HOSPITAL NACIONAL DE PARAPLÉJICOS SERVICIO DE SALUD DE CASTILLA-LA MANCHA UNIDAD DE NEUROLOGÍA EXPERIMENTAL UNIDAD ASOCIADA AL INSTITUTO CAJAL DEL CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTÍFICAS 2002-2008 1 Hospital Nacional de Parapléjicos Finca La Peraleda, s/n 45071 Toledo Tel.: 925 247754 Fax: 925 247745 2 INVESTIGACIÓN BÁSICA 1. DESCRIPCIÓN DE LA UNIDAD DE NEUROLOGÍA EXPERIMENTAL 2. GRUPO DE REPARACIÓN NEURAL Y BIOMATERIALES 3. GRUPO DE FUNCION SENSORIMOTOR 4. GRUPO DE NEUROINFLAMACIÓN 5. GRUPO BIOINGENIERIA Y NEUROFISIOLOGIA EXPERIMENTAL 6. GRUPO DE NEUROLOGÍA MOLECULAR 7. GRUPO DE NEUROBIOLOGÍA DEL DESARROLLO 8. GRUPO DE NEUROPROTECCIÓN MOLECULAR 9. GRUPO DE BIOLOGIA DE MEMBRANA Y REPARACION AXONAL 10. GRUPO DE FISIOPATOLOGÍA VASCULAR 11. GRUPO DE PLASTICIDAD NEURAL- INSTITUTO CAJAL (CSIC) INVESTIGACIÓN CLÍNICA 1. GRUPO DE INVESTIGACIÓN SOBRE EXPLORACIÓN FUNCIONAL Y NEUROMODULACIÓN DEL SISTEMA NERVIOSO. GRUPO FENNSI. 2. UNIDAD DE BIOMECÁNICA Y AYUDAS TÉCNICAS. 3. EQUIPO DE MEDICINA INTERNA. 4. EQUIPO DE REEDUCACIÓN DE LA MARCHA Y RECUPERACIÓN FUNCIONAL 5. EQUIPO DE REHABILITACIÓN SEXUAL. 6. EQUIPO DE METODOLOGÍA CLÍNICA. 7. EQUIPO DE TRAUMATOLOGÍA. 3 INTRODUCCIÓN DE LA UNIDAD DE NEUROLOGÍA EXPERIMENTAL La Unidad de Neurología Experimental del Hospital Nacional de Parapléjicos (HNP) comenzó su andadura en el año 2002, con el objetivo de convertirse en un centro de referencia nacional e internacional en el estudio de la fisiopatología de la lesión medular y el desarrollo de estrategias reparadoras desde una perspectiva multidisciplinar. En este sentido, la Unidad de Neurología Experimental tiene como principal cometido complementar la excelencia asistencial del HNP con la incorporación de grupos de investigación preclínica que aporten nuevos conocimientos y desarrollen estratégias terapéuticas que puedan trasladarse a la clínica. El objetivo último es, por tanto, generar una infraestructura que permita estudiar la lesión medular de origen traumático o degenerativo, desde sus aspectos más moleculares hasta la evaluación en pacientes de los tratamientos que se hayan demostrado eficaces en modelos experimentales y ensayos preclínicos. Para garantizar la creación de una Unidad de Neurología Experimental acorde al nivel de excelencia clínica del Hospital Nacional de Parapléjicos, el Servicio de Salud de Castilla-La Mancha (SESCAM) encargó la organización de las áreas de conocimiento y la selección de los responsables de los grupos de investigación preclínica al Doctor Manuel Nieto Sampedro, profesor de investigación del Instituto Cajal del Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC), que es uno de los referentes nacionales en el campo de la neurobiología de las lesiones del sistema nervioso. Desde su creación hace 5 años, la Unidad de Neurología Experimental ha pasado de estar formada por dos investigadores, procedentes del grupo del Profesor Nieto Sampedro, a contar con 9 grupos de investigación independientes que engloban a 31 investigadores doctores, a 18 investigadores predoctorales, 2 facultativos especialistas de área, 13 técnicos de laboratorio. Además de este importante aumento de recursos humanos, la consolidación del proyecto científico se comenzó a materializar en los años 2005 y 2006 con la publicación y el envío para revisión de los 6 primeros trabajos realizados íntegramente en la Unidad de Neurología Experimental. La Unidad de Neurología Experimental se constituyó como unidad asociada al Instituto Cajal del CSIC en el año 2003, recientemente el convenio de asociación seha renovado y ampliado con la incorporación de los profesores del CSIC Carmen Guaza Rodríguez y Luis Miguel García Segura. Por otra parte, se ha creado una nueva unidad asociada al área de materiales del CSIC, a través del Instituto de Ciencias de Materiales de Barcelona y del Instituto de Cerámica y Vidrio (Dra. Nieves Casaña Pastor y Prof. José Ramón Jurado). En esta línea expansiva se ha puesto recientemente en marcha el Plan Director del Hospital Nacional de Parapléjicos, fruto de un convenio de colaboración entre la Administración General del Estado y la Comunidad Autónoma de Castilla-La Mancha. Este Plan inicia una nueva etapa de expansión y de renovación del Hospital, el cual con una inversión cercana a los 30 millones de euros prevé la construcción de, entre otros, un edificio anexo al actual hospital con una área dedicada a la investigación que contará con más de 6000 m2, ampliando el número de laboratorios de investigadores, así como la puesta en marcha de diversos servicios de apoyo a la investigación. Esto permitirá crear una Unidad de Investigación compuesta por aproximadamente 18 grupos de investigación complementarios, con una plantilla asociada de unas 200 personas y un soporte técnico de servicios de apoyo a la investigación que permitan proponer y desarrollar proyectos de investigación del más alto nivel científico, equiparando el Hospital Nacional de Parapléjicos a Centros de Referencia 4 Internacional en el campo de la lesión medular como el Reeve-Irvine Research Center (USA), Spinal Trauma and Repair Laboratories – Ohio State University (USA), Kentucky Spinal Cord Injury Research Center (USA), The Brain Repair Centre – Cambridge University (Reino Unido), Brain Research Institute – University and ETH Zurich (Suiza) o el Departamento de Neurociencias del Instituto Karolinska (Suecia). Desde la puesta en marcha de la Unidad de Investigación del Hospital Nacional de Parapléjicos el Servicio de Salud de Castilla-La Mancha está realizando un importante esfuerzo inversor para equipar los laboratorios con los instrumentos y las infraestructuras necesarias para poder desarrollar una labor investigadora de calidad. El año 2007 ha sido un año clave para concretar las políticas de crecimiento y consolidación ya que la Unidad ha pasado de 6 a 9 grupos experimentales, al tiempo que se han incrementado significativamente el número de ayudas concedidas para proyectos de investigación. Este aumento significativo, tanto en forma de recursos humanos y ayudas para proyectos, ha venido acompañado con las primeras dotaciones de lo que se consideraría grandes equipos o infraestructuras de uso común imprescindibles para garantizar el crecimiento y consolidación de la Unidad durante los próximos años, destacamos entre otras: La construcción de un animalario con nivel de bioseguridad 2, provisional hasta la finalización del nuevo centro de investigación del HNP prevista para primeros del 2009, dotado con 6 salas independientes para la estabulación de ratas y ratones, incluidos animales transgénicos o que hayan sido tratados con terapias que impliquen el uso de virus recombinantes o células modificadas genéticamente. La adquisición de un citómetro de flujo FACSARIA de última generación con capacidad para selección celular, el cual va a resultar de gran utilidad para los grupos con interés en la selección y/o caracterización de poblaciones celulares específicas presentes en la lesión, o la selección de células a partir de animales transgénicos o que han sido modificadas “ex vivo”. La adquisición de un microscopio confocal espectral Leica TCS SP5, el cual ya se halla instalado y está siendo utilizado principalmente en estudios de caracterización del fenotipo de células transplantadas, así como su localización e interacción con células endógenas en la zona de lesión. La adquisición de un laboratorio de neurofisiología avanzada con capacidad para registrar hasta 32 canales simultáneos “in vivo”. Este equipo está siendo utilizado principalmente por el Grupo FENNSI en la caracterización a nivel electrofisiológico “in vivo” de las alteraciones funcionales a nivel de la corteza motora y sensorio-motora tras una lesión medular. En este contexto, la Unidad de Neurología Experimental del Hospital Nacional Parapléjicos se ha dotado durante el presente año con una serie de infraestructuras de alta tecnología para sus Servicios de Apoyo a la Investigación lo que permitirá el abordaje de una patología tan compleja como la lesión medular desde multiples perspectivas. El estudio de la fisiopatología y el desarrollo de estrategias combinadas que afronten todos los aspectos de una lesión medular implican el uso de técnicas de biología molecular, biología celular, animales transgénicos, microcirugía, neurofisiología, histología, bioingenieria y neuroimagen. Este amplio espectro de técnicas impide pensar en un centro en el que los grupos de investigación puedan desarrollar proyectos competitivos sin ese soporte técnico, ya que implica la adquisición de grandes equipos con un elevado coste económico y de mantenimiento, sólo asequible a través de convocatorias públicas con un máximo que en ocasiones no permite adquirir algunos de estos equipamientos, como equipos de resonancia magnética nuclear para estudios estructurales y funcionales en modelos animales, microscopio electrónico de barrido, etc. La posibilidad de dotar este nuevo centro con unos Servicios de Apoyo a la Investigación equiparables a los de otros centros de 5 referencia, como los descritos arriba, permite colocar al futuro centro en la primera línea de la investigación internacional, otorgándole la capacidad de poder atraer a grupos consolidados de excelencia y, en consecuencia, la entidad suficiente para competir por recursos externos a nivel Europeo e Internacional. Los Servicios de Apoyo a la Investigación para los que se han adquirido equipos incluirían: - Estabulario: con capacidad para la generación, cruce y mantenimiento de animales de experimentación normales y modificados genéticamente: transgénicos y knockouts. - Unidad de Microcirugía del Sistema Nervioso: equipada con equipos de anestesia, microscopios quirúrgicos, aparatos estereotáxicos, sistemas de microinyección y equipos mecanizados para la realización de lesiones reproducibles. - Unidad de Neuroimagen: dotada con una resonancia magnética Brucker de 7 T para realizar estudios estructurales y funcionales en animales de experimentación, y el seguimiento con animales vivos de proteínas reporteras fluorescentes o quimioluminiscentes. - Unidad de Análisis del Movimiento y Pruebas Neurofuncionales: dotada con equipos para pruebas complejas de análisis del movimiento (cinemática), cinética, electrofisiología y diferentes modalidades sensitivas. - Servicio de Microscopia y Análisis deimagen: dotado con equipos para permitir el procesamiento de muestras y el desarrollo de técnicas de microscopía óptica confocal, microscopía electrónica de rastreo y microscopía electrónica de transmisión. - Unidad de Cultivos Celulares: dirigido a dar soporte en la obtención de cultivos de celulares primarios y la creación, cultivo y mantenimiento de líneas celulares. - Servicio de Citometría de Flujo y Separación Celular: con capacidad para análisis de ciclo celular, apoptosis y separación celular de poblaciones celulares específicas o generación de líneas celulares clonales. - Unidad de Genómica: equipado para estudios de expresión génica, análisis genómico, uso y análisis de arrays, secuenciación de ADN y síntesis de oligonucleótidos. - Servicio de Proteómica: capaz de separar, caracterizar y secuenciar péptidos y proteínas. - Unidad de Producción de Vectores de Expresión y Virus Recombinantes: con capacidad para la producción de vectores de expresión plasmídicos y virales; y la producción de virus recombinantes adenovirales, adeno-asociados, retrovirales y lentivirales. - Unidad de análisis químicos, físicos y estructurales: equipada con un sistema automático de microscopía de infrarrojos, sistema de SPM para mediciones en líquidos y en atmósfera controlada, espectroscopia de impedancia electroquímica, potenciómetro para determinación de carga superficial, elipsómetro, etc. - Unidad de Bioinformática: dirigido a dar soporte de las necesidades bioinformáticas en las diferentes líneas de investigación, especialmente en proyectos de genómica y proteómica, así como el desarrollo de nuevas herramientas de análisis bioinformático. Los servicios de citometría, proteómica y microscopía han sido los primeros en ponerse en funcionamiento dada su importancia en un centro de investigación. 6 GRUPO DE REPARACIÓN NEURAL Y BIOMATERIALES 2. RECURSOS HUMANOS DEL GRUPO. 2.1 Responsable de Laboratorio. Jorge Collazos Castro, Licenciado en Medicina y Cirugía en 1995 por la Universidad Nacional de Colombia, realizó su internado en Neurofisiología y posteriormente se desempeñó como Asistente de Investigación adscrito a la Dirección General del INSALUD en Colombia. Desde entonces sus intereses han sido el estudio de las lesiones del sistema nervioso y la búsqueda de estrategias para su reparación. Durante 1996 y 1997 trabajó como Ayudante de Investigación en el grupo de Daño Cerebral y Desarrollo Neuromotriz en la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional. En 1998 se incorporó al grupo del Prof. Manuel Nieto Sampedro, en el Instituto Cajal del CSIC, para estudiar la regeneración axonal y las alteraciones motrices asociadas a la lesión medular, recibiendo el título de Doctor en Neurociencias por la Universidad Autónoma de Madrid en 2003. Actualmente es responsable del Laboratorio de Reparación Neural en el Hospital Nacional de Parapléjicos y dirige sus esfuerzos al inicio de una nueva aproximación terapéutica para las lesiones del sistema nervioso, mediante el uso de sustratos electroactivos promotores del crecimiento neural. Adicionalmente, investiga la pérdida y recuperación de la motricidad y los cambios en los circuitos neurales inducidos por la lesión medular. 2.2 Personal Investigador. * Ksenija Jovanovic, Licda. en Biología, Doctora en Neurofisiología. SESCAM-HNP *Guillaume Saint-Pierre, Licenciado y Doctor en Ciencias Químicas. SESCAM-HNP *Noelia López-Sánchez, Licenciada en Biología, Doctora en Biología Molecular. Contratada proyecto Comunidad Europea, 028473 *Ana Lucas Osma, Licenciada en Veterinaria. Predoctoral. Becaria FUHNPAIN *Vanesa Padial, Técnico de Anatomía Patológica. Cargo al MEC. 3. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN DEL GRUPO. El tema de trabajo del grupo es la investigación de mecanismos para inducir la recuperación funcional después de lesiones del sistema nervioso central (SNC). Con este fin se desarrollan dos líneas complementarias. Linea 1. Reparación Neural El objetivo de esta línea es encontrar una forma de inducir el crecimiento axonal y la reconexión neuronal después de una lesión medular. Durante los años anteriores se ha estudiado la utilidad de los trasplantes de glía envolvente (GE) del sistema olfativo para inducir la reparación de contusiones medulares en rata. Las contusiones se realizaron en la médula cervical, reproduciendo el síndrome de lesión centromedular humano. En estas lesiones, los trasplantes de glía envolvente no promovieron la regeneración axonal. Muchas de las células trasplantadas murieron en la zona de lesión, y las demás se organizaron al azar, sin tener un efecto promotor de la regeneración axonal, e incluso estimulando el crecimiento aberrante de colaterales axonales indemnes. La reparación de las lesiones del SNC sólo será posible con un abordaje multidisciplinar, en donde la ingeniería de biomateriales apropiados para el crecimiento neural tendrá un papel fundamental. Si los materiales tienen propiedades electroquímicas dinámicas para interactuar con el tejido neural, podrían introducirse 7 señales eléctricas para estimular su regeneración, ya que la migración, el crecimiento y la supervivencia de las células neurales puede modularse por medio de campos eléctricos. Estos hechos llevaron al grupo a comenzar el estudio de materiales electroactivos en colaboración con el Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC). Empezamos con óxidos derivados del TiO2, investigando su capacidad como soporte para el crecimiento neuronal. El TiO2 es un compuesto biocompatible que neutraliza activamente la respuesta inflamatoria, y que posee propiedades electroquímicas que pueden regularse con facilidad variando el proceso de síntesis o mediante el dopado con iones. Los primeros experimentos consistieron en evaluar el crecimiento de neuronas en superficies de TiO2 - rutilo, para luego modificar la microestructura de la superficie y analizar su influencia sobre los procesos celulares. Se demostró que el crecimiento de la neuronas sobre este sustrato es excelente in vitro. En la actualidad se están caracterizando en detalle las superficies preparadas y considerando el diseño de una estructura tridimensional de rutilo. Por otra parte, los materiales electroactivos que se emplearán como implantes en el sistema nervioso deberán ser flexibles para no producir daño tisular adicional. Una posibilidad es preparar híbridos con polímeros conductores. Esto implica el procesamiento de los materiales a temperaturas relativamente bajas (350 ºC), en las cuales el TiO2 usualmente tiene estructura de anatasa. En colaboración con la Dra. Casañ-Pastor empezamos a estudiar el crecimiento de neuronas corticales sobre anatasa, óxido de Iridio y polipirrol, polímero conductor biocompatible. Los resultados obtenidos hasta ahora son muy estimulantes. Los tres materiales han resultado excelentes para el crecimiento celular, y además se ha identificado su forma de preparación que permite la mejor adherencia y extensión de las neuritas. La conductividad eléctrica del polipirrol y de sus composites con TiO2 nos permitirá estudiar, en etapas avanzadas del proyecto, el efecto de la aplicación de campos eléctricos sobre la supervivencia y el crecimiento neuronal. Finalmente, la biocompatibilidad y el efecto promotor del crecimiento neural que puedan tener estos biomateriales se evaluará en modelos de lesión medular en roedor. Linea 2. Plasticidad neural y motricidad en condiciones normales y patológicas Para conseguir la recuperación de la motricidad después de una lesión del SNC es necesario entender la causa de los trastornos observados y las bases neurofisiológicas de los movimientos reflejos, automáticos y voluntarios. Así mismo, se requiere conocer los cambios en la conectividad neural y las adaptaciones funcionales inducidas por la lesión. Esta información resulta esencial para la evaluación de estrategias de reparación neural, y también para el desarrollo de técnicas de habilitación y rehabilitación funcional de los pacientes. En el laboratorio de Reparación Neural se utilizan modelos de lesión medular en roedor que reproducen las características patológicas de las humanas, y se evalúan varios paradigmas de motricidad mediante técnicas cinéticas y cinemáticas de alta resolución. Las modificaciones en la conectividad neural inducidas por la lesión se estudian mediante trazadores neurales y técnicas histológicas. En este campo, las principales contribuciones del grupo han sido la identificación de trastornos funcionales crónicos por muerte neuronal selectiva después de una lesión medular cervical, la correlación entre el daño axonal y la capacidad locomotriz en animales con contusión medular torácica, y la correlación definitiva entre la capacidad cinética y cinemática de las extremidades después de una hemisección cervical. Durante los siguientes años, estos modelos de lesión medular serán utilizados para evaluar estrategias de reparación neural. 8 4. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN Y SUBVENCIONES ACTIVOS 4.1 Proyectos Europeos. Organismo Convocante European Commission Expediente. FP6-028473 Título. Development of a Bioelectrochemical Device for CNS Repair (NERBIOS) Tipo de Proyecto: Specific Targeted Research Project (STREP) Programa: NEST (New and Emergent Science and Technology Duración. 2006-2009 Cantidad. 