 y 20 ug/mL. Se
corrieron las muestras por duplicado
8. Prueba de contaminación del autoinyector (carry over): Se procesó el
punto más alto de la curva (20ug/mL) y un estándar blanco (plasma sin
analito), inyectándose cada uno por triplicado, en forma alternada,
empezando por la muestra con el analito, seguido por el blanco.
9.
Pruebas de estabilidad: Se determinó la estabilidad del Ibuprofeno en
plasma en las condiciones de almacenamiento y manipulación de la
muestra. Las muestras sometidas a estos ensayos fueron controles de
calidad QCA, QCB y QCC.
-
Prueba de congelamiento y descongelamiento. Se realizó tres
ciclos de congelamiento y descongelamiento del plasma con
Ibuprofeno, a un intervalo de 24 horas, al término del cual se
analizaron estas muestras (QCA, QCB y QCC) y se compararon los
resultados con muestras frescas a las mismas concentraciones.
-
Estabilidad a corto plazo a temperatura ambiente. Se sometió a
descongelamiento por seis horas a temperatura ambiente de las
muestras
(QCA, QCB y QCC)
y se comparó los resultados
obtenidos con muestras frescas a las mismas concentraciones.
-
Estabilidad a largo plazo.- Se comparó los resultados obtenidos de
las muestras almacenadas (QCA, QCB y QCC) durante sesenta días
con muestras frescas a las mismas concentraciones.
-
Estabilidad de las soluciones stock de ibuprofeno y de estándar
interno. Se comparó los resultados obtenidos de las soluciones
almacenadas durante siete días con soluciones recién preparadas.
-
Estabilidad en el automuestreador: Se comparó los resultados de
muestras almacenadas (QCA, QCB y QCC) en el automuestreador
por 24 horas.
g. Análisis de las muestras de voluntarios
12
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Una vez que los resultados obtenidos en la validación pre estudio
cumplieron con las especificaciones para cada parámetro, se procesaron
las muestras de los voluntarios, las cuales se analizaron por duplicado,
junto con una curva de calibración y controles de calidad (QCA, QCB y
QCC), de acuerdo a la lista de inyección diaria.
Todas las muestras correspondientes a un voluntario (primer y segundo
periodo) se incluyeron en la misma lista de inyección.
h. Etapa estadística
Con los resultados obtenidos del análisis de las muestras se determinaron
los parámetros farmacocinéticos, los cuales fueron sometidos a un
análisis estadístico.
i. Estimación de los parámetros farmacocinéticos.
Los parámetros farmacocinéticos de las dos formulaciones de ibuprofeno
se determinaron por el método compartimental de Wagner y Nelson en
forma individual para cada período.
j. Cálculo del área bajo la curva (AUC)
El área bajo la curva fue calculada por el método de los trapecios (curva
concentración – tiempo).
k. Consideraciones estadísticas.
Primero se aplicó el análisis de varianza (ANOVA), para cuantificar la
variabilidad con la que contribuyen los factores de secuencia, período y
tratamiento al diseño del estudio.
Así mismo para cada uno de los factores se probó la hipótesis nula (H o) a
fin de ver si la variabilidad en cada factor, influía en el diseño del estudio
de manera significativa.
Se evaluaron Cmáx y AUC para el medicamento de referencia y el
multifuente aplicando el programa Microsoft Excel 2003, con un
intervalo de confianza de 90%. Estos resultados fueron verificados con el
programa STATA 7.0 y el programa de Bioeqyuivalence program for
two – period cross – over studies, versión 3.7.
5.
RESULTADOS
5.1
Etapa clínica
13
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Los voluntarios fueron examinados 2 semanas antes del primer periodo de
administración de medicamentos
y evaluados para determinar su
elegibilidad. En aquellos que fueron incluidos en el estudio no se
encontraron alteraciones clínicas ni anormalidades relevantes en el ECG. Los
resultados de hematología, bioquímica y urianálisis en la mayoría de los
voluntarios indicaron valores dentro de los rangos normales; así mismo, los
resultados para Hepatitis B y C, VIH 1 y 2 fueron negativos.
De esta manera, catorce voluntarios sanos de ambos sexos fueron incluidos
en el estudio, presentando una edad promedio de 31 años (21 - 48), peso
promedio de 64 kg (52 – 79), altura promedio de 1.61 m (1.47 – 1.73). Indice
de masa corporal (IMC), (Ver anexo 06)
La evaluación post-estudio incluyó además de una evaluación clínica,
estudios de hematología, bioquímica y urianálisis
Los resultados de los exámenes pre y post-estudio fueron incluidos en los
CRFs, luego de la evaluación del investigador clínico
5.2
Etapa analítica
5.2.1 Validación pre estudio
1. Especificidad. En los cromatogramas de las muestras de plasma normal,
hiperlipémico y hemolizado no se observó picos cromatográficos en los
tiempos de retención correspondiente al ibuprofeno y diclofenaco.
Cromatogramas de plasma normal
Relative Abundance
C:\Xcalibur\...\0011106CC1QCS219
RT: 0.00 - 3.00
0.22
100
0.29 0.45
0.64
11/25/2006 12:14:23 AM
0.91
TBN1
NL: 4.37E5
TIC F: - p SRM ms2
[email protected] [
161.01-161.02] M S
0011106CC1QCS219
1.06
1.13 1.31
90
1.54
1.85
1.98
2.17
80
2.45 2.59
2.87
NL: 9.57E4
TIC F: - p SRM ms2
[email protected] [
249.90-249.91] M S
0011106CC1QCS219
1.63
100
90
0.16
80
1.55
0.37
0.44
0.67 0.83
1.04
1.25
1.44
2.42
1.92
70
0.0
0.5
1.0
1.5
Time (min)
2.0
2.20
2.51 2.60
2.5
2.97
3.0
0011106CC1QCS219 #1 RT: 0.01 AV: 1 NL: 3.00E6
T: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02]
100
14
dance
80
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Cromatogramas de plasma hiperlipémico
Relative Abundance
C:\Xcalibur\...\0011106CC1QCS213
RT: 0.00 - 3.00
0.06 0.29 0.38
100
11/24/2006 11:52:22 PM
0.64 0.75
90
0.92
1.17 1.24
80
1.43 1.59
TBL1
NL: 6.94E5
TIC F: - p SRM ms2
[email protected] [
161.01-161.02] M S
0011106CC1QCS213
1.78
1.92
70
2.03 2.17
2.33 2.52
60
100
2.89
NL: 8.83E4
TIC F: - p SRM ms2
[email protected] [
249.90-249.91] M S
0011106CC1QCS213
0.16
90
0.72 0.86 0.98
0.35 0.47
1.25
1.48 1.65
80
1.83
2.06
2.21
70
2.42 2.49
2.78
2.97
60
0.0
0.5
1.0
1.5
Time (min)
2.0
2.5
3.0
0011106CC1QCS213 #1 RT: 0.01 AV: 1 NL: 3.00E6
T: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02]
Cromatogramas de plasma hemolizado
Relative
