Apunte Sistema Linfoide y Linfocitos

SISTEMA LINFOIDE
Definición: sistema constituido por células con distinta ubicación en el organismo,
cuya función fundamental es el mantenimiento de la identidad, es decir,
reconocimiento de lo propio y rechazo de lo que es ajeno. Su función primordial
es participar en la inmunidad específica.
Órganos linfoides: se dividen en primarios y secundarios.

Primarios: son aquellos colonizados por Stem cells. Su función primaria es
la linfopoyesis antígeno independiente y se desarrollan tempranamente en
la vida intrauterina. En el adulto, y después del nacimiento, los órganos
linfoides primarios son la médula ósea y el timo. En la vida intrauterina son
el hígado fetal, el epiplón, el timo y, más tardíamente, la médula ósea.

Secundarios: son los lugares en los que los linfocitos interactúan entre sí y
con células no linfoides, para generar respuestas inmunes a antígenos. No
son colonizados por Stem cells y la proliferación es antígeno dependiente.
Esta categoría incluye al bazo, los ganglios linfáticos y los tejidos linfoides
asociados a la mucosa (MALT). La estructura de estos tejidos suministra
una perspectiva de cómo discrimina el sistema inmune entre los auto
antígenos y los antígenos extraños, y desarrolla la capacidad para
orquestar una variedad de defensas específicas e inespecíficas contra los
patógenos invasores. Los órganos linfoides secundarios se organizan más
tardíamente en la vida intrauterina.
Los tejidos linfoides asociados a la mucosa (MALT) son agregados de
linfocitos difusamente organizados que protegen al epitelio respiratorio y
gastrointestinal. Se encuentran formando folículos linfáticos solitarios, con
estructura folicular y centro germinativo, en la mucosa y submucosa del
tracto
respiratorio,
fundamentalmente
bronquios.
En
el
tracto
gastrointestinal se encuentran formaciones linfoides a lo largo del tubo
digestivo. En la boca, tenemos el anillo de Waldeyer formado por las
amígdalas palatinas, faríngeas y sublinguales. En el íleon, las placas de
Peyer están formadas por tejido linfoide nodular prominente. Por último,
encontramos el apéndice.
También se encuentran algunas formaciones linfoides en el tracto urinario y
la vagina. En estos tejidos linfoides accesorios, no hay cápsulas ni vasos
linfáticos aferentes ni eferentes.
Linfopoyesis: se produce en el hígado fetal, timo y el epiplón desde las 8-14
semanas de gestación y en el 2º trimestre en la MO. Desde el 3º Trimestre y a lo
largo de toda la vida se produce en la MO y en el timo, a partir de la stem cell
pluripotente, que por interacciones con el microambiente, se diferencia en stem
cell comprometida para el sistema linfoide, aunque se duda de su existencia. A
partir de la stem cell linfoide, y por acción de distintos estímulos, se diferencia en
células precursoras de los linfocitos T /NK y precursoras de los linfocitos B. Las
precursoras de los T/NK se diferencian en precursoras de las T y de las NK que
continúan su desarrollo fundamentalmente en el timo. Las precursoras de las
células B continúan su desarrollo en MO, en el hígado fetal y epiplón. Todas estas
precursoras son indistinguibles morfológicamente y pueden ser diferenciadas
mediante los antígenos de membrana.
Linfopoyesis B: la célula B precursora interactúa con las células del estroma de
MO, exponiendo receptores VLA-4, VLA-5 y LFA1 que se unen al VCAM-1, a la
fibronectina y al ICAM-1. Esta interacción está regulada positivamente por la
interleuquina 7, el KL, IL-11, el factor derivado de las células estromáticas Pre-B,
el factor de crecimiento tipo insulina, la hormona tiroidea, etc. Los inhibidores son:
la interleuquina-1, la interleuquina-4, el factor transformante del crecimiento 
(TGF-), y el interferón , entre otros.
La linfopoyesis B, que comienza con la célula B precursora (pre-proB), continúa
con la célula pro B, luego pre B, después B inmaduro hasta llegar al linfocito B
maduro, virgen. Durante este proceso de maduración ocurre, el reordenamiento
de los genes de cadenas de inmunoglobulinas (Ig): 1º cadena pesada , luego
cadena liviana  y luego cadena liviana . Una vez reordenados los genes
comienza la producción de cadena pesada  citoplasmática, luego IgM
citoplasmática, para luego, en el linfocito maduro, pasar a ser IgM de superficie.