304.986 €. Investigador Principal. Jorge Collazos Castro 4.2 Proyectos de Organismos de ámbito nacional. Organismo convocante: MEC Expediente. MAT2005-07683-02 Titulo. Influencia de la electroactividad del material sobre la supervivencia, diferenciación y crecimiento neuronal Duración: 2005-2008 Financiación: 113.050 € + Téc. Investigación Investigador Principal. Jorge Collazos Castro 4.3 Proyectos de Organismos de ámbito Autonómico Organismo Convocante. Consejería de Educación y Ciencia Proyecto de investigación coordinado PCC-08-0072 Participantes: Hospital Nacional de Parapléjicos y Universidad de Castilla La Mancha Título. Determinantes fisicoquímicos del espectro de impedancia eléctrica en el tejido neural Duración.2008-2010 Cantidad. 140.000 € + becario predoctoral Investigador Principal Subproyecto HNP. Jorge Collazos Castro Coordinador del proyecto: José Luis Polo (UCLM) OTROS PROYECTOS APROBADOS Modulación electroquímica del crecimiento neural Ministerio de Innovación y Ciencia Ref.: MAT2008-06643-C02-02. Este proyecto ha sido aprobado recientemente y comenzará el 1/01/2009, con duración de 3 años. 9 5. PRODUCCIÓN CIENTIFICO-TÉCNICA. 5.1. Publicaciones. 1. GR Hernández-Labrado, JE Collazos-Castro and JL Polo (2008) Digital simulations to solve electrochemical processes involving a diffusion coefficient varying linearly with the concentration. Journal of Electroanalytical Chemistry. 615 (1): 62 – 68. F.I (2007: 2.58). 2. Carballo-Vila M., Moreno-Burriel B., Jurado JR. Chinarro E., Casañ-Pastor N. and Collazos-Castro JE. (2008) Titanium Oxide as Substrate for Neural Cell Growth. J Biomed Mater Res A. DOI: 10.1002/jbm.a.32058. F.I (2007: 2.612). Nota: En este momento hay otros 3 artículos en proceso de revisión. 5.2. Congresos y Ponencia 1) J. Collazos-Castro. Conferencista invitado. Title: Development of a bioelectrochemical device for stimulating spinal cord Repair. Gordon Research Conference on Electrochemistry New England, USA, 2008. 2) Lucas-Osma AM and Collazos-Castro JE. Title: Compartmentalization in the triceps brachii motoneuron nucleus and its relation with muscle architecture. European Neuroscience Society Congress, Zurich, 2008. 3) J. Collazos-Castro, Mónica Carballo, Berta Moreno, Chinarro Eva, Nieves CasañPastor, Jurado J. Title: Rutile Substrata for Neural Cell Growth. Materials Research Society Congress, 2007. San Francisco (USA). 4) J. Collazos-Castro, A. M. Cruz, J. Fraxedas, M. Carballo, L. Abad, A. Pérez del Pino, N. Casañ-Pastor. Title: Electroactive Oxide Coatings as Substrates for Neural growth. 4th World Congress on Biomimetics, Artificial Muscles and Nano-Bio. Cartagena, España, Nov 6-9 2007. 5) A.C. Manikas, A. Soto Beobide, J. Collazos-Castro and G. A. Voyiatzis Quantitative Analysis of Drugs in Corporal Fluids Using Surface-Enhanced Raman Spectroscopy. International Conference On Nanomedicine. Greece. September 9 –11, 2007. 10 GRUPO DE FUNCION SENSITIVOMOTORA El Grupo de Función Sensitivo motora se constituyó en el año 2003 por el Dr. Taylor, procedente del Instituto Cajal (CSIC), constituyendo el primer grupo de investigación en el Hospital Nacional de Parapléjicos. Nuestro grupo investiga las alteraciones que las lesiones medulares provocan tanto en los sistemas sensoriales, centrándonos principalmente en los cambios en la nocicepción, como en los motores, mediante el estudio de la espasticidad. RECURSOS HUMANOS DEL GRUPO. 2. 2.1 Responsable del laboratorio Julian Scott Taylor. Licenciado en Fisiología con Honores en 1983 por la University of Sheffield y Doctorado por la University of Nottingham con una tesis titulada “Opioid and monoamine modulation of spinal reflexes in the rabbit” dirigida por el Dr. Rob Clarke. En enero 1990 se trasladó al Brain Institute-University of Florida, como investigador contratado en los laboratorios del Dr. John Munson y del Dr. Chuck Vierck trabajando en el proyecto “Spinal cord dysfunction and repair: Physiology and behavior” financiado por el NIH. Desde 1986 ha investigado sobre la neuroplasticidad de los sistemas sensitivomotores medulares, centrándose específicamente en la identificación de los mecanismos fisiopatológicos y el desarrollo de estrategias novedosas para la modulación del dolor y la disfunción motora como la espasticidad después de una lesión medular. En el año 2001 recibió el contrato “Ramón y Cajal” del Ministerio de Educación y Ciencia por su actividad investigadora después de haberse incorporado en el laboratorio del Dr. Nieto Sampedro en el Instituto Cajal del Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC) en Madrid. Tiene más de 20 artículos y capítulos publicados sobre fisiopatología sensitivomotora y recuperación funcional después de la lesión medular y actualmente trabaja con varios grupos nacionales e internacionales. 2.2 Personal Investigador. Dr. Javier Mazarío Torrijos, Doctorado en Biología por la Universidad de Alcalá. Financiado por la FISCAM y FUHNPAIIN. Dra. Margarita Suardíaz García, Doctorado en Biología por la Universidad Rey Juan Carlos. Financiado por la Consejería de Sanidad, JCCM y HNP. Eider Goiriena Foruria. Licenciada en Biologia. Beca de la Consejería de Sanidad de Castilla-La Mancha (FISCAM). GCS-2006_C/02 Julio Gómez Soriano. Diplomado en Fisioterapia por la Universidad Castilla La Mancha. FUHNPAIIN. Gerardo Avíla Martín. Licenciado en Biología por la Universidad Complutense de Madrid. FUHNPAIIN. 3. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN DEL GRUPO. 11 TEMA PRINCIPAL: PATOFISIOLOGÍA SENSITIVOMOTORA RECUPERACIÓN FUNCIONAL TRAS UNA LESIÓN MEDULAR LOCAL Y La lesión medular provoca una reducción significativa de la calidad de vida y la independencia de los pacientes debido a un daño permanente y a una recuperación limitada del sistema motor, combinado con el desarrollo de síndromes debilitantes como la espasticidad y el dolor neuropático. El grupo de investigación del Dr. Taylor tiene dos metas principales: 1ª. Mejorar el diagnóstico precoz de la espasticidad y del dolor neuropático, basándose en la medición de cambios fisiopatológicos asociados a las lesiones medulares y desarrollados a nivel de la médula espinal. 2ª. Desarrollar nuevas técnicas para el tratamiento precoz de la espasticidad y el dolor neuropático mientras se mantiene y promueve la plasticidad sensitiva y motora tras la lesión medular. 1. Identificación de nuevas dianas terapéuticas para el dolor neuropático y la espasticidad en pacientes: Diagnóstica precoz temprana y modulación de fenómenos fisiopatológicos Problema: La hipersensibilidad frente a estímulos cutáneos asociada al dolor neuropático y la presencia de espasmos dolorosos, la hiperreflexia cutánea y la coactivación, son síntomas comunes en los pacientes con lesión medular que con frecuencia llevan a una reducción en la calidad de vida. La detección temprana de alteraciones fisiopatológicas que llevan al desarrollo de dolor neuropático y/o espasticidad está limitada, hoy en día, por la falta de un análisis sistemático temprano de las señales y síntomas de estos dos complejos síndromes. Un diagnóstico de la espasticidad y el dolor neuropático completo y rápido tras la lesión es el primer paso para un tratamiento más racional basado en técnicas neuroprotectoras, neurorregeneradoras y neuromoduladoras novedosas. Objetivos específicos: A) Identificar los mecanismos que contribuyen al desarrollo temprano de hipersensibilidad frente a estímulos cutáneos asociada a dolor evocado, espontáneo y a espasticidad en pacientes. B) Aplicar y evaluar nuevas técnicas neurorrehabilitadoras para la modulación de la espasticidad y del dolor neuropático en pacientes. 2. Desarrollo de modelos animales de dolor neuropático y espasticidad: Identificación de mecanismos fisiopatológicos comunes. Problema: La aparición de dolor neuropático y de espasticidad puede estar mediada en parte por un área de hiperexcitabilidad alrededor de la zona de la lesión medular, donde se producen cambios en la comunicación entre neuronas y glía, y a la neuroinflamación. De todos modos las alteraciones que ocurren después de una lesión medular distan mucho de estar completamente caracterizadas, especialmente en los casos en los que concurren factores agravantes como una hemorragia. El desarrollo de modelos animales y de técnicas de medición traslacionales, destinados al entendimiento de los cambios producidos en la función sensitiva y motora espinal, desarrollados inmediatamente después de un lesión medular, tanto al nivel como por debajo del nivel de la lesión, son fundamentales para la identificación de nuevas 12 dianas terapéuticas que contribuyan al tratamiento del dolor neuropático y de la espasticidad. Objetivos específicos: A) Identificar las alteraciones fisiopatológicas de la médula espinal asociadas al desarrollo temprano de dolor neuropático y de espasticidad en animales despiertos empleando técnicas operantes, de estudio de reflejos y electromiográficas fácilmente adaptables a estudios en humanos. B) Documentar los cambios en el procesamiento sensorial central y periférico tras una lesión medular mediante registros electrofisiológicos in vivo en el animal anestesiado (sumación temporal de reflejos, registros extracelulares de la actividad de neuronas espinales frente a estímulos naturales, etc.). C) Caracterización de cambios en la función sensitiva y motora mediante el estudio de las alteraciones producidas en los marcadores anatómicos y funcionales asociadas con dolor neuropático y espasticidad después de una lesión medular, empleando técnicas histológicas e inmunohistoquímicas (H/E, c-fos, OX-42, TNF, TRPV1). 3. Desarrollo de terapias no invasivas translacionales para el tratamiento temprano del dolor neuropático y la espasticidad basadas en mecanismos neuroprotectores y neurorregeneradores. Problema: En la actualidad no existen tratamientos efectivos para la modulación de los cambios fisiopatológicos asociados con el desarrollo de dolor neuropático y espasticidad tras una lesión medular. De un modo ideal, un tratamiento efectivo para el control temprano de los cambios en la función sensitivomotora, que pueden desembocar en dolor neuropático o espasticidad crónicos, debería de estar basado en la aplicación rápida de tratamientos no invasivos. Estos tratamientos estarían destinados a promover la neuroprotección y la neurorregeneración, dependiendo de la presencia de factores excitotóxicos asociados con el tipo específico de lesión medular de que se trate. Es más, los efectos de estos tratamientos no deberían afectar a los fenómenos positivos de plasticidad que se producen tras la lesión. Recientemente se han identificado dos dianas terapéuticas potenciales que pueden actuar como agentes neuroprotectores y neurorregeneradores mientras favorecen la recuperación motora tras una lesión medular. De este modo, se está estudiando el papel de la activación del receptor de ácido fosfatídico y de la familia de receptores hormonales nucleares como posibles dianas terapéuticas con un claro potencial clínico. Objetivos Específicos: Evaluación del papel de la familia de receptores hormonales nucleares y del receptor de ácido fosfatídico en el control de las patologías que cursan con dolor neuropático y espasticidad tras una lesión medular. 4. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN Y SUBVENCIONES ACTIVOS 4.1. PROYECTOS DE ORGANISMOS DE AMBITO ESTATAL Organismo Convocante. FIS-ISCIII Nº. Expediente. Todavía sin determinar Título. Medición y modulación del dolor neuropático después e una lesión medular en el roedor: Caracterización por técnicas de neurofisiología e imagen funcional por Resonancia Magnética. Duración. 2008-2010 Cantidad. 106.480 € 13 Investigador Principal. Julian Scott Taylor 4.2 PROYECTOS DE ORGANISMOS DE AMBITO AUTONÓMICO Organismo Convocante FISCAM Expediente. PI-2007/33 Título. Efectos de las lesiones medulares sobre las neuronas de los ganglios raquideos y su detección de estímulos nocipectivos. Duración. 2008-2010 Cantidad. 102.504 € Investigador Principal. Javier Mazario Torrijos. Organismo Convocante. FISCAM Nº. Expediente. Ayuda para adquisición de euipamiento científico-tecnológico con fines de investigación. Equipamiento: Equipo de prueba térmica operante para los estudios de dolor en roedores (Tiros-R2). Duración. 2008 Cantidad. : 42.000 € Investigador Principal. Julian Scott Taylor Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha (FISCAM) Ayuda para grupos consolidados y grupos emergentes de investigación en salud. Financiación: 43.306,24 € Duración: 05/2007-12/2008. Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha (FISCAM) Ayudas para perfeccionamiento y movilidad de investigadores en el campo de la salud. Eider Goiriena Foruria. Financiación: 14.200 € Duración: 2007-2010 Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha (FISCAM) Ayudas para perfeccionamiento y movilidad de investigadores en el campo de la salud. Javier Mazarío Torrijos. Financiación: 22.000 € Duración: 2007-2010 Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha. Ayudas para adquisición de equipamiento científico-tecnológico con fines de investigación Financiación: 38.884 Investigador principal: Julian Scott Taylor Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha. Ayudas para grupos consolidados y emergentes de investigación en salud Financiación: 43.700 euros Investigador principal: Julian Scott Taylor 14 Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha. Fisiopatología y espasticidad del tríceps surae después de lesión medular: diagnóstico y posibilidades de neurorehabilitación. Financiación: 71.585 euros Investigador principal: Julian Scott Taylor Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha. Ayuda para adquisición de equipamiento científico-tecnológico con fines de investigación Financiación: 37.022 euros Investigador principal: Julian Scott Taylor Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha. Diagnóstico del dolor neuropático después de la lesión medular: análisis de los mecanismos fisiopatológicos presentes al y debajo de nivel de trauma. Duración: 2005-2008 Financiación: 55.800 euros Investigador principal: Julian Scott Taylor Fundación Inocente-Inocente (Antena 3 Televisión) Lesión medular y dolor neuropático: desarrollo de un modelo experimental para el estudio y modulación de la sensibilización central después lesión medular. Duración: 2005-2008 Financiación: 110.400 euros Investigador principal: Julian Scott Taylor 5. PRODUCCIÓN CIENTIFICO-TÉCNICA. 5.1 PATENTES Patente solicitada. P200801904 Titulo. Complejos de albúmina con ácidos grasos monoinsaturados para el tratamiento de lesiones medulares. Gestores. Patentes ARIAS,BERNARDO & GONZÁLEZ. 5.2 PUBLICACIONES SELECCIONADAS Suardíaz, M., Estivil, G., Goicoechea, C., Rodríguez de Fonseca, F. Analgesic properties of oleoylethanolamide (OEA) in visceral and inflammatory pain. Pain (En prensa) 2007. F.I.: 4.309 J. Mazarío, AI. Basbaum. Differential injury-induced thermal and mechanical responsiveness of lamina I and V neurons. Journal of Neuroscience 2007; 27(4):762-70. F.I.: 7.506 Shields SD, Mazario J, Skinner K, Basbaum AI. Anatomical and functional analysis of aquaporin 1, a water channel in primary afferent neurons. Pain (En prensa) 2007. F.I.: 4.309 Taylor JS and Vierck C. Effects of ketamine on electroencephalographic, autonomic arousal and segmental reflex responses in the cat. Veterinary anaesthesia and analgesia 2004; 30:237-249. F.I.: 1.397 Muneton-Gomez V, Taylor JS, Averill S, Priestley JV, Nieto-Sampedro M. Degeneration of primary afferent terminals following brachial plexus extensive avulsion injury in rats. Biomédica 2004; 24(2):183-93. Taylor J.S., Muñetón-Gómez V.C., Eguía-Recuero R. and Nieto-Sampedro M. Transplants of olfactory bulb ensheathing cells promote functional repair of 15 multiple dorsal rhizotomy. Progress in Brain Research 2001; 132: 641-654. F.I.: 1.425 Muñetón Gómez, VC Taylor, J S, Averill, SA, Vallejo-Cremades, MT, King, VR, Priestley, JV, Nieto-Sampedro M Trasplantation of Olfactory Ensheathing Cells in a Model of Brachial Plexus Avulsion Increase Spinal Cord Permissivity to Dorsal Root Ingrowth. Journal of Neurocytology 32: 53-70 (2003). F.I.: 1.838 5.3 COMUNICACIONES A CONGRESOS autores: gonzalez e., taylor j. titulo: bilateral wind-up responses below the level of a unilateral spinal cord injury in the rat. tipo: poster congreso: ii congreso de la sociedad madrileña del dolor. madrid. año 2007 autores: gomez j., huelbes s., taylor j., h. poole, f. calderón muñoz, j.r. cabrera feria. titulo: impacto de los factores físicos de la lesión medular en el desarrollo de dolor neuropático y calidad e vida durante el primer año de lesión medular. tipo: presentacion congreso: “xxiv jornadas de la sociedad española de paraplejia”. a coruña (españa). año 2007. autores: gomez j., perez e., taylor j. castellote olivito, a. esclarín de ruz. titulo: evaluación de estímulos vibratorios como herramienta de neuro-rehabilitación: modulación de reflejos cutáneos locales en sanos y pacientes con lesión medular. tipo: presentacion congreso: “xxiv jornadas de la sociedad española de paraplejia”. a coruña (españa). año 2007. autores: huelves s., rivera aj., taylor j. a. mauderli, h. poole, f. calderón muñoz, j.r. cabrera feria, c. shaw fernandez-toda. titulo: impact of spinal cord injury physical factors on the debelopment of neuropathic pain and quality of life during the first year of lesion. tipo: poster congreso: neupsig, iasp,. berlin. año 007 autores: huelves s., taylor j., cabrera jr c. peñacoba, f. calderón muñoz,, h. poole. titulo: cognitive-behavioural strategies during the first year of spinal cord injury neuropathic pain. tipo: poster congreso: neupsig, iasp, berlin. año 2007 16 GRUPO DE NEUROINFLAMACIÓN El laboratorio de neuroinflamación de la Unidad de Neurología Experimental del Hospital Nacional de Parapléjicos investiga desde el año 2003 las interacciones del sistema inmunitario y el sistema nervioso central en diversas situaciones experimentales, poniendo énfasis en los procesos de neuroprotección, de regeneración axonal, de mielinización y de diferenciación de células madre para, en base al conocimiento de los mecanismos fundamentales que subyacen en estos procesos, manipularlo con fines terapéuticos. En concreto, hemos elegido el estudio del sistema endocannabinoide como diana terapéutica. Los cannabinoides, ya sean sintéticos, naturales o endógenos, se presentan por sus propiedades inmunomoduladoras, neuroprotectoras y sus efectos sobre poblaciones de células madre/precursores neurales como potenciales agentes terapéuticos en modelos experimentales de lesiones traumáticas de la médula espinal o de lesiones desmielinizantes. El grupo de Neuroinflamación es un grupo consolidado reconocido por la Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla- La Mancha (JCCM). 2. RECURSOS HUMANOS DEL GRUPO 2.1 Responsable del laboratorio Eduardo Molina Holgado. Licenciado en Biología en 1988, en la especialidad de Bioquímica y Biología Molecular, por la Universidad Autónoma de Madrid. En septiembre de 1989 se traslada a la Université de Montréal, (Montreal, Canadá) donde se doctora en Ciencias Neurológicas con una tesis titulada Biochemical studies of neurotransmitters in the central nervous system of adult rats after neonatal lesion of dopaminergic neurons y dirigida por el Dr. Tomás A. Reader. En la primavera de 1994, después de obtener una beca postdoctoral del Ministerio de Educación y Ciencia (MEC) de España, se traslada al laboratorio de la Dra. Guillermina Almazán, del Department of pharmacology and Therapeutics de la McGill University en Montreal. Hasta principios del año 1997 investiga sobre los mecanismos y efectos biológicos que se desencadenan al activar receptores de neurotransmisores en oligodendrocitos. Ese mismo año vuelve a España, financiado por un contrato de reincorporación de Doctores del MEC, incorporándose al laboratorio de la Dra. Carmen Guaza del Instituto Cajal del Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC) en Madrid. Durante los últimos seis años investiga sobre la participación de las células gliales en los procesos inflamatorios del sistema nervioso central. 