Relative
Abundance
Abundance
100
C:\Xcalibur\...\0011106CC1QCS226
11/25/2006 12:40:06 AM
TBH1
80
RT: 0.00 - 3.00
0.13 0.20
100
60
0.45 0.54
0.73
90
40
0.92
1.12
1.36
1.56
80
NL: 3.67E5
TIC F: - p SRM ms2
[email protected] [
161.01-161.02] M S
0011106CC1QCS226
1.66
1.78
2.05
2.26 2.42
20
100
161.02
0
0.14 0.26
90
161.016
161.017
0.47
161.02
2.61
2.71
NL: 8.72E4
1.55
161.02
161.02
TIC F: - p SRM ms2
[email protected] [
0.70
161.0180.90
1.11
161.019
1.23
80
161.0201.62 161.021
1.69 1.97
m/z
1.44
249.90-249.91] M S
161.022
161.023
161.024
0011106CC1QCS226
2.20
2.42 2.53
2.86
70
0.0
0.5
1.0
0011106CC1QCS226 #1 RT: 0.01 AV: 1 NL: 3.00E6
1.5
Time (min)
2.0
2.5
3.0
15
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Analito
Ibuprofeno
(n=5)
CV (%)
QCA
(0,1537 ug/ml)
0,1612
0,1579
0,1606
0,1732
0,1634
3,61
QCB
(1,793 ug/ml)
QCC
(17,9301 ug/ml)
1,5562
1,6123
1,5819
1,5905
1,7963
13,3280
17,1063
14,2918
13,0066
12,3124
5,93
13,36
2. P
r
e
c
isión: El coeficiente de variación (CV%) de las cinco alícuotas de QCA,
Analito
Ibuprofeno
(n=5)
CV (%)
QCA
(0,1537 ug/ml)
QCB
(1,7930 ug/ml)
QCC
(17,9301 ug/ml)
Q
0.1586
1.7774
18.7749
B
0.1632
1.7846
20.5783
0.1446
1.9050
15.6866
0.1286
1.6994
20.4022
0.1490
1.6949
19.5278
9,09
4,81
10,45
C
y
Q
C
C, no debe ser mayor al 15%.
Tabla 1
Precisión Intra-día
16
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Tabla 2
3.
Precisión Inter-día
Exactitud.- El valor medio para las cinco alícuotas de QCA,
QCB y QCC, no debe ser mayor al 15% del valor nominal.
Tabla 3
Exactitud
4. Recuperación. La recuperación del analito y del estándar interno no
debe ser menor al 50%, siempre que cumpla con la precisión y exactitud.
Analito
Ibuprofeno
QCA
QCB
QCC
0,1586
0,1632
0,1446
0,1286
0,1490
0,1488
1,7774
1,7846
1,9050
1,6994
1,6949
18,7749
20,5783
15,6866
20,4022
19,5278
Concentración
1,7723
obtenida
Concentración Promedios de muestras
Concentración
0,1537
1,7930
Analito
QC
Nominal
En fase
Extraídas
nominal
(ug/mL)
de plasma
98,84 móvil
Exactitud (%)
96,82
QCA
Variación
(%)
I buprofeno QCB
QCC
Tabla 4
0,1537
-3,18
1,7930
17,9301
0,1433
0,1234
-1,16
1,7847
1,7412
16,1018
13,8123
R
=
Valor
obtenid
o/valor
esperad
o (100)
18,9940
Recuperación
17,9301
(%)
105,93
86,096
5,93
102,499
115,939
Recuperación
5. Límite de detección (LOD): Los blancos no presentan interferencias en
los tiempos de retención de los picos correspondientes a los analitos.
17
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
C:\Xcalibur\...\0011106CC1QCS236
11/25/2006 1:16:34 AM
LODIBUFM
Relative Abundance
RT: 0.00 - 3.00
NL: 4.29E5
TIC F: - p SRM ms2
[email protected] [
161.01-161.02] M S ICIS
0011106CC1QCS236
RT: 1.57
AA: 748005
100
80
0.11 0.22
0.57 0.71
0.85
60
1.10
1.31
1.70
1.94
2.19 2.28 2.36
2.66 2.75
NL: 4.27E5
TIC F: - p SRM ms2
[email protected] [
249.90-249.91] M S ICIS
0011106CC1QCS236
RT: 1.56
AA: 1539895
100
50
0.09 0.28
0.46
0.0
0.70
0.88 1.09 1.19
0.5
1.74
1.34
1.0
1.95 2.16 2.27
1.5
Time (min)
0011106CC1QCS236 #1 RT: 0.01 AV: 1 NL: 3.00E6
1 Cromatograma
T: - p SRM ms2 [email protected]
[ 161.01-161.02]
2.44 2.60
2.0
2.86
2.5
3.0
de ibuprofeno en fase móvil
100
Relative Abundance
80
6. Límite de cuantificación (LOQ). El analito debe ser identificable y
reproducible, con una precisión de 20% y exactitud de 80% - 120%
60
40
C:\Xcalibur\...\0011106CC1QCS240
11/25/2006 1:31:11 AM
LOQIBUFM
20
Relative Abundance
0
161.016
RT: 0.00
- 3.00
161.02
161.02
161.017
161.018
161.019
161.02
161.020
161.021
RT:
1.55
m/zMA: 1281178
100
161.022
161.023
161.024
80
60
0.08
0.38 0.45 0.55
0.87 0.96 1.24 1.33
1.76
40
2.27
2.06
2.54 2.70 2.78
NL: 7.57E5
TIC F: - p SRM ms2
[email protected] [
249.90-249.91] M S
0011106CC1QCS240
RT: 1.55
MA: 2465167
100
NL: 5.37E5
TIC F: - p SRM ms2
[email protected] [
161.01-161.02] M S
0011106CC1QCS240
50
0.23
0.0
0.40
0.65 0.86 0.95
0.5
1.14
1.84 1.95
1.33
1.0
1.5
Time (min)
2.19 2.34
2.0
2.56
2.79
2.5
3.0
Figura 2 Cromatograma de ibuprofeno en fase móvil
0011106CC1QCS240 #1 RT: 0.01 AV: 1 NL: 3.00E6
T: - p SRM ms2 [email protected] [ 161.01-161.02]
100
Relative Abundance
80
Tipo de muestra
Ibuprofeno
LOQ, valor nominal (ug/mL)
0,0512
0,0570
60
40
Concentración obtenida
(ug/mL)
20
Promedio (n=3)
0,0485
0,0590
0,0548
161.02
Exactitud (%)
0
161.016
161.017
Precisión (%)
161.018
161.019
106,99
161.020
161.021
m/z
10,13
161.022
161.023
161.024
18
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
7. Linealidad. Los resultados de la curva cumplen los siguientes criterios:
a. Los puntos de la curva en el nivel LOQ tienen una desviación relativa
menor a 20% de la concentración nominal declarada.
b. Los otros estándares no cero tienen una desviación menor a 15% de
la concentración nominal declarada.
c. Todos los estándares no cero cumplieron con los criterios
anteriormente señalados.
d. El coeficiente de correlación de la curva es mayor que 0,95.
Tipo de muestra
(ug/mL)
Concentración Exactitud
Hallada (ug/mL)
(%)
Estándar Blanco
-
Estándar cero
-
CV %
0,0512
0,0470
91,83
6,02
0,1025
0,0942
91,93
5,95
0,2049
0,1724
84,14
12,18
0,5123
0,5156
100,64
0,49
1,0246
1,0313
100,66
0,46
2,0491
1,9136
93,39
4,84
5,1229
4,7595
92,91
5,20
10,2457
10,8073
105,48
3,77
20,4915
20,3150
99,14
0,61
Coeficiente de correlación
0,9987
Tabla 6 Linealidad
19
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
350,00
y = 14,0068x
300,00
R2 = 0,9987
Ratio
250,00
200,00
150,00
100,00
50,00
0,00
0,00
5,00
10,00
15,00
20,00
25,00
Concentración ug/mL
Gráfico 1: Linealidad del Ibuprofeno
8. Prueba de contaminación del autoinyector (carry over): En los
cromatogramas de las muestras blanco no se observó picos
cromatográficos en el tiempo de retención correspondiente a ibuprofeno
(estándar 20 ug/mL).
9. Pruebas de estabilidad :
a. Prueba de congelamiento y descongelamiento. La variación de las
muestras sometidas a
congelamiento y descongelamiento no es
mayor que 20% de las muestras frescas.
b.
T° del ensayo –20 ºC
Analito
Ibuprofeno
Diclofenaco
Promedio de Áreas ( n = 3)
QCA
Muestras
frescas en
plasma
20302767,2
3 Ciclos de congelamiento
descongelamiento (72
hras)
19675688,2
QCB
165087848
183288474
11,03
QCC
1767278118
1763000661
-0,24
-
9434354
10696009
13,37