También puede tener IgD. Cada una de las diferentes células puede identificarse
por sus antígenos específicos designados con un número a continuación de la
sigla CD (cluster de diferenciación). La célula precursora y la pro B se
caracterizan por tener una enzima nuclear llamada desoxi-nucleotidil-transferasa
terminal (TdT).
Linfopoyesis T: Ocurre en MO y el hígado fetal. Una vez llegados al Timo, en la
zona subcapsular, los LT se dividen y entran en contacto con las células
epiteliales. En este estadío, los LT presentan tanto CD4 como CD8 sobre su
superficie. Aquellos TCR que reconozcan sobre las CE a las moléculas del
Complejo Mayor de Histocompatibilidad MHC propias, seguirán su proceso
madurativo hacia la médula tímica. Además los que los que reconozcan el MHC-1
perderán su marcador CD4 y conservarán el CD8 y los que reconozcan el MHC-2
perderán su CD8 y conservarán el CD4. Esto es muy importante porque será la
manera en que reconocerán los Ags una vez que se encuentren cumpliendo su
función en sangre periférica. A este proceso se lo conoce como SELECCIÓN
POSITIVA.
Una vez en la zona medular del timo, los LT CD4(+) y CD8(+) se encontrarán con
dos células presentadoras de Ags profesionales: la Célula Dendrítica y el
Macrófago. Ellos llevarán a cabo lo que se conoce como SELECCIÓN
NEGATIVA. Los LT que reconozcan con baja o mediana afinidad a los Ags
propios, seguirán su proceso de maduración, pero aquellos que reconozcan con
alta afinidad los Ags propios serán estimulados para que entren en apoptosis. Así
van a permanecer solo aquellos LT que no reaccionen frente a los Ags propios,
fenómeno conocido como INMUNOTOLERANCIA.
De esta manera, los Pro-LT que llegan a la zona cortical del timo, prosiguen su
maduración a célula Pre-T hasta llegar a linfocitos T maduros, que se encuentran
fundamentalmente en la médula del timo. En este proceso de maduración va
cambiando la morfología de la célula, haciéndose su núcleo más chico y más
denso.
En esta linfopoyesis también existe reorganización de los genes de cadena , , 
y  correspondientes al receptor antigénico de la célula T (TCR). Al mismo tiempo
que se reorganizan las cadenas , ,  y  aparece en el citoplasma, el CD3
(complejo transductor de señales), que luego pasa a superficie, uniéndose al
TCR. Los linfocitos T salidos del timo, son linfocitos vírgenes y se clasifican en
dos tipos: los CD-4 positivos y los CD-8 positivos. También aquí maduran los NK.
Hasta el advenimiento de la Inmunología moderna, se consideraba que el linfocito
maduro provenía de una stem cell pluripotente que luego se comprometía y daba
lugar al primer elemento de la progenie morfológicamente identificable, llamado
linfoblasto y que, a su vez, se dividía y diferenciaba en el Prolinfocito y éste,
luego, se dividía y maduraba a linfocito. Actualmente, tanto el Prolinfocito como el
linfoblasto, son originados por estimulación antigénica, ya que sus marcadores
CD así lo sugieren.
Los linfocitos B vírgenes se dirigen por sangre a los órganos linfoides secundarios
como el bazo y por linfa a los ganglios linfáticos. Los linfocitos CD4+ y CD8+ que
salen del timo van a colonizar los órganos linfoides secundarios vía linfática.
Como existe recirculación en los órganos linfoides secundarios podemos
encontrar, tanto linfocitos B como T.
Ubicación:
Los LB se ubican en los folículos linfáticos del bazo, ganglios y formaciones
linfoides del tubo digestivo y de los bronquios. Los LT se ubican en la vaina
periarteriolar, en el bazo, y entre los folículos. En el ganglio se ubica en la
paracortical de los mismos. El bazo es el principal foco de respuesta inmune a
antígenos transportados por la sangre, mientras que los ganglios linfáticos están
involucrados en respuestas a los antígenos que hay en la linfa.
En esos sitios tanto el LB como el LT se ponen en contacto con el Ag ofrecido en
un caso por el macrófago, y en el otro por la célula dendrítica, sufriendo cambios
morfológicos y bioquímicos con final formación del Inmunoblasto B (IB) o T. El
inmunoblasto B finalmente da lugar a la formación de la célula efectora: el
plasmocito, y a la célula de memoria B que pasan a la médula de los ganglios.
El LT se pone en contacto con el antígeno a través de la célula dendrítica y es
activado a inmunoblasto T, que suele tener un núcleo convoluto, y luego este se
transforma en linfocitos T efectores: CD-4 positivo, colaboradores, CD-8 positivo,
supresores, citotóxicos, y linfocitos LT de memoria.