2.2 Personal Investigador Eduardo Molina Holgado, Doctor en Ciencias Neurológicas, Université de Montréal, Montreal, Canadá (1994). 17 Ángel Arévalo Martín, Doctor en Biología, Univ. Complutense de Madrid (2003). Daniel García Ovejero, Doctor en Biología, Univ. Complutense de Madrid (2004 Oscar Gómez Torres. Doctor en Biología, Univ. Complutense de Madrid (2002). Beatriz Navarro Galve. Doctora en Bioquímica, Univ. Autónoma de Madrid (2005). Investigadora Juan de la Cierva. Ana Rubio Araiz. Licenciada en Biología. Becaria Predoctoral de la Consejería de Educación y Ciencia de la JCCM (2004-2007). Sandra Sánchez Rodríguez. Licenciada en Biología. Becaria Predoctoral FISCAM. 2.3 Técnicos especialistas de laboratorio Concepción Sánchez Caro. Técnico especialista de laboratorio SESCAM. Uyen Le. Técnico especialista de laboratorio. Contratada por proyecto FISCAM gestionado por FUHNPIIN. Colaboraciones científicas nacionales e internacionales Drs. Carmen Guaza y José Borrell. Grupo de Neuroinmunología, Instituto Cajal, C.S.I.C., Madrid. Dra. Guillermina Almazán. Department of Pharmacology and Therapeutics, McGill University, Montreal, Canadá. Dr. Francisco Molina Holgado. Wolfson Centre for Age-Related Diseases, Division of Biomolecular Science, GKT School of Biomedical Sciences, Hodgkin Building, Guy's Campus, Londres, Reino Unido. 3. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN DEL LABORATORIO ESTRATEGIAS TERAPÉUTICAS PROMOTORAS DE LA REPARACIÓN DEL SISTEMA NERVIOSO LÍNEA 1- Endocannabinoides como nuevos agentes neuroprotectores después de una lesión de la medula espinal. Nuestro grupo ha observado recientemente que el sistema endocannabinoide se activa en respuesta a la lesión medular en rata (Garcia-Ovejero et al., 2008, Neurobil. Disease, en prensa) y que la administración del endocannabinoide 2araquidonilglicerol (2-AG) 30 min después de una contusión medular resulta en una menor extensión del daño y en una mejor recuperación motora de un modelo de lesión traumática incompleta (Arevalo-Martin et al., FENS Abstract 2008). Estos efectos terapéuticos parecer resultado de a acciones específicas y asociadas a la activación de los receptores cannabinoides CB1 y CB2 como son: favorecer la supervivencia celular en condiciones de daño o compromiso celular y favorecer la inmunomodulación hacia respuestas protectoras. LÍNEA 2- Neurorreparación de la médula espinal lesionada a partir de células madre endógenas. Una de las principales causas de disfunción tras lesión medular es la pérdida de un elevado número de neuronas y oligodendrocitos mielinizantes durante la fase de muerte secundaria, lo que se traduce en una pérdida funcional por debajo de la zona de lesión. Tras este tipo de lesiones, una de las respuestas que se observan es la 18 proliferación de los precursores neurales presentes en el canal central posiblemente para tratar de restituir las células pérdidas y la homeostasis del tejido lesionado. Sin embargo, estas células se diferencian principalmente en astrocitos reactivos en respuesta a las señales gliogénicas del entorno, lo que reduce las posibilidades de regeneración axonal y recuperación funcional. En la médula espinal también se ha descrito que existen progenitores con características de células madre, capaces de diferenciarse en los tres linajes celulares del sistema nervioso tanto “in vitro” como “in vivo”. Sin embargo, no se conoce con detalle el origen ni el fenotipo de estas células. Al igual que sucede en el cerebro, en respuesta a una lesión hay una respuesta proliferativa y migratoria de células localizadas en la región del canal central de la médula espinal o de células de regiones próximas a la lesión. Nuestro interés en estos tipos celulares se basa en resultados preliminares que muestran que tras lesiones del SNC y tratamiento con cannabinoides sintéticos se acumulan presursores de oligodendrocito en zonas próximas a la lesión. Por lo tanto, pensamos que con la actuación adecuada se podría dirigir su diferenciación hacia células oligodendrogliales que remielinizasen los axones preservados que han perdido su cubierta de mielina. Esta línea de investigación pretende localizar de forma precisa qué células expresan receptores cannabinoides en el canal central y determinar el efecto de la manipulación del sistema endocannabinoide sobre el potencial de los precursores neurales endógenos para la reparación de lesiones traumáticas de la médula espinal. LÍNEA 3- Diferenciación de precursores de oligodendrocitos para la reparación de lesiones desmielinizantes. La SVZ es una fuente de precursores oligodendrogliales tanto durante el desarrollo postnatal como durante la edad adulta, época en la cual la oligodendrogénesis es un proceso poco relevante pero que aumenta muy significativamente cuando tiene lugar un episodio desmielinizante. Por tanto, el estudio de las señales que regulan la diferenciación/especificación de los precursores neurales en esta zona hacia el linaje oligodendrocitario así como de las señales que modulan su migración hacia zonas de lesión podría tener como consecuencia el desarrollo de estrategias terapéuticas para patologías desmielinizantes. Hemos demostrado que el tratamiento con cannabinoides podrían tener un papel relevante en estos procesos dado que promueven la supervivencia de los precursores de oligodendrocitos en situaciones de compromiso celular, potencian la remielinización en un modelo animal de esclerosis múltiple e incrementan la especificación de los precursores de la SVZ hacia precursores gliales (Molina-Holgado y col., 2002; Arévalo-Martín y col., 2003, 2007). También, la activación de los receptores CB1 o CB2 en cultivos primarios de estas células induce su proliferación y especificación hacia fenotipos gliales (Molina-Holgado y col., 2007; Rubio-Araiz y col., FENS Abstract 2008). Esta línea de trabajo pretende determinar si los endocannabinoides modulan la migración de los precursores neurales de la SVZ o del canal central medular después de una lesión desmielinizante en el cuerpo callosos o en los cordones posteriores de la médula espinal y determinar si en este periodo se induce la especificación de estas células hacia oligodendrocitos. 4. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN Y SUBVENCIONES ACTIVAS 4.1 Proyectos de Organismos de ámbito nacional. 19 Fondo de Investigaciones Sanitarias del Instituto de Salud Carlos III (Ministerio de Ciencia e Innovación) Papel de los receptores CB1 y CB2 en los efectos terapéuticos de los cannabinoides en lesión medular: neuroprotección, control de la inflamación y reparación a partir de células madre neurales Duración: 2009-2011 Investigador principal: Eduardo Molina-Holgado Proyecto Santaló de Colaboración CSIC-CONICET Implementacion de terapia genica neuroprotectora utilizando vectores virales etiquetados con nanoparticulas fluorescentes Duración: 2008-2009 Investigador principal: Luis Miguel García Segura Fondo de Investigaciones Sanitarias del Instituto de Salud Carlos III (Ministerio de Sanidad y Consumo) Evaluación del sistema endocannabinoide como diana terapéutica en el daño secundario de la lesión medular. Duración: 2005-2008 Investigador principal: Eduardo Molina-Holgado 4.2 Proyectos de Organismos de ámbito autonómico. Fundación para la Investigación Sanitaria en Castilla-La Mancha (FISCAM) Implicaciones del sistema endocannabinoide en la migración y especificación celular de los precursores neurales/células troncales en el contexto de la mielinización y remielinización. Duración: 2008-2010 Investigador principal: Eduardo Molina-Holgado Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha. Acción del sistema endocannabinoide sobre la respuesta de las células madre y los precursores endógenos frente a una lesión medular. Duración: 2006-2008 Investigador principal: Eduardo Molina-Holgado Fundación para la Investigación Sanitaria en Castilla-La Mancha (FISCAM) Ayuda para grupos consolidados y grupos emergentes de Investigación en Salud. Nº expediente: GCS-2006_C26 Duración: 2007-2008 Financiación: 39.888 € Investigador principal: Eduardo Molina-Holgado. Entidad Gestora: FUHNPAIIN 5. PRODUCCIÓN CIENTÍFICA. 5.1 Publicaciones 2007-2008 Artículos científicos Molina-Holgado F., Rubio-Araiz A., García-Ovejero D., Williams R.J., Moore J.D., Arévalo-Martín A., Gómez-Torres O. and Molina-Holgado E. CB2 cannabinoid 20 receptors promote mouse neural stem cell proliferation European Neuroscience 25: 629–634 (2007). Índice de impacto 3,67 Journal of Barreto G., Veiga S., Azcoitia I., Garcia-Segura L.M., Garcia-Ovejero D. Testosterone decreases reactive astroglia and reactive microglia after brain injury in male rats: role of its metabolites estradiol and dihydrotestosterone European Journal of Neuroscience 25: 3039-3046 (2007). Índice de impacto 3,67 Arévalo-Martín A., García-Ovejero D., Rubio-Araiz A., Gómez O., Molina-Holgado F., Molina-Holgado E. (2007) Postnatal effects of cannabinoids on neural stem/precursor cells in the subventricular zone depend on CB1 and CB2 receptors. European Journal of Neuroscience 26:1548-1559 (2007). Índice de impacto 3,67 Arevalo-Martin A., Garcia-Ovejero D., Gomez O., Rubio-Araiz A., Navarro-Galve B., Guaza C., Molina-Holgado E. and Molina-Holgado F. CB2 cannabinoid receptors as an emerging target for demyelinating diseases: from neuroimmune interactions to cell replacement strategies. British Journal of Pharmacology 153: 216-225 (2008) Índice de impacto 3,77 Rubio-Araiz A., Arevalo-Martin A., Gomez-Torres O., Navarro-Galve B., GarciaOvejero D., Navarro-Galve B., Suetterlin P.,Sánchez-Heras E., Molina-Holgado E. and Molina-Holgado F. The endocannabinoid system modulates a transient TNF pathway that induces neural stem cell proliferation. Molecular and Cellular Neuroscience (2008) Índice de impacto 3,99 Garcia-Ovejero D, Arevalo-Martin A, Petrosino S, Docagne F, Hagen C, Bisogn T, Watanabe M, Guaza C, Di Marzo V, Molina-Holgado E. The endocannabinoid system is activated in response to spinal cord injury in rats. Neurobiology of Disease (en prensa, ref. editorial YNBDI_NBD-08-212) Índice de impacto 4,38 Capítulos de libro Molina-Holgado F, Arévalo-Martín A, García-Arencibia M, Rubio-Araiz A, GarcíaOvejero D, Gómez-Torres O, Correa F, Fernández-Ruiz J, Guaza Rodriguez C, Molina-Holgado E. The endocannabinoid system as the interface between the CNS and the immune system. Neuroimmunology Research Prespectives. Editor Lilian M. Johansson, 2007 Nova Science Publishers Inc, Hauppage, NY, pp 207-229. 5.2 Comunicaciones a Congresos. autores: Garcia-Gvejero D, Petrosino S, Arevalo-Martin A, Bisogno T, Docagne F, Hagen C, Guaza C, Di Marzo V, Molina-Holgado E. titulo: Endocannabinoid system is activated in response to spinal cord injury in rats. tipo: poster congreso: 17 International Cannabinoid Research Society congress. Saint Sauveur (Canada). año 2007 21 autores: Garcia-Ovejero D, Etrosino S, Arevalo-Martin A, Bisogno T, Docagne F, Hagen C, Guaza C, Di Marzo V, Molina-Holgado E. titulo: Activacion del sistema endocannabinoide despues de una lesion medular en rata. tipo: poster congreso: 12 congreso de la Sociedad Española de Neurociencia, Valencia. año 2007. autores: Gomez O, Almazan G, Arevalo-Martin A, Garcia-Ovejero D, Rubio-Araiz A, Molina-Holgado E. titulo: Los agonistas cannabinoides regulan la diferenciación celular de progenitores de oligodendrocitos. tipo: poster congreso: 12 congreso de la Sociedad Española de Neurociencia, Valencia. año 2007. autores: Arevalo-Martin A, Garcia-Ovejero D, Hagen C, Suarez-Batista L, MolinaHolgado E. titulo: Therapeutic action of 2-AG in spinal cord injury. tipo: poster congreso: 2nd Gordon Research Conference on Cannabinoid Function in the CNS. Les Diablerets (Suiza). año 2007. autores: Molina-Holgado F, Rubio-Araiz A, Arevalo-Martin A, Garcia-Ovejero D, Gomez O, Molina-Holgado E. titulo: Neuroimmune interaction network of the endocannabinoid system in neural development: therapeutic implications in brain repair. tipo: poster congreso: 2nd Gordon Research Conference on Cannabinoid Function in the CNS. Les Diablerets (Suiza). año 2007. autores: Hagen C, Garcia-Ovejero D, Arevalo-Martin A, Petrosino S, Docagne F, Bisogno T, Guaza C, Di Marzo V, Molina-Holgado E. titulo: Activación del sistema endocannabinoide en respuesta a una lesion medular en la rata. tipo: poster congreso: VIII Annual Meeting of Spanish Society for Cannabinoid Research (SEIC). Bilbao (SPAIN). año 2007 autores: Gomez O, Arevalo-Martin A, Garcia-Ovejero D, Rubio-Araiz A, Navarro B, Hagen C, Molina-Holgado E. titulo: Papel del Sistema cannabinoide endógeno en la diferenciación de progenitors de oligodendrocito. tipo: poster congreso: VIII Annual Meeting of Spanish Society for Cannabinoid Research (SEIC). Bilbao (SPAIN), año 2007 autores: Garcia-Ovejero D, Arevalo-Martin A, Petrosino S, Docagne F, Hagen C, Bisogno T, Watanabe M, Guaza C, Di Marzo V, Molina-Holgado E. titulo: The endocannabinoid system is activated in response to spinal cord injury in rats. tipo: poster congreso: 6th FENS FORUM of European Neuroscience. Geneva (Switzerland). 22 año, 2008. autores: Arevalo-Martin A, Garcia-Ovejero D, Hagen C, Molina-Holgado E. titulo: Early 2-arachidonoylglycerol treatment improves recovery after incomplete spinal cord injury in rats. tipo: poster congreso: 6th FENS FORUM of European Neuroscience. Geneva (Switzerland) año 2008. autores: Rubio-Araiz A, Arevalo-Martin A, Garcia-Ovejero D, Gomez-Torres O, Navarro-Galve B, Molina-Holgado F, Molina-Holgado E. titulo: Involvement of cannabinoid receptors in the migration and specification of neural stem cells. tipo: poster congreso: 6th FENS FORUM of European Neuroscience. Geneva (Switzerland) año 2008. autores: Gómez O, Arévalo-Martín A, García-Ovejero D, Navarro B, Molina-Holgado F, Molina-Holgado E, Almazan G. titulo: The endogenous cannabinoid system is involved in the differentiation of oligodendrocyte progenitors. tipo: poster congreso: 6th FENS FORUM of European Neuroscience. Geneva (Switzerland). año 2008. autores: García Ovejero D, Arévalo Martín A, Petrosino S, Docagne F, Hagen-Lapido C, Bisogno T, Watanabe M, Guaza C, Di Marzo V, Molina-Holgado E. titulo: Inducción del sistema endocannabinoide en células gliales después de una lesión medular. tipo: poster congreso: IV Reunión de la Red Glial Española. Madrid (Spain). año 2008 autores: Rubio-Araiz A, Arévalo-Martín A, García-Ovejero D, Gómez-Torres O, Navarro-Galve B, Molina-Holgado F, Molina-Holgado E. titulo: Implicación de los receptores cannabinoides en la migración y especificación de las células madre neurales. Inducción del sistema endocannabinoide en células gliales después de una lesión medular. tipo: poster congreso: IV Reunión de la Red Glial Española. Madrid (Spain). año 2008 NEUROSIGNALS GROUP BIOINGENIERIA Y NEUROFISIOLOGIA EXPERIMENTAL 1. RECURSOS HUMANOS 1.1 Responsables del Grupo Bioingeniería: Dr. Guglielmo Foffani Neurofisiología experimental: Dr. Juan de los Reyes Aguilar Lepe 23 Guglielmo Foffani, Ingeniero Biomédico por el Politecnico di Milano, Italia (2001) y Doctor en Bioingeniería por la Drexel University de Philadelphia, EEUU (2004). Realizó su doctorado en el laboratorio de neuroingeniería de la Dra. Karen A. Moxon, con una tesis que combinaba aproximaciones experimentales y computacionales sobre las estrategias neuronales de codificación temporal de la información sensorio-motora en ratas y en humanos. Mantiene una posición académica de Research Assistant Professor en la School of Biomedical Engineering, Science and Health Systems de la Drexel University. Se incorporó en el Hospital Nacional de Parapléjicos en enero de 2005. Juan de los Reyes Aguilar Lepe, Biólogo por la Universidad de Sevilla (1996) y Doctor en Biología por la Universidad de Santiago de Compostela (2002). Se doctoró en el laboratorio del Dr. Antonio Canedo, con una tesis sobre la modulación de la información cutánea ascendente por la corteza cerebral en el gato anestesiado. Ha realizado una estancia posdoctoral internacional de 30 meses en el laboratorio del Dr. Manuel Castro-Alamancos (Drexel University College of Medicine), donde ha perfeccionado y ampliado sus conocimientos sobre el procesamiento tálamo-cortical en la rata anestesiada. Se ha incorporado con la Fundación del Hospital Nacional de Parapléjicos para la Investigación y la Integración en Octubre de 2005 con un contrato de investigador del SNS del FIS. 2.2 Personal Investigador María de la Luz Morales Botello, Licenciada en Física por la Univ. Complutense de Madrid. Financiada con beca asociada a proyecto FIS (ref: PI05/2322). lncorporada en abril de 2006. Elena Alonso Calviño, Licenciada en Ciencias Ambientales por la Univ. CastillaLa Mancha. Financiada con contrato asociado a proyecto de la Consejería de Educación y Ciencia de la JCCM (ref: PAI 06-0104). Incorporada en Julio de 2007. Desiré Humanes Varela, Licenciada en Ciencias Biológicas por la Univ. de Sevilla Financiada con beca asociada a proyecto FISCAM (ref: PI-2006/50). Incorporada en Diciembre de 2007. Elisa Bellistri, Licenciada en Ingeniería Biomédica por el Politécnico de Milano (Italia). Financiada con beca asociada a proyecto FISCAM (ref: PI-2006/49). Incorporada en Enero de 2008. Francesca Pulecchi, Técnico Especialista en Neurofisiopatología por la Univ. Milano (Italia). Financiada con contrato asociado a proyecto de la Consejería de Sanidad de la JCCM (ref: 06056-00). Incorporada en Enero 2008. Josué García Yagüe, Doctor en Biología por la Universidad Autónoma de Madrid. Financiado con Ayuda para Incorporación de Doctores o Investigadores Expertos a Grupos de Investigación de Castilla-La Mancha, FISCAM (ref: MOV-2007_IE/01). Incorporado en Febrero 2008. Colaboradores nacionales e internacionales Dr. Antonio Canedo, Departamento de Fisiología, Universidad de Santiago de Compostela. (línea 1) Dr. Shabbar Danish, Department of Neurosugery, University of Pennsylvania, Philadelphia, USA. (línea 2) Dr. Sergio Cerutti, Departamento de Bioingeniería, Politecnico di Milano, Italia. (línea 2) Dr. Liset Menéndez de la Prida, Instituto Cajal, Madrid. (línea 1) Dr. Karen A. Moxon, School of Biomedical Engineering, Science and Health Systems, Drexel University, Philadelphia, USA. (línea 1) 24 Dr. Antonio Oliviero, Hospital Nacional de Parapléjicos, Toledo. (líneas 2) Dr. Alberto Priori, Departamento de Ciencias Neurológicas, Universita’ di Milano, Italia. (línea 2) Visitantes Lorenzo Rossi, Licenciado en Ingeniería Biomédica y estudiante de doctorado del Politecnico di Milano (Italia). Financiado con contrato asociado a proyecto de la Consejería de Educación y Ciencia de la JCCM (ref: PAI 06-0104). Octubre 2006-Marzo 2007. Jason T. Moyer, Estudiante de Doctorado en Bioingeniería de la University of Pennsylvania, Philadelphia (USA). Enero-Marzo 2007. Shabbar F. Danish, Neurocirujano de la University of Pennsylvania, Philadelphia (USA). Enero-Marzo 2007. Anna Merzagora, Estudiante de Doctorado en Ingeniería Biomédica de la Drexel University, Philadelphia (USA). Financiada por el proyecto de la Consejería de Sanidad de la JCCM (ref: 06056-00). Mayo-Junio 2008. Alessandro Scaglione, Estudiante de Doctorado en Ingeniería Biomédica de la Drexel University, Philadelphia (USA). Financiado por el proyecto de la Consejería de Sanidad de la JCCM (ref: 06056-00). Mayo-Junio 2008. Robertino Dilena, Licenciado en Medicina y Residente de Neurología en la Univ. de Milano (Italia). Financiado por el proyecto de la Consejería de Sanidad de la JCCM (ref: 06056-00). Enero-Junio 2008. 3. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN La actividad neuronal representa la base del funcionamiento fisiopatológico del sistema nervioso central. Las modernas técnicas de registros neurofisiológicos permiten gravar actividades neuronales in vivo e in vitro produciendo señales cada vez mas complejas: poblaciones de neuronas individuales, potenciales de campo local, registros EEG multicanales, etc. La complejidad de las señales frecuentemente impide la correcta interpretación fisiopatológica de las actividades neuronales registradas. El tema central de nuestra investigación es el desarrollo y utilización de metodologías de registro y análisis de señales para decodificar información fisiopatológica en actividades neuronales complejas. Nuestras principales líneas de investigación son las siguientes: (1) el estudio de las reorganización cortical y sub-cortical en patologías neurodegenerativas en ratas, con particular referencia al problema de la lesión medular; y (2) el estudio de las alteraciones fisiopatológicas del procesamiento sensorial, motor y cognitivo en humanos, con particular referencia a la enfermedad de Parkinson. 4. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN Y SUBVENCIONES ACTIVAS Financiación Total Proyectos (2006-2012): 856.947 € 4.1 Proyectos de Organismos de ámbito nacional Fondo de Investigaciones Sanitarias del Instituto de Salud Carlos III (Ministerio de Sanidad y Consumo) Contrato Posdoctoral de perfeccionamiento “Sara Borrell” (ref: CD08/00249). 25 Duración: 2009-2012. Financiación: 144.000€ (36.000 € anuales) Grupo Receptor: Neurosignals Group - Bioingeniería y Neurofisiología Experimental. Beneficiario: Josué García Yagüe Ministerio de Educación y Ciencia. Development and applications of signals processing techniques to extract information from complex neuronal activities. Acción Integrada España-Italia. (Ref: HI 2006-0068). Duración: 2007-2008 Financiación: 11.260€ Investigador Principal: Guglielmo Foffani. Co-Investigador: Juan R Aguilar . Fondo de Investigaciones Sanitarias del Instituto de Salud Carlos III (Ministerio de Sanidad y Consumo) Reorganización somatosensorial cortical después de lesión medular en un modelo animal de rata. Duración: 2006-2008 Financiación: 111.860 € Investigador Principal: Guglielmo Foffani. Fondo de Investigaciones Sanitarias del Instituto de Salud Carlos III (Ministerio de Sanidad y Consumo) Reorganización somatosensorial tálamo-cortical después de lesión medular en un modelo animal de rata. Duración: 2006-2008 Financiación Proyecto: 42.000 € Financiación Contrato: 89.516 € Investigador Principal: Juan Aguilar Co-Investigador: Guglielmo Foffani. 4.2 Proyectos de Organismos de ámbito autonómico. Fundación para la Investigación Sanitaria en Castilla-La Mancha (FISCAM). Mecanismos de control de los ritmos ultrarrápidos para la reparación funcional del hipocampo epiléptico (ref: PI-2006/49). Duración: 2007-2009. Financiación: 90.559€ Investigador Principal: Guglielmo Foffani. Co-Investigador: Liset Menéndez de la Prida. Fundación para la Investigación Sanitaria en Castilla-La Mancha (FISCAM). Reorganización cortical de la información táctil y de dolor después de lesión medular aguda y crónica en un modelo animal de rata: estudio intracelular in vivo. (ref: PI2006/50). Duración: 2007-2009. Financiación: 76.755€ Investigador Principal: Juan R Aguilar. Co-Investigador: Guglielmo Foffani. Fundación para la Investigación Sanitaria en Castilla-La Mancha (FISCAM). 26 Ayuda para Incorporación de Doctores o Investigadores Expertos a Grupos de Investigación de Castilla-La Mancha, FISCAM (ref: MOV-2007_IE/01). Duración: 2008. Financiación: 24.900€ Grupo Receptor: Neurosignals Group - Bioingeniería y Neurofisiología Experimental. Beneficiario: Josué García Yagüe Fundación para la Investigación Sanitaria en Castilla-La Mancha (FISCAM). Ayuda para Grupos Consolidados de Investigación en Salud (ref: GCS-2006_C/25). Duración: 2007-2008. Financiación: 20.230€ Grupo Receptor: Neurosignals Group - Bioingeniería y Neurofisiología Experimental Fundación para la Investigación Sanitaria en Castilla-La Mancha (FISCAM). Ayuda para Adquisición de Equipamiento Científico Tecnológico (ref: EQ-2006/22) Duración: 2007. Financiación: 27.392,01€ Grupo Receptor: Neurosignals Group - Bioingeniería y Neurofisiología Experimental Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Estudio diferencial de la reorganización de la información táctil y de dolor en la corteza somatosensorial de la rata después de lesión medular. Duración: 2006-2008 Financiación: 100.510 € Investigador Principal: Guglielmo Foffani. Co-Investigador: Juan R Aguilar. Consejería de Educación y Ciencia de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Estudio diferencial de la reorganización de la información táctil y de dolor en tálamo de la rata después de lesión medular. Duración: 2006-2008 Financiación: 87.965 € Investigador Principal: Guglielmo Foffani. Co-Investigador: Juan R Aguilar. 4.3 Proyectos de Organismos Privados Fundación Mutua Madrileña Automovilista Reorganización cortical de la información táctil y de dolor después de lesión medular aguda y crónica en un modelo animal de rata: estudio intracelular in vivo. Duración: 2006-2008 Financiación: 30.000 € Investigador Principal: Juan Aguilar. Co-Investigador: Guglielmo Foffani PREMIOS DE AUTONÓMICAS INVESTIGACIÓN CONCEDIDOS EN CONVOCATORIAS Consejería de Investigación y Ciencia, Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Premio Joven Investigador Luisa Sigea de Velasco. Destinado a un investigador novel por los logros conseguido como científico. Concedido por la contribución al estudio de las neuronas y por el trabajo desarrollado en el Hospital Nacional de Parapléjicos. Fecha de la convocatoria: 2007 Cuantía: 6.000 € Beneficiario: Guglielmo Foffani 27 Complejo Hospitalario y Universitario de Albacete, Comunidad Autónoma de Castilla-La Mancha Premio 20 Aniversario del Complejo Hospitalario Universitario de Albacete. Destinado al joven investigador con mejor trayectoria de publicaciones en Ciencias de la Salud. Fecha de la convocatoria: 2007 Cuantía: 2.500 € Beneficiario: Guglielmo Foffani. 5. PRODUCCIÓN CIENTÍFICA 2006-2008 5.1 Patentes solicitadas 1) K. Moxon, G. Foffani. Method to quantitatively measure effect of psychotropic drugs on sensory discrimination. PCT/D2027 20123, 1/19/2007. 2) A. Priori, L. Rossi, G. Foffani. Apparatus for treating neurological disorders by means of chronic adaptive brain stimulation as a function of local biopotentials. PCT/IB2006/002184, 03/08/2006. 5.2 Trabajos publicados en revistas internacionales 2008. Impact factor (IF): 15.7 (6 artículos) 3) K. A. Moxon, L. L. Hale, J. Aguilar, G. Foffani. Responses of infragranular neurons in the rat primary somatosensory cortex to forepaw and hindpaw tactile stimuli. Neuroscience, in press (2008). (IF: 3.3) 4) J. Aguilarc, M.L. Morales-Botello, G. Foffani. Tactile responses of hindpaw, forepaw and whisker neurons in the thalamic ventrobasal complex of anesthetized rats. Eur J Neurosci 27, 378-387 (2008). ccorresponding author (IF: 3.7) 5) G. Foffani, J. K. Chapin, K. A. Moxon. Computational role of large receptive fields in the primary somatosensory cortex. J Neurophysiol 100, 268-280 (2008). (IF: 3.7) 6) A. Scaglione*, G. Foffani*c, G. Scannella, S. Cerutti, K. A. Moxon. Mutual information expansion for studying the role of correlations in population codes: how important are auro-correlations? Neural Comput 20, 2662-2695 (2008). *equal contribution, ccorresponding autor (IF: 2.3) 7) L. Rossi, S. Marceglia, G. Foffani, F. Cogiamanian, F. Tamma, P. Rampini, S. Barbieri, F. Bracchi, A. Priori. Subthalamic local field potential oscillations during ongoing deep brain stimulation in Parkinson’s disease. Brain Res Bull 76, 512-521 (IF: 1.9) 8) S. Mrakic-Sposta*, S. Marceglia*, M. Egidi, G. Carrabba, P. Rampini, M. Locatelli, G. Foffani, E. Accolla, F. Cogiamanian, F. Tamma, S. Barbieri, A. Priori. Extracellular spike microrecordings from the subthalamic area in Parkinson’s disease. J Clin Neurosci 15, 559-567 (2008). *equal contribution (IF: 0.8) 2007. Impact factor correspondencia: 4.0) (IF): 25.4 (5 artículos: 19.9; 1 revisión: 1.5, 1 28 9) G. Foffani*, Y. G. Uzcategui*, B. Gal, L. Menendez de la Prida. Reduced spiketiming reliability correlates with the emergence of fast ripples in the rat epileptic hippocampus. Neuron 55, 930-941 (2007). *equal contribution (IF: 13.4) 10) S. Marceglia, A. M. Bianchi, G. Baselli, G. Foffani, F. Cogiamanian, N. Modugno, S. Mrakic-Sposta, A. Priori, S. Cerutti. Interaction between rhythms in the human basal ganglia: application of bispectral analysis to local field potentials. IEEE Trans Neural Sys Rehabil Eng 15, 483-492 (2007). (IF: 2.5) 11) S. Marceglia, L. Rossi, G. Foffani, A. M. Bianchi, S. Cerutti, A. Priori. Basal ganglia local field potentials: applications in the development of new deep brain stimulation devices for movement disorders [Review]. Expert Rev Med Devices 4, 605-614 (2007). (IF: 1.5) 12) A. Oliviero, M. Rubio-Esteban, G. Foffani, J. Aguilar, E. Lopez-Dolado, T. ArzozLezaun, J.M. Gómez-Arguelles, Y. Pérez-Borrego, F. Sebastián de la Cruz, V. Di Lazzaro. Effects of baclofen on temperature perception in humans. Neurosci Res 59, 89-92 (2007). (IF: 2.1) 13) S. F. Danish, J. T. Moyer, L. H. Finkel, G. H. Baltuch, J. L. Jaggi, A. Priori, G. Foffanic. High-frequency oscillations (>200Hz) in the human non-parkinsonian subthalamic nucleus. Brain Res Bull 74, 84-90 (2007). ccorresponding author (IF: 1.9) 14) G. Foffani, A. Priori. Information theory, single neurons and gamma oscillations in the human subthalamic nucleus [correspondence]. Exp Neurol 205, 292-293 (2007). (IF: 4.0) 15) L. Rossi*, G. Foffani*, S. Marceglia, F. Bracchi, S. Barbieri, A. Priori. An electronic device for artefact suppression in human local field potential recordings during deep brain stimulation. J Neural Eng 4, 96-106 (2007). *equal contribution (IF: n/a) 2006. Impact factor (IF): 32.9 (6 artículos: 25.3, 1 correspondencia: 7.6) 16) A. Hirata A, J.R. Aguilar, M.A. Castro-Alamancos. Noradrenergic activation amplifies bottom-up and top-down signal-to-noise ratios in sensory thalamus. J Neurosci 26, 4426-4436 (2006). (IF: 7.4) 17) S. Marceglia, S. Mrakic-Sposta, G. Foffani, F. Cogiamanian, E. Caputo, M. Egidi, S. Barbieri, A. Priori. Gender-related differences in the human subthalamic area: a local field potential study. Eur J Neurosci 24, 3213-3222 (2006). (IF: 3.7) 18) G. Foffani, A. Priori. Deep brain stimulation in Parkinson's disease can mimic the 300 Hz subthalamic rhythm [letter]. Brain 129, e59 (2006). (IF: 7.6) 19) A. Priori, G. Ardolino, S. Marceglia, S. Mrakic-Sposta, M. Locatelli, F. Tamma, L. Rossi, G. Foffani. Low-frequency subthalamic oscillations increase after deep brain stimulation in Parkinson’s disease. Brain Res Bull 71, 149-154 (2006). (IF: 1.7) 20) B. Tutunculer*, G. Foffani*, B. T. Himes, K. A. Moxon. Structure of the Excitatory Receptive Fields of Infragranular Forelimb Neurons in the Rat Primary Somatosensory Cortex Responding To Touch. Cereb Cortex 16, 791-810 (2006). *equal contribution (IF: 6.4) 29 21) S. Marceglia*, G. Foffani*, A.M. Bianchi, G. Baselli, F. Tamma, M. Egidi, A. Priori. Dopamine-dependent non-linear correlation between subthalamic rhythms in Parkinson's disease. J Physiol 571, 579-591 (2006). *equal contribution (IF: 4.4) 22) G. Foffani, G. Ardolino, M. Egidi, E. Caputo, B. Bossi, A. Priori. Subthalamic oscillatory activities at beta or higher frequency do not change after high-frequency DBS in Parkinson’s disease. Brain Res Bull 69, 123-130 (2006). (IF: 1.7) 5.2 bis. Trabajos publicados en revistas nacionales 23) A. Priori, G. Foffani. I meccanismi d’azione della stimolazione cerebrale profunda. Rivista Medica 14, 2008 (review). 24) A. Priori, G. Foffani. Nuovi orizzonti in neurofisiologia umana: le registrazioni EEG dai gangli della base. La Neurologia Italiana, 2, 16-19 (2006) (divulgative review) Capítulos de libros 25) G. Foffani, B. Tutunculer, S. C. Leiser, K. A. Moxon. Decoding Sensory Stimuli from Populations of Neurons: Methods for Long-Term Longitudinal Studies. In: HANDBOOK OF NEURAL ENGINEERING, Edited by Metin Akay, Wiley-IEEE press, January 2007. 5.3 Artículos presentados a congresos 26) S. Marceglia, A.M. Bianchi, S. Mrakic-Sposta, G. Foffani, A. Priori, S. Cerutti. Gender-related differences in non-linear phase synchronizations between subthalamic rhythms in Parkinson’s disease. Proceedings of the 3nd International IEEE EMBS Conference on Neural Engineering, 2-5 May 2007, pp: 522-525. 27) G. Foffani. Mechanism of action of deep brain stimulation. Proceedings of the 2nd Post-graduate eans ncial course in: Techniques of Deep Brain Stimulation for the Treatment of Parkinson’s Disease and Dystonia (Medical School, University of Milan), Gargnano (Italy), pp. 74-83, October 1st-5th 2006. Abstracts presentados a congresos 28) G. Foffani, M.L. Morales-Botello, J. Aguilar. Spike-timing information in the rat thalamic ventrobasal complex. “Barrels XXI”, Baltimore (USA), 13-14 November 2008. 29) G. Foffani, M.L. Morales-Botello, J. Aguilar. Spike-timing information arises from latencies and jitters when spike-count is ambiguous. “38th Society For Neuroscience Annual Meeting”, Washington (USA), 15-19 November 2008. 30) J. Aguilar, D. Humanes-Valera, E. Alonso-Calviño, G. Foffani. Responses of forepaw neurons to forepaw stimuli are altered after thoracic spinal cord injury. “38th Society For Neuroscience Annual Meeting”, Washington (USA), 15-19 November 2008. 30 31) L. Menéndez de la Prida, G. Foffani, J. M. Ibarz, Y. G. Uzcategui, B. Gal. Dynamical relationship between ripples and fast ripples in an in vitro model of sharp-waves. “38th Society For Neuroscience Annual Meeting”, Washington (USA), 1519 November 2008. 32) G. Foffani. A touch of time in the somatosensory code. “IV Simposio Internacional Percepnet, Ciencias sensoriales y de la percepción”, Barcelona (Spain), 10-11 July 2008. 33) M. Morales-Botello, J. Aguilar, G. Foffani. ON/OFF tactile responses of hindpaw, forepaw and whisker neurons in the thalamic ventrobasal complex of anesthetized rats: computational role of spike-timing. “6th FENS Forum of European Neuroscience”, Geneva (Switzerland), 12-16 July 2008. 34) J. Aguilar, M. Morales-Botello, G. Foffani. Spatiotemporal structure of ON/OFF responses to tactile stimuli in the rat somatosensory thalamus. “37th Society For Neuroscience Annual Meeting”, San Diego (USA), 3-7 November 2007. 35) G. Foffani, L. L. Hale, J. Aguilar, K. A. Moxon. Excitatory receptive field structure of infragranular neurons in the rat primary somatosensory cortex responding to touch: hindpaw-forepaw overlap. “37th Society For Neuroscience Annual Meeting”, San Diego (USA), 3-7 November 2007. 36) A. Scaglione, G. Foffani, G. Scannella, S. Cerutti, K. A. Moxon. Comparison of different methods of mutual information expansion to study the role of correlations in population coding. “37th Society For Neuroscience Annual Meeting”, San Diego (USA), 3-7 November 2007. 37) M. L. Morales-Botello, J. Aguilar, A. Scaglione, K. A. Moxon, G. Foffani. Synergy, redundancy and independence in population codes from the perspective of a downstream neuron. “37th Society For Neuroscience Annual Meeting”, San Diego (USA), 3-7 November 2007. 38) L. Rossi, F. Bracchi, S. Marceglia, G. Foffani, F. Cogiamanian, A. Priori. Adaptive deep brain stimulation as a function of local field potentials from the basal ganglia for the treatment of advanced parkinson’s disease. “37th Society For Neuroscience Annual Meeting”, San Diego (USA), 3-7 November 2007. 39) A. Priori, G. Foffani. Future prospettive biotecnologiche per i sistemi di neurostimolazione. XXXVIII Congresso Società Italiana di Neurologia”, Firenze (Italy), 13-17 October 2007. 40) G. Foffani. Oscilaciones de alta frecuencia en el núcleo subtalámico en la enfermedad de Parkinson. “XII Congreso de la Sociedad Española de Neurociencas”, Valencia (Spain), 5-9 September 2007. 41) J.R. Aguilar Lepe, M.L Morales-Botello, G. Foffani. Estructura espacio-temporal de las respuestas ON/OFF a estímulos táctiles en las neuronas del tálamo somatosensorial de la rata. “XII Congreso de la Sociedad Española de Neurociencas”, Valencia (Spain), 5-9 September 2007. 42) M.L. Morales-Botello, J. Aguilar, A. Scaglione, K.A. Moxon, G. Foffani. Sinergia, redundancia e independencia en códigos poblacionales desde el punto de vista de una 31 neurona receptora. “XII Congreso de la Sociedad Española de Neurociencas”, Valencia (Spain), 5-9 September 2007. 43) G. Foffani, J.K. Chapin, K.A. Moxon. Role of receptive field excitatory surround in cortical discrimination of stimulus location. “36th Society For Neuroscience Annual Meeting”, Atlanta (USA), 14-18 October 2006. 44) S.F. Danish, J.T. Moyer, G.H. Baltuch, A. Priori, G. Foffani. The relationship between 300-Hz oscillations and single-neuron firing in the subthalamic nucleus of patients with Parkinson's disease. “36th Society For Neuroscience Annual Meeting”, Atlanta (USA), 14-18 October 2006. 45) Y. G. Uzcategui, B. Gal, G. Foffani, L. Menéndez de la Prida. Ripple and fast ripple oscillations in the normal and epileptic hippocampus in vitro. FENS Forum 2006, Vienna (Austria), 8-12 July 2006. 46) L. Rossi, F. Bracchi, G. Foffani, S. Marceglia, F. Cogiamanian, S. Mrakic Sposta, E. Accolla, S. Barbieri, A. Priori. Un dispositivo elettromedicale brevettato di soppressione di artefatto di stimolo per la registrazione dei potenziali di campo locale durante la stimolazione cerebrale profonda. “III Riunione Annuale Gruppo di Studio per la Stimolazione Cerebrale Profonda”, Taormina (Italy) 2006. GRUPO DE NEUROLOGÍA MOLECULAR 1. RECURSOS HUMANOS El Grupo de Neurología Molecular se constituyó en octubre del año 2004 con la incorporación de su investigador principal, Francisco Javier Rodríguez, procedente del Laboratorio de Neuroregeneración y Plasticidad de la Universidad Autónoma de Barcelona. 