Tipo de
muestra
Variación
(%)
-3,09
Tabla 7 Prueba de congelamiento descongelamineto
b. Estabilidad a corto plazo a temperatura ambiente (06 horas). La
variación de las muestras sometidas a descongelamiento a
20
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
temperatura ambiente por seis horas no es mayor que 20% de las
muestras frescas.
T° del ensayo 20 ºC
Analito
Promedio de Áreas (n = 3)
Tipo de
muestra
Muestras frescas
en plasma
QCA
Ibuprofeno
Diclofenaco
Variación
(%)
17654429
Muestras después
de 06 hras
15132856
QCB
216750861
207094337
-4,46
QCC
2168296266
1949368944
-10,10
-
12519883
11338477
-9,44
-14,28
Tabla 8 Estabilidad a corto plazo a temperatura ambiente
c. Estabilidad a largo plazo.- La variación de las muestras
almacenadas durante sesenta días no debe ser mayor a 20% con
respecto a las muestras frescas.
T° del ensayo –20 ºC
Analito
Ibuprofeno
Promedio de Areas ( n = 3)
Tipo de
muestra
QCA
Muestras frescas
2208733,5
Muestras después
de 60 días
1846960,5
Variación
(%)
-16,38
QCB
21745674,67
24423660,67
12,32
QCC
222527962,2
230477405,7
3,58
-
712119,333
657643
-7,65
Diclofenaco
Tabla 9 Estabilidad a largo plazo
d. Estabilidad de las soluciones stock de ibuprofeno y estándar
interno. No se observó variación mayor al 20% de las muestras
almacenadas con respecto a las muestras frescas.
Promedio de Areas , (n = 5)
T° del ensayo 4.0 ºC
Concentración
referencial
(ug/mL)
Muestras
frescas
Muestras después
de 07 días en
refrigeración
Promedio de
variación (%)
Ibuprofeno
10,00
138130933
120826832,8
-12,53
Diclofenaco
10,00
431640961
427569159
-0,94
Analito
Tabla 10 Estabilidad de las soluciones stock de ibuprofeno y estándar interno
21
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
e. Estabilidad en el automuestreador: La descomposición no debe ser
mayor al 20% de la concentración inicial.
T° del ensayo –20 ºC
Analito
Tipo de
muestra
Ibuprofeno
Diclofenaco
Promedio de Areas ( n = 3)
Muestras frescas
Muestras de
automuestreador
Variación
(%)
QCA
2,1373
2,2115
3,4717
QCB
20,2122
21,0233
4,0129
QCC
165,7947
173,0057
1,0435
-
Tabla 11 Estabilidad en el automuestreador
5.2.2
5.2.2.1
Análisis de datos
Resultados farmacocinéticos
La evaluación se realizó en doce de los catorce voluntarios, debido a que
dos de ellos no cumplieron con lo establecido según el modelo de
Wagner y Nelson.
Para determinar los parámetros farmacocinéticos se empleó la
concentración plasmática y el tiempo.
Concentraciones plasmáticas promedio de Ibuprofeno
400 mg tabletas (n=12)
Tiempo de
muestreo (hras)
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
3,0
3,5
4,0
5,0
6,0
8,0
12,0
Medicamento (ug/mL)
Multifuente
Referencia
4,18
6,66
7,22
12,43
11,48
15,36
15,39
18,70
16,26
17,93
18,51
17,43
18,50
15,02
14,91
12,17
10,81
6,78
6,28
4,40
2,73
2,11
0,66
0,52
Tabla 12 Concentraciones plasmáticas de Ibuprofeno
22
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Resultados de los parámetros farmacocinéticos
Parámetros
Farmacocinéticos
Medicamento
Referencia
Multifuente
AUC(0-t) (ug/mLxh)
81,20
86,85
AUC(t-) (ug/mLxh)
82,83
88,67
18,09
16,90
Cmax
(ug/mL)
Tabla 13 Parámetros farmacocinèticos
Concentraciones plasmáticas máxima
promedio (ug/mL) de Ibuprofeno
Voluntario
Medicamento
1
Referencia
12,1042
Multifuente
10,9400
2
13,9021
25,5733
3
24,9400
15,3490
5
19,6637
16,8092
7
19,1109
18,4556
8
22,3771
15,0199
9
14,6491
17,7580
10
24,1004
16,8622
11
13,8778
24,2645
12
14,9886
15,1050
13
22,1859
17,3379
14
15,2052
18,9841
Promedio
17,705
18,0925
Valor máximo
25,57
24,94
Valor mínimo
10,94
12,1
Tabla 14 Concentraciones plasmáticas máxima promedio
23
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Concentración plasmática
(ug/mL)
Concentraciones plasmáticas promedio
de Ibuprofeno 400 mg
25
GENÉRICO
REFERENCIA
20
15
10
5
0
0
2
4
6
8
10
12
14
tiempo (h)
Gráfico 3.
Comparación de las concentraciones plasmáticas versus tiempo del
medicamento multifuente y del de referencia.
5.2.2.2 Análisis estadístico:
La bioequivalencia se estableció por la aplicación del cálculo estadístico,
con un intervalo de confianza de 90% para la diferencia entre los valores
promedios obtenidos para el producto de prueba Ibuprofeno 400 mg tabletas
y el producto de referencia Motriz 400 mg tabletas, en cuanto a las
variaciones del AUC de concentración - tiempo y de la Cmáx alcanzadas por
cada formulación, después de la transformación logarítmica de los datos.
Para el análisis se empleó:
 Concentraciones plasmáticas y tiempo.
 Sujeto
 Período
 Secuencia
 Tratamiento
 AUC0-t, (Area bajo la curva del tiempo 0 al tiempo t)
 AUC0- , (Area bajo la curva del tiempo 0 al tiempo infinito)
 Cmax, (Concentración plasmática máxima)
 Tmax, (tiempo que se alcanza la concentración plasmática máxima)
 Ke (Constante de eliminación del fármaco)
24
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
 t½ (tiempo de vida media del fármaco)
 Variabilidad intersujeto
 Variabilidad intrasujeto
La evaluación estadística de los datos farmacocinéticos mostró la
equivalencia entre las tabletas de Ibuprofeno del producto multifuente
con el de referencia para los parámetros de AUC y Cmáx, cuyos rangos
de variabilidad se encuentra dentro de los intervalos de 0.80 a 1.25.
Previa a la aplicación de los cálculos para bioequivalencia se aplicó el
análisis de varianza (ANOVA) a los datos transformados al logaritmo
natural, cuantificándose la variabilidad con la que contribuyen los
factores de secuencia, período y tratamiento al diseño del estudio,
encontrándose que ninguno influye de manera significativa.
Los resultados para bioequivalencia con respecto a Cmáx y AUC se
detallan
en los
siguientes
Área Bajo la Curva (AUC)
Intervalo de Confianza 90%
0,96
1,20
Límites
0,80
1,25
Resultado
cuadros.
Bioequivalente
Tabla 15 Resultados de Área bajo la curva
Concentración máxima (Cmáx)
Intervalo de Confianza 90%
0,85
1,14
Límites
0,80
1,25
Resultado
Bioequivalente
Tabla 16 Resultados concentración máxima
5.2.2.3
Archivo de datos:
Los datos generados de las etapas clínica y analítica del estudio están
almacenados en un archivo central con los siguientes documentos:
25
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas

Procedimiento normalizado de operaciones

Documento de aprobación del Comité de Ética

Consentimiento informado de todos los voluntarios.

Historias clínicas de los voluntarios,

Exámenes clínicos a los voluntarios.

Anotaciones clínicas del médico responsable.

Documentación referida al control de calidad de los productos.

Información técnica de cada uno de los métodos de cuantificación y
determinaciones realizada a las muestras de plasma, incluyendo
cromatogramas y reportes.

6.
Documentación del manejo estadístico de los datos.
DISCUSION
Se utilizó la prueba t de Student para determinar que tan alejado están los
valores encontrados de los límites especificados para bioequivalencia.
El intervalo de confianza de la razón de AUC y Cmax del producto test y
referencia se encuentran dentro de las especificaciones (80% – 125%) para
bioequivalencia con un nivel de confianza del 90% (p>0,10).
La comparación de la biodisponibilidad del producto multifuente y del
producto de referencia, se realizó basado en los datos de concentración
plasmática de Ibuprofeno en relación al tiempo, no habiéndose encontrado
diferencias estadísticamente significativas entre los dos medicamentos , para
las variables logotransformadas AUC (p>0,10), ni Cmáx (p>0,10).
La aplicación de los criterios aceptados en la literatura, demostraron al
comparar los medicamentos, un semejante perfil de concentración plasmática
- tiempo; de la misma manera, la razón entre el AUC de concentración de
Ibuprofeno en el tiempo y la razón entre la Cmáx obtenida con cada
producto, estuvieron dentro de los límites de aceptación, tanto para los datos
experimentales como para los resultantes de su transformación logarítmica.
Finalmente, los resultados analíticos y su análisis estadístico de los mismos
fundamentan la conclusión de bioequivalencia entre el medicamento
multifuente Ibuprofeno tabletas 400 mg (Genérico Nacional) y el
medicamento de referencia Motrin tabletas 400 mg del laboratorio
26
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Pharmacia Upjohn, para la velocidad y la cantidad de Ibuprofeno alcanzadas
en el organismo, después de su administración en dosis única a 14
voluntarios sanos, de acuerdo con el diseño experimental.
7.
CONCLUSIÓN
Los resultados del estudio no mostraron diferencias significativas en los
niveles de concentraciones plasmáticas después de la administración de las
dos formulaciones de Ibuprofeno 400 mg tabletas. Por tanto, el diseño del
estudio y la aplicación de los protocolos escogidos permitieron demostrar la
bioequivalencia entre los productos.
8.
Referencias Bibliográficas
1. CPMP (Committee for Proprietary Medicinal Products). Note for
Guidance on the Investigation of Bioavailability and Bioequivalence.
The European Agency for the Evaluation of Medicinal Products (1998).
2. Standard Operating Procedures “The determination of Ibuprofeno in
Human Plasma by LC-MS-MS using Diclofenaco Potásico as the
Internal Standard”. Cartesius Analitical Unit. Institute of Biomedical
Sciences – USP. Sao Paulo – SP – Brasil.
3. British Pharmacopoeia 2002.
4. Harrison PRINCIPIOS DE MEDICINA INTERNA VOL 1 15 a. edición
2001 Publicado por McGraw-Hill Interamericana-División Medicina
5. Goodman G.A, Goodman LS, Gilman A. Las bases farmacológicas de la
terapéutica. 6ta edición 1980. Ciudad de la Habana, Editorial Científico
Técnica 1984: 554 – 57.
6. Benet LZ, Kroetz DL, Sheiner LB. Farmacocinética y Farmacodinamia
de drogas – Goodman and Gilman`s .
7. Hassandazeh M.K. “Quantitative Evaluation of different dosage forms of
ampiciline”. Drug Dev. Ind. Pharm, Hamilton. V 17, n3. p 1795-1810.
1991
8. López, H.G. Zárate, J.V.O. Tellea, C.A. “Biodisponibilidad relativa de
cuatro formas de presentación de ampicilina thihidrato de 500 mg
Revista Colombiana Química Farmacéutica Bogotá v19 n19 p 15-19,
1991.
27
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
9. Puck. J Soep, h Fraux JL. 2In vivo comparison of two galenic forms of
ampicillin Trihydrate Chemotherapy", Basel v 21 n1 p 11-18 1975.
10. C.H. Oliveira, M. Sucupira, J. Ilhia, G. De Nucci. Biodisponibilidad
comparativa de cuatro formulaciones de amoxicilina en voluntarios
sanos, después de una administración de dosis simple”.
11. Porta Valentina, Estudio de Interacción entre la ranitidina y el diclofenaco
en voluntarios sanos después de la administración peroral de voltaren 50.
Universidad de San Paulo – Facultad de Ciencias Farmacéuticas (1992).
12. Storpirtis
Consiglieri,
Biodisponibilidad
y
Bioequivalencia
de
medicamentos: aspectos fundamentales par el planeamiento y ejecución de
estudios. Universidad de San Paulo – Facultad de Ciencias Farmacéuticas
(1995).
13. CDER, Estudios de Biodisponibilidad y Bioequivalencia para productos
farmacéuticos administrados oralmente, Consideraciones Generales,
Centro de Evaluación e investigación de fármacos (CDER) - Octubre
2000.
14. Martindale, “Guía completa de consulta farmacoterapéutica” primera
edición española (2003). Barcelona, España.
15. Ortiz J, Grande M, Isasi J, Validación de métodos analíticos para
estudios en matrices biológicas, CNCC-INS, 2005.
16. Laboratorio de Biodisponibilidad y bioequivalencia, Elaboración de
listas de inyección para estudios de bioequivalencia, CNCC-INS, 2006
17. Villalva O, Organización y planificación de estuarios de bioequivalencia,
CNCC-INS, 2006.
18. Farmacopea de los Estados Unidos de Norteamérica edición 29, 2006.
19. Food and Drug Administration. Center for Drug Evaluation and Research
(CDER). U.S. Department of Health and Human Services. Guidance for
Industry. Bioanalytical Method Validation. FDA .USA. May 2001
20. WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceutical
Preparations. Fortieth Report. WHO Technical Report Series 937. World
Health Organization. Geneva 2006.
9.
ANEXOS
 Anexo 01 Resultados de ensayos físico-químicos

Anexo 02 Perfil de disolución a pH 1,2
28
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas

Anexo 03 Perfil de disolución a pH 4,5

Anexo 04 Perfil de disolución a pH 6,8

Anexo 05 Resultados de perfiles de disolución

Anexo 06 Resultados de ensayos clínicos de los voluntarios

Anexo 07 Signos vitales durante la toma de muestra

Anexo 08 Concentración plasmática de voluntarios

Anexo 09 Parámetros farmacocinéticas de medicamentos multifuente y
de referencia

Anexo 10 Esquema de randomización

Anexo 11 Valores individuales de concentración (ug/mL) vs tiempo
(min) (Gráficos) y parámetros farmacocinéticos (Tabla)