Tiempo de linfopoyesis: no se conoce con exactitud, cuanto tiempo demora la
proliferación, a nivel de MO y timo, al igual que en los órganos linfoides
secundarios.
LINFOCITOS Y CELULAS PLASMÁTICAS
Linfocito pequeño
Tamaño 6 a 9 m de diámetro
Forma: esférica
Relación N/C: alta
Núcleo de forma ovoide o arriñonado que se tiñe de color púrpura, cromatina
densamente empaquetada que ocupa aproximadamente el 90% de la célula. Al
microscopio óptico no se le suelen ver nucleolos, como se ven al microscopio
electrónico.
Citoplasma pequeño, que se tiñe de color celeste, sin granulaciones.
Linfocito mediano
Tamaño: aproximadamente de 9 a 11 m
Núcleo de tamaño similar al L pequeño, sin nucleolos.
Citoplasma de mayor tamaño, color celeste, sin granulaciones.
Linfocito grande
Tamaño aproximado de 11 a 15 m
Núcleo de tamaño similar al pequeño, sin nucleolos.
Mayor cantidad de citoplasma, color celeste (basófilo).
Algunos de estos linfocitos pueden contener de 5 a 15 gránulos azurófilos y se
denominan
linfocitos
grandes
granulares
(en
condiciones
normales
es
aproximadamente el 3% de todos los linfocitos). Estos linfocitos son en general
NK.
Microscopio de contraste de fases:
Los linfocitos se mueven despacio, con movimiento en espejo de mano.
Microscopio de barrido:
Son de forma esférica, los linfocitos T son lisos, los B son vellosos.
Microscopio electrónico de transmisión:
La cromatina nuclear es condensada y electrodensa, Presenta un nucleolo
vesiculoso. En el citoplasma se distingue un aparato de Golgi poco desarrollado.
Sistema retículo endoplásmico rugoso con algunos ribosomas libres. Los
centriolos, mitocondrias, microtúbulos y microfilamentos generalmente cercanos a
la membrana celular. Contiene pocos lisosomas con enzimas.
Composición de los linfocitos:
Los linfocitos tienen un VCM de 200 m3, el 71% los constituye el agua, con un
elevado contenido de K y menor contenido de Na. El contenido de calcio del L en
reposo es bajo, pero aumenta con la activación.
Enzimas asociadas a la membrana: pueden ser extra o intracelulares:
Extracelulares: Su concentración es inferior a la de las proteínas de adhesión
linfocitaria. Algunas están implicadas en el metabolismo de los nucleótidos, otras,
como por ejemplo el CD 10 o CALLA tienen actividad endopeptidasa.
Intracelulares: varían según la sub-población linfocitaria. Por Ej. los linfocitos B
expresan una tirosín quinasa, que cuando está mutada, altera el desarrollo de los
LB, los T tienen otras tirosín quinasas que interactúan con el TCR.
Citoplasma: tiene proteínas como la tubulina, actina, miosina. Tropomiosina, y
una molécula similar a la espectrina. La activación de los linfocitos provoca
cambios en la interacción de los componentes de la membrana con el
citoesqueleto permitiendo el procesamiento del Ag, la secreción de Igs, o las
reacciones citotóxicas mediadas por células.
Lisosomas: contiene fosfatasa ácida,  glucuronidasa,  manosidasa, 
glicosidasa, etc.
Los LT tienen fosfatasa ácida, esterasas no específicas y beta glucuronidasa. Los
B no tienen fosfatasa ácida ni esterasas inespecíficas. La 5´nucleotidasa se
encuentra en ambos. El 40% de los LB suelen tener escasos gránulos PAS +
(glucógeno).
Los LGG y los LT citotóxicos tienen gránulos con actividad de perforinas que son
capaces de formar poros en la membrana, y grupos de serín proteasas con
actividad proapoptótica llamadas granzimas. Para evitar la autólisis, los LT tienen
inhibidores de las serínproteasas llamadas serpinas.
Los LT citotóxicos utilizan el sistema perforina/granzima para destruir sus
objetivos.
Metabolismo: sintetizan ácidos grasos y fosfolípidos, tiene fosfolipasa pero no
pueden sintetizar prostaglandinas ni leucotrienos. Sintetizan abundante ATP
mediante la fosforilación oxidativa porque requieren grandes cantidades de ATP
para la recirculación. Sintetizan proteínas y AA esenciales. Sintetizan ARN, en
escasa cantidad. Tienen un bajo índice de síntesis de desoxirribonucleótidos. Son
capaces de escindir el ADN y contienen exonucleasas, ADN polimerasas y ADN
ligasas que permiten la reparación del ADN, el reordenamiento y la expresión de
los receptores linfocitarios de Ags.