1.1 Responsables del Grupo 32 Francisco Javier Rodríguez Muñoz, se licenció en Biología en 1992, en la especialidad de Bioquímica y Biología Molecular, por la Universidad Autónoma de Barcelona. Entre los años 1990-94 participó como estudiante colaborador de segundo ciclo (1990-92) y estudiante predoctoral (1992-94) en el Grupo del Dr. Isaac Blanco, perteneciente a la Unidad de Bioquímica de la Universidad Autónoma de Barcelona, donde colaboró en el desarrollo de proyectos dirigidos a caracterizar la modulación por histamina de las sinapsis glutamatérgicas del hipocampo. En 1994 se trasladó al Laboratorio de Neuroplasticidad y Regeneración de la misma Universidad, donde el tema central de su tesis doctoral consistió en el desarrollo de prótesis neurales implementadas con células de Schwann y elementos de la matriz extracelular para la reparación de lesiones de nervio periférico, además de colaborar en el inicio de la línea de investigación basada en el transplante de células de glía envolvente para la reparación de avulsiones de raíz dorsal o lesiones de médula espinal. En septiembre de 1999 se trasladó al Laboratorio de Neurobiología Molecular del Instituto Karolinska, donde aprendió todas las técnicas necesarias para la manipulación y análisis del patrón de diferenciación de células madre, la búsqueda de factores esenciales para la supervivencia y especificación de precursores neurales durante el desarrollo, el diseño y desarrollo de vectores plasmídicos y virales para la modificación genética de células, la creación de líneas celulares para la sobre-expresión de factores tróficos y la valoración de los efectos neuroprotectores y funcionales 2.3 Personal Investigador Shannon Shields, Doctora en Biología por la Univ. De California San Francisco (2006). Técnico Superior Biólogo SESCAM. Alfredo Maqueda Fernández, Doctor en Biología por la Univ. Autónoma de Madrid (2007). Técnico Superior Biólogo SESCAM. Elisa Fernández Núñez, Licenciada en Biología por la Universidad Complutense de Madrid (2006). Becaria del Programa JAE-2007 Del Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Técnicos especialistas de laboratorio Sandra Vázquez Pérez. María Asunción de la Barreda. Virginia Pérez Llort. Colaboraciones científicas nacionales e internacionales Dr. Ernest Arenas Cases, Molecular Neurobiology Unit, Karolinska Institute, Estocolmo, Suecia. Dra. Liliane Tenenbaum, Laboratory of Experimental Neurosurgery, Université Libre de Bruxelles, Brussels, Belgium. Dr. G Enikolopov; Cold Spring Harbour Laboratory, Cold Spring Harbour; USA. Dra. Assumpció Bosch, CBATEG, Universidad Autónoma de Barcelona, España. Dr. J.A. Buerén, División de Hemotopoyesis y Terapia Génica, CIEMAT, Madrid, España. Dr. Alberto Martínez Serrano, Centro de Biología Molecular, Universidad Autónoma de Madrid, España. Dr. Manuel Nieto-Sampedro, Grupo de Plasticidad Neural, Instituto Cajal de Neurobiología, Consejo Superior de Investigaciones Científicas, Madrid 3. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN 33 Tema central: El tema central del grupo de investigación es la búsqueda de factores esenciales en la neuroprotección, especificación y regeneración de células neurales, para luego aplicarlos mediante técnicas de ingeniería celular y terapia génica en modelos animales de traumatismo o enfermedades neurodegenerativas del sistema nervioso, con el objetivo de limitar el daño o muerte celular y promover la regeneración axonal y la restitución de las células perdidas. Las líneas de investigación actualmente en desarrollo son: 1. Determinación de factores de transcripción y epigenéticos esenciales para la especificación y supervivencia de células neurales de la médula espinal adulta lesionada. 2. Ingeniería de células madre embrionarias y neurales adultas para favorecer su diferenciación hacia neuronas u oligodendrocitos. 3. Ingeniería de células de glía envolvente para la sobreexpresión de factores tróficos que promuevan la supervivencia celular, la regeneración axonal de neuronas lesionadas y la diferenciación de precursores neurales en neuronas u oligodendrocitos. 4. Desarrollo de vectores virales adeno-asociados para la transducción específica de neuronas y expresión de factores que promuevan su supervivencia o regeneración. 5. Diseño de estrategias combinadas con fármacos, transplantes celulares y terapia génica que promuevan la supervivencia celular, la regeneración axonal y la restitución celular en modelos animales de lesión traumática de médula espinal. 4. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN Y SUBVENCIONES ACTIVAS 4.1 Proyectos de Organismos de ámbito nacional Fondo de Investigaciones Sanitarias del Instituto de Salud Carlos III (Ministerio de Sanidad y Consumo) Neuroprotección y promoción de la regeneración axonal en lesiones traumáticas de médula espinal mediante una estrategia combinada con fármacos, transplantes celulares y terapia génica. Expediente: PI052243 Duración: 2006-2008 Financiación: 97.580 euros Investigador Principal: F. Javier Rodríguez. 4.2 Proyectos de Organismos de ámbito autonómico. Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Transplantes de glía envolvente modificada genéticamente y virus adeno-asociados para la expresión regulada exógenamente de factores neuroprotectores y promotores de la regeneración axonal en lesiones traumáticas de médula espinal. Duración: 2006-2008 Financiación: 106.950 euros Investigador Principal: F. Javier Rodríguez. 34 Consejería de Educación y Ciencia de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Desarrollo de una estrategia combinada con fármacos neuroprotectores y el transplante de células de glía envolvente y células madre neurales para la reparación de lesiones traumáticas de médula espinal. Duración: 2006-2008 Financiación: 77.000 euros Investigador Principal: F. Javier Rodríguez. Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Ayuda para Grupos de Investigación Emergentes. Desarrollo de una estrategia combinada con fármacos neuroprotectores y el transplante de células de glía envolvente y células madre neurales para la reparación de lesiones traumáticas de médula espinal. Duración: 2006-2007 Financiación: 23.731 euros Investigador Principal: F. Javier Rodríguez. Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Ayuda para la Adquisición de Equipos Científicos. Concesión de recursos para la adquisición de un sistema completo de cirugía de roedores. Duración: 2006 Financiación: 59.541 euros Investigador Principal: F. Javier Rodríguez. Fundación para la Investigación Sanitaria de Castilla-La Mancha Ayuda para la Adquisición de Equipos Científicos. Concesión de recursos para la adquisición de un criostato y dos centrífugas. Duración: 2007 Financiación: 62.249 euros Investigador Principal: F. Javier Rodríguez. Fundación para la Investigación Sanitaria de Castilla-La Mancha Ayuda para la Adquisición de Equipos Científicos. Concesión de recursos para la adquisición de un módulo SCAN-R para estudios de cuantificación con un microscopio video time lapse Olumpus. Duración: 2008 Financiación: 67.469 euros Investigador Principal: F. Javier Rodríguez. 4.4 Proyectos de Organismos Privados Fundación para la Investigación Médica Mutua Madrileña Nueva estrategia para la reparación de lesiones traumáticas de médula espinal: Transplantes de glía envolvente modificada genéticamente para sobreproducir factores tróficos combinado con transplantes de precursores neurales adultos comprometidos con los linajes oligodendroglial y neuronal. Duración: 2006-2008 Financiación: 36.000 euros Investigador Principal: F. Javier Rodríguez. 35 5. PRODUCCIÓN CIENTÍFICA 2006-2008 5.1 PUBLICACIONES SELECCIONADAS Holm PC, Rodríguez FJ, Kresse A, Canals JM, Silos-Santiago I, Arenas E. Critical role of TrkB ligands in the survival and phenotypic differentiation of developing locus coeruleus noradrenergic neurons. Development. 130 (15): 1535-1545 (2003). F.I.: 7.603 Castelo-Branco G*, Wagner J*, Rodriguez FJ*, Kele J, Sousa K, Rawal N, Kitajewski J, Arenas E. (*Co-primeros autores). Proliferation of neuronal precursors and induction of midbrain dopaminergic neurons by Wnts. Proceding of the National Academy of Science. 100: 12747-12752 (2003). Wallen-McKenzie A, Mata de Urquiza A, Rodríguez FJ, Petersson S, Frilling S, Wagner J, Ordentlich P, Lengqvist J, Heyman RA, Arenas E, Perlmann T. Nurr1-RXR heterodimers mediate RXR ligand-induced signaling in neuronal cells. Genes and Development. 17(: 3036-3047 (2004). Rodríguez FJ, Valero-Cabré A, Navarro X. Regeneration and functional recovery following peripheral nerve injury. Drug Discovery Today: Disease Models. 1: 177-185 (2004). Lago N, Ceballos D, Rodríguez FJ, Stieglitz T, Navarro X. Long term assessment of axonal regeneration through polyimide regenerative electrodes to interface the peripheral nerve. Biomaterials. 26(14): 2021-2031 (2005). F.I.: 4.698 Holm PC, Rodriguez FJ, Kele J, Castelo-Branco G, Kitajewski J, Arenas E. Long term assessment of axonal regeneration through polyimide regenerative electrodes to interface the peripheral nerve. Journal of Neurochemistry, 99 (1): 343-352 (2006). F.I.: 4.604 Lago N, Rodríguez FJ, et al. Effects of motor and sensory nerve transplants on amount and specificity of sciatic nerve regeneration. Journal of Neuroscience Research, En prensa. F.I.: 3.239 Garcia-Alias G, Vallejo C, Rodríguez FJ, Navarro X. Functional and structural changes of the lumbar spinal segments after midthoracic contusion to the spinal cord of the rat. Experimental Neurology. En revisión. COMUNICACIONES A CONGRESO AUTORES: RODRIGUEZ FJ., NAVARRO X, VERDÚ E, VALERO A, PASCUAL R, CEBALLOS D. TITULO: LA IMMUNOGENICITAT DE LES CÈL.LULES DE SCHWANN AFECTA A LA REGENERACIÓ DE NERVI PERIFÈRIC AMB PROTESIS CEL.LULARS. TIPO: POSTER CONGRESO: II SIMPOSI DE NEUROBIOLOGIA EXPERIMENTAL. BARCELONA (ESPAÑA). AÑO 2007. AUTORES: RODRIGUEZ FJ. HOLM PC, KRESSE A, CANALS JM, SILOSSANTIAGO I, ARENAS E. TITULO: CRUCIAL ROLE OF TRKB LIGANDS IN THE SURVIVAL AND PHENOTYPIC DIFFERENTIATION OF DEVELOPING LOCUS COERULEUS NORADRENERGIC NEURONS. TIPO: POSTER CONGRESO: FENS WINTER SCHOOL. KITZBUHEL (AUSTRIA). AÑO 2007 36 GRUPO DE NEUROBIOLOGÍA DEL DESARROLLO El Laboratorio de Neurobiología del Desarrollo se ha constituido durante el presente año 2005 por investigadores procedentes, fundamentalmente, del Instituto de Neurociencias de la Universidad de Salamanca. Allí, las raíces del GNDe hay que buscarlas en Abril de 2003, cuando se fundó. 2. RECURSOS HUMANOS DEL GRUPO. 37 2.1 Responsable del laboratorio Fernando de Castro Soubriet. Licenciado en Medicina y Cirugía en 1991, por la Universidad Complutense de Madrid. En septiembre de 1991 se traslada al Instituto de Neurociencias de la Universidad de Alicante, donde se doctora en el Programa de Neurociencias con una tesis titulada “Corriente de cloruro activada por calcio en las dendritas de las neuronas simpáticas de ratón”, dirigida por el Prof. Roberto Gallego. En Agosto de 1996, se traslada al laboratorio del Dr. Constantino Sotelo (U-106 del INSERM, París, Francia), donde realiza una estancia postdoctoral con becas de la FRM, la FSetCdelDucca y Marie Curie-Unión Europea. Allí estudia los mecanismos celulares y moleculares implicados en la orientación del crecimiento axonal y de la migración neuronal durante el desarrollo. En el año 2000 realiza una segunda estancia postdoctoral en el laboratorio del Dr. Bernard Zalc (U-495 del INSERM; París, Francia), contratado por el INSERM, donde estudia las bases moleculares de la migración de los precursores de oligodendrocitos. Ese mismo año vuelve a España, financiado, sucesivamente, por un contrato de reincorporación de tipo “R” de la Unión Europea, un contrato de Investigador del FIS y un contrato de Investigador del Programa “Ramón y Cajal”, formando su propio grupo de investigación en el INCyL (Universidad de Salamanca). Desde 1996 investiga en diversos aspectos de la Neurobiología del Desarrollo y, particularmente, en las propiedades migratorias de los precursores de oligodendrocitos y sus posibles implicaciones en la patogenia de las enfermedades desmielinizantes, como la esclerosis múltiple. 2.2 Personal Investigador Pedro Esteban, Doctor en Biología por la Universidad de Salamanca. Técnico Superior Biólogo SESCAM. Diego Clemente López, Doctor en Biología por la Univ. de Salamanca. Técnico Superior Biólogo SESCAM. Verónica Murcia-Belmonte. Licenciada en Biología (Univ. de Alicante). Becaria predoctoral del Fiscam (MOV-2007_JI/19). Cristina Ortega Muñoz. Licenciada en Bioquímica (Univ. Autónoma de Madrid). Becaria predoctoral del Fiscam (MOV-2007_JI/20). Diego García González. Licenciado en Biología (Univ. Complutense Madrid). Becario predoctoral adscrito al proyecto Fiscam PI2007-66. Verónica Moliné Velázquez, Licenciada en Biología (Univ. de Granada). Becaria predoctoral adscrita al proyecto SAF2007-65845. Técnico Especialista de Laboratorio. Laura García Fernández. Técnico Especialista en Anatomía Patológica. Contratada por el SESCAM. Isabel Machín Díaz. Licenciada en Ciencia Tecnológica Alimentaria. Contratada por la FUHNPAIIN. Amelia González López. Técnico Especialista en Anatomía Patológica. Contrato adscrito al proyecto SAF2007-65845. Colaboraciones científicas nacionales e internacionales Drs. Paola Bovolenta, Laura López-Mascaraque, Juan De Carlos y Carlos Vicario. Departamento de Desarrollo, Instituto Cajal, Consejo Superior de Investigaciones Científicas, Madrid. Drs. Bernard Zalc y Jean-Léon Thomas. U-711 del INSERM, París (Francia). Drs. Eduardo Soriano y José Aº del Río. Laboratorio de Desarrollo y Regeneración del Sistema Nervioso. Parc Cientific, Universidad de Barcelona 38 Dr. Ferdinando Rossi. Dept. de Neuroscience, Universitá di Torino. Turín (Italia). Dr. Charles Greer. Dept. of Anatomy & Neurosurgery, Yale University. New Haven (EEUU). Drs. Óscar Marín. Instituto de Neurociencias, UMH-CSIC, Alicante. Drs. Miguel Merchán, Mª Dolores Ludeña, Rosario Arévalo, Rafael Coveñas, Arturo Mangas y Arantxa Tabernero. Instituto de Neurociencias de Castilla y León-INCyL, Universidad Salamanca. Dr. José Aº Pérez Simón. Servicio de Hematología, Hospital Clínico Universitario, Universidad de Salamanca. Drs. Renata Kozyraki y Olivier Cases. Institut de la Vision. París (Francia). 3. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN DEL GRUPO. 1. Bases celulares y moleculares de la proliferación, migración y diferenciación de los precursores de oligodendrocitos, su implicación en la patogenia de las enfermedades desmielinizantes y su posible utilidad en neuro-reparación por medio de terapia celular y/o sustitutiva. En las enfermedades desmielinizantes, como la esclerosis múltiple, se produce un daño de la vaina de mielina a consecuencia de la muerte de los oligodendrocitos (las células mielinizantes del sistema nervioso central). En el cerebro adulto, existen precursores de oligodendrocitos. Estas células, con gran capacidad migratoria y proliferativa, no consiguen reparar el daño producido en condiciones normales, ya que, aunque acuden a las placas de desmielinización, o bien no entran o, si lo hacen, mueren. El estudio de diferentes aspectos (proliferación, migración, supervivencia y diferenciación) nos debería aportar información decisiva acerca de este tipo celular, encaminándonos hacia qué aspectos celulares y moleculares deberían ser potenciados/modificados para poder utilizar los precursores de oligodendrocitos tanto endógenos como trasplantados como base de una terapia celular efectiva para reparar el daño neurológico. 2. Desarrollo del sistema olfativo y sus implicaciones en plasticidad y neuroreparación. El sistema olfativo es quizá el gran olvidado dentro del sistema nervioso. Sin embargo, características específicas del mismo lo convierten en un sujeto de estudio particularmente interesante tanto para la Neurobiología del Desarrollo como para investigar en los mecanismos de plasticidad y posible reparación del daño neurológico. Estudiamos procesos como la neurogénesis, la migración celular y la formación de conexiones durante el desarrollo embrionario y postnatal. También estudiamos estos fenómenos en el adulto, debido a la neurogénesis mantenida que se observa tanto por los nuevos receptores olfativos como por las interneuronas que se generan en la región subventricular y migran hasta el bulbo olfativo. 4. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN Y SUBVENCIONES ACTIVOS 4.1 PROYECTOS EUROPEOS Unión Europea (European Concerted Research Action COST) Brain Regeneration and Plasticity Expediente: COSTAction B-30, “NEREPLAS” Duración: 2006-2008. 39 Financiación: Indeterminada. Coordinador: Prof. José Mª Delgado. 4.2. PROYECTOS DE ORGANISMOS DE AMBITO ESTATAL Ministerio de Educación y Ciencia Reparación de lesiones desmielinizantes con precursores oligodendrogliales y modulares de su proliferación, migración y diferenciación. Duración: 01/12/2007 al 30/11/2009 Financiación: 254.100 € Investigador Principal: Fernando de Castro soubriet. Ministerio de Educación y Ciencia Reparación de lesiones desmielinizantes con precursores oligodendrogliales y modulares de su proliferación, migración y diferenciación. Duración: 26/06/2007 al 26/06/2008. Financión: 55.000 € Investigador Principal: Fernando de Castro soubriet. Fondo de Investigaciones Sanitarias del Instituto de Salud Carlos III del Ministerio de Sanidad y Consumo Progenitores neurales multipotentes como herramienta terapéutica en procesos desmielinizantes. Duración: 2005-2007 Financiación: 118.000 euros Investigador Principal: Fernando de Castro Soubriet. Ministerio de Asuntos Exteriores-AECI Acción Integrada Hispano-Italiana (HI20040379) Papel de la anosmina-1 en el crecimiento y la plasticidad de los axones de las células de Purkinje. Duración: 2005-2006; prolongada hasta 31-III-2007. Financiación: 9.700 euros Investigadores Principales: Fernando de Castro Soubriet y Ferdinando Rossi. 4.2 PROYECTOS DE ORGANISMOS DE AMBITO AUTONÓMICO Consejeria de Sanidad y Consumo de Castilla-La Mancha Papel de la proteína anosmina-1 en el desarrollo del sistema olfativo y en neuroreparación. Duración: 2008-2010 Financiación: 125.923,20 € Investigador Principal: Fernando de Castro soubriet. Consejería de Sanidad de Castilla La Mancha (FISCAM) Ayudas para incoporación de jóvenes investigadores a grupos de investigación de Castilla La Mancha. (Verónica Murcia Belmonte). Duración: 2008 renovable a 4 años. Financiación: 20.840 € Investigador Principal: Fernando de Castro Soubriet. 40 Consejería de Sanidad de Castilla La Mancha (FISCAM) Ayudas para incoporación de jóvenes investigadores a grupos de investigación de Castilla La Mancha. (María Cristina Ortega Muñoz). Duración: 2008 renovable a 4 años. Financiación: 20.840 € Investigador Principal: Fernando de Castro Soubriet. Consejería de Sanidad de Castilla La Mancha (FISCAM) Ayuda para Adquisición de equipamiento científico-tecnológico con fines de investigación. Equipamiento: Espectrofotometro UV-Visible Nanodrop, modelo ND1000. Duración: 2008 Financiación: 7.023,80 € Investigador Principal: Fernando de Castro Soubriet. Consejería de Educación y Ciencia de Castilla La Mancha (PAI08-0242-3822). Terapia celular en un modelo animal de Esclerosis Múltiple: combinación de precursores oligodendrogliales y células mesenquimales. Estudio del papel del IFNgamma en la biología del oligodendrocito. Duración: 2008-2010 Financiación: Investigador Principal: Virginia Vila del Sol. Consejería de Sanidad de Castilla La Mancha (FISCAM) Ayuda para adquisición de equipamiento científico-tecnológico con fines de investigación. Equipamiento: Autoclave Esterilizador de vapor. Duración: 2007 Financiación: 7.421,841 € Investigador Principal: Fernando de Castro Soubriet. Consejería de Sanidad de Castilla La Mancha (FISCAM) Ayuda para grupos consolidados y grupos emergentes de investigación en salud. Duración: 2007-2008 Financiación: 44.744 € Investigador Principal: Fernando de Castro Soubriet. Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Modulación de la proliferación, migración y diferenciación de precursores neurales para neuro-reparación. Duración: 2006-2008 Financiación: 226.090 euros Investigador Principal: Fernando de Castro Soubriet. 4.3 PROYECTOS INSTITUCIONES PRIVADAS Fundación Mutua Madrileña Automovilista-FMMA, Terapias celulares con progenitores de oligodendrocitos para enfermedades desmielinizantes. Duración: 2004-2007 Financiación: 65.000 euros Investigador Principal: Fernando de Castro Soubriet. 41 Federación de Cajas de Ahorro de Castilla y León Combinación de precursores oligodendrogliales y mesenquimales para terapia celular en enfermedades desmielinizantes. Duración: Enero de 2006 a Diciembre de 2007 Financiación: 58.000 € Investigador Principal: Profa. Mª Dolores Ludeña de la Cruz y Dr. Fernando de Castro Soubriet. Federación de Cajas de Ahorro de Castilla y León Microencapsulación y terapia celular para la reparación neural. Duración: Enero de 2006 a Diciembre de 2007 Financiación: 121.000 € Investigador Principal: Prof. Miguel Merchán Cifuentes. Consejeria de Educación y Ciencia Expediente: . pai07-0049-6090 duración: 2007 Titulo: papel de la interacion anosmina/fgfr1 en la migracion de precursores de oligodendrocitos. Financiación: 3.000 €. Investigador principal.: pedro felipe esteban ruiz. Consejeria de Educación y Ciencia Expediente: PAI07-0050-7177 Duración: 2007 Titulo: estudio del control de migración de células mielinizantes por quimioquinas durante el desarrollo y en patologías desmilinizantes. Financiación: 5.000 €. Investigador Principal: Diego Clemente López. 