LIMPIEZA DE MICROSCOPIO

MICROSCOPIO LIMPIO
Efecto de la suciedad en la imagen
Mientras más cerca cualquier suciedad del objeto o del sensor de la cámara, mayor es su
efecto sobre la imagen visual o grabado. Las superficies siguientes son fundamentales:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
La superficie externa de la lente frontal del objetivo
La superficie del sensor de la cámara y su cubierta protectora de vidrio
Ambas superficies de la hoja de la cubierta
La superficie del portaobjetos
La superficie de la óptica de la cámara del adaptador
Las superficies de la lente frontal del condensador
Las superficies interior y exterior de la lente del ojo del ocular y las superficies de
retículas
8. La superficie exterior del cristal de protección que cubre la abertura de salida de
luz del diafragma de campo de iluminación
9. Otras superficies de vidrio en la trayectoria de la luz, por ejemplo, los blubs de
lámparas de halógeno o de alta, filtros de fluorescencia y divisores de haz, lentes
de colección, de contraste y filtros de calor.
Algunas superficies ópticas son más sensibles a la suciedad que otras. La lente frontal del
objetivo es particularmente crítica, por lo que se discute en mayor detalle en este
documento.
Para cualquier objetivo seco, menor será la distancia de trabajo libre y cuanto menor sea
la superficie de la lente frontal cóncava, mayor es el peligro de la lente frontal estar
manchada con medios de incrustación, líquidos de inmersión o polvo.
La exposición de la lente frontal del objetivo a cualquier polvo es mayor en el caso de un
microscopio invertido que un microscopio vertical. En particular, todos los objetivos LD
secos, con aumentos de 32x, 40x y 63x deben ser verificados regularmente.
La lente frontal de un objetivo de inmersión debe ser limpiada para eliminar los residuos,
tanto después de su uso y, además, antes de la inmersión líquida fresca es aplicada. La
mezcla de diferentes lotes del mismo medio puede dar lugar a imágenes borrosas.
Cómo reconocer la suciedad
Para reconocer la suciedad de las superficies ópticas, usted debe tener una idea del mejor
resultado que puede esperar de un método de microscopía específico y en una aplicación
específica. Si compara su expectativa con la imagen visual en términos de máxima
definición, mejor contraste y limpieza, se reconocerán de inmediato si su microscopio está
sucio en cualquier lugar.
Si la nitidez o el contraste de la imagen son menores que el óptimo, existe una alta
probabilidad de que la óptica del microscopio no esté limpia.
Para localizar el elemento sucio, proceder como sigue:
 Gire cuidadosamente los objetivos y las cámaras en una pequeña cantidad dentro
de su hilo.
 Ver portaobjetos y cubreobjetos moviendo el espécimen mientras se centra en las
superficies superior e inferior en sucesión.
 Compruebe el condensador moviéndola hacia arriba y hacia abajo y si es posible,
ligeramente girando o girar la lente frontal.
La superficie óptica afectada se identifica cuando la suciedad sigue el movimiento del
componente óptico sospechoso. La cámara es la única excepción de esta regla: la suciedad
dentro de la cámara no se mueve cuando se mueve la cámara.
Una comprobación macroscópica de las partículas de polvo más grandes y arañazos en las
superficies ópticas puede llevarse a cabo con lupas 3x a 6x, o un ocular a cabo de manera
equivocada arriba.
La suciedad en la lente frontal de un objetivo se detecta fácilmente si nos fijamos en una
superficie uniformemente iluminada
desde el extremo posterior del objetivo.
Los componentes internos de la lente
producen una imagen ampliada del más
mínimo pedazo de suciedad en la lente
frontal.
La comprobación final siempre debe ser
una evaluación de la mejora de la calidad
alcanzada en la imagen.
La imagen izquierda muestra imagen limpia y el lado
derecho suciedad de aceite
Los diferentes tipos de suciedad
Hay que diferenciar entre las partículas de polvo (vidrio erosionada de preparados
microscópicos, las escamas de la piel del micros copista, la pelusa de la ropa, el polen) y
otros tipos de suciedad (incrustación de medios de inmersión líquida o seca, residuos de
soluciones culturales de limpieza inadecuados, huellas digitales, grasa)
El polvo o bien puede descansar libremente en las superficies ópticas. Otros sucios
pueden ser solubles en agua o necesitandisolventes orgánicos para completar la
eliminación.
Una imagen borrosa no siempre es debido a la suciedad: utilizando un objetivo con una
gran abertura numérica en conjunción con un cubreobjetos del espesor erróneo puede
dar lugar a imágenes borrosas (aberración esférica).
