FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA RED NACIONAL UNIVERSITARIA UNIDAD ACADÉMICA DE SANTA CRUZ FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD BIOQUÍMICA Y FARMACIA SEXTO SEMESTRE SYLLABUS DE LA ASIGNATURA DE HEMATOLOGÍA Y BANCO DE SANGRE Elaborado por: MsC. Jacqueline Verónica Carrasco Flores Gestión Académica I /2013 U N I V E R S I D A D 1 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA UDABOL UNIVERSIDAD DE AQUINO-BOLIVIA Acreditada como PLENA mediante R. M. 288/01 VISIÓN DE LA UNIVERSIDAD Ser la universidad líder en calidad educativa. MISIÓN DE LA UNIVERSIDAD Desarrollar la educación superior universitaria con calidad y competitividad al servicio de la sociedad. Estimado(a) estudiante: El Syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus docentes, quienes han puesto sus mejores empeños en la planificación de los procesos de enseñanza para brindarte una educación de la más alta calidad. Este documento te servirá de guía para que organices mejor tus procesos de aprendizaje y los hagas mucho más productivos. Esperamos que sepas apreciarlo y cuidarlo. Aprobado por: Fecha: Marzo de 2013 SELLO Y FIRMA JEFATURA DE CARRERA U N I V E R S I D A D 2 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA SYLLABUS Asignatura: Código: Requisito: Horas teóricas Horas Prácticas Carga Horaria: Créditos: HEMATOLOGÍA Y BANCO DE SANGRE BCL – 621 BCL – 522 80 horas 40 horas 120 horas 12 I. OBJETIVOS GENERALES DE LA ASIGNATURA OBJETIVOS GENERALES Analizar la información de los diversos exámenes laboratoriales hematológicos con el propósito de aplicarlos en el diagnóstico de las enfermedades más frecuentes de nuestro medio. Aplicar los principios generales éticos y legales que todos los profesionales en salud deben tener en cuenta antes de una terapéutica transfusional en el Banco de Sangre. Percepción de la trascendencia de los valores a desarrollar que se materializan con el amor a la actividad profesional, las buenas prácticas profesionales respetuosas con los derechos de los pacientes, las normas de la ética profesional y un estilo de búsqueda profesional creativo e innovador II. PROGRAMA ANALÍTICO DE LA ASIGNATURA. UNIDAD I: HEMATOLOGÍA BÁSICA Y APLICADA TEMA 1: INTRODUCCIÓN A LA HEMATOLOGÍA 1.1. Introducción. 1.2. Concepto de sangre 1.3. Composición 1.3.1. Celulares. 1.3.2. Plasmáticos 1.4. Propiedades físicas de la sangre 1.5. Funciones de la sangre TEMA 2: HEMATOPOYESIS 2.1. Introducción. 2.2. Evolución de la Hematopoyesis 2.3. Hematopoyesis Extramedular 2.4. Médula Ósea 2.5. Célula “Stem” 2.6. CFC (Colony Forminig Unit) 2.7. El Estroma y el Microambiente Hematopoyético. 2.7.1. Estroma. 2.7.2. Tipos de Citocinas. U N I V E R S I D A D 3 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 2.7.3. Especificidad de las Citocinas 2.7.4. Factores de Crecimiento Hematopoyéticos. 2.8. Mantenimiento de la Homeostasis en el Control de la Hematopoyesis TEMA 3: ERITROPOYESIS 3.1. Introducción. 3.2. Eritropoyesis Normoblástica 3.2.1. Pronormoblasto 3.2.2. Normoblato Inicial 3.2.3. Normoblasto Intermedio 3.2.4. Normoblasto Tardío 3.2.5. Reticulocito 3.2.6. Eritrocito 3.3. Eritropoyesis Megaloblástica 3.3.1. Maduración de la Serie Megaloblástica 3.3.2. Características Diferenciales TEMA 4: CITOMETRÍA HEMÁTICA: SERIE ROJA 4.1. Introducción 4.2. Hemoglobina 4.3. Hematocrito 4.4. Número de glóbulos rojos 4.5. Volumen corpuscular medio 4.6. Hemoglobina corpuscular media 4.7. Concentración media de la hemoglobina corpuscular 4.8. Coeficiente de variación 4.9. Conteo de Reticulocitos 4.10. Velocidad de sedimentación globular TEMA 5: ANEMIA 5.1. Introducción 5.2. Definición 5.3. Clasificación de las anemias de acuerdo a su morfología. 5.3.1. Anemia microcítica 5.3.1.1. Ferropénica 5.3.1.2. Metabolismo del Hierro. 5.3.1.3. Déficit de transporte de hierro 5.3.1.4. Trastornos de la utilización del Hierro 5.3.1.5. Trastornos de la reutilización del Hierro 5.3.2. Anemia macrocítica 5.3.2.1. Déficit de vitamina B12 5.3.2.2. Déficit de acido fólico. 5.3.3. Anemia normocítica 5.3.3.1. Hipoproliferación 5.3.3.2. Nefropatías 5.3.3.3. Insuficiencia endocrina (Tiroidea, hipofisaria) 5.3.3.4. Depleción proteica 5.3.3.5. Anemia aplásica o hipoplásica 5.3.3.6. Aplasia pura de las células rojas (eritroblastopenias) 5.3.3.7. Mieloptisis 5.3.3.8. Mielodisplasia. U N I V E R S I D A D 4 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA UNIDAD II TEMA 6: LEUCOPOYESIS POLIMORFONUCLEAR GRANULOCÍTICA 6.1. Introducción 6.2. Mieloblasto 6.3. Promielocito 6.4. Mielocito 6.5. Metamielocito 6.6. Leucocito Neutrófilo juvenil 6.7. Neutrófilo 6.8. Eosinófilo 6.9. Basófilo TEMA 7: LEUCOPOYESIS MONONUCLEAR 7.1. Introducción 7.2. Serie linfocítica 7.3. Linfoblasto. 7.4. Prolinfocito 7.5. Serie Monocítica 7.6. Monoblasto 7.7. Promonocito 7.8. Monocito TEMA 8: LEUCOPOYESIS PLASMOCÍTICA 8.1. Introducción 8.2. Serie plasmocitica 8.3. Plasmoblastos 8.4. Proplasmocito 8.5. Plasmocito TEMA 9: MEGACARIOPOYESIS 9.1. Introducción 9.2. Serie megacariocitica 9.3. Megacarioblasto 9.4. Promegacariocito 9.5. Megacariocito 9.6. Plaquetas TEMA 10: CITOMETRÍA HEMÁTICA SERIE BLANCA 10.1. Introducción 10.2. Número de glóbulos blancos 10.3. Recuento diferencial 10.3.1. Neutrófilos 10.3.2. Eosinófilos 10.3.3. Basófilos 10.3.4. Linfocitos 10.3.5. Monocitos 10.3.6. Cayados. U N I V E R S I D A D 5 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA TEMA 11: INTERPRETACIÓN DEL HEMOGRAMA 11.1 . Leucocitosis fisiológica 11.2 . Leucocitosis patológica 11.2.1. Bacteriemia 11.2.2. Septicemia 11.2.3. Pancreatitis aguda 11.2.4. Hemorragias agudas 11.2.5. Leucemia mieloide Crónica 11.2.6. Reacción leucemoide. 11.3 . Leucopenia 11.3.1. Fiebre tifoidea 11.3.2. Fiebre del dengue 11.3.4. Fiebre malárica 11.3.5. Otros procesos virales 11.4 . Pancitopenias 11.4.1. Aplasia medular 11.4.2. Síndrome mielodisplasico 11.4.3. Leucemias 11.4.4. Mielofibrosis idiopatica 11.5 . Panmielosis 11.5.1. Policitemia Vera UNIDAD III TEMA 12: ALTERACIONES DE LOS GRANULOCITOS 12.1. Introducción 12.2. Funciones de los granulocitos 12.3. Alteraciones cualitativas 12.4. Alteraciones cuantitativas 12.5. Clasificación de las neutropenias según el lugar donde se producen 12.6. Clasificación de las neutropenias según su origen TEMA 13: LEUCEMIAS AGUDAS 13.1. Introducción 13.2. Tipos de leucemias agudas 13.3. Clínica 13.3.1. Síntomas constitucionales 13.3.2. Síntomas por infiltración de la MO de las células leucemias 13.3.3. Síntomas por infiltración a otros órganos 13.4. Diagnóstico laboratorial TEMA 14: LINFOMAS 14.1. Introducción 14.2. Diferencias entre linfomas y leucemias 14.3. Tipos de linfomas 14.4. Clínica 14.5. Diagnóstico laboratorial TEMA 15: SÍNDROME MIELOPROLIFERATIVOS 15.1. Introducción 15.2. Características comunes del síndrome U N I V E R S I D A D 6 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 15.3. Leucemia mieloide crónica 15.4. Policitemia Vera 15.5. Trombocitemia esencial 15.6. Mielofibrosis idiopática TEMA 16: SÍNDROME LINFOPROLIFERATIVOS 16.1. Introducción 16.2. Características comunes del síndrome 16.3. Síndrome linfoproliferativo de origen B 16.3.1. Leucemia linfocítica crónica 16.3.2. Leucemia prolinfocítica 16.3.3. Tricoleucemia 16.4. Síndrome linfoproliferativo de origen T 16.4.1. Leucemia de linfocitos grandes granulares 16.4.2. Leucemia prolinfocítica T 16.4.3. Leucemia linfoma T del adulto 16.4.4. Síndrome de Sesary 16.5. Trombocitemia esencial 16.6. Mielofibrosis idiopatica TEMA 17: GAMAPATIA MONOCLONAL (MIELOMA MÚLTIPLE) 17.1. Introducción 17.2. Características 17.3. Signos clínicos y laboratoriales derivados de la existencia monoclonal. 17.4. Diagnóstico. UNIDAD IV: TEMA 18: MEMBRANA ERITROCITARIA 18.1 . Membrana biológica biodimensional 18.1.1. Lípidos 18.1.2. Proteínas 18.2. Composición e interrelaciones. 18.3. Asimetría 18.4. Lípidos 18.5. Proteínas 18.5.1. Proteínas transmembranales o integrales 18.5.2. Proteínas del citoesqueleto 18.5.3. Proteínas del anclaje 18.5.4. Alteraciones morfológica de los hematíes TEMA 19: HEMOGLOBINA 19.1. Introducción 19.2. Hemoglobina 19.3. Función 19.4. Estructura 19.5. Biosíntesis de la hemoglobina. 19.6. Regulación 19.7. Propiedades de la hemoglobina 19.8. Tipos de la hemoglobina 19.9. Hemoglobinas anormales U N I V E R S I D A D 7 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA TEMA 20: ANEMIA HEMOLÍTICA 20.1. Introducción 20.2. Definición 20.3. Clasificación según su herencia 20.3.1. Congénitas 20.3.2. Adquiridas: 20.3.2.1. Inmunes 20.3.2.2. No inmunes 20.4. Diagnóstico: 20.4.1. Clínico 20.4.2. Laboratorial 20.4.3. Tratamiento. UNIDAD V TEMA 21: BANCO DE SANGRE 21.1. Introducción 21.2. Estructura del Banco de Sangre 21.3. Recepción del donante 21.4. Tamizaje clínico del donante 21.5. Tamizaje laboratorial 21.6. Área de extracción 21.7. Área de producción de hemocomponentes 21.8. Área de serología o clasificación biológica 21.9. Área de inmunohematología 21.10. Área de almacenamiento 21.11. Área de distribución de hemocomponentes TEMA 22: SERVICIO TRANSFUSIONAL 22.1. Introducción 22.2. Sistemas Sanguíneos humanos 22.2.1. Sistema ABO 22.2.2. Sistema Lewis 22.2.3. Sistema Rh 22.2.4. Sistema Kell 22.2.5. Sistema Duffy 22.2.6. Sistema Kidd. TEMA 23: TRANSFUSIÓN SANGUÍNEA 23.1. Introducción 23.2. Selección de unidades por compatibilidad ABO 23.3. Selección de unidades por compatibilidad Rh 23.4. Entrega de sangre en situaciones urgentes 23.5. Transfusión, vigilancia y control 23.5.1. En el momento de la infusión 23.5.2. Durante la transfusión 23.5.3. Velocidad de la infusión 23.5.4. Manejo y reporte de las reacciones transfusionales. TEMA 24: SISTEMA HEMOSTÁTICO 24.1. Generalidades 24.2. Hemostasia U N I V E R S I D A D 8 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 24.3. 24.4. 24.5. 24.6. Sistema vascular Sistema plaquetario Sistema plasmático de la coagulación Inhibidores del sistema de la coagulación TEMA 25: TRASTORNO DE LA HEMOSTASIA 25.1. Trastorno de la hemostasia primaria 25.1.1. Púrpura vascular 25.1.2. Púrpura Trombopénica 25.1.3. Púrpura Trombopática 25.2. Trastorno de la hemostasia secundaria 25.2.1. Alteración de la síntesis de factores de la coagulación 25.2.2. Congénitos 25.2.3. Adquiridos III. ACTIVIDADES A REALIZAR DIRECTAMENTE EN LA COMUNIDAD. i. Tipo de asignatura para el trabajo social. Hematología 6to semestre ii. Resumen de los resultados del diagnóstico realizado para la detección de los problemas a resolver en la comunidad. La promoción de la donación voluntaria, habitual, anónima y altruista de sangre es una temática de salud pública de suma importancia que todavía en nuestro país no ha sido considerada como tal. Pocas e insuficientes han sido las estrategias de comunicación y difusión empleadas hasta el momento, lo que genera desinformación en la población con respecto a la cuestión y su importancia para la sociedad. La recolección de sangre sólo de donantes voluntarios y no remunerados de poblaciones de bajo riesgo es una medida estratégica fundamental para garantizar la seguridad, calidad, disponibilidad y accesibilidad de las transfusiones sanguíneas. Se considera, en general, que un sistema de donación de sangre voluntaria y gratuita es un factor esencial en la prestación de servicios de sangre de calidad. Se sabe que la sangre donada por los familiares o la sangre de reemplazo y en especial, la de donantes remunerados tiene una incidencia y una prevalencia más elevadas de infecciones de transmisión transfusional. La sangre que proviene de un sistema voluntario tiene, en general, una menor probabilidad de contener el VIH, los virus B y C de las Hepatitis u otros factores perjudiciales a la salud. La mayoría de las donaciones de sangre en Santa Cruz de la Sierra se consiguen por reposición (70%). Es decir que cuando una persona requiere una transfusión de sangre, sus familiares o amigos deben reponer la sangre provista por el Banco de Sangre como requisito. La donación voluntaria es de carácter netamente altruista. En Bolivia, no existe la suficiente información ni sensibilización de la población hacia la donación voluntaria. Los Universitarios, de la UDABOL como ciudadanos al servicio de la comunidad pueden representar un excelente ejemplo en sus ámbitos de influencia para convertirse en donantes voluntarios y conducir campañas de concientización, educación y donación. iii. Nombre del proyecto al que tributa la asignatura. “DONACION VOLUNTARIA ALTRUISTA Y FIDELIZADA DE SANGRE” U N I V E R S I D A D 9 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PRIMER SEMESTRE AÑO 2013 iv. Contribución de la asignatura al proyecto. Participará toda la comunidad universitaria de la UDABOL, sin distinción de género, ya sea como donante voluntario de sangre entre los 18 a 60 años, que pese más de 50 Kg. y que se encuentren en buenas condiciones de salud., o como promotor en el reclutamiento de donantes de sangre voluntario, no remunerado con el fin de contribuir a mejorar la calidad de la sangre en los Bancos de Sangre del Departamento de Santa Cruz de la Sierra. v. Actividades a realizar durante el semestre para la implementación del proyecto. Trabajo a realizar por los estudiantes Localidad, aula o laboratorio Organización de actividades del proyecto Capacitación sobre promoción de la donación voluntaria y altruista de sangre. Charlas de promoción de la donación de sangre en las diferentes