Tienen
receptores
para
la
ACTH,
calcitonina,
melatonina,
endorfinas,
vasopresinas, andrógenos y estrógenos. Los neurotransmisores pueden enviar
señales de activación positiva o negativa a los L.
Los glucocorticoides tienen efecto linfolítico. A pesar de su estado de reposo, los
linfocitos son muy sensibles a la radiación ionizante y a la UV.
Cantidad de linfocitos en sangre.
Adultos: VR: 25 – 35% de todos los leucocitos. VA: 1250 – 3150/mm3. El 70% lo
constituyen linfocitos LT de memoria y el 30% linfocitos B. Dentro de linfocitos LT
los CD-4 son mayores que los CD-8.
Niños entre 15 días de vida y 4-6 años: VR: 55 – 65% de todos los leucocitos. VA:
2750 – 5850/mm3. La cantidad de linfocitos LT y la relación CD-4/CD-8 es similar
a la del adulto.
Recién nacidos: VR: 25 – 35% de todos los leucocitos. VA: 2500 –5400/mm3.
Existe una mayor proporción de CD-4 que de CD-8.
En los 3 casos los NK CD-56 positivo son aproximadamente el 10% de todos los
leucocitos.
Tiempo de vida de los linfocitos: los linfocitos B son de vida corta (2-3 meses),
los LT de memoria pueden vivir años.
Propiedades.
Recirculación: los linfocitos vírgenes que dejan la MO entran a sangre y luego
migran a los nódulos linfáticos, ya sea a través de las vénulas post-capsulares ó,
después de dejar los tejidos periféricos, vía los linfáticos aferentes. Los linfocitos
dejan los ganglios linfáticos a través de los linfáticos eferentes, entran al conducto
toráxico y luego se vuelcan a sangre.
Transformación blástica: Este fenómeno ocurre in vivo e in vitro. Los linfocitos
pueden ser cultivados o estimulados en presencia de mitógenos que favorecen su
proliferación: Los LT proliferan en presencia de fitohemaglutinina, los linfocitos B,
en presencia de toxoide tetánico, entran en el ciclo celular y se transforman en
células grandes, con nucleolos tipo linfoblasto en el caso de linfocitos T o bien,
células grandes con nucleolos, hiperbasófilas, de citoplasma azul (plasmoblasto),
los LB. Como ambos tipos de células se forman en respuesta a la presencia de
antígenos, se denominan inmunoblastos.
El destino de los linfocitos que atraviesan el ciclo celular es diferente. Algunos
vuelven a la fase de reposo y son indistinguibles de los linfocitos primitivos, otros
quedan como LB o T de memoria, los que provienen del LB, se transforman en
plasmocitos y los provenientes de linfocito T en linfocitos efectores: cooperadores
o citotóxicos.
Plasmocito.
Tamaño: 9 – 20 m. Generalmente oval.
Núcleo: redondo, excéntrico, con cromatina en forma de rueda de carro.
Citoplasma:
intensamente
basófilo.
Se
tiñe
de
azul
oscuro
por
las
ribonucleoproteínas.
Citoquímica: betaglucuronidasa positiva.
Peroxidasa y esterasa no específica: negativa
Microscopía electrónica: presentan un marcado retículo endoplásmico rugoso con
gran cantidad de ribosomas, mitocondrias, aparato de Golgi y, cuando secretan
las Ig que producen, se destruye el citoplasma y el núcleo es fagocitado por los
macrófagos. Las Ig se vuelcan a linfa y, de allí, a sangre por el mecanismo de
recirculación.
Funciones de los linfocitos B y plasmocitos (inmunidad humoral): la función
fundamental es la producción de Ig. Esta Ig se une al antígeno. Una única
persona puede sintetizar entre 10 y 100 millones de moléculas de Ig diferentes,
cada una con una especificidad de antígeno distinto. Esta gran diversidad en el
llamado sistema inmune humoral permite generar anticuerpos específicos para
distintas sustancias, incluyendo moléculas sintéticas que no están presentes en
forma natural en el organismo. La unión del anticuerpo al antígeno inicia una serie
limitada de funciones efectoras, biológicamente importantes, como la activación
del complemento y/o la adherencia de inmunocomplejos a receptores de los
leucocitos. El efecto final es la eliminación y la degradación de la sustancia
extraña. Existen distintas Ig: IgG, IgA, IgM, IgD e IgE. Cada una de ellas está
constituida por dos cadenas pesadas (H) idénticas y dos cadenas livianas (L)
idénticas. La estructura y función de las Igs será estudiada en Inmunología. En el
recién nacido las Ig existentes son bajas y son de origen materno. Entre el 3º y 6º
mes de vida comienzan a producir sus propias Igs.