Objetivos secos de este tipo tienen normalmente un collar de corrección, que permite la
compensación de la aberración esférica. Gire el collar de corrección (mientras continua el
ajuste del enfoque) hasta que el mejor contraste y nitidez de imagen se consigue.
Muchos objetivos de inmersión son altamente corregidos, también requieren
cubreobjetos especialmente seleccionados de un espesor de 0,17 mm, si la mejor imagen
es necesaria.
Objetivos de inmersión sólo deben usarse en conjunción con un líquido de inmersión
adecuado, libre de burbuja. Utilice los objetivos de inmersión en aceite con IMMERSOL de
Carl Zeiss solamente. Para el objetivo del agua c-apocromático de inmersión, lo ideal es
usar agua destilada o W
IMMERSOL solamente.
El uso recomendado de vez en
cuando de anisol como un medio
de inmersión en los resultados da
pérdida de la nitidez y el
contraste. Por otra parte, el anisol
puede atacar el cimiento de las
ópticas delanteras, especialmente
de los objetivos de mayor marca.
La imagen borrosa a pesar de la limpieza es causada por la aberración
esférica.
Objetivo apocromático plan de ajustado correctamente (izquierda),
incorrecto (derecha).
Diferentes superficies ópticas
Superficies cóncavas o convexas (lentes frontales de los objetivos secos y condensadores
secos, las lentes de los ojos de algunos oculares) deben distinguirse de las superficies
planas paralelas o en avión (lentes frontales de la mayoría de los objetivos de inmersión y
condensadores, filtros, gafas de protección de los sensores de la cámara o las aberturas de
salida de luz.
Limpie las superficies cóncavas o convexas con los hisopos de algodón tal como se
describe más adelante.
Limpie las superficies planas de fácil acceso con medios similares, o simplemente con el
tejido blando facial.
La Óptica del microscopio puede consistir en vidrio óptico, cuarzo fundido o polímeros.
Las superficies de todos ellos están recubiertas para reducir al mínimo la luz difusa.
Algunos recubrimientos anti reflectantes son resistentes a la limpieza (las lentes de los
ojos de piezas de los oculares), mientras que otros son demasiado blandos para ser
capaces de limpiar. La mayoría de los recubrimientos anti reflectantes se componen de
capas de fluoruro de magnesio, y sólo se deben limpiar con agentes libres a partir de
amoníaco y ácidos.
A veces se recomienda el uso de agentes de limpieza de cristales del hogar (Sidolin, brillo,
color azul Windex). Algunos componentes ópticos están rodeadas por las superficies
negras laca anti reflectantes, que son sensibles a los disolventes orgánicos. Las piezas de
plástico y caucho de oculares serán igualmente atacados por algunos disolventes
orgánicos (acetona, cloroformo). Las lentes de los microscopios más viejos se pegan con
cementos solubles en alcohol. La mayoría de los cementos de lentes utilizadas hoy en día
son poli resinas acrílicas sintéticas, que no tienen este problema.
Las superficies internas de la óptica del microscopio, los componentes de los conjuntos de
filtros de fluorescencia, cámaras y adaptadores para cámaras nunca deben ser limpiadas
por el usuario, sino por el personal de servicio técnico. El usuario puede limpiar la
superficie externa del lente frontal objetivo, la lente condensadora frontal; la lente del ojo
de los oculares, filtros de conversión, y la superficie exterior del cristal de protección que
cubre la abertura de salida de luz del diafragma de campo iluminado.
Óptica limpia (izq.) polvo en la cubierta
de la salida de luz del diafragma de
campo de iluminación (arriba a la
derecha). Cámara extremadamente
sucia (abajo a la derecha). Intestino
delgado de una rana con manchas azan
Agentes y Métodos de Limpieza
El objetivo es la eliminación completa del polvo y la suciedad sin dejar ningún residuo del
agente de limpieza y sin dañar las superficies.
Los siguientes utensilios y agentes son requeridos:
 Palos largos y delgados de madera preferiblemente de bambú (obtenible a partir
de proveedores restaurante chino) o un material similar, no demasiado flexible.
 Algodón de alta pureza (algodón hidrófilo), tal como se utiliza en oftalmología.
 Hisopos absorbentes de poliéster para la limpieza óptica. Se trata de una muy
buena alternativa a las esponjas de algodón y pueden ser reutilizados.