5. PRODUCCIÓN CIENTIFICO-TÉCNICA. 5.1 PATENTES Patentes y Modelos de Utilidad Título: “FGF-2 y migración Autores: de Castro, F. y Nº de precursores de Bribián, A. oligodendrocitos. Aplicación en esclerosis Entidad Titular: de Fecha de Registro: Prioridad: 200403130 29-XII-2004 Países: múltiple y otras lesiones Universidad de Salamanca España desmielinizantes”. Título: “Efecto mitógeno de Autores: Sonic hedgehog sobre precursores de Castro, F., Nº de Fecha (Shh) Bovolenta, P., Merchán, P., Registro: de Bribián, A. y Sánchez- 200600697 de Prioridad: 17-III-2006 oligodendrocitos y su uso Camacho, C. 42 en enfermedades Entidad Titular: desmielinizantes”. Universidad Países: de España Salamanca/CSIC 5.2 PUBLICACIONES SELECCIONADAS de Castro, F., López-Mascaraque, L. y De Carlos, J.A. (2007) Cajal: lessons on brain development. Brain Res. Rev. En Prensa (BRESR100462). de Castro, F., Vila del Sol, V., Esteban, P., Clemente, D., Bribián, A., Merchán, P., Martínez-Granero, F. y Ludeña, M.D. (2007) Terapia celular en enfermedades desmielinizantes. Meth. Find. Exp. Pharm. 29 (Supl. 1), 27-31. Merchán, Merchán, P.*, Bribián, A.*, Sánchez-Camacho, C.*, Lezameta, M., Bovolenta, P. y de Castro, F. (2007) Sonic Hedgehog promotes the migration and proliferation of optic nerve oligodendrocyte precursors. Mol. Cell. Neurosci. 36, 355-368 (doi: 10.1016/j.mcn.2007.07.012). Bribián, A. y de Castro, F. (2007) Oligodendrocitos: origen embrionario, migración e implicaciones terapéuticas. Rev. Neurol. 45,535-546. Coelho, M. y de Castro, F. (2006) La corriente de migración rostral: el largo y continuo viaje de neuronas hasta el bulbo olfativo. En: “La olfacción en España”. Editores: J.R.. Alonso, F. de Castro y L. López-Mascaraque. Editorial SBI, Salamanca (España). Pp 171-192. Bribián, A., Barallobre, M.J., Soussi-Yanicostas, N. y de Castro, F. (2006) Anosmin-1 modulates the FGF-2-dependent migration of oligodendrocyte precursors in the developing optic nerve. Mol. Cell. Neurosci. 33, 2-14. F.I. : 4.641 Vergaño-Vera, E., Yusta-Boyo, M.J., de Castro, F., Bernad, A., de Pablo, F. y Vicario-Abejón, C. (2006) Generation of GABAergic and dopaminergic interneurons from endogenous embryonic olfactory bulb precursor cells. Development 133, 4367-4379.F.I. : 7.603 de Castro, F., López-Mascaraque, L. y De Carlos, J.A. (2006) Cajal: lessons on brain development. Brain Res. Rev. En Prensa. Bribián, A. y de Castro, F. (2006) Oligodendrocitos: origen embrionario, migración e implicaciones terapéuticas. Rev. Neurol. En Prensa. de Castro F. and Bribián A. The molecular orchestra of the migration of oligodendrocyte precursors during development. Brain Research Reviews 49, 227-241 (2005). F.I.: 6.402 5.3 COMUNICACIONES A CONGRESOS 43 AUTORES: BRIBIAN A., DE CASTRO F., MERCHAN P., SÁNCHEZ-CAMACHO, C., MARCHISONE, C., Y BOVOLENTA, P. TITULO: THE BLOCKADE OF SONIC HEDGEHOG RESULTS IN SEVERAL DEFECTS DURING EYE DEVELOPMENT. TIPO: POSTER CONGRESO: INTERNACIONAL CHICK MEETING. BARCELONA (ESPAÑA). AÑO 2007 AUTORES: BRIBIAN A. DE CASTRO F., MERCHAN P., CLEMENTE D., ESTEBAN PF., VILA V. TITULO: OLIGODENDROCYTES: DEVELOPMENT AND PATHOLOGICAL IMPLICATIONS. TIPO: POSTER CONGRESO: EUROPEAN COOPERATION IN THE FIELD OF OF SCIENTIFIC AND TECHNICAL RESEARCH COST-B30 “BRAIN DAMAGE REPAIR”. GARMISCH PARTENKIRCHEN (ALEMANIA). AÑO 2007 AUTORES: DE CASTRO F. TITULO: “INMUNOTERAPIA PARA EL TRATAMIENTO DE LAS ENFERMEDADES NEUROLÓGICAS”. TIPO: PRESENTACIÓN CONGRESO: ASISTENCIA AL SIMPOSIO INTERNACIONAL . FUNDACIÓN RAMÓN ARECES. MADRID. AÑO 2007. GRUPO DE NEUROPROTECCIÓN MOLECULAR 2. RECURSOS HUMANOS DEL GRUPO. 44 El grupo de Neuroprotección Molecular se integró en Octubre del 2005, a la Unidad de Neurología Experimental del Hospital Nacional de Parapléjicos. 2.1 Responsable del laboratorio Rodrigo Martínez Maza. Licenciado en Biología en 1993, en la especialidad de Bioquímica y Biología Molecular, por la Universidad Complutense de Madrid. Su formación se inicia en el laboratorio del Dr. Francisco Mora en el Departamento de Fisiología Humana en la Facultad de Medicina de la Universidad Complutense de Madrid (1992-1995) donde obtiene su licenciatura con grado con una tesis titulada Anfetamina, glutamato y taurina: estudio con microdiálisis de la infusión intracerebral de anfetamina en el estriado de la rata despierta (1997); posteriormente se incorpora al laboratorio de Miguel Ángel Vidal en el Departamento de Desarrollo en el Centro de Investigaciones Biológicas (CIB-CSIC) participando en el estudio del mantenimiento del estado transcripcional activo/inactivo en dominios cromosómicos de mamíferos. En Octubre del año 2000 se doctora por la Universidad Autónoma de Madrid (Departamento Bioquímica y Biología Molecular) con la tesis titulada Caracterización funcional de dominios estructurales del transportador neuronal de glicina GLYT2 dirigida por Carmen Aragón y Beatriz López (1997-2000). En Noviembre del año 2000 comienza su formación postdoctoral en el laboratorio del Prof.Dr. Dan Lindholm en el Instituto de Neurobiología del Centro Biomédico de la Universidad de Uppsala con la obtención de distintas ayudas y becas de formación: beca de la fundación Skandinaviska Enskida Banken (SEB) Foundation (2000), beca postodoctoral del Ministerio de Educación y Ciencia 2001-2002, beca-contrato Marie Curie (FP5 Comunidad Europea) 2002-2005. En este periodo se involucró en la caracterización de las proteínas inhibidoras de apoptosis (IAPs) en procesos neurodegenerativos (isquemia) o en la relación funcional neuroprotección/degradación vía proteosoma de XIAP. El proyecto principal consistió en el estudio de distintos aspectos de las propiedades anti-apoptóticas de IAPs aunque centrado especialmente en la búsqueda de nuevos reguladores específicos capaces de alterar la actividad anti-apoptótica (inhibidora de caspasas, o inductoras de vías pro-supervivencia) de XIAP. Estos estudios desembocaron en la caracterización funcional de reguladores desconocidos de XIAP y el papel fisiológico del balance entre estos factores pro-/anti-apoptoticos en la muerte celular. Esta línea de investigación desarrollada en los últimos años se continuá e integrá en la actividad investigadora del Hospital Nacional de Parapléjicos teniendo como objetivos el estudio así como el desarrollo de terapias de procesos neurotraumáticos y neurodegenerativos. 2.2 Personal Investigador. Manuel Nieto Diaz Doctor en Ciencias Biológicas, por la Universidad Autónoma de Madrid. Técnico Superior Biólogo SESCAM (incorporación Mayo 2008). Mónica Yunta Gónzalez. Doctora en Ciencias Biológicas, por la Universidad Complutense de Madrid. Técnico Superior Biólogo SESCAM (incorporación Agosto 2007). Carmen María Fernández Martos. Doctora en Ciencias Biológicas 2007 (incorporación Febrero 2008). Rosa María Navarro Ruiz . Licenciada en Ciencias Biológicas (incorporación Noviembre 2007). Marcos Lopez Rodríguez. Licenciado en Ciencias Químicas (incorporación Enero 2008). Colaboraciones científicas 45 Dr. Prof. Dan Lindholm. Instituto de Neurobiología. Centro de Biomedicina. Universidad de Uppsala. Uppsala, Suecia Dra. Laura Korhonen. Departamento de Neurociencia, Instituto Minerva. Helsinki. Finlandia. 3. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN DEL GRUPO. El área principal del grupo de Neuroprotección Molecular se centra en la lesión traumática de la médula espinal (LME). La fisiopatología de este tipo de trauma se caracteriza por la acción de una serie de procesos nocivos que conlleva la degeneración del tejido nervioso así como por la formación de una barrera que impiden la reparación funcional de la lesión. Estos son los dos grandes ámbitos de estudio que encamina los trabajos de investigación del grupo, la protección celular y la promoción del crecimiento axonal para la reparación de la LME. La muerte celular programada, apoptosis, ha sido descrita en LME tanto en modelos animales como en humanos, observándose a distancias espacial y temporalmente alejadas del origen y el momento del trauma (la denominada muerte secundaria). Aunque seria difícil prevenir que, tras una lesión medular, las células en el área de lesión se encaminaran hacia una muerte de tipo necrótico, es posible diseñar estrategias útiles que intervengan sobre aquellas células no dañadas que durante la lesión secundaria inician el programa apoptótico, haciendo plausible una mejoría en la función nerviosa. Así, partiendo de la premisa de que es posible atenuar el daño neurotraumático en la lesión medular mediante la intervención temprana del proceso lesivo y atendiendo a las propiedades neuroprotectoras de distintas substancias se han desarrollado estrategias que interfieren con los factores nocivos que participan en los procesos desencadenados durante el daño secundario. Las líneas de investigación en desarrollo de nuestro grupo son las siguientes: En breve, las líneas de investigación en desarrollo de nuestro grupo son las siguientes: Estudio de la participación de inhibidores de apoptosis y sus reguladores durante el proceso neurotraumático de lesión médula. Hemos abordado la caracterización a nivel molecular y celular de la actividad anti-apoptótica y citoprotectora de las proteínas de la familia IAP durante el proceso neurotraumático de la lesión medular. De igual modo, hemos iniciado un estudio de las moléculas de microARN con acción anti-apoptotica que permitirá conocer el grado de participación de estos reguladores postranscripcionales durante el periodo postraumático. Evaluación de nuevas estrategias neuroprotectoras y neuroreparadoras (farmacológicas y celulares) como terapia para la LME. Estamos estudiando la aplicación de posibles terapias que aprovechen la accion citoprotectora de los IAPs y de microARNs in vivo. Estas terapias se sirven por un lado de peptidos traslocadores para administrar intracelularmente proteínas IAPs o microARN y por otro del silenciamiento específico con oligonucleotidos de ARN de interferencia (siARN) de los reguladores endógenos de IAPs, así como de distintos factores implicados en la cascada apoptótica (caspasas iniciadoras y efectoras). Por ultimo, conocida la acción neuroprotectora de estas terapias pasaremos a estudiar su posible combinación con terapias reparadoras como transplantes de glia envolvente. Estudio de un modelo de regeneración nerviosa en mamíferos adultos: identificación de mecanismos neuroprotectores y neuroregeneradores con potencial aplicación clínica. Utilizando como modelo el crecimiento de las astas de ciervo buscamos identificar y evaluar la implicación de los distintos factores en 46 relacionados con la regeneración y rápido crecimiento axonal. Estos factores identificados podrían servir de candidatos en posteriores ensayos tanto en la reparación de nervios periféricos como en la lesión medular. Analisis de los pefiles de expresión génica en la lesión medular y su tratamiento. Nos proponemos desarrollar las herramientas informáticas necesarias en la recopilación de los perfiles de expresión génica disponibles y relacionados con la médula espinal, la lesión medular y los cambios acaecidos con distintos tratamientos para posteriormente poder evaluar los tratamientos que se realicen. 4. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN Y SUBVENCIONES ACTIVOS 4.4 Proyectos de Organismos de ámbito nacional. Fondo de Investigación Sanitaria Estudio del papel de la proteína inhibidora de apoptosis XIAP en nuevas terapias neuroprotectoras de la lesión medular. Duración: 2009-20011 Financiación: 80.596 € Investigador Principal: Rodrigo Martínez Maza. 4.5 Proyectos de Organismos de ámbito Regional. Consejería de Educación y Ciencia de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Caracterización funcional de nuevos reguladores de las proteínas inhibidoras de apoptosis (IAP). Duración: 2006-2008 Financiación: 25.000 euros Investigador Principal: Rodrigo Martínez Maza. Consejería de Sanidad de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha Estudio de la acción neuroprotectora de las proteínas inhibidoras de apoptosis (IAPs) como tratamiento terapéutico en el daño secundario del trauma de la medula espinal.. Duración: 2006-2009 Financiación: 96.700 euros Investigador Principal: Rodrigo Martínez Maza. Consejeria de Sanidad de Castilla-La Mancha (FISCAM) Ayuda para adquisición de equipamiento científico-tecnológico con fines de investigación. Equipamiento: Microscopio esteroscopico de investigación SZX16. Set optica planapocromatica 1 x v 1,6x. Electroporador de alta eficiencia amaxa nucleofector. Duración: 2008 Financiación: 41.823,60 € Investigador Principal: Rodrigo Martínez Maza. Consejeria de Sanidad de Castilla-La Mancha (FISCAM) Ayuda para grupos consolidados y grupos emergentes de investigación en salud. Duración: 2007-2008 Financiación: 29.274 € Investigador Principal: Rodrigo Martínez Maza. 4.5 Proyectos de Organismos Privados Fundación Mutua Madrileña de Investigación Médica 47 Estudio de la acción citoprotectora de las proteínas inhibidoras de apoptosis (IAPs) como aproximación terapéutica en el daño secundario del trauma de la médula espinal. Duración: 2006-2008 Financiación: 25.000 euros Investigador Principal: Rodrigo Martínez Maza. Fundacion Mafre Los miARN neuroprotectores en la lesión neurotraumática de la médula espinal Fecha: 2008 Financiación: 15.000 € Investigador principal: Mónica Yunta González 5. PRODUCCIÓN CIENTÍFICA 2006-2008 5.1 PUBLICACIONES SELECCIONADAS Li-Ying Yu, Korhonen L., Martinez R., Jokitalo E., Chen Y., Arumae U and Lindholm D. Regulation of sympathetic neuron and neuroblastoma cell death by XIAP and its association with proteasomes in neural cells. Molecular and Cellular Neuroscience 22: 308-318 (2003). Trapp T, Korhonen L., Besselmann M, Martinez R., Mercer EA., and Lindholm D. Transgenic mice overexpressing XIAP in neurons show better outcome after transient cerebral ischemia. Molecular and Cellular Neuroscience 23: 302-313 (2003). Yunta, M., Oliva, J. L., Barcia, R., Horejsi, V., Angelisova, P., and Lazo, P.A. (2002) “Transient Activation of the c-Jun N-terminal Kinase activity by ligation of the Tetraspan CD53 antigen in different cell types”. Eur. J. Biochem. 269: 1012-1021. Yunta M., Rodriguez-Barbero, A., Arévalo, M., Lopez-Novoa, J.M. & Lazo, P.A. (2003) “Induction of DNA synthesis by ligation of the CD53 tetraspanin antigen in primary cultures of rat mesangial cells”. Kid. Int. 63: 534-542. Yunta M., Lazo P.A. (2003) “Tetraspanin proteins as organisers of membrane microdomains and signalling complexes”. Cellular Signalling. 15: 559-564. Yunta, M. & Lazo, P.A. (2003) “Apoptosis protection and survival signal by the CD53 tetraspanin antigen”. Oncogene. 22: 1219-1224. orhonen L., Napankangas U., Steen H, Chen Y, Martinez R. and Lindholm D. Differential regulation of X-chromosome-linked inhibitor of apoptosis protein (XIAP) and caspase-3 by NMDA in developing hippocampal neurons; involvement of the mitochondrial pathway in NMDA-mediated neuronal survival. Experimental Cell Research 295: 290-9 (2004). Núñez E, Martínez-Maza R, Geerlings A, Aragón C and López-Corcuera B. Transmembrane domains 1 and 3 of the glycine transporter GLYT1 contain structural determinants of N[3-(4´-fluorophenyl)-3-(4-phenylphenoxy)-propyl] sarcosine specificity. Neuropharmacology 49:922-34 (2005). Barrena S, Almeida J, Yunta M, Lopez A, Fernandez-Mosteirin N, Giralt M,. Romero M, Perdiguer L, Delgado M, Orfao A, Lazo P.A. (2005). “Aberrant expression of Tetraspanin molecules in B-cell chronic lymphoproliferative 48 disorders and its correlation with normal B-cell maturation”. Leukemia 19: 13761383. Barrena S, Almeida J, Yunta M, Lopez A, Diaz-Mediavilla J, Orfao A, Lazo P.A . (2005) “Discrimination of biclonal B-cell chronic lymphoproliferative neoplasias by tetraspanin antigen expression”. Leukemia 23 Jun 2005. Correspondence:1 Nieto Sampedro, M., E. Doncel Pérez; E. Martín López y Nieto-Díaz, M. 2006. Desarrollo de instrumentos de reparación del trauma del sistema nervioso central. En: La Olfacción en España (J.R. Alonso, F. De Castro y L. LópezMascaraque editores), pp. 247-273 Nieto Sampedro, M.; Martín-López, E.; Pita-Thomas, W. & Nieto-Díaz, M. 2006. Plasticidad Neural: aprendizaje y reparación de lesiones. En “Actas del Congreso Cajal 2003. Ed. Gobierno de Aragón, pp. 109-105. Bornhauser BC, Bonapace L, Lindholm D, Martinez R, Cario G, Schrappe M, Niggli FK, Schafer BW, Bourquin JP.- Low dose arsenic trioxide sensitizes glucocorticoid-resistant acute lymphoblastic leukemia cells to dexamethasone via an Akt-dependent pathway. Blood May 30 (2007). Nieto-Díaz, M.; Pita-Thomas, W. & Nieto-Sampedro, M. 2007. Cross-species analysis of gene expression in non-model mammals: repruducibility of hybridization on high density oligonucleotide microarrays. BMC Genomics 8:89. Martinez R. Steen H, Sokka AL Arumae U, Anderson L, Korhonen L and Lindholm D. G-protein pathway suppressor-2 protein (GPS2) induces cell death by the XIAP/caspase 3 pathway and is downregulatd in human tumors. Cancer J.(submitted) 2008. Nieto-Diaz, M; Pita-Thomas, W; Martínez-Maza, R. y Nieto-Sampedro,M.. Quality control methods for oligonucleotide microarrays. Nova Publishers (En prensa) Lopez Rodriguez M, Yunta M, Fernandez M, Navarro RM, Nieto-DIaz M, Martinez R. and Lindholm D. Regulation of Fas-dependent cell death by XIAP. Journal of Biological Chemistry (submitted) (2008-2009). GRUPO DE BIOLOGIA DE MEMBRANA Y REPARACION AXONAL El Grupo de Biología de Membranas y Reparación Axonal se incorporará a la unidad de investigación del HNP en noviembre del año 2007 y estará formado por investigadores de diversas procedencias incluyendo la Universidad de Turin (Italia) o 49 el Instituto Cajal del Consejo Superior de Investigaciones Científicas de Madrid. Actualmente este grupo está incorporando nuevos miembros. 2. RECURSOS HUMANOS DEL GRUPO. 2.3 Responsable de Laboratorio. José Abad Rodríguez. Licenciado en Química en 1989, en la especialidad de Bioquímica, por la Universidad Complutense de Madrid. En 1995 se doctora en Ciencias (Bioquimica y Biología Molecular) por la Universidad Autónoma de Madrid con la tesis: Purificadión y caracterización de un inhibidor de la proliferación glial, dirigida por el Dr. Manuel Nieto Sampedro y desarrollada en el Instituto Cajal de Madrid (CSIC). Durante 1998 disfruta una beca postdoctoral de la Comunidad Autónoma de Madrid (CAM) en el laboratorio de plasticidad neural del Instituto Cajal (CSIC) y trabaja sobre el efecto de los gangliósidos en la proliferación normal y neoplásica de la glia. En 1999, al obtener un contrato postdoctoral del European Molecular Biology Laboratory (EMBL, Heidelberg, Alemania), se traslada al laboratorio del Dr. Carlos Dotti en el Department of Cell Biology. Hasta finales del año 2000 investiga sobre el papel de los gangliósidos y de sus sialidasas en el crecimiento y la regeneración axonales. Al inicio del 2001 obtiene un puesto de jefe de grupo “junior” y se traslada al Istituto Cavalieri Ottolenghi en la Universidad de Turín (Italia). Durante cinco años desarrolla proyectos sobre el papel de los glicoconjugados de la membrana plasmática en el crecimiento y regeneración de los axones y en la enfermedad de Alzheimer. En enero de 2006, se traslada como jefe de grupo al Flanders Interuniversitary Institute for Biotechnology (VIB11) en Lovaina (Bélgica). Aquí desarrolla ulteriormente las líneas mencionadas más arriba hasta noviembre 2007, en que se incorpora como jefe de grupo al Hospital Nacional de Parapléjicos de Toledo. 