COPEG PROCEDIMIENTO PARA LA SEGURIDAD BIOLÓGICA-ORIGEN DE LOS PELIGROS BIOLÓGICOS 1.0 OBJETIVO: Identificar los orígenes de los Peligros Biológicos para mantener y garantizar la Seguridad Biológica en el Laboratorio. 2.0 ALCANCE: El alcance de este procedimiento incluye describir las suposiciones básicas, el grado de riesgo de los peligros, causas específicas de infecciones adquiridas, la importancia de los peligros biológicos, clasificación de los agentes que causan infecciones, cultivo de células y la recombinación. 3.0 PROCEDIMIENTO: Paso Descripción 3.1 Suposiciones Básicas Al identificar los riesgos biológicos hay dos suposiciones básicas: a- Cualquier accidente que ocurra en presencia de materiales con riesgos biológicos pueden resultar en una infección. b- Cuando el trabajo de laboratorio es realizado con agentes biológicos o materiales que contengan agentes, cuya epidemiología y patogenicidad son desconocidas o mal comprendidas, se puede concluir que el trabajo efectuado representa peligro. 3.2 Responsable Personal del Laboratorio Grado de Riesgo El grado de riesgo involucrado en trabajos con microorganismos patógenos y sus productos tóxicos dependen de los siguientes factores: a- Resistencia individual del trabajador. b- Puerta o vía de entrada. c- Tiempo de exposición. d- Virulencia de los microorganismos. e- El total de la dosis recibida. A medida que la cantidad o concentración del agente involucrado aumenta, aumente el peligro. La dosis viral puede quizás ser el Código:PO-LAD-BIO-11 Revisión: 01 Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo Página 1 de 6 Documento vigente de INTERNET Propiedad de COPEG, cualquier versión impresa es una copia no controlada COPEG PROCEDIMIENTO PARA LA SEGURIDAD BIOLÓGICA-ORIGEN DE LOS PELIGROS BIOLÓGICOS Paso Descripción factor principal en determinar si el virus pasará las barreras de especie. Responsable Personal del Laboratorio 3.3 Causas específicas de infecciones adquiridas en el laboratorio incluyen: a- Contacto. Cuando los microorganismos son derramados o salpicados sobre la piel, cuando alcanza las membranas mucosas o entran al organismo por quemaduras o heridas. b- Inhalación. Cuando los microorganismos son accidentalmente aerosolizados, (Exposición de la vía conjuntiva es una ruta común de infección). c- Ingestión. Cuando los microorganismos se transmiten a la boca con los dedos, bebidas, o accidentes cuando se está pipeteando. d- Inoculación. Vía heridas o rasguños con vidriería contaminada, inoculaciones accidentales con jeringuillas o aguja contaminadas, cortaduras con instrumentos. Distribución de las infecciones por causas conocidas adquiridas en el Laboratorio: Tipo de Accidente Agujas y jeringas Salpicaduras de material infeccioso Heridas con vidrio roto contaminado Accidentes por pipeteo Accidentes en la centrífuga Picaduras de animales infectados Causas indeterminadas Código:PO-LAD-BIO-11 Revisión: 01 Total de Accidentes resultantes de causas conocidas (%) 26.5 21.4 1.0 15.4 2.8 14.9 3.3 Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo Página 2 de 6 Documento vigente de INTERNET Propiedad de COPEG, cualquier versión impresa es una copia no controlada COPEG PROCEDIMIENTO PARA LA SEGURIDAD BIOLÓGICA-ORIGEN DE LOS PELIGROS BIOLÓGICOS Paso Descripción Responsable 3.4 Importancia de los peligros biológicos: Según la literatura universal se han reportado 6,000 casos de infecciones accidentales en trabajadores de laboratorio. Dos consideraciones principales se han tenido en cuenta: a- En casos reportados de infecciones adquiridas en el laboratorio, representan solamente una fracción de todos los accidentes de la misma naturaleza. b- Entre las infecciones registradas, el accidente específico o el elemento infectado ha sido identificado para tan solo aproximadamente un 20 % de los casos. Ya que muchas infecciones patógenas pueden ser iniciadas por dosis respectivamente pequeñas, se sospecha que muchas infecciones pueden resultar a causa de aerosoles infecciosos en el ambiente del laboratorio. La consecuencia final de infecciones accidentales reportadas fue: a- Fatal b- Incapacidad definitiva c- Recuperación completa Personal del Laboratorio 4% 26 % 70 % En una investigación adicional sobre las infecciones de laboratorio se demostró que el 71 % de las infecciones ocurrió en personal científico, 29 % en personal que atiende los animales, estudiantes, aseadores, lavadores de material, oficinistas y personal de mantenimiento. Código:PO-LAD-BIO-11 Revisión: 01 Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo Página 3 de 6 Documento vigente de INTERNET Propiedad de COPEG, cualquier versión impresa es una copia no controlada COPEG PROCEDIMIENTO PARA LA SEGURIDAD BIOLÓGICA-ORIGEN DE LOS PELIGROS BIOLÓGICOS Paso Descripción 3.5 Clasificación de los agentes que causan infecciones: Responsable Para correlacionar el número y significados de las