 Paños faciales (Kim paños suaves, Kleenex)
 Soplador de polvo (disponible de los proveedores materiales de laboratorio o
farmacias)
 Solventes para la eliminación de la suciedad grasienta o aceitosa, tales como la
receta de la casa Carl Zeiss (solución de limpieza óptica), o de grado analítico nhexano. Sólo para cubrir las caídas: acetona pura.
Para la limpieza rápida y fácil de superficies planas (la eliminación de los medios de
inmersión del cubreobjetos o las lentes frontales de los objetivos de inmersión), uso de los
tejidos blandos faciales (Kleenex) empapado en un líquido para lavar plato diluido en
agua destilada.
Precaución: el tejido del lente comúnmente no se destina para la limpieza, pero sólo para
el almacenamiento libre de polvo y protección de los componentes ópticos. Con la única
excepción de Whatman tejido del lente 105papel de lentes son demasiado duras para la
limpieza, también, que no absorben la suciedad de manera eficiente, o lo suficientemente
rápido.
Para limpiar todas las superficies ópticas, use ya sea recién hechos, hisopos de algodón o
hisopos nuevos poliéster (ITW Texwipe puntas limpias), éstas absorben la suciedad a
través de sus superficies de microfibra.
Preparación de los hisopos de algodón
1. Lávese las manos (uso de guantes de látex no son adecuados)
2. Sumerja el palillo de bambú en la solución de limpieza (acuoso u orgánico). Esto
hace que las fibras de algodón agarrar mejor al palo.
3. Poner el palo en contacto con el algodón.
4. Gire el palillo para cerrar las fibras de algodón, luego gire mas poco a poco, para
que una de manera uniforme crezcan, aproximadamente con forma elíptica de
algodón en la punta.
5. Para mantener la punta de algodón limpio, el palillo debe ser guardado en una
bolsa de polietileno hasta que se utiliza. No toque la punta con los dedos, ya que el
sudor y la grasa de la piel afectará de manera significativa la capacidad de limpieza.
6. Retire la punta de algodón después de cada trazo y reemplazarlo con un
bastoncillo de algodón recién hecho.
7. El palillo puede ser utilizado durante mucho tiempo. Utilizar palo separado para las
soluciones basadas en agua y disolventes orgánicos.
Procedimiento de limpieza
1. Sople las partículas de polvo sueltas fuera con un
soplador de polvo.
2. Quite toda la suciedad soluble en agua con agua
destilada. Si esto no se realiza correctamente,
repita con líquido de fregar diluido. Quite los
residuos con un hisopo de algodón sucio, respira
en la primera superficie para generar una película de humedad. Tenga cuidado de
no rociar gotitas de saliva en la superficie.
3. Para quitar la suciedad aceitosa primero utilice
líquido lavavajillas diluido. Si el resultado no es
satisfactorio, repita utilizando un disolvente (Carl
Zeiss Solución de Limpieza)
4. La suciedad grasienta siempre debe ser
removido con un solvente.
5. Después de limpiar la superficie de la inspección
(véase la sección Cómo reconocer la suciedad)
Coloque los objetivos, oculares y cámaras en una
superficie libre de polvo. Todos los otros componentes a
limpiar deben ser accesibles de la mejor manera posible.
Sumergir el hisopo de algodón o hisopo de ITW Texwipe
Cleantips en la solución de limpieza y sacuda el exceso de líquido. Un exceso de líquido en
un bastoncillo de algodón fluirá por encima del borde de la lente y atacar el cemento de la
lente. Esto puede provocar que los componentes cementados a desarmarse.
El disolvente debe tomar la suciedad tanto como sea posible. Con el fin de aumentar el
tiempo de retención de disolventes orgánicos volátiles en la yema de algodón, algunos
usuarios enfrían el disolvente (-10 ° C a -20 ° C) disolventes refrigerados tienen una
desventaja, ya que Debido a su baja temperatura, la humedad atmosférica puede
condensarse en la superficie de la lente y dejar un residuo.
Una forma más adecuada para mejorar el tiempo de retención de un disolvente es añadir
el isopropanol, por ejemplo.
No todos los disolventes pueden ser recomendados para la limpieza de la óptica del
microscopio. Entre aquellos que limpia muy eficientemente algunos son tóxicos, otros son
hostiles para el medio ambiente aún otros se dejan residuos en la superficie. Residuo
forma particular con el uso de etanol absoluto y xileno y, sobre todo, si la suciedad
contiene componentes solubles en agua.