Funciones de los linfocitos T (inmunidad celular): todas las células T expresan
un receptor para el antígeno (TCR) que se asocia a un grupo de proteínas no
variables denominado CD-3. Estas proteínas son necesarias para la expresión en
superficie y la señalización del receptor de célula T. Los dos polipéptidos que
forman el receptor de células T en la mayoría de los LT se denominan alfa y beta,
mientras que un pequeño subgrupo de linfocitos T tiene polipéptidos distintos
denominados gamma y delta. Los polipéptidos del receptor de células T tienen
una diversidad comparable con la estimada para las moléculas de Igs. Sin
embargo, a diferencia de las Igs, los receptores de las células T reconocen
pequeños fragmentos del antígeno, normalmente péptidos, que son presentados
por las moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de otras
células. Por eso, el reconocimiento inmune de la célula T requiere interacciones
celulares similares entre una célula T y otra célula, a veces denominada célula
presentadora de antígenos. La respuesta de la célula T al antígeno depende de la
intensidad de la señal generada por la unión al TCR. Además, esta señal se ve
modificada por la unión simultánea de otros receptores de células T a moléculas
accesorias en la membrana plasmática de la célula presentadora de antígenos.
Debido a esto, el resultado del reconocimiento del antígeno por la célula T puede
variar desde la activación inmune y la proliferación de las células T hasta la
tolerancia específica de los LT y/o la muerte celular programada.
Funciones de CD-4 y CD-8: estas células facilitan el reconocimiento del antígeno
por parte del LT, mediante la interacción de las glucoproteínas del complejo
mayor de histocompatibilidad. Durante el reconocimiento del antígeno los
linfocitos CD-4 y CD-8 se asocian en la membrana plasmática con los
componentes del TCR. Por éstas razones estas moléculas se consideran coreceptores del TCR.
Linfocitos precursores: estos linfocitos expresan CD-4 y CD-8. Los linfocitos
más maduros y los LT periféricos, expresan CD-4 ó CD-8, pero no ambos.
Células T supresoras ó citotóxicas: los LT que expresan CD-8 se denominan
LT supresores, citotóxicos o citolíticos, ya que su función es lisar células,
denominadas células dianas, que llevan antígenos de superficie, para los cuales
son
específicas.
Reconocen
el
Ag
asociado
al
Complejo
Mayor
de
Histocompatibilidad de tipo I (CMH-I)
Células T colaboradoras o helpers: Las células T CD-4 positivas se denominan
colaboradoras o helpers. Reconocen el Ag asociado al Complejo Mayor de
Histocompatibilidad de tipo II (CMH-II), generalmente del macrófago
Cuando son activadas, producen citoquinas. Estas citoquinas son IL-2, IFNgamma, TNF-beta, IL-4, IL-5, TNF-alfa, GM-CSF, IL-10 e IL-13. Su función es:
colaborar con las células B en la producción de anticuerpos, en la activación de
los macrófagos, producción de eosinófilos y mastocitos y en la hipersensibilidad
de tipo retardado.
Funciones de las células NK: estas células “asesinas naturales” (NK), con
morfología predominante de LGG, representan una 3º estirpe de células linfoides,
participando en la eliminación de virus, patógenos intracelulares y células
neoplásicas
en
forma
directa,
sin
requerir
del
complejo
mayor
de
histocompatibilidad de clase I y II en las células dianas. Son capaces de secretar
citoquinas y tienen un efecto modulador en la inmunidad adaptativa, así como en
la hemocitopoyesis. Las NK son potentes productoras de INF gamma y factores
estimulantes de colonias de granulocitos y macrófagos TNF-alfa, IL-3, IL-5, IL-8,
IL-13 y otras.
Antígenos de los linfocitos humanos.
Antígenos de los LB maduros: CD-19, CD-20, CD-21, CD-22. Un subgrupo de
células B que se encuentran en sangre de cordón umbilical son CD-5 positivas.
Antígenos de los LB activados: CD-23, CD-38, CD-39.
Antígenos de la célula plasmática: CD-38, PCA-1, BB-4, Ig citoplasmática.
Antígenos de los LT maduros: CD-3, CD-5, CD-7, CD-4 ó CD-8.