Anexo 12 Análisis Estadístico
29
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ANEXO 01
Resultados de ensayos físico-químicos
Medicamento multifuente :
Ibuprofeno 400 mg tabletas Lote : 004176
Medicamento de referencia:
Motrin 400 mg tabletas
Lote : V9553
Resultados
Ensayos
Especificaciones
Identificación Ibuprofeno,
método HPLC, USP 29
Positivo al principio activo
Contenido de ibuprofeno,
método HPLC, USP 29
Comparación de los
contenidos de ambos
medicamentos
Peso promedio
Disolución, método
Espectrofotómétrico,
UV-VIS, USP 29
Uniformidad de contenido
por variación de pesos,
USP 29
La cantidad hallada no debe
ser menor a 90,0% ni mayor
a 110,0% de la cantidad
declarada
La diferencia entre los
porcentajes obtenidos no
debe ser mayor a 5%
Referencia
Multifuente
Positivo
Positivo
428,53 mg/tab
(107,13%)
422,25 mg/tab.
(105,56%)
1,57%
X = 589,35 mg
X = 602,24 mg
n = 20 unidades
n = 20 unidades
D1 = 98,19%
D1 = 96,31%
El porcentaje disuelto del
D2 = 96,98%
D2 = 99,88%
Principio activo no debe ser
D3 = 96,74%
D3 = 97,56%
menor a 80,0% de la
D4 = 99,81%
D4 = 100,55%
cantidad declarada
D5 = 96,15%
D5 = 96,65%
D6 = 101,39%
D6 = 97,96%
U1 = 108,03 %
U1 = 105,42 %
U2 = 107,21 %
U2 = 106,64 %
U3 = 105,76 %
U3 = 105,85 %
U4 = 107,96 %
U4 = 105,20 %
U5 = 109,56 %
U5 = 104,85 %
U6 = 106,39 %
U6 = 104,02 %
U7 = 106,49 %
U7 = 106,96 %
U8 = 106,62 %
U8 = 104,87 %
U9 = 107,69 %
U9 = 105,43 %
BP 2005
Los porcentajes encontrados
no deben ser menores de
85,0% ni mayores a 115,0%
y la DSR ≤ 6,0%
U10 = 105,54 % U10 = 107,45 %
DSR = 1,14 %
DSR = 1,01 %
30
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ANEXO 02
Perfil de disolución a pH 1,2
Medicamento
Tiempo
(min)
Referencia
Multifuente
Promedio (%)
Promedio (%)
5
3,58
1,29
10
6,94
2,19
15
8,78
3,38
30
9,13
6,17
45
8,90
8,33
60
9,84
10,01
75
9,29
11,12
Ibuprofeno 400 mg tabletas
pH 1,2
30
Multifuente
Referencia
% disuelto
25
20
15
10
5
0
0
25
50
75
100
Tiempo (min)
31
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ANEXO 03
Perfil de disolución a pH 4,5
Medicamento
Tiempo
Referencia
Multifuente
Promedio (%)
Promedio (%)
5
7,14
2,99
10
14,27
6,13
15
19,10
9,37
30
25,66
16,51
45
27,63
21,14
60
28,42
24,61
75
29,01
27,10
(min)
Ibuprofeno 400 mg tabletas
pH 4,5
50
Multifuente
Referencia
% disuelto
40
30
20
10
0
0
25
50
75
100
Tiempo (min)
32
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ANEXO 04
Perfil de disolución a pH 6,8
Medicamento
Tiempo
Referencia
Multifuente
Promedio (%)
Promedio (%)
5
78,72
45,67
10
94,96
71,21
15
96,31
86,25
30
96,93
98,58
45
97,00
99,77
60
97,28
99,21
75
97,26
99,12
(min)
Ibuprofeno 400 mg tabletas
pH 6,8
100
Multifuente
Referencia
% disuelto
80
60
40
20
0
0
25
50
75
100
Tiempo (min)
33
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ANEXO 05
Resultados de perfiles de disolución
Medicamento multifuente : Ibuprofeno 400 mg tabletas Lote : 004176
Medicamento de referencia: Motrin 400 mg tabletas
Ensayos comparativos
Perfil de disolución pH 1,2; OMS
Perfil de disolución pH 4,5; OMS
Perfil de disolución pH 6,8; OMS
Lote : V9553
Especificaciones
Resultados
Comparativos
f2 (50% – 100%)
f2 = 74,54%
f2 (50% – 100%)
f2 = 58,30%
f2 (50% – 100%)
(*)
* La disolución a pH 6,8 para el medicamento de referencia y el de prueba se observa un
porcentaje de liberación de principio activo superior al 85% a los 15 minutos, por lo cual no
se aplica el factor de similitud f2.
34
26,70
26,31
23,53
23,56
25,81
24,06
24,80
21,41
24,39
26,08
23,22
24,56
1
2
3
5
7
8
9
10
11
12
13
14
Valores
Normales
IMC
Vol
3.5 - 5
3,47
3,4
3,38
3,5
3,3
3,58
3,4
3,2
3,3
3,2
3,3
3,81
Albúmina
(g/dL)
Hasta 0,2
0,13
0,20
0,10
0,10
0,20
0,20
0,12
0,13
0,13
2,20
0,30
Bilirrubina
directa
(mg/dL)
0,13
Hasta 0,8
0,27
0,6
0,20
0,53
0,20
0,67
0,45
0,29
0,56
0,40
0,80
Bilirrubina
indirecta
(mg/dL)
0,41
Hasta
40
27
18
15
20
26
36
19
24
15
24
29
28
TGO
(U/L)
Hasta
41
22
13
13
17
20
57
19
29
12
17
26
38
TGP
(U/L)
60 - 110
♂ Hasta 115
♀ Hasta105
70
78
73
82
88
77
78
81
74
73
84
Glucosa
(mg/dL)
83
69
71
69
53
121
67
60
68
60
76
Fosfatasa
Alcalina
(U/L)
72
89
Pre-Estudio
♂ 13.0 18.0
♀ 12.0 16.0
12,3
12,5
12,5
12,6
14,9
14,5
13,3
12,6
15,3
15,3
13,9
13,9
Hb
(g/dL)
ANEXO 06
RESULTADOS DE ENSAYOS CLINICOS DE VOLUNTARIOS
Hasta 200
188
166
165
170
190
166
235
191
199
164
163
220
Colesterol
(mg/dL)
150 - 199
70
60
105
201
66
87
121
54
42
114
68
151
Triglicéridos
(mg/dL)
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
35
26,70
26,31
23,53
23,56
25,81
24,06
24,80
21,41
24,39
26,08
23,22
24,56
1
2
3
5
7
8
9
10
11
12
13
14
Valores
Normales
IMC
Vol
3.5 - 5
4,42
4,66
4,59
3,96
4,75
5,03
3,57
3,96
3,88
4,46
4,07
4,81
Albúmina
(g/dL)
Hasta 0,2
0,16
0,25
0,18
0,15
0,19
0,17
0,15
0,12
0,16
0,23
0,3
0,12
Bilirrubina
directa
(mg/dL)
Hasta 0,8
0,44
0,65
0,32
0,26
0,6
0,47
0,46
0,67
0,36
0,83
0,83
0,33
Bilirrubina
indirecta
(mg/dL)
Hasta
40
19
20
28
18
31
34
14
24
18
21
31
27
TGO
(U/L)
Hasta
41
25
18
30
17
25
38
20
35
17
19
25
40
TGP
(U/L)
60 - 110
♂ Hasta 115
♀ Hasta105
72
100
84
87
93
93
88
86
83
90
84
Glucosa
(mg/dL)
92
68
75
69
59
125
71
63
71
68
74
67
Fosfatasa
Alcalina
(U/L)
72
Post-Estudio
♂ 13.0 18.0
♀ 12.0 16.0
13,0
12,3
13,8
12,7
14,7
15,0
12,0
11,7
15,3
14,8
13,7
13,3
Hb
(g/dL)
ANEXO 06
RESULTADOS DE ENSAYOS CLINICOS DE VOLUNTARIOS
Hasta 200
180
168
165
168
176
169
195
181
203
165
162
220
Colesterol
(mg/dL)
150 - 199
95
61
110
95
82
156
134
112
79
136
73
160
Triglicéridos
(mg/dL)
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
36
14
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
36,6
100/70
36,6
100/70
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
60
90/70
62
36,6
100/60
74
36,5
90/70
62
36,6
100/60
72
36,6
90/60
90/60
P.A.
37,2
36,8
36,8
Tº
62
60
60
37,2
92/60
92/60
Pulso
P.A.
P.A.
37
36,5
36,5
37
60
60
Tº
90/60
90/60
72
36,4
36,4
110/80
62
62
72
100/70
100/70
110/80
62
36,1
62
36,1
Pulso
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Tº
100/70
60
60
100/70
100/72
100/72
Pulso
P.A.
59
36,5
36,5
Tº
36,5
52
52
60
90/60
90/60
Pulso
P.A.
36,6
37
37
Tº
P.A.
62
36,5
36,5
110/60
64
64
62
110/68
110/68
110/60
60
36,3
60
90/70
36,3
0.5
90/70
Basal
Pulso
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Voluntario/Hora
1
36,6
64
100/60
36,4
56
100/80
37,1
64
98/60
36,7
64
98/60
37
60
100/80
36,6
60
90/60
36,8
68
90/60
36,3
52
100/70
36,5
58
110/60
36,3
62
100/68
36,6
61
90/70
36,9
64
110/60
36,4
60
110/68
36,4
60
90/70
1.5
36,7
74
100/60