2.2 Personal Investigador. Ernesto Doncel Pérez. Doctor en Biología por la Univ. Autónoma de Madrid (2003). Técnico Superior Biólogo SESCAM. Alonso Higuero Romero. Doctor en Bioquímica por la Universidad de . Técnico Superior del SESCAM. Natalia Díez Revuelta. Licenciada en Biología por la Universidad Complutense de Madrid (2007). Suscrito al Convenio Específico de Colaboración entre la Administración General del Estado, a través del Instituto de Salud Carlos III, y la Comunidad Autónoma de Castilla-La Mancha en el Programa para favorecer la incorporación de grupos de investigación en las Instituciones del Sistema Nacional de Salud. Nº Exp.: EMER07/026. Marta-Aranzazu Fernández-Pacheco Ortiz de Zarate. Técnico Superior en Biología. Proyecto a la Consejería de Sanidad de Castilla-La Mancha (FISCAM). Nº Exp.: PI-2007/18. María Peñas de la Iglesia. Técnico Especialista en Laboratorio. (2006). Suscrito al Convenio Específico de Colaboración entre la Administración General del Estado, a través del Instituto de Salud Carlos III, y la Comunidad Autónoma de Castilla-La Mancha en el Programa para favorecer la incorporación de grupos de investigación en las Instituciones del Sistema Nacional de Salud. Nº Exp.: EMER07/026 Colaboraciones científicas nacionales e internacionales Drs. Taeko Miyagi y Takafumi Hasegawa, Division of Biochemistry, Prefectural Cancer Center, Miyagi, Japon Dr. Hans-Joachim Gabius. Institut für Physiologische Chemie, LudwigMaximilians Universitat, Munich, Alemania. 50 Dr. Jürgen Kopitz, Institut für Molekulare Pathologie, Ruprech-Karls-Universitat. Heidelberg. Alemania Dr. Carlos G. Dotti. VIB-Catholic University of Leuven, Lovaina, Bélgica. Miembros de la network DYNAMIC. “Programa Marie Curie Training and mobility”. 9 grupos académicos y tres empresas biotecnológicas. Para detalles ver http://dynamic.u-strasbg.fr/ 3. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN DEL GRUPO. 1.- La organización y composición lipídica de la membrana neuronal en el crecimiento y en la regeneración axonal. La organización de la membrana plásmática neuronal es esencial para el desarrollo de las neuronas, en especial para el crecimiento y el mantenimiento de los axones. En nuestro grupo hemos determinado que la manipulación de ciertas poblaciones lipídicas altera esta organización y nos permiten modular la dinámica axonal. En esta línea de trabajo, nos proponemos estudiar la organización y composición de la membrana neuronal, a nivel axonal, en procesos fisiológicos (crecimiento, guía, dinámica sináptica) y la aplicación potencial de estos conocimientos en procesos patológicos (degeneración, lesiones traumáticas). 2.- Papel de las interacciones de los carbohidratos en la diferenciación neuronal y en la relación glia-neurona. Los polisacáridos son los polímeros naturales más complejos y con mayor capacidad para almacenar información biológica. A pesar de este hecho y de que la gran mayoría de las moléculas de la membrana de las células neurales son glicoconjugados, no se conoce el papel que los polisacáridos tienen en la fisiología neuronal ni en la relación entre los distintos tipos celulares del sistema nervioso. Por otra parte, las lectinas, moléculas de unión a carbohidratos, son candidatos ideales para el estudio sistemático de las respuestas celulares a la interacción con los polisacáridos de membrana. Nuestro grupo ha desarrollado un conjunto de sistemas experimentales para estudiar, cuantitativa y sistemáticamente, el efecto de las interacciones glicosídicas en procesos neuronales como el crecimiento y la guía axonal o la capacidad de los axones para regenerarse después de sufrir una axotomía. Esta línea persigue la definición de relaciones estructura oligosacarídica-función neural y el potencial uso de este conocimiento en patologías degenerativas y/o traumáticas del sistema nervioso central. 4. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN Y SUBVENCIONES ACTIVOS 4.1 Proyectos Europeos. EU Marie Curie Training Networks. Exp. MRTN-CT-2005-019561. Proyecto “Dynamic Interactive Chemical Biology and Biomedicine” (DYNAMIC). Duración: 2006-2009. Cantidad total financiada: 206.029,50 € Investigador principal: José Abad Rodríguez 4.2 Proyectos de Organismos de ámbito nacional. Convenio Específico de Colaboración entre la Administración General del Estado, a través del Instituto de Salud Carlos III, y la Comunidad Autónoma de Castilla-La Mancha en el Programa para favorecer la incorporación de grupos de 51 investigación en las Instituciones del Sistema Nacional de Salud. Nº Exp.: EMER07/026. Proyecto: 1.- La organización y composición lipidica de la membrana neuronal en el crecimiento y la regeneración axonal. 2.- Papel de las interaciones de los carbohidratos en la diferenciación neuronal y en la relación glía-neurona. Duración: 2008-2011 Cantidad total financiada: 125.000 € 4.3 Proyectos de Organismos de ámbito Autonómico Consejería de Sanidad de Castilla-La Mancha (FISCAM). Nº Exp. : PI-2007/18 Proyecto: Los gangliosidos de la membrana neuronal como diana para la estimulación de la regeneración axonal. Mecanismos moleculares y aplicación en modelos de lesión medular. Duración: 2008-2010. Cantidad total financiada: 114.314,75 € Investigador principal: José Abad Rodríguez. 5. PRODUCCIÓN CIENTIFICO-TÉCNICA. 5.1. Publicaciones. Abad-Rodríguez J., (2007) Membrane Glycolipids in Neurotrophin ReceptorMediated Signaling. In (de Curtis I. Ed.) Intracellular Mechanism for Neuritogenesis. Springer (New York, U.S.A) pp.. 195-221. Abad-Rodriguez J and Robotti A (2007) Regulation of axonal development by plasma membrane gangliosides. J. Neurochem. 103 (Suppl. 1), 47-45 Santos Da Silva J, Hasegawa T, Miyagi T, Dotti CG. and Abad Rodríguez J. (2005). Asymmetric membrane ganglioside sialidase activity specifies axonal fate. Nature Neurosci. 8: 606-615. Abad-Rodríguez J, Ledesma MD, Craessaerts K, Perga S, Medina M, Delacourte A, Dingwall C, De Strooper B and Dotti CG. (2004). Neuronal membrane cholesterol loss enhances amyloid peptide generation. J. Cell Biol. 167(5): 953-960 Kopitz J, Russwurm R, Kaltner H, André S, Dotti CG, Gabius HJ and AbadRodríguez J, (2004). Hippocampal neurons and recombinant galectins as tools for systematic carbohydrate structure-function studies in neuronal differentiation. Dev. Brain Res. 153: 189-196. Ledesma MD*, Abad-Rodríguez J.* , Galvan C, Biondi E., Navarro P., Delacourte A, Dingwall C, and Dotti CG. (2003). Raft disorganization leads to reduced plasmin activity in Alzheimer’s disease brains. EMBO rep. 4(12): 1190-1196. (* equal contribution) Abad Rodríguez J., Piddini E., Hasegawa T., Miyagi T. and Dotti C. G. (2001). Plasma Membrane Ganglioside Sialidase Regulates Axonal Growth and Regeneration in Hippocampal Neurons in Culture J. Neurosci. 21: 8387-8395. 52 Jun L, Frints S, Duhamel H, Herold A, Abad-Rodríguez J, Dotti C, Izaurralde E, Marynen P, Froyen G. (2001). NXF5, a novel member of the nuclear RNA export factor family, is lost in a male patient with a syndromic form of mental retardation. Curr Biol. 11:1381-91. Abad-Rodríguez J., Bernabé M, Romero-Ramirez L., Vallejo-Cremades M., Fernández-Mayoralas A. and Nieto-Sampedro M. (2000); Purification and structure of neurostatin, a negative regulator of astrocyte division of mammalian brain. J. Neurochem. 74: 2547-2556. Abad-Rodríguez J., Vallejo M., Nieto-Sampedro M. (1998); Control of glial number. Purification from mammalian brain extracts of an inhibitor of astrocyte division. Glia; 23: 156-168. Abad-Rodríguez J., (2007) Membrane Glycolipids in Neurotrophin ReceptorMediated Signaling. In (de Curtis I. Ed.) Intracellular Mechanism for Neuritogenesis. Springer (New York, U.S.A.) pp.195-221 53 FISIO PATOLOGIA VASCULAR (FPVI) El Grupo de Fisiopatología vascular se constituyó en Diciembre del 2006 por investigadores procedentes del Hospital Fundación Jiménez Díaz de Madrid y del Hospital Virgen de la Salud de Toledo. 2. RECURSOS HUMANOS DEL GRUPO. 2.1 Responsable de Laboratorio. Mª Eugenia González Barderas, Doctor en Bioquímica y Biología Molecular, Universidad Complutense de Madrid, Madrid, España (2002). Técnico Superior Biólogo SESCAM. (INTERINA) 2.2 Personal Investigador. * Félix Gil Dones, Doctor en Bioquímica y Biología Molecular, Universidad Complutense de Madrid, Madrid, España (2003). Técnico Superior Biólogo SESCAM. (Contratado) * Tatiana Martín Rojas, Licenciada en Biología. Universidad complutense de Madrid, Madrid, España 1998. Becaria Predoctoral, FUHNPAIIN. * Mª Carmen Bermúdez Oliva. T.E.L, SESCAM Colaboradores Científicos. * Luis Rodríguez Padial. Doctor en Medicina y Cirugía. Universidad Complutense. Madrid (1992) * Dr. Fernando Vivanco Martínez. Laboratorio de Inmunología, Fundación Jiménez Díaz, Madrid. * Dr. Juan pablo Albar. Centro Nacional Biotecnología, CSIC, Madrid. * Dr. Ángel García Pinto. Jefe de Servicio Cirugía Cardiaca. Hospital Gregorio Marañón, Madrid. * Dr. Pedro Moreno,Associated Profesor of Medicine Director. Interventional Cardiology Research. Mount Sinai Medical Center. New York. EEUU * Dr. Juan Antonio López, Unidad de Proteómica, CNIC, Madrid, España. * Dr. Miguel Rivera. Cardiólogo-Pediatra. Director de Investigación Hospital La Fe, Valencia 3. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN DEL GRUPO. Linea 1. Búsqueda de nuevas proteínas diagnósticas y prognósticas en la enfermedad cardiovascular mediante análisis proteómico. La aterotrombosis es la causa principal de mortalidad en el mundo occidental. A pesar de los progresos realizados seguimos sin conocer en profundidad la fisiopatología de la trombosis de placas ateroscleróticas, debido a que los mecanismos de trombosis constituyen un entramado de moléculas con múltiples relaciones entre si. La utilización de distintas metodologías proteómicas en el estudio de la enfermedad cardiovascular está generando nuevos datos de gran interés, como la descripción de nuevos biomarcadores o el establecimiento de perfiles proteicos de monocitos circulantes 54 humanos. En este proyecto pretendemos. 1) Estudiar rutas fundamentales de señalización de las placas de ateroma, de células musculares lisas y células espumosas obtenidas de las placas mediante microdisección por captura con láser, utilizando arrays de fase reversa y electroforesis bidimensional cuantitativa de saturación (2D-DIGE). 2) Estudio de los perfiles proteicos de plasma de pacientes con Síndromes coronarios Agudos (SCA) mediante técnicas avanzadas de proteómica diferencial: SELDI-TOF, LC-MALDI-TOF-TOF, marcaje isobárico-LC-MALDI-TOF-TOF y 2D-DIGE de plasma previamente deplecionado de las proteínas mayoritarias por inmunoafinidad. 3) Análisis estadístico multivariable de los potenciales biomarcadores asociados con la patología cardiovascular obtenidos con las distintas aproximaciones de proteómica diferencial cuantitativa. 4) Validación de las potenciales biomarcadores mediante aproximaciones tecnológicas complementarias. Linea 2. Estenosis aórtica degenerativa. Estudio de aspectos patogenicos mediante análisis proteómico. El Tema central de este proyecto es el estudio de la estenosis aórtica degenerativa. El reemplazo valvular es la principal causa de cirugía en el mundo. La estenosis aórtica (EA) degenerativa es una enfermedad de elevada prevalencia, que en los países desarrollados es la responsable del mayor número de reemplazos valvulares aórticos. El envejecimiento de la población, y el aumento de la EA degenerativa el incrementarse la edad, hacen prever un aumento importante de su incidencia en los próximos años. El objetivo principal de este estudio es analizar mediante técnicas de proteómica válvulas aórticas con EA degenerativa extraídas de pacientes con EA significativa sometidos a cirugía de reemplazo valvular aórtico siguiendo las indicaciones actuales, comparándolas con válvulas aórticas controles obtenidas a partir de necropsias. 4. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN Y SUBVENCIONES ACTIVOS 4.1 Proyectos de Organismos de ámbito nacional. Proyecto FIS PI070537 Búsqueda de nuevas proteínas diagnósticas y prognósticas en la enfermedad cardiovascular mediante análisis proteómico. Duración: 3 años Cantidad: 88693€ Investigadora Principal Mª Eugenia Gonzalez Barderas Entidad gestora: FUHNPAIIN Proyecto redes tematicas de investigacion cooperativa: RD06/00161015 Duracion: 1 año, renovable a 3 cantidad: 26677,42€ IP: Luis Rodriguez Padial, Eugenia Gonzalez Barderas Entidad gestora: FUHNPAIIN 4.2 Proyectos de Organismos Privados Proyecto de la sociedad española de cardiología: estenosis aórtica degenerativa. estudio de aspectos patogenicos mediante análisis. duracion: 1 año cantidad: 15000€ ip: dr luis rodriguez padiañ, mª eugenia gonzalez barderas Entidad gestora. FUHNPAIIN 55 5. PRODUCCIÓN CIENTÍFICA 2006-2008 5.1 Publicaciones Atorvastatin modifies the protein profile of circulating human monocytes after an acute coronary syndrome. M. G. Barderas, J. Tuñón, V. M. Dardé, F. Del la Cuesta, JJ Jiménez-Nacher, N Tarin, L Lopez-Bescos, J. Egido, F. Vivanco. 2008 Proteomics. (ACEPTADO, PENDIENTE DE PUBLICACION). (IMPACT INDEX:6.08) Recent advances in vascular-based proteomics: New biomarkers and future perspective. G. Alvarez-Llamas, F. de la Cuesta, M.G. Barderas, V.M. Darde, L.R. Padial, F. Vivanco. Expert review of proteomics 2008 (ACEPTADO, PENDIENTE DE PUBLICACION) (IMPACT INDEX: 1.53) Influence of fractionation and sample pre-treatment on analysis of membrane and cytosolic subproteomes of eritrocites by 2DE. G. Alvarez-Llamas, F. de la Cuesta, M.G. Barderas, V.M. Darde, C. caramelo, F. Vivanco. Journal of Proteome Research, 2008, (ACEPTADO, PENDIENTE DE PUBLICACION) (IMPACT INDEX:6.901) Proteomic analiysis if circulating monocytes identifies Cathepsin D as a potential novel plasma marker of acute coronary syndrome. M.G. Barderas, J.L: MartinVentura, L.M. Blanco-Colio, M.C. Duran, V.M. drade, F. de la Cuesta, J.J. JiménezNacher, G. Alvarez-Llamas, L. Lopez-Bescos, J. Tunon, J. Egido, F. Vivanco. Clinical Medicine: cardiology, 2008: 2, 1-11 Proteomic Biomarkers of atherosclerosis. F. Vivanco, L.R. Padial, V.M. Darde, F. de la Cuesta, G. Alvarez-Llamas, N.Diaz-Prieto, M.G. Barderas. Biomarkers Insights,2008, 3: 101-113 Vascular proteomics. F, Vivanco, S. Mas, V.M. Dardé, F. de la Cuesta, G. AlvarezLlamas M.G. Barderas. Clinical Proteomics Application. 2007,1,1102-1122. (IMPACT INDEX:6.08) Cardiovascular Proteomics. F. Vivanco, V.M. Dardé, F. de la Cuesta, M.G. Barderas. Current Proteomics, 2007 3,147-170. (IMPACT INDEX:4.90) Circulating human monocytes in the acute coronary syndrome express a characteristic proteomic profile. M. G. Barderas, J. Tuñón, V. M. Dardé, F. Del la Cuesta, M.C. Durán, A. Lázaro, J. Gallego-Delgado, JJ JiménezNacher, N Tarin, L Lopez-Bescos, J. Egido, F. Vivanco. J Proteome Res 2007 Feb 2;6(2):876-886. (IMPACT INDEX:6.901) Atorvastatin modulates the profile of proteins released by human atherosclerotic plaques MC Durán J L Martín-Ventura, S Mohammed, M G. Barderas, S Mas, V M Darde, S Hernández-Mérida, A Lázaro, J Gallego-Delgado, J Tuñón, J Egido, O N. Jensen and F Vivanco. Eur J Pharmacol. 2007 Feb 8; [Epub ahead of print] (IMPACT INDEX: 1.576) 56 5.2. Congresos y Ponencias. ISOLATION OF ARTERIAL INTIMAL LAYER AND SINGLE CELLS FOR PROTEOMIC ANALYSIS. De la Cuesta F., Alvarez-Llamas G., Darde V.M., Donado A., Maroto AS., Padial L.R., Pinto A.G., Barderas M.G., Vivanco F. 7th World Congress HUPO 2008. Ámsterdam, Holanda. SECRETOME ANALYSIS OF HUMAN ARTERY BIOPSIES IN THE SEARCH FOR ATHEROTHROMBOTIC BIOMARKERS. De la Cuesta F., Alvarez-Llamas G., Darde VM., Tejerina M., Juarez R., Padial LR., Pinto AG., Barderas MG., Vivanco F.. 7th World Congress HUPO 2008. Ámsterdam, Holanda. ANALYSIS OF ERYTHROCYTE MEMBRANE AND CYTOSOLIC SUB-PROTEOMES BY 2-DE. Alvarez-Llamas G, de la Cuesta F, Darde VM, Barderas MG and Vivanco F. 7th World Congress HUPO 2008. Ámsterdam, Holanda. IDENTIFICATION OF DIFFERENTIALLY EXPRESSED PROTEINS IN ACUTE CORONARY SYNDROMES. Darde VM., Barderas MG., de la Cuesta F., JiménezNacher J.J., López Bescos L. Tuñon J., Egido J., Vivanco F. 7th World Congress HUPO 2008. Ámsterdam, Holanda. IDENTIFICATION OF PROTEIN EXPRESSED BY AORTIC STENOSIS VALVES IN THE SEARCH FOR NOVEL BIOMARKERS Gil-Dones F., Martin-Rojas T., Diaz-Prieto N., Lopez-Almodovar L.F., de la Cuesta F., Alvarez-Llamas G, Vivanco F., Padial L.R. Barderas M.G. 7th World Congress HUPO 2008. Ámsterdam, Holanda. BÚSQUEDA DE BIOMARCADORES DE ATEROTROMBOSIS CORONARIA: EL FUTURO DE LA PREVENCIÓN DE LA CARDIOPATÍA ISQUÉMICA Donado A., Cuerpo G., de la Cuesta F., Alvarez-Llamas G, Barderas M.G., Vivanco F., Pinto A.G.. XIX Congreso Nacional de la Sociedad Española de Cirugía Torácica y Cardiovascular. 18-21 Junio 2008. Málaga, España. PROTEOMIC ANALYSIS OF INTIMAL TISSUE REGIONS AND SINGLE CELLS FROM ARTERY BIOPSIES IN THE SEARCH FOR CORONARY ATHEROTHROMBOTIC BIOMARKERS. De la Cuesta F., Alvarez-Llamas G., Darde V.M., Donado A., Maroto AS., Padial L.R., Pinto A.G., Barderas M.G., Vivanco F.. European Atherosclerosis Society 77th Congress. 26-29 April 2008. Istambul, Turkey. IDENTIFICATION OF PROTEINS SECRETED BY ARTERY BIOPSIES IN THE SEARCH FOR ATHEROTHROMBOTIC BIOMARKERS. Alvarez-Llamas G., De la Cuesta F., Darde V.M., Donado A., Padial L.R., Pinto A.G., Barderas M.G., Vivanco F.. European Atherosclerosis Society 77th Congress. 26-29 April 2008. Istambul, Turkey. OBTENCIÓN DE MAPAS BIDIMENSIONALES DE CAPA ÍNTIMA DE ARTERIA CORONARIA HUMANA AISLADA POR MICRODISECCIÓN POR LÁSER. De la Cuesta F., Alvarez-Llamas G., Darde V.M., Donado A., Maroto AS., Padial L.R., Pinto A.G., Barderas M.G., Vivanco F.. I Jornadas Bienales de Proteómica para Jóvenes Investigadores, SEPROT. 21-22 February 2008. Sitges, Barcelona. ANÁLISIS DEL SECRETOMA DE ARTERIAS HUMANAS EN LA BÚSQUEDA DE BIOMARCADORES DE ATEROTROMBOSIS. Alvarez-Llamas G., De la Cuesta F., Darde V.M., Donado A., Padial L.R., Pinto A.G., Barderas M.G., Vivanco F. I Jornadas Bienales de Proteómica para Jóvenes Investigadores, SEPROT. 21-22 February 2008. Sitges, Barcelona. (CHARLA de Gloria) 57 PROTEOMIC ANALYSIS OF SECRETOME AND LASER MICRODISSECTED CELLS FROM ATHEROTHROMBOTIC ARTERIES De la Cuesta F., Barderas M.G., Dardé V.M., Álvarez-LLamas G., Donado A., Padial L.R., Tejerina M., Pinto A.G. and Vivanco F.. 1st Annual Iberoamerican Proteomics Congress, laHUPO. 