aulas de la Universidad por alumnos del sexto semestre de la materia de Hematología y Banco de Sangre. Colecta de sangre Aula Entrega y orientación sobre resultados de laboratorio a las personas portadoras de alguna serología reactiva. U N I V E R S Aula UDABOL Con la Unidad Móvil de Banco de Sangre Banco de Sangre Regional de Santa Cruz de la Sierra. I D A D 10 D E A Q Incidencia social Capacitación de los alumnos del sexto semestre. Concienciación sobre la importancia de la donación de sangre y sobre las repercusiones que conlleva este acto altruista y humanitario. Pacientes de todas las razas, credos, situación económica y política que necesite una transfusión. Actores involucrados en el proceso de la donación voluntaria y altruista de sangre U I N O B O L I V I A Fecha 3ra. Semana de marzo 2da. Semana de abril 3ra. y 4ta. Semana de abril 1ra. Semana de mayo 2da. Semana de mayo FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA IV. EVALUACIÓN DE LA ASIGNATURA PROCESUAL O FORMATIVA. A lo largo del semestre se realizarán 2 tipos de actividades formativas: Las primeras serán de aula, que consistirán en clases teóricas, repasos cortos, trabajos grupales con casos clínicos. Las Brigadas Solidarias UDABOL, tendrán puntaje de evaluación final según el desempeño en la parte práctica de la colecta de la sangre antes, durante y después (éxito de la colecta). Las segundas serán actividades de “aula abierta”. Las Brigadas Solidarias UDABOL tendrán puntuación procesual en la parte teórica, referente a su preparación y desempeño durante el proceso de promoción y concientización sobre la importancia de la donación voluntaria y altruista de sangre. El trabajo, la participación y el seguimiento realizado a estos dos tipos de actividades se tomarán como evaluación procesual calificándola entre 0 y 50 puntos independientemente de la cantidad de actividades realizadas por cada alumno. U N I V E R S I D A D 11 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Cronograma semestral Primer parcial ACTIVIDAD EVALUATIVA Repaso de teoria PONDERACIÓN FECHA 10 puntos Se fijará según el avance En la siguiente clase practica. Presentación de syllabus (GIP) se promediará los presentados. Presentación de work paper (los presentados) Repasos orales de laboratorio sobre lo avanzado en la practica anterior. Conocimiento de la practica a realizar, desenvolvimiento en el laboratorio, Bioseguridad Examen parcial 5 puntos 5 puntos Presentar mismo día del parcial 10 puntos En cada laboratorio 50 puntos Fijado por jefatura Examen parcial de laboratorio teórico practico. Total puntos Segundo parcial Repaso de teoria 20 puntos Luego de la 5ta. Practica de laboratorio. Presentación de syllabus (GIP) se promediará los presentados. Presentación de work paper (los presentados) Repasos orales de laboratorio sobre lo avanzado en la practica anterior. Conocimiento de la practica a realizar, desenvolvimiento en el laboratorio, Bioseguridad Examen parcial de laboratorio Examen parcial Total puntos Examen final de laboratorio (práctico) Examen final de laboratorio (teórico) 5 puntos Tercer parcial U N I V E R S I D A D 12 D E 100 10 puntos Presentar mismo día del parcial En cada clase de laboratorio 10 puntos 20 puntos Luego de la 5ta. Practica de laboratorio. Fijado por jefatura 50 puntos 100 20 puntos Al finalizar el avance de laboratorio Al finalizar el avance de laboratorio 20 puntos U I N O de Se fijará según el avance En la siguiente clase practica. 5 puntos A Q clase B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Repaso teorico 10 puntos Examen final de teoría Total puntos 50 puntos 100 Al finalizar el avance de laboratorio Fijado por jefatura DE RESULTADOS DE LOS PROCESOS DE APRENDIZAJE O SUMATIVA (examen parcial o final) Se realizarán 2 evaluaciones parciales con contenido teórico y práctico sobre 50 puntos cada una. El examen final consistirá en un examen escrito con un valor del 90% de la nota y la presentación de los informes y documentos del proyecto con el restante 10%. V. BIBLIOGRAFÍA BÁSICA. - Joceph J. Mazza. “Hematologia Clinica”. Marban Libros SL.Impreso en España 2004. - Raimundo Gomez Oliveira. “Hemograma Como haces e Interpretar”. Editorial Amolca. 2011. - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 - José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 - Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 - Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 - Ennest Beutler Williams Hematología 2da. Edición Ediciones Marbán. España 2006 Signatura Topográfica 616.15B16v.1 - Ennest Beutler Williams Hematología 2da. Edición Ediciones Marbán. España 2006 Signatura Topográfica 616.15B16v.2 BIBLIOGRAFÍA COMPLEMENTARIA. - Bernadette F. Rodadk .”Hepatología, Fundamentos y Aplicaciones clinicas” . Segunda Edición. Editorial Panamericana. 2005. - Joan LLuis Vives Corrrons. “Manual de Tecnicas de Laboratorio En Hematologia”. Tercera Edición. Editorial Masson. 2006. - A. Perez Ferrer.”Medicina Transfusional”. U N I V E R S I D A D 13 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA VI. PLAN CALENDARIO. SEMA NA 1ra. 2da. 3ra. 4ta. 5ta. 6ta. 7ma. 8va. 9na. 10ma. 11ra. 12da. 13ra. 14ta. 15ta. 16ma. 17va. 18na. 19va. ACTIVIDADES ACADÉMICAS Avance de Tema I materia Avance de Tema II -III materia Avance de Tema IV - V materia Avance de Tema VI - VII Repaso teórico materia Avance de Tema VIII – IX – X materia Avance de Tema Xi – XII – materia XIII Avance de Primera Evaluación materia Avance de Tema XIV – XV – materia XVI Avance de Tema XVII - XVIII materia Avance de Tema XIX – XX materia Avance de Tema XXI Repaso teorico materia Avance de Tema XXII materia Avance de Tema XXIII materia Avance de Segunda Evaluación materia Avance de Tema XXIV materia Avance de Tema XXV materia Avance de Repaso teórico Taller pre evaluación materia Avance de Repaso práctico Taller pre evaluación materia Evaluación final 20na. Evaluación final 21va U N I V E OBSERVACIONES 2da. Instancia R S I D A D 14 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA VII. WORK PAPERS. PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 1 UNIDAD I: TEMA 1 al 4 TITULO: Interpretación de la citometría hemática y las anemias FECHA DE ENTREGA: 3ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 4ª semana INTRODUCCIÓN. La anemia es “el estado por el cual el organismo tiene un déficit en su concentración de hemoglobina en la sangre periférica de un 10% o más, según la edad, sexo, y altura sobre el nivel del mar”. Los tejidos requieren constantemente aporte de oxígeno y éste lo hace la hemoglobina, por lo que se considera a este elemento como pilar fundamental en el diagnóstico de anemia. La Citometría Hemática es el estudio de laboratorio destinado a informar sobre el número y las características de las células de la sangre. Citos: Células, metros: medida, haematos: sangre. La interpretación correcta de la citometría hemática supone el análisis detallado de cada uno de los datos que informa. CASOS CLÍNICOS PARA APLICACIÓN DEL APRENDIZAJE 1.- Paciente de 13 años de edad, sexo femenino con hemograma que muestra: Hb. 8,9grs/dl., Hto. 30%, 4.200.000 eritrocitos VCM 65Fl, CHCM 28%, HCM 22Pg, 7500 blancos, segmentados 60, linfocitos 35, eosinófilos 3 y monocitos 2, RP 550.000, con antecedentes de periodos menstruales irregulares y abundantes. Usted debe: Clasificar morfológicamente a la anemia. Especificar la causa de la anemia. 2.- Paciente de 45 años de edad, con antecedente de ser vegetariano estricto desde hace 4 años y medio por indicaciones de un naturista. Al examen físico presenta trastorno a la de ambulación y lengua depapilada. Los laboratorios muestran el hemograma con: Hb. 8grs/dl., Hto. 30%, VCM 135Fl, HCM 42Pg, con RP de 85.000, leucocitos 3200, segmentados 55, linfocitos 35, monocitos 5, eosinófilos 4 y basófilos 1. Clasificar morfológicamente a la anemia Especificar la causa de la anemia 3.- Paciente de 55 años de edad, sexo femenino con hemograma que muestra: GR. 3.400.000, Hb. 8grs/dl., Hto. 25%, VCM 65Fl, 28%, HCM 22Pg, GB 9000, seg. 60, linfocitos 35, eosinófilos 5. RP 650.000 con antecedentes de epigastralgias y deposiciones de color negro de más o menos 3 meses de evolución. Usted debe: Clasificar a la anemia Escribir la causa de la anemia U N I V E R S I D A D 15 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 4.- Paciente femenina de 35 años de edad, con antecedentes de cefalea, e historia de dolores a nivel articular que se presentaban desde hace unos 3 meses, al examen físico general encontramos edema y dolor a nivel de la articulación del pie, con lesiones en la piel de ambas piernas de tipo purpúricas, hemograma que muestra: Hb. 8grs/dl., Hto. 25%, VCM 85Fl, HCM 28Pg, GB., 3200, segmentados 55, linfocitos 45, RP. 55000, TP 13 seg., urea 35mg/dl, y creatinina 0,8mg/dl: Usted debe: Clasificar morfológicamente a la anemia Especificar la causa de la anemia y que analisis de laboratorios confirmarian su hipótesis?. 5.- Paciente femenina de 38 años de edad, con historia de dolores a nivel articular que se presentan desde hace unos 5 meses, que se manifiestan con rigidez matinal predominantemente afectando la articulación metacarpofalangicas y metatarsofalangicas, algunas veces a presentados molestias también en tobillos, codo y hombro. Al examen físico general encontramos edema y dolor a nivel de la articulación del pie y de la rodilla de la pierna derecha, los laboratorios muestran un hemograma con: Hb. 8grs/dl., Hto. 25%, VCM 85Fl, HCM 28Pg, GB., 13800, segmentados 65, linfocitos 23, cayados 7, Recuento de Plaquetas 165.000, VSG, 55mm. La electroforesis de proteínas muestra un aumento de las alfa 2 globulinas y las gammaglobulinas normales. Usted debe: a. Clasificar morfológicamente a la anemia 2. Especificar la causa de la anemia y que analisis de laboratorios confirmarian su hipótesis?. 6.- Paciente de 15 años de edad, con antecedentes de dolor abdominal, diarrea crónica y anemia desde hace unos 3 meses, en el hemograma se observa: Hb. 7grs/dl., Hto. 21%, VCM 60Fl, HCM 21Pg, seg. 45, eosinófilos 15, linfocitos 35, monocitos 5 y el coproparasitológico informa huevos de Ancylostomas +++, y larvas de Strongyloides stercoralis. 1. Clasificar a la anemia 2. Causa de la anemia 3. ¿Qué otros laboratorios solicitaría? 7.- Paciente de 32 años procedente de Mairana, con antecedente de dolor abdominal, y diarrea de mas o menos 1 meses de evolución, no refieres perdida de peso, el coproparasitológico informa Giardia lamblia (+++), huevos de Taenia sp. (+++) y de Himenolepys nana. Resto sin particularidad. En el hemograma se observa: Hb. 9grs/dl., Hto. 28%, VCM 67Fl, HCM 26Pg, seg. 40, eosinófilos 20, linfo. 35, mono. 5 1. Clasificar a la anemia 2. Causa de la anemia 3. Que otros laboratorios solicitaría. 8.- Paciente de 55 años de edad, con antecedentes de DM tipo II. Desde hace 20 años sin un régimen alimenticio ni control medico adecuado, se queja que desde hace 6 meses se siente mas cansado, ha perdido peso y tiene nauseas a las comidas. El hemograma muestra: Hb. 8,5grs/dl., Hto. 25%, VCM 85Fl, HCM 29Pg, GR 2.750.000, creatinina, 2,5 mg/dl, urea 55 mg/dl. 1.- Clasificar morfológicamente a la anemia. 2.- Especificar la causa de la anemia. 9.- Paciente de 53 años de edad que consulta con un cuadro clínico de más o menos 2 meses de evolución, al examen físico se observa palidez mucocutánea marcada, no se palpa U N I V E R S I D A D 16 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA hepatoesplenomegalia. El Hemograma: 6,6 Hb., Hto. 18%, GR. 1.800.000, VCM 85 Fl. HCM 31 Pg., GB. 2.700. Segmentado 35, linfocitos 55, monocitos 10, Recuento de Plaquetas: 20.000, ácido úrico 4mg/dl, y LDH 150 UI. La punción aspiración permite fácilmente obtener medula ósea y el mielograma informa como conclusión medula ósea hipercelular y dismielopoyética. 1.- Clasificar morfológicamente a la anemia. 2.- Sospecha diagnóstica. 3.- Diagnóstico diferencial 4.- Conducta terapéutica 10.- Paciente de 45 años de edad, con cuadro clínico de anemia con antecedente de consumo de hidantoina y carbamacepina, por síndrome convulsivo desde hace 1 año. Con hemograma que muestra: Hb. 8grs/dl., Hto. 30%, VCM 85Fl, HCM 31Pg, GB, 3800, segmentado 65, linfocitos 30, monocitos 5 y Recuento de Plaquetas 130.000. La punción aspiración permite fácilmente obtener medula ósea y el mielograma informa como conclusión médula ósea hipo celular con todas las líneas hipo celulares. 1. Clasificar a la anemia 2. Escribir la causa de la pancitopenia 3. Diagnóstico diferencial 4. Tratamiento 11.