36,4
58
100/80
37,2
64
90/70
36,5
64
90/60
37
56
90/70
36,5
59
100/60
36,5
68
90/60
36,5
56
100/70
37
60
100/60
36,7
58
100/68
36,5
64
100/70
36,7
61
100/70
36,0
64
110/70
36,5
62
100/70
36,7
62
100/60
36,6
56
90/70
37,4
59
100/50
36,6
64
90/60
36,9
56
100/70
37,2
61
90/60
36,8
68
100/60
36,5
60
100/60
36,5
62
100/50
36,9
54
90/60
36,7
60
100/70
36,7
60
100/70
36,4
60
110/70
36,4
60
100/70
2
PERIODO I
36,8
64
94/60
36,5
60
90/60
37,5
68
100/50
36,7
60
90/56
36,9
60
100/70
36,8
62
90/60
36,9
64
98/60
36,1
60
100/60
36,5
58
110/70
36,8
52
110/60
36,5
60
100/70
36,9
62
110/70
36,3
64
110/70
36,3
58
100/70
2.5
36,5
64
100/60
36,6
56
90/60
37,4
68
90/60
36,9
64
88/60
36,7
64
100/60
37
58
100/60
36,9
64
100/60
36,5
56
90/70
36,5
60
90/50
36,8
54
100/60
36,6
56
100/70
37
68
110/60
36,6
64
112/68
36,5
60
100,70
3
36,7
64
100/60
36,4
60
90/60
37,2
70
90/60
36,9
64
88/60
37
58
90/60
36,7
66
90/60
36,9
64
100/68
36,3
64
90/60
37
60
100/70
36,8
56
100/60
36,5
56
90/60
36,9
66
100/60
36,6
60
112/68
36,5
60
100/70
3.5
SIGNOS VITALES DURANTE LA TOMA DE MUESTRA
4
37,2
64
90/60
36,5
56
90/60
37,4
64
110/70
37
64
100/60
37
56
90/60
37
65
100/70
36,8
64
100/70
36,3
56
90/60
36,5
60
100/60
36,7
52
98/60
36,7
56
100/60
37
67
100/70
36,7
64
100/62
36,5
60
100/70
5
37
72
100/60
36,6
68
90/60
37,2
82
100/60
36,7
64
90/60
37
60
90/60
36,8
70
100/60
36,7
64
90/60
36,5
62
100/60
36,9
60
90/50
37
56
104/60
36,9
68
115/70
37,2
67
110/60
36,9
60
120/60
36,6
64
100/70
6
37,1
80
110/60
36,6
68
100/60
37,5
62
100/50
37,1
72
98/60
36,7
60
90/60
37
60
90/60
36,8
72
90/60
36,6
60
120/60
36,7
60
100/50
36,6
56
100/60
36,3
80
100/60
37
66
100/60
36,8
64
110/70
36,8
72
100/60
8
36,9
64
110/60
36,8
68
100/60
37,5
54
100/60
37
64
90/50
36,9
80
100/50
36,8
62
90/60
36,9
60
100/60
36,8
72
100/50
37,2
60
90/50
37,1
54
90/60
36,8
79
100/60
37,2
62
100/60
37
60
100/60
36,8
69
110/70
12
36,7
64
94/60
36,8
72
90/60
37,4
54
100/60
37
64
100/60
37,4
64
110/70
36,5
64
100/60
37,1
68
90/60
36,7
72
110/70
37
61
100/60
37
56
90/60
36,8
64
100/60
37,4
58
100/60
37,2
68
110/60
36,9
76
110/80
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ANEXO 07
37
14
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
90/60
64
36,2
100/70
64
36,2
100/70
68
37,3
95/60
64
36,5
110/80
64
36,7
96/60
62
36,2
100/60
58
36,3
100/60
74
37,2
95/60
64
36,5
90/60
67
36,7
100/70
90/60
P.A.
60
36,7
36,7
Tº
36,5
64
64
60
95/60
95/60
Pulso
P.A.
36,5
36,3
P.A.
36
36,5
36,4
Tº
64
66
62
110/70
100/70
100/60
36,3
36,4
70
56
100/60
100/60
58
Pulso
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Tº
Pulso
100/60
100/80
P.A.
66
100/70
37
Tº
36,6
68
36,5
62
Pulso
58
100/60
110/60
P.A.
36,6
68
Tº
Pulso
36,6
120/60
120/70
68
78
36,5
68
36,5
0.5
110/70
Basal
120/85
36,7
P.A.
Tº
Pulso
P.A.
Voluntario/Hora
1
36,9
64
110/70
36,7
62
90/60
37,2
76
100/60
36,8
60
100/70
36,2
60
90/60
36,7
60
90/70
36,8
64
95/60
36,3
68
96/60
36,4
64
110/80
36,5
54
100/60
36,5
68
100/70
36,7
62
100/63
36,9
64
120/70
36,4
60
110/80
1.5
37
62
100/50
36,5
72
90/60
37,2
76
100/60
36,2
68
100/70
36,4
62
90/70
36
62
90/70
36,8
62
90/60
36,3
64
96/60
36,5
60
110/70
36,6
54
100/60
36,7
64
100/70
36,5
64
100/60
36,7
64
120/60
36,4
64
110/70
37
68
100/60
36,7
72
90/60
37,2
68
90/50
36,6
64
100/70
36,4
60
88/60
36,8
60
100/70
36,6
64
94/60
36,3
64
100/60
36,5
62
110/70
36,7
52
96/60
36,7
64
110/70
36,5
72
90/60
36,7
62
120/70
36,6
70
115/80
2
PERIODO II
36,8
64
100/50
36,8
64
100/60
37,1
72
100/50
36,4
62
105/70
36,4
62
90/60
36,7
62
100/70
36,9
64
95/60
36,5
68
100/60
36,6
64
110/80
36,7
52
100/70
36,5
60
100/70
36,8
68
90/60
36,7
68
120/60
36,4
62
115/80
2.5
36,9
68
90/50
36,6
72
90/60
37,2
72
90/50
37
60
105/70
36,6
60
90/60
36,4
64
95/65
37
72
100/60
36,9
68
110/70
36,7
64
110/80
36,5
52
110/70
36,7
64
110/70
36,5
64
97/60
36,4
64
120/70
36,6
68
120/80
3
37
72
100/60
36,8
64
100/60
37,3
80
100/60
36,8
68
110/70
36,5
60
90/60
36,7
66
100/70
37
64
90/62
36,5
68
100/60
36,7
60
110/80
36,6
50
100/60
36,6
60
100/70
36,5
68
100/60
36,7
60
120/60
36,6
64
115/80
3.5
SIGNOS VITALES DURANTE LA TOMA DE MUESTRA
4
37
68
100/60
36,7
68
90/60
37,2
76
100/60
36,9
60
100/70
36,5
62
100/70
36,6
64
100/70
37
64
90/60
36,6
70
100/60
36,9
70
110/80
36,6
54
110/60
36,5
62
105/80
36,5
68
92/60
36,8
60
120/70
36,4
64
115/80
5
36,9
80
110/60
37
72
90/60
37,2
76
100/50
37
80
105/70
36,4
60
90/60
36,5
64
105/80
36,8
72
90/60
36,4
68
110/70
37
68
110/80
36,5
52
106/70
36,7
64
105/70
37,0
68
100/60
36,7
64
126/70
36,6
80
120/80
6
37
72
110/70
37
68
100/70
37,4
76
100/60
37
60
110/80
36,5
64
100/60
36,3
68
100/75
36,5
80
100/60
36,6
64
90/60
36,8
70
120/80
36,6
52
90/60
36,6
62
110/70
36,8
64
90/60
36,7
68
100/60
36,8
66
110/80
8
36,1
72
100/60
37,2
72
100/60
37,5
78
110/60
37
70
100/80
36,7
68
90/60
36,4
64
100/70
37,3
78
100/60
37
70
96/60
37
60
120/80
36,6
52
100/60
36,7
58
110/80
37,4
72
100/60
36,7
64
110/62
36,7
68
120/80
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
38
12
37,5
76
110/70
37
72
90/60
37,5
76
110/70
36,8
78
110/80
36,7
68
90/60
36,2
76
110/70
37
68
110/70
36,7
72
100/60
36,2
72
120/80
37,3
64
110/70
36,5
68
110/80
37
72
100/60
37
70
100/60
37
68
120/80
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ANEXO 08
Concentración plasmática de voluntarios
Voluntario
Tiempo
(hras)
0
1
2
3
5
Referencia
Prueba
Referencia
Prueba
Referencia
Prueba
Referencia
Prueba
0
0
0
0
0
0
0
0
0,5
2,7424
0,741
0,0675
16,6181
13,3618
1,0614
9,3763
0,3639
1,0
9,5702
0,888
0,1874
nd
14,4437
4,1760
15,1689
nd
1,5
10,8044
3,165
0,4068
24,6771
18,7347
10,9729
nd
5,0750
2,0
12,3117
8,310
8,5126
26,6598
22,7908
14,2568
18,3300
16,8529
2,5
16,1117
9,672
17,9689
16,5809
19,1499
16,1347
14,7230
20,1853
3,0
11,8241
13,176
21,1797
16,3618
15,7220
17,7549
17,4845
18,4827
3,5
10,1330
nd
22,5691
11,5705
11,0958
16,1665
17,9645
25,5913
4,0
10,9768
nd
15,4605
8,4895
5.00
13,6732
13,3837
19,5038
5,0
5,9112
16,108
10,7101
7,9970
7,3570
9,1960
10,2855
17,6289
6,0
3,7586
8,518
5,6193
3,0917
3,4910
6,5360
5,8804
15,1874
8,0
1,1858
2,761
2,6055
2,4020
1,5456
3,3760
3,3213
6,5272
12,0
0,4532
0,712
0,9349
0,5519
0,3546
0,7351
1,4714
2,3558
Voluntario
Tiempo
(hras)
0
7
8
9
Referencia Prueba
Referencia Prueba
10
Referencia Prueba
Referencia
Prueba
0,5
7,7802
6,7712
14,6730
1,9257
0,9564
0,2456
2,1896
2,0832
1,0
19,4735
15,7553
22,8501
3,8044
8,2092
8,8061
13,0820
5,6775
1,5
18,2625
16,0316
23,5706
10,6890
14,8344
14,1473
18,7956
6,2094
2,0
