O-73-docu

EFECTO DEL ÁCIDO RETINOICO ALL TRANS EN LA EXPRESIÓN DE LAS
PROTEÍNAS DE LAS UNIONES ESTRECHAS (CLDN 1,2,8 ZO-1 Y OCLUDINA)
Y EN LA MORFOLOGÍA DE CÉLULAS MESOTELIALES DE PACIENTES EN
DIÁLISIS PERITONEAL
Retana-Contreras M1, Ramos-Gordillo M2, Pérez-López A3, Sánchez-Montes de
Oca E1, Alfaro-Cruz C4, Martín D1, Namorado C1, González-Pozos S1, ReyesSánchez J1.
1Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del IPN (Cinvestav-IPN),
2Hospital la Raza Instituto Mexicano del Seguro Social, 3Servicio de Nefrología
del Hospital Central Norte de Pemex-Azapotzalco, 4Hospital Gabriel Mancera
Instituto Nacional del Seguro Social.
Resumen
Los pacientes en diálisis se clasifican de acuerdo a la capacidad de la membrana
peritoneal para transportar solutos en transportadores altos o transportadores
bajos. Las células mesoteliales (CM) son las células más importantes del
peritoneo y constituyen la mayor área superficial a través de la cual ocurre el
intercambio de solutos durante la diálisis. En diálisis el transporte de solutos
ocurre principalmente a través de la vía paracelular y está regulado por las
uniones estrechas (UE). Las claudinas (CLDNs) son componentes esenciales de
las UE y son determinantes del transporte paracelular. Se ha reportado que
cultivos de células mesoteliales de peritoneo humano (CMPH) expresan CLDN1.
En nuestro laboratorio hemos encontrado que también expresan CLDN 2, 8, ZO-1
y ocludina y que se encuentran localizadas en el borde celular. Al evaluar estas
proteínas en cultivos de CMPH de pacientes con transporte peritoneal (TPA) alto y
bajo (TPB) observamos que estas proteínas están desorganizadas encontrándose
principalmente en el citoplasma o en el núcleo (CLDN 2,8 y ocludina) ó en el borde
pero en una forma discontinua (CLDN 1 y ZO-1). El ácido retinoico all trans
(ARAT) es un metabolito activo de la vitamina A, el cual se ha observado es capaz
de inducir la expresión de algunas CLDNs. El objetivo de nuestro trabajo fue
estudiar el efecto del ARAT en la expresión de CLDN 1,2,8, ZO-1 y ocludina, así
como su efecto en la morfología y en la permeabilidad de CMPH de pacientes con
TPA y TPB. La expresión de las CLDNs se estudio por inmunoflurescencia
utilizando anticuerpos específicos para cada proteína, mientras que el efecto sobre
la morfología se evaluó por microscopía electrónica de barrido (MEB). La
permeabilidad fue estudiada midiendo la resistencia eléctrica transepitelial (RET)
para estimar el sellado de la monocapa. Los resultados obtenidos son: En CMPH
de pacientes con TPA y TPB el ARAT incremento la expresión de CLDN 1,2,8,
ZO-1 y ocludina y mejoró la distribución solo de CLDN1, ZO-1 y ocludina. Por la
MEB observamos que las CMPH de pacientes con TPA y TPB son aplanadas y no
están unidas entre sí, tienen pocas microvellosidades y carecen de cilios. El
tratamiento con ARAT aumento el número de microvellosidades y mejoro la unión
entre célula-célula. Además, el ARAT aumento el valor de RET en TPA , pero no
en TPB. En conclusión el tratamiento con ARAT aumenta la expresión de las
proteínas estudiadas favoreciendo su localización en los bordes celulares y
además conserva mejor las microvellosidades y disminuye los espacios
intercelulares.