- Paciente de 35 años de edad que llega a la consulta presentando anemia, de más o menos unos tres meses de evolución, al examen físico se palpa esplenomegalia y el hemograma reporta, Hb. 7 grs/dl, Hto. 20%, GR. 2100.000, VCM. 80 fl., HCM. 30 pg. Recuento de plaquetas de 25.000, leucocitos 1.600, linfocitos 55, segmentados 45. Se intento la punción aspiración y fue muy difícil obtener médula ósea. El informe no es concluyente y se recomienda una biopsia. Clasificar a la anemia. Escriba su sospecha diagnóstica. Diagnóstico diferencial Tratamiento U N I V E R S I D A D 17 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 2 UNIDAD I: TEMA 7 al 11 TITULO: Citometría Hemática serie blanca granulocitos e Interpretación del hemograma) (Alteraciones de los FECHA DE ENTREGA: 6ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 7ª semana INTRODUCCIÓN. La Citometría Hemática es el estudio de laboratorio destinado a informar sobre el número y las características de las células de la sangre. Citos: Células, metros: medida, haematos: sangre. La interpretación correcta de la CH supone el análisis detallado de cada uno de los datos que informa. LA CITOMETRÍA HEMÁTICA: SERIE BLANCA. Los datos que proporciona la Citometría Hemática son: Número de glóbulos blancos, recuento diferencial. Pueden ser muy variables de acuerdo a la patología en curso. ERITROSEDIMENTACION. Su aumento es proceso inespecífico de infección, fuera del embarazo, normalmente en este estado debe estar aumentada y su normalidad indica baja de monocitos o, que en el momento del parto puede originar hemorragias incontrolables con muerte de la paciente a veces. RECUENTO DE PLAQUETAS (PLQ). Disminuidas en pacientes con PTI, CID, dengue, etc. Aumentadas en carcinomas, artritis reumatoide, infecciones agudas, enfermedades cardiacas, pancreatitis crónica y tuberculosis. VOLUMEN PLAQUETARIO MEDIO (VPM). Informa el tamaño promedio de las plaquetas. Útil en investigación de púrpura trombocitopénica y leucemia. EL EXAMEN LABORATORIAL. Aporta mayores datos, dándonos una utilidad relacionada directamente con los conocimientos hematológicos de quien interpreta es el hemograma. ALTERACIONES DE LOS GRANULOCITOS: Funciones básica de los granulocitos neutrofilos: Las cuatro funciones básicas de los granulocitos son: 1. Adherencia; 2. Quimiotaxis; 3. Fagocitosis, y 4. Bacteriolisis, por dos mecanismos: (Uno dependiente del sistema de la peroxidación, y el otro independiente) Por tanto las alteraciones funcionales las podemos dividir en 4 grupos, dependiendo de la función que este alterada. Alteraciones cuantitativas: Neutropenia / Agranulocitosis. U N I V E R S I D A D 18 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Neutrofilia: Aumento del numero de neutrofilos (>7,5 x 10º/L). Neutropenia: Descenso del numero de neutrofilos (< 1,5 x 10º/L): - Leve: > 1,0 x 10º /L). - Moderada: 0,5 – 1 x 10º /L). - Grave: < 0,5 x 10º /L). CASOS CLÍNICOS PARA APLICACIÓN DEL APRENDIZAJE 1.- Paciente de 8 años de edad que consulta por presentar fiebre de 48 horas de evolución. Al examen físico presenta erupción cutánea de tipo morbiliforme en tórax, miembros inferiores y superiores, adenopatías en región retro y latero cervical de características blandas, dolorosas y móvil., hemograma con leucopenia de 3700 blancos y linfocitosis de 55, segmentados 40, monocitos 5. Hemoglobina 12 g/dl, y recuento de plaquetas 230.000. Usted debe: Clasifique la neutropenia Sospecha diagnostica. Que otros estudios solicitaría según sospecha. 2.- Paciente de 55 años de edad que consulta presentando anemia, perdida de peso y adenopatía en región laterocervical de consistencia dura y no dolorosa de mas o menos 2.5cm y dos meses de evolución, a nivel abdominal no se palpa esplenomegalia, el hemograma presenta Hb. 8gr/dl, recuento de plaquetas de 20.000 y leucocitos de 5800 blancos, linfocitosis de 85 y 15 segmentados. Escriba su sospecha diagnostica. Que otros estudios solicitaría según sospecha 3.- Paciente masculino de 15 años de edad que vive en el Plan Tres Mil con antecedentes de 72 horas de evolución de cefalea intensa, fiebre alta y escalofríos. Al examen físico dolor abdominal difuso, esplenomegalia, Hemograma con las siguientes características: Leucopenia, de 3200 blancos, linfocitosis de 45, segmentados 40, monocitos 5 y desvió a la izquierda con 10 cayados, hemoglobina 13gr/dl, recuento de plaquetas de 180.000 y Reacción de Widal Antígeno flagelar “H” 1/100 y antígeno somático “O” 1/40. Escriba su sospecha diagnostica. Clasifique la neutropenia Diagnóstico diferencial ¿Qué otros estudios solicitaría? 4.- Paciente de 18 años de edad procedentes de la villa Primero de mayo con antecedente de 7 días de evolución con fiebre, escalofríos, mialgias, artralgias, dolor abdominal, nauseas, vómitos e ictericia asociado a presión arterial 90/70, frecuencia cardiaca 115 PM, además edema generalizado, con un hemograma con las siguientes características: hematocrito de 58%, recuento de plaquetas de 20.000 con 4800 blancos, neutrófilos 45 y linfocitos 55 de los cuales 20 son atípicos. Escriba su sospecha diagnóstica. Clasifique la neutropenia Diagnóstico diferencial ¿Qué otros estudios solicitaría? 5.- Paciente de 14 años de edad, procedente de la Urbanización Cotoca viene al consultorio quejándose de fiebre, artralgia, mialgia y cefalea intensa. Al examen físico presenta petequias en miembros inferiores, con un eritema generalizado, presión arterial 130/70 y frecuencia cardiaca 90 PM. Un hemograma con Hematocrito 36%, Hb 12gr/dl, 2800 glóbulos blancos, 55 linfocitos, 40 segmentados, 5 monocitos y plaquetas 35.000 sugiere: Escriba su sospecha diagnóstica. U N I V E R S I D A D 19 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Clasifique la neutropenia Diagnóstico diferencial ¿Qué otros estudios solicitaría? 6.- Paciente de 22 años procedente de Puerto Suárez con antecedente de fiebre de mas o menos 2 meses de evolución, pérdida de peso, diarrea desde hace 3 semanas, Hemograma con las siguientes características hemoglobina 9 g/dl, recuento de plaquetas de 75.000, blancos 3700, neutrófilos 75, linfocitos 15 y cayados 10 y un test rápido de VIH negativo. Escriba su sospecha diagnóstica. Clasifique la neutropenia Diagnóstico diferencial ¿Qué otros estudios solicitaría? 7.- Paciente de 45 años de edad que trabaja como transportista en el sector de la madera, viene a la emergencia refiriendo fiebre y escalofríos de comienzo brusco desde hace 3 semanas de presentación diaria, cefalea, mialgias, y artralgias. Al examen físico no se palpa esplenomegalia y los laboratorios muestran un hemograma con las siguientes características: hemoglobina 9gr/dl, 3800 blancos, 68 segmentados, 12 cayados, 20 linfocitos y recuento de plaquetas de 75.000. Frotis en el turno de la noche para Plasmodium vivax negativo. Escriba su sospecha diagnostica. Clasifique la neutropenia Diagnóstico diferencial ¿Qué otros estudios solicitaría. 8.- Paciente varón de 19 años que consulta por fiebre, cefalea, artralgia, mialgia y dolor abdominal de una semana de evolución. Al examen físico la PA 110/70, FC: 75 PM., no se palpa esplenomegalia y se observa una erupción cutánea que es mas intensa en los miembros inferiores. Ud. Le pide un hemograma y orina completa. El hemograma presenta, 1600 blancos, 50 linfocitos, 40 segmentados, 8 monocitos y eosinófilos 2, la orina sin particularidad. HB: 13gr/dl y recuento de plaquetas de 25.000. Sugiere sospechar en: Escriba su sospecha diagnostica. Clasifique la neutropenia Interprete el hemograma Que otros estudios confirmarían su sospecha?. 9.- Paciente de 2 años de edad, con antecedentes de fiebre, y deposiciones líquidas en 8 oportunidades desde hace 24 horas, el hemograma muestra: Hb. 12 grs. /dl., Hto. 36%, VCM 85Fl, HCM 28Pg. Blancos 3800, linfocitos 65%, segmentados 30% y monocitos 5% con moco fecal presentando un predominio de mononucleares. Clasifique la neutropenia Interprete el hemograma. U N I V E R S I D A D 20 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 3 UNIDAD V: TEMA 12 TÍTULO: Banco de Sangre y Servicio Transfusional FECHA DE ENTREGA: 13ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 14ª semana INTRODUCCIÓN. El Banco de Sangre Regional fue creado en marzo del año 1998, de acuerdo a Ley 1687 de Medicina Transfusional. La función del Banco de Sangre Regional para con la sociedad es la de promocionar y educar sobre donación voluntaria de sangre; recolección, análisis, fraccionamiento, almacenamiento y entrega de sangre segura; supervisar y evaluar la medicina transfusional a nivel departamental; promocionar y capacitar sobre el uso adecuado y racional de hemocomponentes. Los Servicios de Sangre (Bancos de Sangre y Servicios de Transfusión) constituyen la parte operativa de todo Programa de sangre, a nivel Nacional y/o local. Con el propósito de mejorar y estandarizar la calidad de los productos y servicios de sangre, de optimizar el uso de los recursos locales y de mejorar la eficiencia en la asistencia sanitaria, objetivos irrenunciables de los sistemas de salud modernos, los modelos funcionales de los servicios de colecta y preparación de sangre han ido evolucionando hacia la centralización. Los Bancos de Sangre, son los Servicios de Sangre responsables de la recolección, procesamiento, almacenamiento y conservación de la sangre y sus componentes destinados a transfusiones y distribución a los Servicios de Transfusión. Serán además los encargados de la promoción para la donación voluntaria y altruista de sangre, del reclutamiento, selección, retención y registro de donantes. No todos los Bancos de Sangre necesariamente deben ser iguales podrán diferenciarse en la complejidad de las funciones que desarrollan y en las actividades o recursos que sean asignados a sólo algunos de ellos, de manera que se logre una correcta cobertura de la demanda transfusional a nivel nacional. Los Bancos de Sangre deben participar activamente en el Sistema de Hemovigilancia, notificando al nivel central con la periodicidad establecida, la información estadística generada de las actividades desarrolladas, y deberán mantener estrecha relación de trabajo con los Laboratorios de Referencia Nacional para la confirmación de las muestras reactivas en el tamizaje serológico. Los Servicios de Transfusión son los Servicios de Sangre responsables de aplicar las transfusiones de sangre y componentes, según indicaciones o solicitud del personal médico, deberán participar en el asesoramiento de la práctica transfusional al personal médico del Hospital en el que se encuentre ubicado, fomentarán la elaboración y consenso de criterios de uso clínico recogido en Guías Transfusionales. Efectuarán convenios de trabajo con los Bancos de Sangre, definirán el stock de unidades de sangre y/o hemocomponentes en base a las necesidades del centro Hospitalario como también la periodicidad y forma de entrega de las unidades de sangre y Hemocomponentes. Garantizara el almacenamiento adecuado de la sangre y hemocomponentes manteniendo las condiciones requeridas a cada unidad. U N I V E R S I D A D 21 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA El personal técnico del Servicio de Transfusión será el encargado de efectuar todos los procedimientos de estudios pre-transfusionales pertinentes a las muestras de sangre del paciente y unidades a transfundir, establecidos y descritos en los Estándares de Trabajo para Servicios de Sangre establecidos por el Programa Nacional de Sangre. También los Servicios de Transfusión al igual que los Bancos de Sangre, deben participar activamente en el Sistema Nacional de Hemovigilancia, notificando a las autoridades competentes sobre las posibles reacciones adversas ocurridas como consecuencia del acto transfusional. Son encargados de promover la conformación de los Comités Intrahospitalarios de Medicina Transfusional en sus centros Hospitalarios, para asegurar y evaluar el uso adecuado y racional de la sangre y componentes por parte del personal médico de los Centros Hospitalarios, podrán desarrollar actividades científicas e investigativas en el campo de la Medicina Transfusional. Los Estándares de Trabajo para Servicios de Sangre del país, establecen; que todo Hospital donde exista un Servicio de Transfusión debe contar con un Comité de Medicina Transfusional, constituido por un equipo multidisciplinario con representantes de diferentes áreas: Clínica, Quirúrgica, Pediátrica, Enfermería, Farmacia, Laboratorio, Administración, y todas las áreas que la dirección del centro, considere conveniente También se establece que todos los Servicios de Transfusión deberán trabajar en forma coordinada desde el punto de vista técnico y asistencial con el Banco de Sangre correspondiente, como parte de la operativización del trabajo en Red a nivel departamental, que es la base para lograr una adecuada expansión y perfeccionamiento de la Red Departamental de Servicios de Sangre, que a su vez representa la parte operativa del Programa Departamental de Sangre. DONACIÓN DE SANGRE. Esta actividad se debe efectuar solamente en los Bancos de Sangre autorizados por el Ministerio de Salud, dicha selección debe ser realizada por personal de salud capacitado en este tipo de actividad. Los tipos de donaciones existentes en nuestro medio son: remunerada, familiar, voluntaria, dirigida y autóloga ANÁLISIS DE CONTROL. El estudio laboratorial obligatorio es: fenotipaje sanguíneo, escrutinio de anticuerpos irregulares, identificación de VHB, VHC, VIH, chagas, sífilis. EXTRACCIÓN DE LA SANGRE. Para evitar la activación del sistema de la coagulación durante la extracción, la sangre debe ser extraída con rapidez y mínimo traumatismo para los tejidos. Debe haber una sola venipuntura y una mezcla frecuente y suave de la sangre con el contenido de 70ml de la bolsa colectora de sangre, como el citrato (anticoagulante), fosfato, dextrosa, adenina, siendo el intervalo de extracción deseable de 4 y 10 minutos. PRODUCCIÓN DE HEMOCOMPONENTES. Obtenidos en Bancos de Sangre por proceso físico mecánico a partir de la donación reciente de sangre. SANGRE TOTAL. Se define como la sangre extraída de un donante en condiciones de esterilidad