19,8885
18,0027
18,4175
11,7737
13,6014
18,8421
25,9173
14,4543
2,5
16,8889
16,4713
17,2948
11,6671
10,8959
21,4048
28,7390
20,3884
3,0
19,3036
10,7120
12,5173
18,2449
nd
19,2288
28,4327
23,2184
3,5
9,8242
14,6187
10,8620
26,5274
nd
18,7122
22,3807
16,7743
4,0
12,1855
12,3715
9,6079
13,3142
11,3834
14,0083
15,5609
17,6895
5,0
7,1827
6,1517
5,1766
10,8640
6,9151
6,9646
nd
13,2638
6,0
4,3889
4,7628
2,8101
3,5174
4,8615
4,0198
5,9667
4,6014
8,0
3,0005
1,6178
1,2461
1,2567
1,5933
2,0303
2,5068
2,0261
12,0
0,6641
0,5800
0,1905
0,1641
0,4864
0,3320
0,3724
0,3170
39
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Voluntario 11
Tiempo
(hras)
0
12
13
14
Referencia
Prueba
Referencia
Prueba
Referencia
Prueba
Referencia
Prueba
0
0
0
0
0
0
0
0
0,5
1,4950
0,2849
7,3871
10,2173
18,6744
1,5638
1,1727
8,3383
1,0
6,4787
1,2373
9,1150
13,9888
20,1393
6,3913
10,3961
11,4909
1,5
11,2561
1,0352
nd
15,1616
23,2386
10,5752
13,7318
19,9688
2,0
nd
0,7852
15,4826
17,8877
29,3196
19,7697
21,1784
17,0708
2,5
13,1157
13,0890
17,9798
15,3711
22,6046
18,2398
19,6894
15,8743
3,0
13,6089
38,4973
17,3367
14,8585
15,9026
16,7381
18,3788
14,7915
3,5
16,6056
32,8569
12,4388
15,7820
16,1096
14,7477
15,2236
10,1477
4,0
14,5535
32,6723
8,6950
12,4460
13,9529
11,8651
9,9533
7,9639
5,0
4,8677
20,7172
7,5049
7,6487
7,3222
8,9622
1,3070
4,1717
6,0
3,4340
11,2872
3,3352
4,1845
5,9479
5,7368
3,2881
3,8672
8,0
1,1034
4,6677
1,5121
1,3540
3,7975
3,0727
1,9039
1,6663
12,0
0,2068
1,0464
0,3674
0,4412
0,5493
0,4991
0,1665
0,2103
nd.- No disponible. Estos datos no fueron considerados por tener interferencias durante la corrida
cromatográfica debido a una contaminación del plasma a esos tiempos.
40
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ANEXO 09
PARAMETROS FARMACOCINETICOS DE MEDICAMENTOS MULTIFUENTE
Y DE REFERENCIA
Medicamento multifuente
Voluntario
ABC(0 - 12 hrs)
ABC(0 - inf.)
Cmáx
Tmáx
ka
ke
t 1/2
1
74,503
76,2711
10,94
2,56
0,38
0,40
1,72
2
93,8694
95,4558
25,57
0,75
3,37
0,35
1,99
3
81,1148
83,1486
15,35
1,86
0,76
0,36
1,92
5
123,9662
131,7495
16,81
2,85
0,40
0,30
2,29
7
77,7693
79,4496
18,46
1,15
1,77
0,35
2,01
8
72,5401
72,8614
15,02
1,78
0,62
0,51
1,36
9
80,949
81,7375
17,76
1,57
0,92
0,42
1,65
10
84,5481
85,2549
16,86
1,83
0,66
0,45
1,55
11
122,1408
124,6476
24,26
1,83
0,70
0,42
1,66
12
79,8378
80,9405
15,11
1,91
0,67
0,40
1,73
13
80,6952
81,9013
17,34
1,62
0,88
0,41
1,67
14
70,2061
70,6786
18,98
1,13
1,54
0,45
1,56
Promedio
86,8450
88,6747
17,7049
1,7367
1,0558
0,4017
1,7592
CV %
20,68
22,05
22,47
33,44
79,48
13,96
14,33
Medicamento de Referencia
Voluntario
ABC(0 - 12 hrs)
ABC(0 - inf.)
Cmáx
Tmáx
ka
ke
t 1/2
1
60,99
62,2319
12,10
1,73
0,86
0,37
1,89
2
75,87
79,0591
13,90
1,74
1,00
0,29
2,37
3
83,32
84,1699
24,94
0,82
2,70
0,42
1,66
5
96,95
103,4302
19,66
0,78
3,85
0,23
3,05
7
88,95
90,9602
19,11
1,37
1,37
0,33
2,10
8
80,81
81,2314
22,38
1,09
1,62
0,45
1,53
9
63,87
65,1961
14,65
1,35
1,29
0,37
1,87
10
109,4182
110,2200
24,10
1,62
0,80
0,46
1,49
11
62,0306
62,4790
13,88
1,58
0,84
0,46
1,50
12
70,3194
71,3242
14,99
1,51
1,08
0,37
1,90
13
112,194
113,6549
22,19
1,74
0,83
0,38
1,84
14
69,6342
69,9586
15,21
1,67
0,69
0,51
1,35
Promedio
81,1964
82,8263
18,0921
1,4167
1,4108
0,3867
1,8792
CV %
21,74
22,01
24,87
24,48
66,93
20,49
24,90
41
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ANEXO 10
Esquema de Randomización
SUJETO
Nº
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
PERIODO I
Fecha: 14-10-2006
T
T
T
T
R
T
R
R
T
R
T
T
T
R
PERIODO II
Fecha:21-10-2006
R
R
R
R
T
R
T
T
R
T
R
R
R
T
T= Medicamento multifuente: Ibuprofeno 400 mg, tabletas, Lote 004176 y F.V.
Abril 2009, adquirido en la farmacia de DIGEMID (Genérico nacional)
R= Medicamento de Referencia: Motrin 400 mg tabletas, Lote U9553, de
laboratorio Pharmacia Upjohn, F.V. 06 2007, (Química Suiza)
42
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
ANEXO 11
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V01
Vol 1
Concentración
(ug/mL)
25
Multifuente
Referencia
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
74.5030
76.2711
10.94
2.56
0.40
1.72
60.9942
62.2319
12.10
1.73
0.37
1.89
43
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V02
Vol 2
Concentración
(ug/mL)
35
Multifuente
Referencia
30
25
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
93.8694
95.4558
25.57
0.75
0.35
1.99
75.8668
79.0591
13.90
1.74
0.29
2.37
44
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V03
Vol 3
Concentración
(ug/mL)
25
Multifuente
Referencia
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
81.1148
83.1486
15.35
1.86
0.36
1.92
83.3187
84.1699
24.94
0.82
0.42
1.66
45
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V05
Vol 5
Concentración
(ug/mL)
30
Multifuente
Referencia
25
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
123.9662
131.7495
16.81
2.85
0.30
2.29
96.9489
103.4302
19.66
0.78
0.23
3.05
46
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V07
Vol 7
Concentración
(ug/mL)
25
Multifuente
Referencia
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
Tiempo (h)
12.5
15.0
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
77.7693
79.4496
18.46
1.15
0.35
2.01
88.9455
90.9602
19.00
1.37
0.33
2.10
47
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V08
Vol 8
Concentración
(ug/mL)
30
Multifuente
Referencia
25
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
72.5401
72.8614
15.02
1.78
0.51
1.36
80.8096
81.2314
22.38
1.09
0.45
1.53
48
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V09
Vol 9
Concentración
(ug/mL)
30
Multifuente
Referencia
25
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Prueba
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
80.9490
81.7375
17.76
1.57
0.42
1.65
63.8860
65.1961
14.65
1.35
0.37
1.87
49
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V10
Vol 10
Concentración
(ug/mL)
30
Multifuente
Referencia
25
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
84.5481
85.2549
16.86
1.83
0.45
1.55
109.4182
110.2200
24.10
1.62
0.46
1.49
50
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V11
Vol 11
45
Multifuente
Referencia
Concentración
(ug/mL)
40
35
30
25
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
122.1408
124.6476
24.26
1.83
0.42
1.66
62.0306
62.4790
13.88
1.58
0.46
1.50
51
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V12
Vol 12
Concentración
(ug/mL)
25
Multifuente
Referencia
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
79.8378