La acetona se puede recomendar cuando el aceite y la grasa deben ser retirados de
cubreobjetos. La Acetona ataca a la mayoría de los tipos de plástico, así como de goma,
por lo que su uso para la limpieza ocular puede ser problemático. No se puede excluir la
posibilidad de que los ataques de acetona componentes ópticos cementados cuando se
utiliza con frecuencia. La acetona también puede disolver especiales recubrimientos
orgánicos
Para la limpieza mueva el palillo con
algodón en un movimiento en espiral
desde el centro hasta el borde. Nunca
frote con un patrón de sig sag, ya que esto
sólo extiende la suciedad. Con grandes
superficies ópticas, primero limpie en un
movimiento en espiral a partir del borde y
avanzando hacia el centro, y luego
ejecutar otro movimiento en espiral desde
el centro hasta el borde. Como regla
general, varias toallitas en espiral serán
requeridas. Recomendamos volátil n-hexano o la solución de limpieza óptica de Carl Zeiss.
Limpieza de las partes externas del microscopio (sin óptica)
Las superficies pintadas de los microscopios de la gama de Axio están recubierto de polvo
y extremadamente durable. Se pueden limpiar con un paño de micro fibra muy suave
ligeramente humedecido. El Polvo suelto y otra suciedad pueden eliminarse con un cepillo
de pelo suave usado exclusivamente para ese fin.
Preparación perfecta
Resultado óptimo en microscopía no sólo depende de la limpieza de la óptica del
microscopio, sino también en la preparación del espécimen perfecto. Los siguientes
factores, entre otros:




Espesor de la sección histológica
Intensidad de la tinción
El índice de refracción y dispersión del medio de inclusión o inmersión
En microscopía de alta resolución: distancia de una célula viva de la hoja de la
cubierta
 Corregir cubrir espesor de deslizamiento para evitar la aberración esférica
Cómo se puede evitar ensuciamiento
Las aberturas de los tubos de visión binocular deben estar siempre cerradas. A menos que
los oculares estén en uso, utilice tapones de polvo. Si ningún tapón de polvo han llegado
con el microscopio, envolver trozos de papel de aluminio alrededor de las aberturas.
El mejor método fundamental contra la acumulación de polvo es cubrir primero el
microscopio con dos bolsas de plástico, de tamaño adecuado y luego con la cubierta anti
polvo suministrado por el fabricante.
En regiones de clima tropical, este método no es recomendable, ya que con frecuencia
puede llevar a la acumulación de hongos. La contaminación por hongos mejor puede ser
evitada por aire seco para la habitación que se produce ya sea por el aire acondicionado o
la instalación de una lámpara de infrarrojos por encima del microscopio (distancia mínima
de 150 cm o pies 5)
La Óptica del microscopio Carl Zeiss están impregnado con un agente anti fúngico
aprobado, sin embargo no existe una protección 100% contra los hongos. Además casi no
hay remedio, una vez haya infección por hongos.
Nunca coloque el microscopio en un lugar donde pueda verse afectado por los vapores
corrosivos ácidos o alcalinos, en o cerca de un laboratorio fotográfico químico húmedo.
Qué tener en cuenta al limpiar la óptica del microscopio
 Al empezar a limpiar, no se olvide de usar un soplador de polvo en primer lugar,
excepto cuando los líquidos tienen que ser eliminados.
 Nunca limpie las lentes con hisopos secos o tejido - Esto causará rayas.
 No utilice materiales abrasivos como limpiadores de piel secos, trapos de lino o
palos secos de poliestireno según lo recomendado por algunos fabricantes.
 No aplique ningún disolvente antes debe intentar con agua destilada, excepto
cuando la grasa tiene que ser eliminado.
 No use etanol, éter di etílico o acetona para limpiar antiguos microscopios.
 No utilice bastoncillos de algodón desechables en lugar de hisopos de algodón o de
ITW Texwipe que recomienda en este documento, ya que los primeros no están
libres de contaminación.
 Los principiantes no deben utilizar en ninguna ocasión barra de metal
recomendados en lugar de los palos de madera, las lentes frontales pueden
dañarse fácilmente por los primeros.
 No utilice ningún aerosol óptico ya que contienen aire líquido a presión. El aire a
presión procedente de estas latas fácilmente pueden dejar un residuo que es difícil
de eliminar.
 Nunca usar ácidos o amoníaco para limpiar lentes frontales de los objetivos, que
son sensibles a los ácidos y vapores alcalinos.
 Nunca trate de limpiar las superficies ópticas internas, cámaras y óptica de
adaptador.