adecuada y que es recogida utilizando una bolsa apropiada que contiene la cantidad correspondiente de sustancias conservadoras y anticoagulante. Proporciona al mismo tiempo volumen y capacidad de transporte de oxígeno, esto se logra mejor con el empleo del Concentrado de Eritrocitos y solución cristaloide. Hoy en día la sangre total solo tiene como función específica ser materia prima para la producción de hemocomponentes. CONCENTRADO DE ERITROCITOS. Obtenido por centrifugación de sangre total tras retirar el plasma, por lo que contiene la misma cantidad de eritrocitos que la unidad de sangre de la que proceden. Contiene aproximadamente 60g de hemoglobina por unidad en un volumen de 300ml, tiene que estar almacenado a 4ºC, a esta temperatura es posible ser utilizada hasta 35 días después de la donación de sangre. Su efecto más importante es la restauración del transporte de oxígeno. U N I V E R S I D A D 22 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA CONCENTRADO DE ERITROCITOS LAVADOS. Se procesa bajo campana de bioseguridad y luz ultravioleta con la finalidad de evitar contaminación alguna en la sangre, con lavados se trata de eliminar lo más posible impureza de tipo proteico, microagregados, citoquinas, plaquetas, leucocitos, anticuerpos anti IgA, a fin de reducir la probabilidad de reacción transfusional o efecto negativo por tal presencia. Una vez preparado debe usarse dentro de las primeras 24 horas, almacenado a 4°C con un volumen de 300ml, el lavado permite una reducción de 60 a 80% de los leucocitos y más del 95% del plasma existente en una unidad de origen. CONCENTRADO DE PLAQUETAS. Intervienen en los mecanismos de la coagulación y hemostasia (liberan sustancias vasoconstrictoras, activadores de la Protrombina y otras con efecto antiheparina). Las plaquetas se obtiene por centrifugación a partir del plasma en las primeras horas tras la flebotomía, es almacenada a 22ºC tiene un tiempo de vida media útil de 5 días. Para evitar la adhesión y por lo tanto la agregación y activación de las plaquetas, estas tiene que ser conservadas en movimiento continuo horizontal por agitación. Por transfusión de cada Concentrado de Plaquetas hay un incremento de 5.000 a 10.000 plaquetas/mm3 en el paciente receptor. PLASMA FRESCO CONGELADO. Es el plasma obtenido en las primeras horas luego de la flebotomía. Centrifugada a partir de sangre total, congelado inmediatamente a menos -81ºC con la finalidad de retener y conservar los factores lábiles de la coagulación (FVIII >80 UI/unidad), además contiene 250mg fibrinógeno, es utilizada como materia prima para la producción de crioprecipitado. Contiene 200ml, almacenado a -30ºC su tiempo de vida útil es de un año. Se necesita niveles mínimos de los factores de la coagulación para la formación normal de fibrina y la hemostasia. El plasma normal contiene factores de la coagulación en exceso, una reserva que por lo común permite a los pacientes recibir hasta una volemia completa de reemplazo en eritrocitos y coloide, sin necesidad de PFC. CRIOPRECIPITADO. Se obtiene a partir del Plasma Fresco congelado, con la finalidad de recuperar la mayor cantidad posible de los factores de la coagulación, factores lábiles de la coagulación FV, FVIII 80UI/unidad y parte del factor FXIII al igual que 250mg fibrinógeno por cada unidad en un volumen de 15ml, se almacenan a -80°C y su duración es de un año. PLASMA CONGELADO. Esta es obtenida por centrifugación de sangre total al ser demorado su congelamiento por varias horas pierde gran parte de los factores lábiles de la coagulación. Almacenada a -30°C tiene vida útil de un año. La mayor parte de los factores de la coagulación son estables a la temperatura de refrigeración excepto el factor V y VIII. Este hemocomponente es empleado en la industria para la producción de hemoderivados. HEMODERIVADOS. Elaborados por medios físicos y químicos, tiene como materia prima el plasma (Producto sometido a inactivación viral), el cual es llevado a la industria farmacológica para la producción de: Albúmina, Gammaglobulina, Factores de coagulación (F VIII), etc. CUESTIONARIO 1. ¿Cuál es la diferencia entre hemocomponentes y hemoderivados? 2. ¿Por qué motivo no se utiliza Sangre Entera y se prefiere dar uso al Concentrado de Eritrocitos? 3. ¿Cuáles son las ventajas que tienen los crioprecipitados en relación al Plasma Fresco Congelado? 4. ¿Cuando el paciente recibe una transfusión sanguínea que mejoras se espera observar en el hemograma de rutina, cuál es el momento oportuno para dicho control? 5. ¿Cuando el paciente recibe cuatro transfusiones de Concentrado de Plaquetas que mejoras se espera observar en el hemograma de rutina, cuál es el momento oportuno para dicho control? 6. ¿Cuándo y por qué se prefiere usar en hemoterapia los Concentrados de Eritrocitos Lavados? U N I V E R S I D A D 23 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD WORK PAPER # 4 UNIDAD V: TEMA 15 y 16 TITULO: Hemostasia primaria y Hemostasia secundaria FECHA DE ENTREGA: 16ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 17ª semana INTRODUCCIÓN. En nuestro organismo existe la interacción continua de diversos fenómenos fisiológicos a fin de evitar pérdida sanguínea, conservando la integridad del sistema vascular. HEMOSTASIA. Es el proceso que detiene espontáneamente el flujo de sangre de los vasos que la transportan a presión. HEMOSTASIA. Es el equilibrio de los componentes sanguíneos cuyas funciones son: Mantener la integridad del endotelio vascular, evitar extravasaciones sanguíneas, cohibir una hemorragia, Mantener incoagulable la sangre circulante, limitar el área de activación de la coagulación, recanalizar un vaso trombosado. Este proceso es llevado a cavo por un conjunto de sistemas homeostáticamente independiente: sistema vascular, sistema plaquetario y sistema plasmático. HEMOSTASIA PRIMARIA. Cuando existe una agresión a la pared vascular, esta se contrae por un reflejo neurohormonal. Al mismo tiempo las plaquetas contactan el subendotelio que termina con la formación del tapón plaquetario primario. “La actuación vascular y plaquetaria constituye la hemostasia primaria”. CLÍNICA. Hemorragias que tienen un comienzo inmediato y brusco en piel y mucosas con petequias, equimosis, gingivorragias y epistaxis (púrpuras) traducen defectos en la hemostasia primaria. PÚRPURAS. (extravasación de eritrocitos a piel o tejido subcutáneo) representa la patología genuina de los trastornos de la hemostasia primaria. Las púrpuras se dividen en función de la alteración de sus componentes en tres grandes grupos: Púrpura vascular, el fallo es en el componente vascular, que origina hemorragias cutáneas superficiales por lo tanto el coagulograma será normal. Púrpura trombopática. Estos pacientes tendrán clínica de diátesis hemorrágica con tiempo de sangría alargado, > 15 minutos y el resto del coagulograma normal. La función de las plaquetas es defectuosa. Púrpura trombopénica. Pacientes con clínica de diátesis hemorrágica con recuento de plaquetas disminuidos frecuentemente menor de 50.000 y el resto del coagulograma normal. U N I V E R S I D A D 24 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA HEMOSTASIA SECUNDARIA. La activación de la cascada de la coagulación, que culmina con la formación de una malla de fibrina (o tapón hemostático secundario) constituye la hemostasia secundaria. CLÍNICA. Los hematomas y las hemartrosis suelen verse en las alteraciones de la hemostasia secundaria. CLASIFICACIÓN DE LOS TRASTORNOS DE LA HEMOSTASIA SECUNDARIA. Alteración de la síntesis de factores CONGÉNITA Hemofilia A, B, C Déficit de Enfermedad de VW. ADQUIRIDA Hepatopatía Déficit de Vitamina K Consumo excesivo de factores: (CID) Presencia de inhibidores: (anticoagulantes) CASOS CLÍNICOS PARA APLICACIÓN DEL APRENDIZAJE 1.- Paciente de 28 años con 75 Kg, con antecedentes de insuficiencia renal crónica con urea 380mg/dl y creatinina de 15mg/dl, desde hace 72 horas presenta petequias, equimosis y hematuria con tiempo de sangría de 30 minutos, recuento de plaqueta 180.000, TP 11 seg., TPTa 40 segundos y fibrinógeno 180mg. Hemograma: HB. 8g/dl, HTO. 25%, VCM. 85 fl, HCM 30pg. Blancos 6300, Seg. 65, linfo. 35. ¿Qué trastorno de la hemostasia tiene su paciente? ¿Qué tipo de púrpura tiene su paciente? Clasifique la anemia y escriba su causa 2.- Paciente femenino de 35 años peso 50kg, LES desde hace 10 años llega a la consulta presentando lesiones tipo púrpura en tórax, miembros superiores e inferiores, estudios laboratoriales reportan TP 11 segundos y TPTa 40 segundos, fibrinógeno. 190mg/dl tiempo de sangría 4 minutos y recuento de plaquetas 20.000. Hemograma: HB. 10 g/dl, HTO. 30%, VCM. 85 fl, HCM 30 pg. Blancos 3300, Seg. 35, linfo. 65. ¿Qué trastorno de la hemostasia tiene su paciente? ¿Qué tipo de púrpura tiene su paciente? Clasifique la anemia y escriba su causa 3.- Paciente de 38 años con 75 Kg., con antecedentes de insuficiencia renal crónica con urea 480mg/dl y creatinina de 12mg/dl, se decide la diálisis peritoneal y en el transcurso de la misma se observa que el liquido utilizado para la diálisis comienza a tomar un color cada vez mas sanguinolento. Solicitan los siguientes laboratorios: Tiempo de sangría 25 minutos, recuento de plaquetas 210.000, TP 12seg. TPTa 40seg., y fibrinógeno. 195mg/dl. Hemograma: HB. 6 g/dl, HTO. 18%, VCM. 85 fl, HCM 30 pg. Blancos 6000, Seg. 65, linfo. 35. ¿Qué trastorno de la hemostasia tiene su paciente? ¿Qué tipo de púrpura tiene su paciente? Clasifique la anemia y escriba su causa ¿Hubo negligencia médica? U N I V E R S I D A D 25 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 4.- Paciente de 15 años con 40 Kg., con cuadro clínico de 72 horas de evolución con signo de petequias, equimosis y hematuria con tiempo de sangría de 25 minutos, recuento de plaqueta 15.000, TP 11 seg., TPTa 35 seg., y fibrinógeno. 180mg. hemograma: HB. 10g/dl, HTO. 30%, VCM. 85 fl, HCM 30pg. Blancos 11000, Segmentados 65, linfocitos 30, cayados 5. Mielograma destaca a la serie granulocitica hiperplásica y con muchos megacariocitos plaquetogenos. ¿Qué trastorno de la hemostasia tiene su paciente? ¿Qué tipo de púrpura tiene su paciente? Clasifique la anemia y escriba su causa Tratamiento de la anemia y de la púrpura 5.- Paciente de 4 meses de edad que llega a su consultorio traído por su madre con antecedentes de gingivorragias, equimosis y hematomas. Usted le pidió un coagulograma y los resultados reportan el TPTa 80 segundos, el TP 12 segundos, tiempo de sangría 25 minutos, recuento de plaquetas 170.000 y fibrinógeno 190mg/dl. ¿Qué trastorno de la hemostasia tiene su paciente? ¿Qué tipo de púrpura tiene su paciente? Causa de la púrpura 6.- Pacienta de 15 años de edad, peso 22 Kg. Que llega a la emergencia referida de un hospital de la provincia con antecedente de lesiones en piel, de tipo purpúricas en la región lumbar de una evolución de aproximadamente 2 semanas, asociada a fiebre alta no cuantificada con un hemograma que muestra blancos 18.000, seg. 55, cayados 10, linfocitos 35 y un coagulograma, que reporta: TP 12 segundos, TPTa 35 seg. y fibrinógeno 250mg/dl. Recuento de plaquetas 350.000 y TS 2 minutos. ¿Qué trastorno de la hemostasia sospecha? ¿Qué tipo de púrpura tiene su paciente? 7.- Paciente de 36 años que ingresa al servicio de emergencia con tres días de evolución de fiebre, artralgia, mialgia y cefalea intensa con petequias y equimosis en miembros inferiores, PA 120/80 y FC 110 PM. Un hemograma con leucocitos 2800, linfocitos 50, monocitos 5, segmentados 40 y eosinófilo 5 con recuento de plaquetas de 32 000 y hemoglobina de 13g/dl. ¿Qué trastorno de la hemostasia tiene su paciente? ¿Qué tipo de púrpura tiene su paciente? Causa de la púrpura . 8.- Paciente de 6 meses de edad que llega a su consultorio traído por su madre con antecedentes de (equimosis y hematomas) desde que el niño gatea a nivel de las rodillas. Usted le pidió un coagulograma y los resultados reportan el TPTa 180 segundos, el TP 12 segundos, tiempo de sangría 15 minutos, recuento de plaquetas 170.000 y fibrinógeno 195mg/dl : ¿Identificar qué trastorno de la hemostasia esta involucrado? ¿Qué patología causa este trastorno? Conducta terapéutica 9.- Paciente con antecedente de ictericia y colelitiasis con bilirrubina directa de 6mg/ dl y la indirecta de 1mg/ dl desde hace 2 semanas y hace 4 días comienza a presentar equimosis en miembros inferiores y el coagulograma reporta solo alteraciones en el tiempo de protrombina con 20 segundos y el TPTa 40 segundos sin sangrado activo. Los factores deficientes La causa que produce el déficit U N I V E R S I D A D 26 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 10.- Paciente con 8 meses de edad que llega a su consultorio traído por su madre con antecedentes de que desde que el niño gatea las rodillas se les moretea (equimosis) Usted le pidió un coagulograma y los resultados reportan el TPTa 2 minutos, el TP 12 segundos, tiempo de sangría, recuento de plaquetas y fibrinogeno normal: Identificar que trastorno de la hemostasia esta involucrado Escriba dos patologías que causan este trastornos 11.- Paciente de 65 años peso 70 kg, con antecedente de mordida de serpiente hace 4 horas llega a la emergencia presentando edema en miembro inferior izquierdo, con signos de equimosis y hematomas y signos de mordedura en dorso del pie. Coagulograma presenta TP incoagulable por más de 1 hora y TPTa 1 minuto con 40 segundos y Fibrinógeno. 