infecciones con respecto a la clasificación de los microorganismos las siguientes cifras se han establecido: Clasificación Agente Infeccioso Bacterias Virus Ricketsias Hongos Clamidias Parásitos Total de infectados (N°) 47 33 9 6 3 3 Fatalidad (%) 4.0 7.3 2.6 2.3 * 0 Diferentes infecciones específicas (N°) 29 65 4 3 3 5 Personal del Laboratorio * No determinado 3.6 Formación de aerosoles para el mayor riesgo biológico Como se menciona arriba, la formación de aerosoles es potencialmente una de las formas más importantes del riesgo biológico. Ciertas manipulaciones del laboratorio crean mayor cantidad de aerosoles que otras. Algunas de estas operaciones que practicadas con microorganismos infecciosos, representan un peligro biológico incluyen: a- Derrame o salpicadura accidental de cultivos durante su manejo. b- Alta velocidad al pulverizar tejidos infecciosos. c- Centrifugación o decantación de líquidos o fluidos sobrenadantes. d- Resuspensión de sedimentos de células o virus. e- Apertura de un material liofilizado. f- Sacudir o licuar cultivos en los mezcladores de alta velocidad. g- Someter cultivos a ultrasonicación. h- Forzar la salida de líquidos de pipetas o jeringuillas. i- Eliminar el vacío de un liofilizador. Código:PO-LAD-BIO-11 Revisión: 01 Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo Página 4 de 6 Documento vigente de INTERNET Propiedad de COPEG, cualquier versión impresa es una copia no controlada COPEG PROCEDIMIENTO PARA LA SEGURIDAD BIOLÓGICA-ORIGEN DE LOS PELIGROS BIOLÓGICOS Paso 3.7 Descripción Responsable j- Abrir un tubo de cultivo en el cual la presión del aire es diferente a la del cuarto donde se está trabajando. (Ejemplo si el tubo es abierto a temperatura diferente a la que había cuando fue sellado). k- Retirar una muestra de cultivo de una botella tapada con tapa de corcho o caucho. l- Insertar una asa caliente dentro de un cultivo. m- Inoculación o sembrado de un cultivo en un agar con superficie irregular. La preparación, manejo y uso de los liofilizados de materiales con riesgo biológico representa un peligro de naturaleza inusual. Estos procedimientos pueden dar origen al escape de aerosoles de alta concentración. Adicionalmente, el polvo seco es difícil esterilizar con desinfectantes líquidos. Otra causa de la formación de aerosoles es debida al mal funcionamiento de equipos defectuosos, por consiguiente todo equipo deberá ser sometido a un programa de mantenimiento regular. 3.8 Cultivo de Células : Los riesgos potenciales en los casos de investigación in vitro son considerados con referencia a la posibilidad de poner en libertad un agente infeccioso para los humanos. Los virus y sus genomas virales pueden ser transportados por las células de diferentes maneras: a- Las así llamadas infecciones persistentes aunque no patógenas para las células. b- Como formas de genomas virales integrados en el material genético de las células huésped. Las líneas celulares establecidas pueden contener agentes virales. Estas entidades virales pueden ser descubiertas como organismos infecciosos por una variedad de pruebas de laboratorio. Las características de los procedimientos de protección requeridos en investigaciones de ésta naturaleza deben basarse en el riesgo potencial de la liberación de un virus infeccioso durante la manipulación de las células. Código:PO-LAD-BIO-11 Revisión: 01 Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo Personal del Laboratorio Página 5 de 6 Documento vigente de INTERNET Propiedad de COPEG, cualquier versión impresa es una copia no controlada COPEG PROCEDIMIENTO PARA LA SEGURIDAD BIOLÓGICA-ORIGEN DE LOS PELIGROS BIOLÓGICOS Paso Descripción Responsable El riesgo de dicha liberación viene a ser menor, en las posteriores manipulaciones de las células. El grado de riesgo se reduce en función de la distancia filogenética de las células manipuladas con la especie humana. Personal de Ladives 3.10 Recombinación: Cuando se vayan a llevar a cabo experimentos en los cuales más de un virus es inoculado en un cultivo celular y no existe indicación, experiencia previa o literatura relevante con respecto al resultado, se debe usar un nivel de contención física superior al requerido para el virus de mayor riesgo cuando es cultivado por separado. Los mismos requerimientos deben también aplicarse para el cocultivo o fusión de dos o más líneas celulares conocidas que contienen virus, o la infección de líneas celulares portadoras de virus, con un segundo virus. Cualquiera de estas circunstancias conlleva el potencial de crear un virus recombinate con virulencia y especificidad de especies alteradas. 4.0 DOCUMENTOS DE REFERENCIA 5.0 HISTORIAL DE MODIFICACIONES FECHA Código:PO-LAD-BIO-11 MODIFICACIONES Revisión: 01 Aprobado por: Directores de Operaciones de Campo Página 6 de 6 Documento vigente de INTERNET Propiedad de COPEG, cualquier versión impresa es una copia no controlada