27-30 Junio de 2007. Buenos Aires, Argentina. CIRCULATING HUMAN MONOCYTES ON THE ACUTE CORONARY SYNDROME EXPRESS A CHARACTERISTIC PROTEOMIC PROFILE: EFFECT OF ATORVASTATIN IN THE PROTEOMIC PROFILE. Barderas MG, Dardé VM, De la Cuesta F, Lázaro A, Gallego-Delgado J, Durán MC, Tuñón J, López-Bescós L., Egido J and Vivanco F. 76th Congress of the European Atherosclerosis Society, Helsinki, Finland, 10-13 Junio 2007. PARTICIPACIÓN EN LA REUNIÓN ESPAÑOLA DE LA PROTEORED COMO GRUPO EMERGENTE. MIRAFLORES DE LA SIERRA MADRID, MARZO 2007 CIRCULATING HUMAN MONOCYTES ON THE ACUTE CORONARY SYNDROME EXPRESS A CHARACTERISTIC PROTEOMIC PROFILE: EFFECT OF ATORVASTATIN IN THE PROTEOMIC PROFILE. M.G. Barderas, V. M. Dardé, F. de la Cuesta, J. Jiménez-Nacher, L. López-Bescós, J. Tuñón, J. Egido, F. Vivanco. Congreso Internacional de Proteómica SeProt, Valencia Febrero 2007 PROTEOMIC ANALYSIS OF DEPLETED HUMAN PLASMA IN ACUTE CORONARY SYNDROMES: DIFFERENTIAL EXPRESSION AND PROTEIN CHARACTERIZATION. V.M. Dardé, M.G. Barderas, F. de la Cuesta, J.J. Nacher, L. López-Bescos, J. Tuñón, J. Egido, F. Vivanco. Congreso Internacional de Proteómica SeProt, Valencia Febrero 2007 PROTEOMIC ANALYSIS OF SECRETOME AND LASER MICRODISSECTED CELLS OF ATHEROTHROMBOTIC ARTERIES. F. de la Cuesta, M.G. Barderas, V.M. Dardé, L.R. Padial, A.G.Pinto and F.Vivanco Congreso Internacional de Proteómica SeProt, Valencia Febrero 2007. USE OF PROTEOMIC ANALYSIS FOR CHARACTERIZATION OF THE MOST IMPORTANT ALLERGENS IN WATERMELON. B. Cases, M.Pérez-Gordo, C. Pastor, M.G. Barderas, M de las Heras, J. Cuesta, F. Vivanco. Congreso Internacional de Proteómica SeProt, Valencia Febrero 2007 PROTEOMIC APPROACH FOR DETERMINATION OF NEW BEEF ALLERGENS IN TWO CASE REPORTS F.de la Cuesta, M.G. Barderas,, M.Perez-Gordo, B.Cases, V. M. Dardé, C. Pastor, M. De las Heras, J. Cuesta. S. Quirce, F. Vivanco. Congreso Internacional de Proteómica SeProt, Valencia Febrero 2007 PROTEOME ANALYSIS OF MOST CONSUMED FISHES IN SPAIN. Pérez-Gordo, B. Cases, C.Pastor, M.G. Barderas, J. Cuesta, F. Vivanco. Congreso Internacional de Proteómica SeProt, Valencia Febrero 2007 58 GRUPO DE PLASTICIDAD NEURAL- INSTITUTO CAJAL (CSIC) El Grupo de Plasticidad Neural del Instituto de Neurobiología Ramón y Cajal del Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC) ha tenido como tema de investigación durante los pasados 24 años el estudio de las bases moleculares de la plasticidad neural y su posible utilización para la reparación funcional del sistema nervioso central lesionado. Los temas de trabajo actuales del grupo son los siguientes: Inhibidores del crecimiento y metástasis tumorales Reparación de lesiones medulares mediante transplantes de glia derivada de células madre neurales Anticuerpos y biomateriales para reparar lesiones medula Mecanismos moleculares y celulares implicados en la regulación del dolor neuropático por gangliósidos de cerebro y sintéticos Astrocitos reactivos en cultivo Crecimiento axonal muy rápido 2. RECURSOS HUMANOS 2.1 Responsable del laboratorio Manuel Nieto Sampedro. Licenciado en Ciencias Químicas, especialidades Química Orgánica y Química Física por la Universidad Complutense de Madrid y Doctor (Ph.D) en Bioquímica por el Council for National Academic Awards, Inglaterra. Ha sido miembro de la plantilla científica del National Institute for Medical Research, Mill Hill de Londres, y ha realizado largas estancias de investigación en el Department of Psychobiology, University of California, Irvine, California; siendo contratado como Associate Professor de este centro entre 1983 y 1989. Ha ocupado los cargos de Vicedirector y Director en Funciones del Instituto Cajal, ejerciendo entre 1993 y 1999 como Jefe del Departamento de Plasticidad Neural de este Instituto. Desde 2001 dirige la Unidad de Neurología Experimental, Unidad Asociada entre el Instituto Cajal del CSIC y el Hospital Nacional de Parapléjicos de Toledo. Su investigación ha estado centrada en el estudio de la Biología Celular de la plasticidad sináptica y en la reparación de lesiones del Sistema Nervioso Central de los Mamíferos. Actualmente dirige un grupo dedicado a la investigación de antimitóticos, presentes en cerebro; los Gliomas y metástasis tumorales, así como los procesos de regeneración neuronal tras una lesión y mediante transplantes de glía envolvente del bulbo olfatorio y células madre neurales. Ha dirigido numerosas tesis doctorales y tesinas de licenciatura. Es autor de más de 170 artículos en revistas internacionales especializadas, capítulos de libros científicos y revistas de divulgación. Igualmente ha dictado numerosos cursos y conferencias en foros nacionales e internacionales especializados 2.2 Investigadores pre y postdoctorales Lorenzo Romero Ramírez. Doctor por la Universidad Autónoma de Madrid (2001). Técnico superior Biólogo SESCAM. Manuel Nieto Díaz. Doctor en Biología por la Univ. Autónoma de Madrid (1998). Técnico Superior Biólogo SESCAM. Diego Gómez Nicola. Doctor en Biología – Univ. Complutense Madrid. Contratado por FUHNPAIIN. Eduardo Martín López. Licenciado en Bioquímica - Univ. Salamanca. Becario predoctoral Comunidad Autónoma de Madrid. Daniel Wolfgang Pita Thomas. Licenciado Biología – Univ. Complutense Madrid. Becario predoctoral FPI del M.E.C. Beatriz Valle Argos. Licenciada en Biología y Bioquímica por la Universidad de Salamanca. Becaria predoctoral CSIC 59 Técnicos especialistas de laboratorio Jesus Díaz Tobarra. Ayudante técnico de laboratorio. Colaboraciones científicas nacionales e internacionales Dr. A. Fernández Mayoralas, Instituto de Química Orgánica del CSIC, Madrid. Dr. J. Vaquero Crespo, Servicio de Neurocirugía, Hospital "Puerta de Hierro", Madrid. Dr. Ignacio Pascual Piedrola, Servicio de Urología, Hospital de Navarra. Dr. Ricardo Insausti, Depto. de Anatomía, Universidad de Castilla-La Mancha. Prof. José M. Delgado, Laboratorio de Neurociencia, Universidad de Pablo Olavide de Sevilla. Dra. Rosa R. de la Cruz, , Laboratorio de Neurociencia, Universidad de Sevilla. Dr. Angel Pastor, Laboratorio de Neurociencia, Universidad de Sevilla. Prof. X. Navarro Acebes, Depto. de Fisiología, Universidad Autónoma de Barcelona. Dr.Enrique Verdú, Depto. de Fisiología, Universidad Autónoma de Barcelona. Prof. B. Castellano, Depto. de Histología, Universidad Autónoma de Barcelona. Prof. B. Gonzalez de Mingo, Universidad Autónoma de Barcelona. Dr. J. Forès, Servicio de Traumatología, Hospital Provincial de la Generalitat, Barcelona Dra. Maximina Monzón, Universidad de Las Palmas. . 3. LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN 1. Astrocitos reactivos en cultivo (Daniel Wolfgang Pita Thomas) Cualquier tipo de lesión en el sistema nervioso central puede provocar una respuesta en las células gliales llamada gliósis reactiva. Los astrocitos experimentan cambios morfológicos, aumentando de tamaño y pasando de una forma en reposo a la forma fibrosa-reactiva . La expresión y fosforilación (estado de polimerización) de moléculas como la proteína GFAP (glial fibrillary acidic protein ) y el IMP (inhibitory membrane proteoglycan) aumentan en respuesta a lesiones . Aunque, los astrocitos cultivados a partir de tejido neonatal son promotores del crecimiento neurítico (expresan un proteoglicano, PMP, perinatal membrane proteoglycan, promotor del crecimiento). los astrocitos reactivos formados in vivo expresanl IMP, un proteoglicano detectable en astrocitos tras una lesión, y uno de los principales inhibidores del crecimiento de neuritas (axones y dendritas). En cultivo, los astrocitos perinatales cuando son cultivados en ausencia de suero o tratados con AMP cíclico, adoptan la morfología estrellada típica de células reactivas. Sin embargo, estos astrocitos con morfología estrellada mantienen todavía sus características favorecedoras del crecimiento. El objetivo de nuestro trabajo es desarrollar un modelo in vitro , donde los astrocitos demuestren características morfológicas de reactividad (forma estrellada) y expresen en su superficie proteoglicanoss quw inhiban el crecimiento neurítico. 2. Biomateriales en la reparación del trauma medular (Eduardo Martín López) Como consecuencia de los avances en el uso de biomateriales como herramienta terapéutica en la reparación de lesiones del Sistema Nervioso Central (SNC), hemos comenzado el estudio de: a) técnicas de obtención de geles orientados que permitan el crecimiento preferencial de células y neuritas en el seno de los mismos, y b) combinaciones de distintos biomateriales biocompatibles, con la finalidad de conseguir sustratos que permitan el crecimiento orientado de células y neuritas en modelos animales de lesión medular, complementando el implante, en su caso, con transplantes de células promotoras del crecimiento, como la glía envolvente de bulbo olfatorio, o células con potencial reparador, como las células madre neurales. 60 Asociaciones de soluciones de 2% quitosano con polilisina y/o gelatina parecen por el momento las combinaciones óptimas. 3. Mecanismos moleculares y celulares implicados en la regulación del dolor neuropático por gangliósidos derivados de cerebro (Diego Gómez Nicola) El dolor neuropático se asocia con enfermedades o daño en el sistema nervioso periférico o central, y es un síntoma común a numerosas patologías, como la neuropatía diabética, la neuralgia trigeminal, o el daño a la médula espinal. La inflamación que sigue a la lesión medular se caracteriza por la invasión y activación de células inmunes. Destaca la acción desencadenada por la interleuquina 2 (IL-2), el factor proliferativo de células T. Como consecuencia de sus efectos proliferativos y de diferenciación, la IL-2 induce la síntesis de otras citoquinas y factores de crecimiento, como por ejemplo la IL-1beta, TNF-alfa o IFN-gamma. Por otro lado, y dentro de este conjunto de moléculas proinflamatorias, aparece la interleuquina 15 (IL-15), una citoquina con actividades biológicas similares a las de IL2. Creemos que esta redundancia explicaría que la IL-15 reemplace a la IL-2 en la regulación de las respuestas inmunes mediadas por células T en el sistema nervioso central (SNC), donde existe evidencia de su expresión en astrocitos y microglía. En conclusión, proponemos que la IL-15 ejerce un papel regulador en los fenómenos de inflamación y de dolor neuropático. Para comprobarlo es necesario por una parte, comprobar la presencia y niveles de IL-15 y de su receptor (IL-15R) en el SNC normal y tras procesos traumáticos, tales como lesiones que lleven a dolor neuropático. Utilizaremos modelos experimentales de dolor neuropático estandar, como la constricción crónica del ciático (CCI), o la ligadura de nervios espinales L5 y L6. Al mismo tiempo, evaluaremos el fenómeno de dolor en imagen especular (“mirror image pain”), y su participación en el proceso propuesto. 4. Crecimiento axonal en astas de ciervo común (Cervus elaphus) (Manuel Nieto Díaz y Wolfgang Pita Thomas) Queremos conocer la combinación de factores moleculares responsable del crecimiento axonal acelerado observado en las astas de los ciervos. La velocidad de crecimiento de los axones es uno de los factores limitantes en la reparación de lesiones del sistema nervioso. A pesar de los avances logrados en la estimulación del crecimiento axonal mediante modificación del ambiente celular y el bloqueo de inhibidores del crecimiento, las distancias alcanzadas y las tasas de crecimiento distan mucho de alcanzar valores similares a los observados durante el desarrollo embrionario. Como consecuencia, los axones alcanzan distancias de regeneración cortas y, en la mayoría de las ocasiones, insuficientes para conectar con sus dianas fisiológicas. En la reinervación anual de las astas de los ciervos, la capacidad de crecimiento de las fibras nerviosas regenerativas ocurre a velocidades de hasta 20 mm/día. El ciclo de crecimiento, maduración y caida (desmogue) de las astas de los ciervos constituye el único caso de regeneración completa de órganos en mamíferos adultos. Durante su fase de crecimiento, las astas (y las fibras nerviosas acompañantes) de especies como el ciervo común (Cervus elaphus ) aumentan su longitud hasta 20 milímetros diarios. Estas características han llevado a las astas de los ciervos a constituirse en un modelo para los estudios de reparación y crecimiento en osteología, a pesar de lo cual, la investigación de estos órganos es aún incipiente y apenas si existen estudios analizando los mecanismos que subyacen al rápido crecimiento de su inervación. Estudios previos han demostrado el carácter sensorial de las fibras nerviosas presentes y su rápido crecimiento durante la regeneración de las astas. Durante los pasados dos añoshemos estudiado las bases moleculares de este crecimiento y analizado la expresión génica en el asta del ciervo en distintos momentos de su crecimiento. Cocomitantemente, hemos probado que es correcto utilizar microarrays humanos para analizar la expresión génica de mamíferos 61 evolutivamente anteriores y que los datos derivados pueden modelarse en un modelo en cultivo de trigémino de rata adulta. En la actualidad estamos purificando lo que puede ser un factor/es neuritogénico nuevo, con aplicación clinica obvia. 5. Inhibidores del crecimiento y metástasis tumorales (Beatriz Valle Argos y Diego Gómez Nicola, en colaboración con Fernández-Mayoralas, IQOG-CSIC) A partir de extractos de cerebro, nuestro grupo de trabajo se purificó y caracterizó un gangliósido, llamado neurostatina, regulador natural de la proliferación de astroblastos y con actividad sobre líneas celulares de glioblastoma multiforme humano. Análogos sintéticos del producto natural han sido producidos y su actividad ha sido probada sobre tumores humanos en cultivo. Uno de los compuestos, el glicósido NF115, fue capaz de inhibir la división de células transformadas U-373 a concentraciones micromolares. En experimentos in vivo, utilizando ratas como animales de experimentación portadores de un tumor en el espacio epicraneal, la administración de NF115 por inyección i.t. durante un período de quince días y análisis del volumen tumoral, mostró que este compuesto es capaz de reducir el volumen tumoral hasta su desaparición. Por otra parte, resultados preliminares de nuestro grupo muestran que NF115 es también capaz de inhibir el crecimiento de melanoma humano. Resultados preliminares de nuestro laboratorio, usando cultivos de células tumorales U373, indican que NF115 actúa sobre diversos genes relacionados con la inducción de apoptosis. Basándonos en la hipótesis de que NF115 puede actuar inhibiendo la enzima glucosilceramida transferasahemos diseñado y sintetizado nuevos compuestos con actividad inhibitoria muy alta (ID50 similar a la del producto natural), manteniendo al mismo tiempo la sencillez y economía de su producción. Así, hemos obtenido varios compuestos con mayor carácter hidrofóbico que NF115, modificando la cadena hidrocarbonada en posición anomérica y sustituyendo el grupo acetilo de NF115 por diferentes grupos acilo en el amino del monosacárido. Al mismo tiempo hemos introducido diversas cadenas hidroxiladas en posición C-6, variando la longitud de la cadena y la estereoisomería de los centros quirales. Los nuevos compuestos se han probado biológicamente activos in vitro e in vivo en líneas tumorales murinas y humanas y tumores de diversos tipos (glioma, melanoma, leucemia). 6. Modo de acción de la neurostatina y análogos sintéticos sobre el crecimiento de astrocitos y células tumorales de origen astrocitario (astrocitoma). (Beatriz Valle Argos) A partir de extractos de cerebro, nuestro grupo purificó un gangliósido, llamado Neurostatina, caracterizado como el gangliósido GD1b, 9-O-acetilado en su siálico terminal. La Neurostatina es un regulador natural de la proliferación de astroblastos y tiene actividad antitumoral sobre líneas celulares de glioma humano. Hemos avanzado en dos objetivos fundamentales en este proyecto: En primer lugar, partiendo del gangliósido GD1b, hemos obtenido derivados glicolipídicos semi-sintéticos más estables y con actividad antitumoral mejorada tanto in vivo como in vitro respecto a la neurostatina. En segundo lugar, estamos estudiando el modo de acción molecular de la Neurostatina y su efecto y sitio/s de acción en el ciclo celular, muerte celular y otras rutas de segundos mensajeros. 62 4. PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN Y SUBVENCIONES ACTIVAS 4.1 Proyectos de Organismos de ámbito nacional Ministerio de Educación y Ciencia Reparación de las lesiones de médula espinalmediante transplantes neuroprotectores que promueven crecimiento neurítico dirigido Duración: 2007- 2009 4.2 Proyectos de Organismos de ámbito autonómico. Consejería de Sanidad de Castilla-La Mancha Reparación del sistema nervioso de mamíferos: factores responsables del crecimiento axonal muy rápido en astas de ciervo adulto Duración: 2007-2009 Consejería de Educación y Ciencia de Castilla-La Mancha Reparación del trauma medular con transplantes de células obtenidas por diferenciación y trans diferenciación de células troncales Duración: 2007-2009 5. PRODUCCIÓN CIENTÍFICA 2006-2008 Gómez-Nicola, D, Martin-Lopez E, Nieto-Sampedro, M. (2007) Expression of IL-15 in the spinal cord after chronic constriction injury. Eur J Pain. 11 (1) Sup 1: 154. Nieto-Díaz, M., Pita-Thomas, D.W. y Nieto-Sampedro, M., (2007) Cross-species analysis of gene expression in non-model mammals: repruducibility of hybridization on high density oligonucleotide microarrays. BioMed Central Genomics. 8: 89-107. Gómez-Nicola, D, Valle-Argos, B, Pita-Thomas, DW, Nieto-Sampedro, M. (2008). Interleukin 15 expression in the mouse CNS: a key signal for glial activation after an inflammatory injury. Glia: 494-505. Gómez-Nicola, D. and Nieto-Sampedro, M. (2008). Glia Reactiva. Mente y Cerebro, 32: 78-87. Nieto-Diaz, M., Pita-Thomas, D.W and Nieto-Sampedro, M. (2008) Cell biology of very rapid nerve fiber regrowth in adult mammals. En preparación. Doncel-Pérez, E., Caballero-Chacón, S. and Nieto-Sampedro, M (2007) Differentiation of neurosphere cells to cells with aldynoglia phenotype. Glia, in press. García-Álvarez, Isabel, Leoncio Garrido,Ψ Ernesto Doncel-Pérez, Manuel NietoSampedro and Alfonso Fernández-Mayoralas (2008) Detection of Metabolite Changes in C6 Glioma Cells Cultured with Antimitotic Oleyl Glycoside by 1H MAS NMR. J. Med. Chemistry, en preparación. Nieto-Sampedro, M. (2007). New Encyclopledia of Neuroscience (L.Squire, Albright, T., Bloom, F., Gage,F., and Spitzer, N. eds.) Neural repair: regeneration and functional recovery: Regeneration after spinal cord damage: olfactory ensheathing cells (MS number: 20), Bjórklund, A., ascoc.editor.(invited). Nieto-Sampedro, M. (2008) Ultimos avances en la reparación de la lesión medular. XIII Jornadas Científicas de ASPAYM, Madrid, 4 Octubre. 63 Nieto-Sampedro, M. (2008) Génesis y envoltura de neuritas promovidas por células derivadas de neuroesferas. V JORNADAS SOBRE ESCLEROSIS MÚLTIPLE EN ALBACETE, 25 de Octubre. INDICES de IMPACTO (Seleccionados) García Álvarez, I. G. Corrales, M. L. López, J. San Román, E. Doncel Pérez, M. Nieto-Sampedro, A. Fernández-Mayoralas. (2006) Síntesis de nuevos glicósidos inhibidores del crecimiento de gliomas y estudio de su liberación controlada mediante el uso de polímeros biodegradables XXI Reunión Bienal del Grupo de Química Orgánica de la RSEQ. García-Álvarez, I. Corrales, G., Doncel-Pérez, E. Muñoz, A., Nieto-Sampedro, M. and Fernández-Mayoralas, A. (2006) Design and Synthesis of Glycoside Inhibitors of Glioma and Melanoma Growth. . J. Med. Chemistry IF: 4.9 Nieto-Diaz, M., Pita-Thomas, D.W. y Nieto-Sampedro, M., (2007) Cross-species analysis of gene expression in non-model mammals. Reliability of hybridization on high density oligonucleotide microarrays. BMC Genomics 8:89. IF: 4.03 Doncel-Pérez, E., Caballero-Chacón, S. and Nieto-Sampedro, M (2007) Differentiation of neurosphere cells to cells with aldynoglia phenotype. Glia, in press IF: 5.01 Manuel Nieto-Sampedro MS No.20. New Encyclopedia of Neuroscience(Squire,Albright, Bloom, Gage and Spitzer, eds.) Neural repair: regeneration and functional recovery. Regeneration after spinal cord damage: olfactory ensheathing cells. Gómez-Nicola, D, Valle-Argos, B, Pita-Thomas, DW, Nieto-Sampedro, M. Interleukin 15 expression in the mouse CNS: a key signal in the glial activation after an inflammatory injury. 2007. Glia 56(5):494-505. IF: 5.01 García-Álvarez, Isabel, Leoncio Garrido,Ψ Ernesto Doncel-Pérez, Manuel NietoSampedro and Alfonso Fernández-Mayoralas (2008) Detection of Metabolite Changes in C6 Glioma Cells Cultured with Antimitotic Oleyl Glycoside by 1H MAS NMR. J. Med. Chemistry, en preparación. IF: 4.9 64