20mg/dl; recuento de plaquetas 155.000 y TS 2 minutos. Identificar trastorno de la hemostasia Identificar causa del trastorno 12.- Paciente de 65 años, hepatitis B desde hace 15 años llega a la emergencia presentando a la palpación abdominal esplenomegalia, con signos de equimosis y hematomas en miembros inferiores y melena. Coagulograma presenta TP 26 segundos y TPTa 60 segundos y fibrinógeno 90 mg/dl; recuento de plaquetas 100.000 y tiempo de sangría 18 minutos. Hemograma con: Hb. 10,5 grs. /dl. Hto. 31%, PA 130/ 90. FC 85 p/min. Identificar trastorno de la hemostasia Identificar causa del trastorno 13.- Paciente de 52 años de edad, llega a la emergencia desorientado e incoherente, con antecedente de melena en 6 oportunidades y hematemesis, al examen físico se observa un abdomen abombado con signos de ascitis a la palpación, asociado a equimosis y hematomas en miembros superiores e inferiores Presenta hemograma con: Hb. 6,5 grs. /dl., Hto. 20%, PA 80/ 50. FC 125p/min. Coagulograma presenta TP 20 % de actividad, TPTa 35 segundos y fibrinógeno 150mg/dl recuento de plaquetas 100.000 y tiempo de sangría 2 minutos. En emergencia solicitan una unidad de CE. Clasificar grado de hemorragia Conducta terapéutica inicial ¿Que considera UD que debe hacer el medico de emergencia? 15.- Paciente varón de 60 Kg de 65 años con antecedentes de tratamiento profiláctico de anticoagulación post cirugía ortopédica, desde hace 48 horas. Habiéndose administrado heparina sódica 5000 UI en bolo y 1000 UI cada hora en perfusión continua. Hace aproximadamente 1 hora comienza a tener hematuria, y melena. ¿Qué trastorno de la hemostasia sospecha? Causa del trastorno de la hemostasia U N I V E R S I D A D 27 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA GIP´S PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 1 UNIDAD I TÍTULO: Microscopia FECHA DE ENTREGA: 5ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 5ª semana FUNDAMENTACIÓN Aunque, como es lógico, la forma y partes de un microscopio pueden variar de un modelo a otro, existen unas partes comunes, que aparecen representadas a manera de esquema en el dibujo adjunto. Facilita la observación de células no distinguibles a la capacidad visual del hombre, indispensable en la investigación y en el trabajo rutinario de laboratorio clínico. PRÁCTICA OBJETIVOS Identificar y describir las partes que forman el microscopio, mediante la manipulación objetiva del mismo MATERIAL Microscopio óptico MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO SISTEMA ÓPTICO - Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo. - Objetivo: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta. - Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación. - Diafragma: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador. - Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador. SISTEMA MECÁNICO - Soporte: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo. - Platina: Lugar donde se deposita la preparación. - Cabezal: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular. - Revólver: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos. - Tornillos de enfoque: Macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico que consigue el enfoque correcto. U N I V E R S I D A D 28 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO 1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente. 2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas. 3. Comenzar la observación con el objetivo de 4x o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparación es de bacterias. 4. Para realizar el enfoque: Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con el macrométrico y, cuando se observe algo nítido la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino. 5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparación si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con el objetivo de inmersión. 6. Empleo del objetivo de inmersión: Bajar totalmente la platina. Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el aceite. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre éste y el de x40. Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de inmersión. Mirando directamente, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersión y la preparación es mínima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande. Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operación desde el paso 3. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersión en posición de observación. Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para óptica. Comprobar también que el objetivo 40x está perfectamente limpio. MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES - - - - Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasará el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico, platina, revólver y condensador). El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del ocular. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido, secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos. RESULTADO U N I V E R S I D A D 29 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA CONCLUSIONES CUESTIONARIO 1. 2. 3. 4. 5. ¿Qué significa la palabra microscopio? ¿Que diferencias de uso tiene los diversos tipos de micrscopio que existen? Describa para que sirven cada uno de los diferentes objetivos que posee el microsopio óptico ¿Investigue con que tipo de solución se debe limpiar los objetivos? ¿Porqué? Es posible observar al virus del VIH en el microscopio óptico? Justifique porqué PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 2 UNIDAD I TÍTULO: Bioseguridad FECHA DE ENTREGA: 5ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 5ª semana FUNDAMENTACIÓN En el sentido etimológico BIOSEGURIDAD significa “seguridad de vida” lo cual evoca el concepto de protección de vida y que en gran parte puede lograrse evitando accidentes, deberá estar diseñado en el marco de una estrategia de disminución de riesgos. El inadecuado manejo de los desechos hospitalarios puede causar diversos tipos de daños entre los que están: heridas pinchazos, sensibilización a medicamentos, infecciones, intoxicaciones, alergias, cáncer, etc. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Conocer y aplicar las normas de Bioseguridad establecidas para laboratorio clínico MATERIAL - Etanol - Hipoclorito de Sodio - Contenedores de basura con bolsas de color: negro, amarillo, roja - Recipiente de plástico resistente para descartar agujas - Jabón - Guantes descartables Riesgos. El inadecuado manejo de los desechos hospitalarios puede causar diversos tipos de daños entre los que están: Heridas pinchazos, Sensibilización a medicamentos, Infecciones, Intoxicaciones, Alergias, Cáncer u otros. La exposición a desinfectantes, detergentes, medicamentos y reactivos de laboratorio pueden provocar alergia, intoxicaciones y sensibilización. El contacto persistente con residuos de antibióticos podría desencadenar resistencia bacteriana. La exposición persistente a medicamentos citostáticos aunque sea en dosis bajas debe ser considerada potencialmente peligrosa por la posibilidad de provocar irritación local, alergia y sobretodo cáncer y efectos mutagénicos y teratogénicos. A través pinchazos con agujas contaminadas con sangre se pueden transmitir varias enfermedades como: SIDA, Hepatitis B, Hepatitis C, Malaria, Leishmaniasis, Tripanosomiasis, Toxoplasmosis, e infecciones por Estafilococos áureos y Estreptococos pyogenes. Normas generales de bioseguridad. La posible contaminación del personal de salud es producida como consecuencia de cortes y pinchazos por objetos afilados o derrames y salpicaduras de materiales contaminados. Las normas de protección son procedimientos que disminuyen la exposición a materiales contaminados y que incluyen la utilización de protecciones o barreras que son de tres tipos: Barreras Físicas: Guantes, batas y cualquier otro equipo de protección individual que aísla al trabajador de las secreciones de los pacientes U N I V E R S I D A D 30 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Barreras Químicas: Desinfectantes como hipoclorito de sodio, formaldehído, glutaraldehido, yodo, gluconato de clorhexidina, etc. que liberan a la piel o a los instrumentos de los contaminantes adquiridos luego de la exposición. Barreras Biológicas: Vacunas, inmunoglobulinas y quimioprofilaxis. Dan protección al personal de salud generando defensas para evitar el contagio o para combatir infección Precauciones universales. Las precauciones universales son conductas que deben aplicarse permanentemente con todo tipo de paciente, independientemente de su enfermedad y que no requieren de ningún cambio por el nivel de infección del paciente. La exposición puede darse por varias vías: Inhalación, dérmica, digestiva, transcutanea y a través de la mucosa. Para evitar riesgos se deben aplicar las siguientes conductas: - Vacunación para Hepatitis B a todo el personal de salud. - Utilizar batas blancas manga larga, con empuñadura. - Cuando procese muestras biológicas o entre en contacto con el paciente colocarse siempre guantes - Después de una extracción sanguínea, encapuchar la aguja con una sola mano para evitar pinchazos. - En lugares con tendencia a formar aerosoles utilizar barbijos (Pacientes con TB) - Nunca salir de la instalación hospitalaria o laboratorio con la bata ni guantes puestos - Lavarsme las manos después de haber entrado en contacto con sangre o fluidos corporales, después de retirarse los guantes y en el cambio de un paciente a otro. - Cubrir cortes y heridas con apósitos imperforables - Retirar anillos y otras joyas para evitar heridas y deposito de gérmenes en los mismos - Colocarse guantes cuando se maneja material infeccioso. - Desechar los guantes contaminados - No tocarse los ojos, nariz, y otras mucosas con las manos enguantadas. - No circular por el establecimiento con las manos enguantadas. - Una vez terminado el trabajo lavarse las manos con jabón. - Colocar las agujas y otros objetos afilados en recipientes imperforables - No pipetear líquidos con la boca - En el ambiente de trabajo no comer, beber, fumar y tampoco guardar alimentos en dicho lugar. - No maquillarse dentro los ambientes de laboratorio Derrames y accidentes. Si se derrama material infectado cubrir con papel absorbente, verter un desinfectante alrededor de la zona y sobre el material absorbente, dejando actuar 20 minutos. La mezcla de material derramado y el desinfectante deben limpiarse con papel absorbente y se desechan, finalmente se limpia de nuevo. Durante todo este proceso utilizar guantes. El desinfectante recomendado es el Hipoclorito de Sodio. En caso de pinchazos, cortes o contaminación de la piel lavarse con agua y jabón. Si se produce una herida sangrante favorecer la hemorragia. Manipulación y evacuación de material y desechos contaminados - El material reutilizable (pipetas, pinzas, tubos, etc.) deben de colocarse en un recipiente metálico o plástico imperforable, para luego desinfectarlos por métodos químicos antes de limpiarlos. - Antes de volver a usar los mandiles es preciso desinfectarlas y lavarlas. - El material contaminado desechable como jeringas, agujas y otros objetos afilados, se deben poner en un recipiente imperforable. Este material se desinfectará por métodos químicos. - La incineración es el método de elección para eliminar desechos y materiales contaminados. - El entierro de material y desechos es la única posibilidad cuando no se cuenta con un incinerador. Soluciones antisépticas - Asepsia. Significa libre de gérmenes o microorganismos. - Antisepsia. Uso de agentes químico para evitar la infección, inhibiendo el crecimiento de los microorganismos. - Desinfección. Procedimiento que permite destruir o matar a los gérmenes de la superficie. Las soluciones antisépticas mas usadas en nuestro medio son las siguientes: Alcoholes de 60 a 90º: etílico e isopropílico Iodos, del 1 al 3%: acuosos y en tinturas, ejemplo: Lugol Iodóforos: Iodopovidona en diferentes concentraciones, por ejemplo: Isodine, Betadine, Iovisol, etc. Soluciones desinfectantes Desinfección de Alto Nivel (D.A.N.). Elimina a la mayoría de los microorganismos que causan enfermedad: hongos, bacterias, virus e incluso al agente de la Tuberculosis. Se puede tener una Desinfección de Alto Nivel, remojando los artículos en un Desinfectante de Alto Nivel (Hipoclorito de Sodio al 1%), por 20 minutos. ¿Cómo obtener hipoclorito de sodio al 1%? El Hipoclorito de Sodio viene de forma comercial con el nombre de Lavandina en una concentración del 5 al 8%. Si viene al 5% realizar una dilución 1:5, es decir 1 parte de lavandina con 4 partes de agua. Para preparar un litro de Hipoclorito de Sodio al 1%, añadir a 200ml de lavandina, 800ml de agua. Esterilización. Este proceso permite eliminar completamente de los objetos, todo microorganismo, bacterias, virus, hongos y parásitos. La esterilización por Autoclave es el método más efectivo y de menor costo para esterilizar la mayoría de los objetos y materiales. La esterilización por calor seco se logra por conducción del calor, desde la superficie externa del artículo hacia las capas internas. Los microorganismos mueren por quemadura lenta de sus proteínas. Desechos en laboratorio. Los desechos son de 2 tipos: U N I V E R S I D A D 31 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Desechos Contaminados. Son los contaminados con sangre, pus, orina, heces, etc. Depositar en recipientes resistentes que tenga en su interior una bolsa plástica color rojo. Desechos No Contaminados. papeles, cajas, etc. Depositar en recipientes resistentes que tenga en su interior una bolsa plástica color negro. Los envases de reactivos y medicamentos serán eliminados de igual forma en recipientes que contengan una bolsa de color amarillo. Los desechos contaminados se recogen con doble embolsado. La incineración requiere, instalación especial que garantice temperaturas alrededor de 1000ºC. Eliminación de los desechos Eliminación de objetos afilados - Usar guantes para hacerlo adecuadamente - Colocar los objetos afilados en un recipiente imperforable (Ej.: Botellas de plástico) - Cuando las ¾ partes esté ocupado, agregar solución de Hipoclorito de Sodio al 1%, y enterrarla, si no es posible su incineración. Eliminación de desechos líquidos contaminados Para proceder a la eliminación siempre usar guantes durante su manipulación, posteriormente hay que tratarlos con Hipoclorito de Sodio al 1% por 20 a 30 minutos. RESULTADO CONCLUSIONES CUESTIONARIO 1.