TP 6: Actividad cardíaca (del pobre sapo) Objetivos: Determinar la acción de factores que modifican la actividad cardíaca en el corazón del sapo, caracterizando: a) la regulación nerviosa b) la influencia de la temperatura c) el efecto de la atropina, la aceticolina y la adrenalina Una pequeña guía de estudio: El sistema circulatorio hizo su aparición en los animales como respuesta al aumento del tamaño corporal, y fue asimismo aumentando en complejidad a lo largo de una escala evolutiva. El fluido circulante recorre toto el cuerpo transportando, entre otras cosas, gases y nutrientes, a través de la función de bombas y válvulas. Pero hecha la sangre hecha la trampa, y los fluidos no sólo se mueven por el sistema circulatorio clásico, sino que también existe un sistema linfático con funciones características. Cuando el cuerpo lo requiere, el fluido circulatorio es impulsado por un corazón, un órgano constituido por un tejido muy particular, que posee automaticidad, conductividad, excitabilidad, contractilidad y refractariedad. Básicamente el mecanismo de origen y mantenimiento del potencial de membrana en reposo y de generación de potencial de acción de la fibra muscular cardíaca es semejante al del axón neuronal o la fibra muscular esquelética, que los alumnos de Fisiología General conocen a la perfección, con la diferencia de que en los corazones miogénicos (lo qué???) el latido eléctrico se origina en regiones marcapasos, responsables del automatismo. En el corazón de mamíferos no existe una sola región marcapasos, y la excitación bioeléctrica que se produce debe ser conducida a través de todo el órgano. A pesar de que el corazón de los vertebrados es miogénico, el hecho de que sus fibras sean excitables hace que su funcionamiento pueda ser modificado o regulado por estímulos externos. Por supuesto que la forma más útil y correcta de medir la frecuencia cardíaca es a través de registros electrofisiológicos. Dado que el profesor e instructor de la materia son pobres pero excesivamente honrados, este práctico requerirá del conteo de la frecuencia cardíaca de sapo, que para este caso en particular arroja resultados semejantes. Procedimiento: a) Corazones linfáticos Anestesiar al sapo con éter sulfúrico y ubicar, en posición decúbito ventral, los corazones linfáticos (se visualizan por su latido a través de la piel). Registrar la frecuencia de latido. Luego, señoras, se procede a desmedular al sapo con delicadeza y notar si hay cambios en esta frecuencia de latido. Queridas amas de casa, los amenos y prácticos docentes del curso ya trajeron el sapo preparado, pero ustedes en su casa, pueden realizar la prueba y ser la envidia de todas sus amigas del barrio, además de sorprender agradablemente a sus maridos a la vuelta de la jornada laboral. b) Actividad cardíaca Ubicar al sapo ya desmedulado sobre una plancha de madera y fijar en posición decúbito dorsal. Realizar un corte abdominal (a la izquierda de la línea ventral) cuidadosamente hasta visualizar el corazón. Introducir delicadamente un termómetro por la boca y medir la temperatura. Registrar la frecuencia cardíaca basal y tratar de describir las distintas fases de la actividad cardíaca. Registrar la actividad cardíaca luego de enfriar y calentar la zona cercana al corazón con bolsas de agua a 5 C y 40 C, respectivamente. Una vez registradas estas actividades, pasamos a la regulación neurofarmacológica: i- Agregar 0.1 ml de acetilcolina. Observar y registrar durante 15-20 min. Lavar con solución buffer. ii- Agregar 0.1 ml de atropina. Observar y registrar durante 15-20 min. Lavar con solución buffer. iii- Agregar 0.1 ml de adrenalina. Observar y registrar durante 15-20 min. Lavar con solución buffer. Por último, con la delicadeza y ternura aprehendida de los docentes del curso, extraer rápida y cuidadosamente l corazón del sapo y colocarlo en una caja de Petri con solución Ringer. Registrar la frecuencia cardíaca. Y las preguntillas de siempre: ¿Cuáles son las funciones de los sistemas circulatorios y sus principales componentes? ¿Por qué tiene que haber bombas y válvulas en los sistemas circulatorios? ¿Qué es eso de corazones neurogénicos y miogénicos? ¿Y las propiedades del miocardio? ¿Qué propiedades del miocardio pudiste comprobar en estos experimentos? ¿Y si hubiéramos sido más ricos, cuáles más y cómo? ¿Cómo es la forma del latido cardíaco registrado electrofisiológicamente, y qué representan sus partes? Calculá el Q10 de la frecuencia cardíaca. APARATOS UROGENITALES DE SAPO MACHO (arriba) Y HEMBRA (abajo, sin comentarios). Cuerpo adiposo Cápsula suprarrenal Órgano de Bidder Testículos Riñón Conducto de Wolff (esperma y orina Ostium Cuerpo adiposo Mesotubario Ovario Mesovario Oviducto Flexuoso (Müller) Región uterina Cond. De Wolff Poros urinarios Cloaca Papila genital DISECCION DE SAPO: Angulo subrostral Fosa subrostral Vena Cava Post. Orificios excretores de las glándulas submaxilares Seno venoso Ventrículo Coanas Lób. anterior Lób. medio Lób. derecho Lóbulo izquierdo y Posterior medio Tubérculo prelingual Lóbs. mayores Lengua Escotadura del Lób. Izquierdo Conds. hepáticos Vesícula biliar Pliegue prelaríngeo Colédoco Faringe Canal cístico Páncreas Eminencia laríngea y glotis Proceso libre del páncreas Esófago Proceso hepato pancreático Proceso gastro pancreático Proceso duodenal pancreático Estómago Ampolla duodenal Duodeno Estómago Mesenterio Intestino delgado Vejiga Intestino grueso