80.9405
15.11
1.91
0.40
1.73
70.3194
71.3242
14.99
1.51
0.37
1.90
52
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V13
Vol 13
35
Multifuente
Referencia
Concentración
(ug/mL)
30
25
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
80.6952
81.9013
17.34
1.62
0.41
1.67
112.1940
113.6549
22.19
1.74
0.38
1.84
53
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Valores individuales de Concentración (ug/mL) vs Tiempo (h)
V14
Vol 13
35
Multifuente
Referencia
Concentración
(ug/mL)
30
25
20
15
10
5
0
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
Tiempo (h)
Parámetros Farmacocinéticos
Parámetros
ABC 0 – t (último) (ug*mL/mL)
ABC 0 – t (infinito) (ug*mL/mL)
Cmáx
Tmáx
Ke
T1/2
Ibuprofeno
Multifuente
Referencia
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
(Método de los trapecios)
Log - Lineal
70.2061
70.6786
18.98
1.13
0.45
1.56
69.6342
69.9586
15.21
1.67
0.51
1.35
54
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Anexo 12
Análisis Estadístico
Ibuprofeno vs. Motrin
Análisis paramétrico de los datos transformados a ln para evaluar Cmáx
Prueba de ANOVA para diferencias entre tratamientos en datos transformados a ln.
P = 0.05
Razón geométrica de las medias = 98.43 %
Intervalos de confianza al 90% . Efecto tratamiento (razón de medias):
84.85 % -
114.18%
Dos pruebas T de una sola cola para valores transformados a logaritmo:
- P( 0.80 < r < 1.25 ) =
1.0
- P( r <= 0.80 )
=
0.0
- P( r >= 1.25 )
=
0.0
Ibuprofeno vs. Motrin
Análisis paramétrico de los datos transformados a ln para evaluar ABC
Prueba de ANOVA para diferencias entre tratamientos en datos transformados a ln.
P = 0.05
Razón geométrica de las medias = 107.31%
Intervalos de confianza al 90% . Efecto tratamiento (razón de medias):
120.00 %
96.00% -
Dos pruebas T de una sola cola para valores transformados a logaritmo:
- P( 0.80 < r < 1.25 ) =
1.0
- P( r <= 0.80 )
=
0.0
- P( r >= 1.25 )
=
0.0
55
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Bioequivalencia Ibuprofeno vs. Motrin
ANÁLISIS DE VARIANZA
Ln AUC
Suma de cuadrados
Grados de
Libertad
Cuadrados
mínimos
F
p
0.632582
11
0.05751
2.690604
0.065075
0.166537
1
0.16654
3.573403
0.088012
Sujeto(secuencia) SSC
0.466045
10
0.04660
2.180488
0.117445
SSI=SSS+SSC
0.000000
0
0.00000
0
0
Intra-sujetos
Formulation SSF
0.000000
0
0.00000
0
0
0.029868
1
0.02987
1.397425
0.264502
Periodo
SSP
0.085728
1
0.08573
4.010945
0.073054
Residuales
SSR
0.213734
10
0.02137
0.000000
0.000000
SE
0.0597
Total
SST
0.961911
23
0.04182
0.000000
0.000000
n
12
Suma de cuadrados
Grados de
Libertad
Cuadrados
mínimos
F
p
0.719511
11
0.065410
1.625232
0.226309
0.128293
1
0.128293
2.169984
0.171493
Sujeto(secuencia) SSC
0.591218
10
0.059122
1.468987
0.277156
SSI=SSS+SSC
0.000000
0
0.000000
0.000000
0.000000
Intra-sujetos
Formulation SSF
0.000000
0
0.000000
0.000000
0.000000
0.001507
1
0.001507
0.037456
0.850415
Periodo
SSP
0.106553
1
0.106553
2.647496
0.134772
Residuales
SSR
0.402466
10
0.040247
0.000000
0.000000
SE
0.08
Total
SST
1.230038
23
0.053480
0.000000
0.000000
n
12.00
Fuente de Variación
Entre Sujetos SSI
Secuencia
SSS
LnCmax
Fuente de Variación
Entre Sujetos SSI
Secuencia
SSS
56
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Bioequivalencia : Ibuprofeno vs. Motrin
ANÁLISIS DE BIOEQUIVALENCIA
Voluntario
Lncmaxtest
Lncmaxref
LnT-LnR
13
5
1
2
7
3
9
11
8
12
10
14
2.392426
3.241420
2.853016
2.821974
2.731115
2.915606
2.709383
2.824944
2.876949
2.943386
3.188829
2.715357
3.099642
2.978586
2.493205
2.631889
2.950212
3.216473
2.684440
2.630449
3.108168
2.707383
3.182212
2.721953
-0.707216
0.262834
0.359811
0.190085
-0.219096
-0.300867
0.024942
0.194495
-0.231219
0.236002
0.006617
-0.006596
Voluntario
LnAUCtest
LnAUCref
LnT-LnR
13
5
1
2
7
3
9
11
8
12
10
14
4.405515
4.880902
4.375123
4.288559
4.445646
4.258143
4.334294
4.558663
4.420629
4.403513
4.825491
4.393714
4.130868
4.370196
4.432837
4.177400
4.134831
4.267236
4.733167
4.638897
4.510422
4.397302
4.702478
4.247904
0.274647
0.510707
-0.057715
0.111159
0.310815
-0.009093
-0.398873
-0.080234
-0.089793
0.006211
0.123012
0.145811
LnT(1) - LnR(2)
Razón Test/Ref
SE
two tailed t(0.05,10)
IC90%
antiLn
Limits
squared IC limits
Resultado
LnT(1) - LnR(2)
Razón Test/Ref
SE
two tailed t(0.05,10)
IC90%
antiLn
Limits
squared IC limits
Resultado
-0.164293
1.1418
1.2500
0.8485
0.8000
0.01758056 0.02699221
Bioequivalente
0.070555
1.073103
0.059684
1.812462
0.178730
-0.037621
1.20
1.25
0.96
0.8
0.031945
0.001415
Bioequivalente
(2) LnMedioCmaxRef
(1) LnMedioCmaxTest
SE, Error estándar ( LnCmax ) :
SE, Error estándar ( LnAUC ):
-0.015851
0.984274
0.081901
1.812462
0.132592
0.0819
0.0597
57
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
10.
Efecto o impacto de los resultados obtenidos
El haber realizado este estudio, nos permite conocer que el medicamento
multifuente a demostrado que alcanza la misma velocidad y concentración del
principio activo que el medicamento de referencia; por lo tanto se está
asegurando la misma respuesta terapéutica en el paciente que la que se obtendría
con el innovador, logrando de esta manera poner al alcance de la población este
medicamento genérico de mucho menor costo que el innovador y a la vez que
satisfaga las exigencias de calidad y eficacia.
Se comprende entonces que este medicamento multifuente puede ser
intercambiable, tal es así que es bioequivalente al producto de referencia o de
marca y que puede ser empleado en vez de este en la práctica clínica.
11.
Estrategias de divulgación
El presente informe será presentado al Director General del Centro Nacional de
Control de Calidad y a las Direcciones de la OGITT, OGAT del Instituto
Nacional de Salud (INS), para su evaluación respectiva.
El mecanismo de su publicación estará sujeto a los medios de publicación y
divulgación con los que cuenta el INS.
58
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
Firmas de los investigadores:
------------------------------------Q.F. Ofelia del Rosario Villalva Rojas
--------------------------------------Q.F. Miguel Angel Grande Ortiz
-----------------------------------------Q.F. Juan Jesús Ortiz Bernaola
-----------------------------------------Q.F. Jacqueline Inés Isasi Rosas
----------------------------------------
------------------------------------------
Q.F. Dula Dina Yantas Visurraga
Dr. Víctor Fiestas Solórzano
Chorrillos, 02 de abril del 2007
59
ESTUDIO DE BIOEQUIVALENCIA DE IBUPROFENO 400 mg. Tabletas
60