- ¿Cuál es el procedimiento a seguir en caso de accidentes con derrame de material biológico? 2.- ¿En que consiste las defensas biológicas adquiridas? 3.- Observa a tu alrededor en laboratorio y describe las condiciones de bioseguridad, realiza sugerencias de ser necesarias. 4.- Menciona 10 enfermedades que puedes adquirir, si no aplicas correctamente las normas de bioseguridad 5.- Describe la manera correcta para descartar todo el material que utilizaste al hacer una toma de muestra sanguínea U N I V E R S I D A D 32 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 3 UNIDAD I TÍTULO: Toma de muestra sanguínea FECHA DE ENTREGA: 5ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 5ª semana FUNDAMENTACIÓN La flebotomía es la incisión de una vena para la extracción de sangre. Por tanto, la toma de muestra de forma correcta, es muy importante, porque a partir de ésta se podrá expresar resultados confiables. La proporción de anticoagulante también es de vital importancia, de preferencia se utilizará anticoagulante EDTA (Hematología), en proporción 20 microlitros para 2ml de muestra sanguínea. La sangre recogida con Ácido Etilendiamintetraacético muestra notable estabilidad de los elementos celulares sin evidencia de hemólisis hasta los 8 días de conservación. El recuento globular, la hemoglobina, reticulocitos, plaquetas y hematocrito, no muestran variaciones por 24 horas en sangre mantenida a temperatura ambiente y 48 horas mediante refrigeración. La eritrosedimentación y los extendidos para examen morfológico diferenciales pueden efectuarse en sangre mantenidas entre 3 y 6 horas a temperatura ambiente o 24 horas en refrigeración. El anticoagulante EDTA es muy útil para el estudio del Hemograma, además para la clasificación y tipificación de los grupos sanguíneos y en determinaciones de química sanguínea donde deba emplearse plasma (excepto sodio, potasio, calcio) PRÁCTICA OBJETIVOS Realizar una correcta flebotomía aplicando las normas establecidas por OMS/OPS MATERIAL - Torniquete - Torundas humedecidas en etanol al 70% - Jeringas de 5ml - Guantes descartables - Frasco de vidrio con Anticoagulante EDTA al 5% MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO - Preparación del Paciente. Si el paciente se encuentra en toma de muestra de laboratorio, haga que se siente de manera que quede colocado paralelamente a la mesa de trabajo donde se hará la extracción de sangre. Ponga el brazo del paciente sobre la mesa de trabajo apoyándolo en un pequeño cojín dispuesto bajo el codo, con la palma de la mano vuelta hacia arriba. Si el paciente se encuentra en cama, extienda el brazo del paciente en una posición descansada. U N I V E R S I D A D 33 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA - Puntos para la extracción de sangre. El sitio más adecuado es la vena que se encuentra en el pliegue anterior del codo, en el punto donde sea más gruesa y fácilmente visible, aprovechando de preferencia, una de las ramas que forman una “Y”, inmediatamente arriba del lugar donde se juntan. Si fuese necesario se pueden usar los puntos 2,3 ó 4 - Uso de la jeringa. Monte la aguja en la jeringa, sin tocar más que la base de la aguja. Pruebe aguja y jeringa para cerciorarse de que no está obstruida y la jeringa es hermética. Cubra el extremo de la aguja con su capuchón estéril hasta que se use. - Aplicación del torniquete - Con la mano derecha coloque firmemente el torniquete alrededor del brazo y sujete los extremos - Con la mano izquierda tire de un extremo, cruzándolo - A continuación introduzca este extremo por debajo de la parte principal del torniquete. El torniquete se deberá ajustar solo lo suficiente para aminorar la corriente sanguínea y dilatar las venas, sin apretarlo tanto que reduzca el paso de sangre por las arterias - Pida al paciente que abra si cierre la mano varias veces, para favorecer la dilatación de las venas. - Con el dedo índice de la mano izquierda palpe la vena en que introducirá la aguja. - Desinfecte la piel con una pieza de algodón humedecida en tintura de yodo o etanol. - Tome la jeringa con la mano derecha, colocando la yema del dedo índice sobre la base de la aguja. - Venoclisis - Coloque la aguja sobre la vena, con el bisel hacia arriba, introduzca la aguja en el centro de la vena, sin titubeos U N I V E R S I D A D 34 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA Importante: Nunca se intente puncionar una vena por un lado, nunca se introduzca la aguja con el bisel hacia abajo. - Haga entrar la aguja a lo largo de la vena 1cm - Con la mano izquierda tire hacia atrás el embolo de la jeringa muy lentamente. Siga tirando el embolo hacia atrás hasta haber obtenido la cantidad de sangre que requiera - Retire el torniquete el torniquete tirando del extremo doblado - Aplique una pieza seca de algodón sobre la parte donde se encuentra oculta la punta de la aguja. Saque la aguja con un movimiento rápido por debajo de la pieza de algodón - Pida al paciente que presione firmemente la pieza de algodón durante 3 minutos, con el brazo extendido. En la actualidad no se recomienda que se flexione el brazo sobre la pieza del algodón (a causa del riesgo de que se forme un hematoma) - Tape la aguja con su respectivo capuchón, aplicando las medidas de Bioseguridad. - Separe la aguja de la jeringa. Llene el frasco con la muestra de sangre (escurrida por las paredes) hasta la marca correspondiente. Invierta varias veces el frasco a manera de mezclar el anticoagulante con la muestra sanguínea. Inmediatamente identificar el frasco con marcador para vidrio. - Descartar el material utilizado, como indica las normas de Bioseguridad - Principales causas de error en toma de las muestras. - Empleo de tubos mal lavados o húmedos. - Jeringas contaminadas, no esteriles - Error en la identificación del paciente. - Perforación accidental de la vena - Anticoagulantes inadecuados o en proporción errónea. - Extracción excesivamente lenta. - Agitación excesiva o insuficiente. - Mala técnica al vaciar la sangre de la Jeringa al tubo receptor - Llenado insuficiente de los tubos que contienen anticoagulantes. RESULTADO CONCLUSIONES CUESTIONARIO 1. ¿Cuál es la función que cumple el EDTA? 2. ¿Existes otros anticoagulantes, cuales son y para que sirven? 3. ¿Dibuje y mencione las venas aptas para realizar una flebotomía? 4. ¿Cuál es la finalidad del uso del torniquete, en que situaciones no debería de utilizarse? 5. ¿Existen riesgos para el paciente en el acto de la flebotomía, descríbalo? U N I V E R S I D A D 35 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 4 UNIDAD I TÍTULO: Frotis Sanguíneo FECHA DE ENTREGA: 1ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 6ª semana FUNDAMENTACIÓN. El frotis sanguíneo es de vital importancia ya que a partir de este se identifican alteraciones morfológicas que nos dan pautas del posible diagnóstico del paciente. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Realizar un extendido delgado y uniforme para posteriormente teñirlo y poder apreciar sus constituyentes MATERIAL - Portaobjetos desengrasados limpios - Cubreobjetos - Lápiz MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Depositar en el portaobjeto (próximo a un extremo) 15µl de sangre con anticoagulante, puede también utilizarse la sangre directa de la jeringa 2. Sujetar firmemente el portaobjeto 3. Aplicar el borde del cubreobjeto al portaobjeto, dejando que la gota de sangre se difunda por el área de contacto. 4. Con un ángulo de aproximadamente 45º se desplaza el cubreobjeto sobre la superficie del portaobjeto con un movimiento uniforme. 5. Dejar secar RESULTADO CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. Dibuje un frotis realizado de forma correcta 2. ¿Cuáles son las desventajas de utilizar un frotis mal realizado? 3. Describe las condiciones de Bioseguridad que debe contar el ambiente donde realizastu frotis BIBLIOGRAFÍA - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 - José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 U N I V E R S I D A D 36 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA - Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 5 UNIDAD II TÍTULO: Hematocrito FECHA DE ENTREGA: 2ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 6ª semana FUNDAMENTACIÓN Es de utilidad para el diagnóstico y el seguimiento de anemias y eritrocitosis. Se base en que gracias a la fuerza centrífuga el contenido globular es empacado en un delgado tubo de vidrio capilar II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Realizar la determinación del hematocrito para su posterior evaluación diagnóstica MATERIAL - Centrifuga para microhematocritro - Escala de lectura o ábaco - Tubo capilar de diámetro uniforme - Plastilina MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Mezclar la muestra por inmersión 20 veces 2. Llenar por capilaridad el tubo hasta las tres cuartas partes 3. Sellar un extremo con plastilina 4. Colocar los tubos en la centrífuga con el extremo sellado hacia afuera 5. Centrifugar 5 minutos aproximadamente a 12.000 r.p.m. 6. Realizar su lectura correspondiente utilizando el ábaco 7. Informar el resultado el porcentaje en relación al 100% RESULTADO Paciente Nº 1: _____ % Paciente Nº 2: _____% Paciente Nº 3: ______ % CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO U N I V E R S I D A D 37 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 1. ¿Cuáles son los factores naturales o fisiológicos que determinan la diferencia de los valores de referencia de un hematocrito? 2. Ejemplifica, con resultado de hematocrito en caso de un paciente con Poliglobulia, ¿Por qué crees que se manifieste de esta manera? 3. Realiza un cuadro donde se observen las diferencias del hematocrito en condiciones normales de acuerdo a la edad y al género 4. Menciona 5 enfermedades que se caracterizan por que el paciente manifiesta anemia, justifica el origen de la anemia de una de ellas BIBLIOGRAFÍA - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 U N I V E R S I D A D 38 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 6 UNIDAD II TITULO: Velocidad de Sedimentación Globular FECHA DE ENTREGA: 3ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 6ª semana FUNDAMENTACIÓN Se basa en la relación existente entre factores corpusculares y plasmáticos que hacen que la columna sangre descienda lentamente en relación al tiempo, es de utilidad ante procesos de naturaleza sistémicos, orgánicos, como ser inflamación, así como por la cantidad de elementos formes. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Realizar la determinación de la VSG para su posterior evaluación diagnóstica MATERIAL - Pipeta de Westergren - Soporte para pipeta de Westergren - Cronómetro MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO Cargar la pipeta hasta la marca “O” con la muestra Colocar la pipeta en el soporte Leer al cabo de una hora el nivel del plasma en milímetros lineales desde el cero hasta el borde superior de la columna eritrocítica. RESULTADO Paciente Nº 1 VSG_____ mm a la primer hora Paciente Nº 2 VSG_____ mm a la primer hora Paciente Nº 3 VSG_____ mm a la primer hora CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO Menciona y describe las limitantes de la valoración de la VSG ¿En qué situaciones es importante el seguimiento y valoración de la VSG? ¿Qué factores inducen a la aceleración de la VSG? Menciona 5 enfermedades que se caracterizan por que el paciente manifiesta una VSG acelerada, justifica el origen de una de ellas BIBLIOGRAFÍA - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 - José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 1. 2. 3. 4. U N I V E R S I D A D 39 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA - Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 7 UNIDAD II TÍTULO: Hemoglobinometría FECHA DE ENTREGA: 4ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 6ª semana FUNDAMENTACIÓN El método recomendado por el Comité Internacional para la Estandarización en Hematología (ICSH) es la Cianmetahemoglobina, que se basa en la mezcla de la solución de Drabkin que contiene ferricianuro, con la muestra que convierte el hierro ferroso de la hemoglobina en férrico, formando metahemoglobina, la que al reaccionar con el cianuro de potasio forma Cianmetahemoglobina, la absorbancia de la solución es espectrofotómetro a 540nm de longitud de onda con filtro verde – amarillo, si se dispone de fotocolorímetro. Es de gran importancia para cuantificar la concentración de la hemoglobina en el diagnóstico en relación a la anemia. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS: Realizar la determinación de la concentración de hemoglobina por el método de la Cianmetahemoglobina MATERIAL - Micropipeta de 20microlitros - Tubos de ensayos - Gradilla para tubos - Pipeta volumétrica de 5ml - Espectrofotómetro o fotocolorímetro - Reactivo de Drabkin MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Colocar 5ml de la solución de Drabkin en un tubo de vidrio de 10ml 2. Mezclar bien la muestra 15 veces por inmersión antes de usar 3. Tomar 20 microlitros de la muestra, limpiar la parte externa de la puntera 4. Expulsar suavemente la muestra en la solución 5. Mezclar bien por inmersión 20 veces, esperar 5 minutos 6. Leer a 540nm RESULTADO Hemoglobina (g/dl) = D x Factor donde: Factor = Standard (g/dl) Hemoglobina: ____ g/dl S. CONCLUSIONES U N I V E R S I D A D 40 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. ¿Cuál es la función que cumple la hemoglobina en nuestro organismo? 2. Menciona y describe las formas y lugares en los que se encuentra la hemoglobina en nuestro organismo 3. ¿Cuáles son los factores naturales o fisiológicos que determinan la diferencia de los valores de referencia de la hemoglobina? 4. ¿Cuáles son los efectos negativos que manifiesta el paciente en caso de una anemia severa? 5. ¿Por qué se prefiere la valoración de la hemoglobina en vez del hematocrito en el proceso de evaluación de una anemia? 6. ¿Además de evidenciar la presencia anemia, qué otros datos de importancia nos brinda la valoración de la hemoglobinometría? BIBLIOGRAFÍA - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 - José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 - Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 - Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 U N I V E R S I D A D 41 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 8 UNIDAD II TÍTULO: Recuento Leucocitario FECHA DE ENTREGA: 5ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 6ª semana FUNDAMENTACIÓN Para cuantificar el número total de leucocitos en sangre, la muestra es diluida con un reactivo que lisa los eritrocitos y es llevada a una cámara que ayuda al conteo de glóbulos blancos. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Cuantificar las células leucocitarias mediante microscopia empleando el líquido de Turk MATERIAL - Micropipeta de 20microlitros - Micropipeta para medir 380microlitros - Punteras - Tubos de ensayo de 5ml - Cámara de Neubauer - Cubrecámara - Gradillas para tubos de ensayo - Microscopio - Solución de Turk MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. En un tubo de ensayo depositar 380 microlitros de solución de Turk 2. Absorber 20µl de muestra sanguínea, limpiar el pared externa de la puntera y depositar en la solución de tal manera que quede completamente limpia (dilución final 1:20) 3. Mezclar hasta lograr una mezcla uniforme y cargar en la cámara de Neubauer 4. Reposar de 2 a 3 minutos luego leer en microscopio con objetivos de 10x 5. Efectuar el conteo leucocitario en los cuadrados grandes de las cuatro esquinas del retículo de la cámara de Neubauer 6. El conteo total de los cuatro cuadrantes se multiplica por el factor: 50 7. El resultado se expresa: células/mm3 RESULTADO Paciente Nº 1 Recuento Leucocitario: ______________ cél/mm3 Paciente Nº 2 Recuento Leucocitario: ______________ cél/mm3 Paciente Nº 3 Recuento Leucocitario: ______________ cél/mm3 CONCLUSIONES EVALUACIÓN U N I V E R S I D A D 42 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA CUESTIONARIO 1. ¿Cuál es la función que cumple el líquido de Turk en técnica para el recuento Leucocitario? 2. ¿Es posible preparar el líquido de Turk en laboratorio, descríbelo? 3. ¿Qué entiendes por leucopenia, menciona 5 enfermedades que se caracterizan por presentar leucopenia, justifica una de ellas? 4. ¿Qué entiendes por leucocitosis, menciona 5 enfermedades que se caracterizan por manifestar leucocitosis, justifica una de ellas? BIBLIOGRAFÍA - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 - José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 - Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 - Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 U N I V E R S I D A D 43 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 9 UNIDAD II TÍTULO: Tinción de Giemsa FECHA DE ENTREGA: 6ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 10ª semana FUNDAMENTACIÓN A través de las tinciones se puede revelar la presencia de las células formes de la sangre con sus características correspondientes, cualidades que no son diferenciales al examen directo. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Realizar la técnica tinción de Giemsa para poder describir la morfología de células formes de la sangre MATERIAL - Dos varillas de vidrio colocadas a través del fregadero (como soporte para lámina) - Tubo cónico graduado - Pizeta con agua destilada - Pipeta pasteur - Cronómetro - Gradilla para secar los portaobjetos - Gradilla para tubo - Colorante Giemsa - Metanol MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Obtener un frotis debidamente realizado 2. Secar a temperatura ambiente o estufa a 37ºC 3. Fijar el frotis con metanol por 3 minutos 4. Desechar el alcohol excedente 5. Colocar sobre el frotis colorante Giemsa recién preparado (1:10dil.) 6. Reposar por 15 minutos 7. Desechar el colorante excedente, lavar con agua suavemente 8. Colocar el portaobjeto inclinado, secar a temperatura ambiente o estufa RESULTADO CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. ¿Qué elementos químicos tiene el colorante de Giemsa? U N I V E R S I D A D 44 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 2. ¿Cuáles son las características coloreadas que adquieren las células al ser teñidas con Giemsa? 3. ¿Existen otros colorantes que sirven para teñir células sanguíneas, menciónalos, cuándo se utiliza? BIBLIOGRAFÍA 4. Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 5. José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 6. Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 7. Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 U N I V E R S I D A D 45 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 10 UNIDAD II TÍTULO: Fórmula Diferencial FECHA DE ENTREGA: 7ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 10ª semana FUNDAMENTACIÓN La lectura del frotis de sangre resume una apreciación semicuantitativa de los elementos figurados: eritrocitos, leucocitos, plaquetas, recuento diferencial de los leucocitos y la apreciación cualitativa: morfológica de éstos elementos a partir de su revelación en microscopia mediante la tinción de Giemsa II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Cuantificar y diferenciar la presencia de células leucocitarias con fines de apoyo diagnóstico MATERIAL - Microscopio - Frotis en portaobjeto - Aceite de inmersión - Piano o contador hematológico MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Examinar el extendido con amplitud de baja resolución (objetivo x10), para conseguir una impresión total del número de leucocitos y si estos están distribuidos uniformemente y si se ven cúmulos de plaquetas, particularmente en la cola del extendido 2. Poner una gota de aceite de inmersión en el frotis teñido con Giemsa 3. Cambiar de ampliación a x100 y examinar colocando el objetivo de tal manera que el lado frontal de la lente toque la gota de aceite 4. La lectura debe realizarse en la zona de la cola donde los eritrocitos no estén sobrepuestos entre ellos ni distantes entre si, a partir de allí hacia la zona del cuerpo realizando la lectura en zig zag siempre y cuando estos conserven su morfología y no se destruyan por estar muy próximos al borde. 5. Se contaran leucocitos en un total de 100 células que representa una expresión relativa 100% 6. Se informará cualquier alteración morfológica de las células formes de la sangre. RESULTADO CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. ¿Cuáles son las células sanguíneas que se observan en un hemograma de rutina, dibújelas? U N I V E R S I D A D 46 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA 2. Describa las alteraciones morfológicas que se pueden observar en las células sanguíneas 3. Mencione 5 enfermedades que pueden inducir a la alteración morfológica de los hematíes BIBLIOGRAFÍA - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 - José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 - Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 - Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 U N I V E R S I D A D 47 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 11 UNIDAD II TÍTULO: Recuento de Plaquetas FECHA DE ENTREGA: 8ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 10ª semana FUNDAMENTACIÓN Se mezcla la muestra sanguínea anticoagulada con un diluyente apropiado que produce hemólisis y lisis leucocitaria permitiendo una mejor visualización de las plaquetas la cual se observan refringentes en la cámara de Neubauer. Su determinación es útil en el seguimiento de transtornos de la coagulación, padecimientos autoinmunes, etc. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Determinar la cantidad de plaquetas por microscopia mediante el uso del diluyente de plaqueta. MATERIAL - Se utilizará sangre venosa anticoagulada con EDTA - Microscopio - Tubos de plástico (cap. 5ml) - Micropipeta de 10µl - Micropipeta capacidad 1000µl - Punteras - Cámara de Neubauer - Cubre cámara - Diluyente de Plaquetas: Solución de oxalato de amonio al 1% MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Colocar 1000µl de diluyente de plaquetas en el tubo de plástico 2. Añadir 10µl de sangre previa limpieza de los bordes externos de la puntera, enjuagar con el diluyente 3. Mezclar por lo menos 5 minutos, mejor si es un agitador mecánico 4. Dejar en reposo 15 minutos 5. Mezclar muy bien y cargar a la cámara de Neubauer, dejar en reposo en cámara húmeda 20 minutos 6. Observar el retículo de la cámara de Neubauer al microscopio con x10 y luego x40 7. Contar las plaquetas que se encuentran en uno de los cuadrantes del retículo central. 8. Las plaquetas contadas multiplicarlas por el factor 10000, el resultado se informará: ______ plaq/mm3 9. Su valor de referencia es de 150.000 a 450.000 plaq./mm3 U N I V E R S I D A D 48 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA RESULTADO Paciente Nº 1 _______________ plaq/mm3 Paciente Nº 2 _______________ plaq/mm3 Paciente Nº 3 _______________ plaq/mm3 CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. ¿Cuál es la función y composición química del reactivo para recuento de plaquetas? 2. ¿Cuál es el efecto negativo que presenta el paciente cuando manifiesta deficiencia severa de plaqueta? 3. ¿Que entiende por Trombocitopenia, mencione 5 enfermedades que pueden inducir a la misma? 4. ¿Qué entiende por Trombocitosis, mencione 5 enfermedades que pueden inducir a la misma? BIBLIOGRAFÍA Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 U N I V E R S I D A D 49 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 12 UNIDAD III TÍTULO: Tiempo de Coagulación FECHA DE ENTREGA: 9ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 10ª semana FUNDAMENTACIÓN Mide la vía Intrínseca, el Tiempo de Coagulación es el tiempo que requiere la sangre venosa en coagular, en ausencia de factores titulares. Esta técnica tiene muy baja sensibilidad y especificidad. Por tal motivo su utilidad diagnóstica es muy limitada. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Realizar el Tiempo de Coagulación, para evaluar la eficiencia de la hemostasia MATERIAL Baño Maria a 37ºC Cronómetro Tubos de hemólisis de vidrio Material para venopunsión MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Recolectar 2ml de sangre venosa 2. Cronometrar el tiempo una vez que la sangre entre en la jeringa 3. Saque la aguja y vierta la sangre por las paredes depositando 1ml en cada tubo (Dos tubos) 4. Colocar las muestras en el Baño Maria a 37ºC 5. Después de 4 minutos, incline suavemente el tubo a 45º cada 30 segundos hasta que se forme el coagulo, anotar el tiempo transcurrido 6. Se anota el tiempo transcurrido desde la toma de muestra hasta la formación del coagulo o gel ejemplo: Tiempo de Coagulación: 6 minutos 30 segundos 7. Su valor de referencia es de 4 a 10 minutos RESULTADO Paciente Nº 1 Tiempo de Coagulación: ________ min._______seg. Paciente Nº 2 Tiempo de Coagulación: ________ min._______seg. Paciente Nº 3 Tiempo de Coagulación: ________ min._______seg. CONCLUSIONES EVALUACIÓN 1. 2. 3. 4. CUESTIONARIO ¿Cuál es la utilidad diagnóstica que se le da la determinación del Tiempo de Coagulación? ¿Qué entiende por Factores de Coagulación, dónde se producen? ¿Cuáles son los factores que inducen al aumento del T.C.? Mencione 5 enfermedades que se caracterizan por el incremento del T.C. U N I V E R S I D A D 50 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA BIBLIOGRAFÍA Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 U N I V E R S I D A D 51 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 13 UNIDAD III TÍTULO: Tiempo de Sangría FECHA DE ENTREGA: 10ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 17ª semana FUNDAMENTACIÓN. Es el tiempo que tarda en detenerse la hemorragia producto de la incisión o corte superficial, estudia la función plaquetaria y todo lo inherente en su acción. II.- PRÁCTICA OBJETIVO: Realizar el Tiempo de Sangría, para evaluar la eficiencia de la hemostasia MATERIAL - Lanceta - Cronómetro - Papel absorbente - Torundas con alcohol MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Limpiar con una torunda impregnado en alcohol en lóbulo de la oreja del paciente 2. Realizar la punción con la lanceta, se observará la microhemorragia 3. Controlar con cronómetro desde el momento de la punción 4. Cada 30 segundos, tocar levemente el lóbulo de la oreja con el papel absorbente, hasta el cese del sangrado 5. Registrar e interpretar. Se anota el tiempo transcurrido desde la punción hasta el cese del sangrado ejemplo: Tiempo de Sangría: 2 minutos 30 segundos 6. Su valor de referencia es de 1 – 4 minutos RESULTADO Paciente Nº 1 Tiempo de Sangría: ________ min._______seg. Paciente Nº 2 Tiempo de Sangría: ________ min._______seg. Paciente Nº 3 Tiempo de Sangría: ________ min._______seg. CONCLUSIONES EVALUACIÓN 1. 2. 3. 4. 5. CUESTIONARIO ¿Qué valora el TS? ¿Que factores inducen al incremento del TS? ¿Cuál es el efecto que produce la aspirina en la determinación del TS, descríbalo? ¿Qué entiende por petequias? ¿Cuál es la diferencia de la técnica del TS y la técnica de Ivy? (ambas valoran lo mismo) BIBLIOGRAFÍA U N I V E R S I D A D 52 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 14 UNIDAD III TÍTULO: Tiempo de Protrombina FECHA DE ENTREGA: 11ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 17ª semana FUNDAMENTACIÓN. El fenómeno de la coagulación puede desencadenarse por una vía extrínseca (lesión tisular) o por una vía intrínseca (contacto de la sangre con epitelios distintos del vascular normal) La determinación del Tiempo de Protrombina o Tiempo de Quick, refleja la eficacia global de la vía extrínseca. Es sensible a cambios en los factores II, V, VII y X. Es también poco apropiado para detectar pequeños cambios en los niveles de Fibrinógeno, puede ser anormal si los niveles de Fibrinógeno son muy bajos o si está presente un inhibidor. El reactivo de TP, a menudo es llamado Tromboplastina, contiene Factor Tisular y Fosfolípidos. Este ensayo se basa en la medida del tiempo que tarda en coagular un plasma descalcificado, colocado a 37ºC y en presencia de un exceso de Tromboplastina tisular y Calcio. El método no detecta deficiencias de factores de la vía intrínseca (VIII, IX, XI y XII) II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Determinar el Tiempo de Protrombina en sangre citratada, para evaluar la eficiencia de la hemostasia MATERIAL - Baño Maria a 37ºC - Cronómetro - Tubos de hemólisis de vidrio - Anticoagulante para TP - Reactivo de Tromboplastina Reconstituido (guardar a 4ºC, es utilizable por un lapso de 1 semana) - Material para venopunsión - Micropipetas de 100 a 1000 microlitros U N I V E R S I D A D 53 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA - Punteras - Gradillas MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Recolectar 2.5ml de sangre venosa 2. Inmediatamente depositar en un tubo de vidrio que contenga 4 gotas de anticoagulante para TP/ homogenizar suavemente 3. Centrifugar la muestra a 3.500 r.p.m. durante 5 minutos para obtener el plasma 4. Preincubar el plasma obtenido, en Baño Maria a 37ºC durante 2 minutos 5. En dos tubos de vidrio rotulados colocar 200 microlitros de reactivo para TP, preincubar 2 minutos 6. Pipetear 100 microlitros del plasma del paciente preincubado y agregar rápidamente sobre el tubo que contiene 200 microlitros de reactivo TP, inmediatamente controlar con cronómetro 7. Mantener los tubos de vidrios dentro del Baño Maria y cerca de una fuente de luz, previo al tiempo estimado de coagulación, sacar el tubo del Baño Maria, inclinar suavemente 2 veces por segundo 8. Detener el cronómetro en el momento de la aparición del coágulo 9. Registrar el tiempo transcurrido e informar en segundos 10. Determinar el Porcentaje de Actividad Protrombínica. Se considera que el plasma normal tiene un 100% de actividad, para ello se debe trazar la curva de actividad protrombínica de un pool de plasma fresco normales 11. Informar el INR que se obtiene de la siguiente fórmula ISI INR: TP de la muestra TP del control normal Nota. Índice de Sensibilidad Internacional de cada lote: ISI 12. : Los valores de referencia del TP son de 10 a 14 segundos. Ejemplo de informe: Tiempo de Protrombina: 13 segundos Actividad Protrombínica: 97% INR: 1.06 RESULTADO Paciente Nº 1 Tiempo de Protrombina : _______segundos Actividad: ______% Testigo : _______segundos Actividad: ______% INR : _______ Paciente Nº 2 Tiempo de Protrombina : _______segundos Actividad: ______% Testigo : _______segundos Actividad: ______% INR : _______ Paciente Nº 3 Tiempo de Protrombina : _______segundos Actividad: ______% Testigo : _______segundos Actividad: ______% INR : _______ CONCLUSIONES EVALUACIÓN 1. 2. 3. 4. CUESTIONARIO ¿Qué factores de coagulación valora el TP? ¿En que situaciones se la evalúa el TP en los pacientes? ¿Cuál es la utilidad del INR en pacientes que tienen prótesis cardiaca? ¿Describa la acción de la warfarina en nuestro organismo y su repercusión en la determinación del TP? BIBLIOGRAFÍA U N I V E R S I D A D 54 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 15 UNIDAD III TÍTULO: Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada FECHA DE ENTREGA: 12ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 17ª semana FUNDAMENTACIÓN. El APTT es una de las pruebas sensibles a la deficiencia de agentes procoagulantes del plasma así como a la presencia de ciertos inhibidores de la coagulación. Sirve para detectar anormalidades en la vía intrínseca de la coagulación como son los factores necesarios para la formación del activador intrínseco de la Protrombina, o sea los factores VIII, IX, XI y XII. La rapidez, sencillez y reproducibilidad de la prueba la hacen muy adecuada para el control de la terapéutica anticoagulante por heparina. También permite la identificación rápida de hemofílicos. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Determinar la cantidad la APTT en plasma citratada, para evaluar la eficiencia de la hemostasia MATERIAL MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO - Obtener plasma a partir de sangre anticoagulada con Citrato de Sodio 3.2% en una proporción de 9 partes de sangre y 1 de citrato. - Precalentar el Cloruro de Calcio en Baño María a 37ºC por 2 minutos - En un tubo de hemólisis colocar 100µl de plasma del paciente - Al mismo tubo agregar 100µl de reactivo de APTT previamente homogeneizado - Mezclar e incubar 5 minutos a 37ºC U N I V E R S I D A D 55 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA - Luego agregar 100µl Cloruro de Calcio, simultáneamente disparar el cronómetro y agitar suavemente para homogeneizar el contenido, conservarlo dentro el Baño María hasta los 25 segundos - Sacar del Baño María inclinar suavemente una vez por segundo y detener el cronómetro en el momento de la formación del coagulo de plasma. - Los valores de referencia del APTT son: 33 a 48 segundos RESULTADO Paciente Nº 1 Paciente Nº 2 Paciente Nº 3 APTT: _____segundos APTT: _____segundos APTT: _____segundos CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. ¿Qué factores de coagulación valora el APTT? 2. ¿En que situaciones se la evalúa el APTT en los pacientes? 3. ¿Describa la acción de la heparina en nuestro organismo y su repercusión en la determinación del APTT? BIBLIOGRAFÍA - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 - José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 - Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 - Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 U N I V E R S I D A D 56 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 16 UNIDAD IV TÍTULO: Determinación de Grupo Sanguíneo en Tubo FECHA DE ENTREGA: 14ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 17ª semana FUNDAMENTACIÓN. La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO y Rh (Antígeno D) se efectúa enfrentado los hematíes problemas con antisueros de especificidad conocida Anti-A, Anti-B, Anti-AB y Anti-D. La presencia o ausencia de aglutinación o hemólisis de los hematíes ensayados frente a cada uno de los Antisueros, es indicativa de la presencia o no de los correspondientes Antígenos Eritrocitarios. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Realizar la Fenotipificación de grupo sanguíneo mediante el empleo de hemoclasificadores MATERIAL - Centrifuga para tubo de hemólisis - Tubos de hemólisis - Pipeta Pasteur - Guantes de látex. - Hemoclasificadores Anti-A, Anti-B, Anti-AB y Anti-D - Solución salina isotónica MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Obtener 3ml de sangre venosa 2. Depositar en un tubo de hemólisis que contenga una gota de anticoagulante EDTA 3. Mezclar suavemente 4. Realizar lavados de los glóbulos rojos 5. Preparar una suspensión de glóbulos rojos al 3 - 5% 6. Rotular los tubos con el número correspondiente y las letras A, B, AB y D 7. Agregar a cada tubo dos gotas del reactivo correspondiente Anti-A, Anti-B, Anti-AB y Anti-D. 8. Colocar una gota de los hematíes diluidos al 5% a cada uno de los tubos ya rotulados. 9. Centrifugar 1 minuto a 2.000 r.p.m. 10. Luego observar y examinar si hay o no aglutinación. U N I V E R S I D A D 57 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA RESULTADO Pacient e Nº 1 Nº 2 Nº 3 Nº 4 ANTI-A ANTIB ANTIAB GRUPO SANGUINEO ANTI-D Rh “D” CONCLUSIONES EVALUACIÓN CUESTIONARIO 1. ¿Por qué es recomendada la determinación de grupo sanguíneo en tubo como confirmatorio, en relación a la placa? 2. ¿Por qué generalmente sólo se identifica el sistema ABO y el Rh? 3. Menciona 10 sistemas sanguíneos diferentes a los identificados por rutina 4. ¿Cuándo y por qué es importante la identificación de todos los grupos sanguíneos clínicamente significativos? BIBLIOGRAFÍA - Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 U N I V E R S I D A D 58 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD GUIA DE INVESTIGACIÓN PRÁCTICA - GIP # 17 UNIDAD IV TÍTULO: Prueba de la Antiglobulina Directa FECHA DE ENTREGA: 16ª semana PERIODO DE EVALUACIÓN: 17ª semana FUNDAMENTACIÓN. La Prueba de la Antiglobulina Directa PAD, tiene como finalidad demostrar la presencia de Autoanticuerpos adheridos a la superficie eritrocitaria mediante una antiglobulina polivalente llamada Suero de Coombs. La positividad de la prueba confirma la sensibilización de los eritrocitos por el autoanticuerpo cuya naturaleza, puede conocerse fácilmente mediante la antiglobulina específica correspondiente. Una prueba de Coombs Directa Positivo generalmente se manifiesta en casos de: E.H.R.N., Anemias hemolíticas autoinmunes, Anemias hemolíticas inducidas por fármacos, Reacciones Transfusionales. II.- PRÁCTICA OBJETIVOS Realizar la prueba de la Antiglobulina Directa, utilizando sangre anticoagulada de pacientes. MATERIAL - Centrifuga para tubo de hemólisis - Baño María - Tubos de hemólisis - Pipeta Pasteur - Guantes de látex. - Suero de Coombs - Solución salina isotónica MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO 1. Obtener 3ml de sangre venosa con EDTA y depositar en un tubo de hemólisis. Mezclar suavemente 2. En un tubo de hemólisis limpio y seco colocar una gota de sedimento de la muestra sanguínea centrifugada a ser investigada. 3. Lavar la muestra sanguínea tres veces y prepare una suspensión de hematíes al 3% 4. En un tubo de hemólisis limpio y seco colocar una gota de la suspensión hemática 5. Agregar dos gotas del Suero de Coombs y centrifugar a 2000 r.p.m. durante 1 minuto 6. Observar si hay presencia de aglutinación. Si se observase aglutinación la prueba identificará la presencia de auto anticuerpos unidos a los propios hematíes. En este caso se informará como “PAD Positivo”. Si No se observase aglutinación la prueba demostrará la ausencia de auto anticuerpos. En este caso se informará como “PAD Negativo” RESULTADO U N I V E R S I D A D 59 D E A Q U I N O B O L I V I A FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA CONCLUSIONES EVALUACIÓN 1. 2. 3. 4. 5. - CUESTIONARIO ¿Qué entiende por PAD positivo? ¿Describa lo que es “Enfermedad Hemolítica del Recién Nacido? ¿En que situaciones es importante investigar las reacciones hemolíticas a través del PAD? ¿Cuándo se valora el PAD en un recién nacido? ¿Qué otras pruebas laboratoriales se relacionan en la investigación una reacción hemolítica, descríbalas? BIBLIOGRAFÍA Prof. Jesús F. San Miguel, Fermín M. Sánchez. “Cuestiones en Hematología”, Harcourt Brace 2002, Segunda Edición. Signatura Topográfica 616.15S19 José Borbolla E. Hematología Algoritmos Diagnósticos, Ed. Interamericana México D.F. 2004 Signatura Topográfica 616.15B64 Francisco Cuellar Hematología 6ta Edición Colombia 2004 Signatura Topográfica 616.15C89 Sans J. Hematología Clínica Ediciones Doyma 2da. Edición Barcelona España 1988 Signatura Topográfica 616.15Sa59 U N I V E R S I D A D 60 D E A Q U I N O B O L I V I A